大鼠服用丹酚酸B合用匹伐他汀后药动学和肝细胞摄取能力的改变

目的 研究大鼠服用丹酚酸B合用匹伐他汀后药动学及肝细胞摄取能力的改变.方法 将SD雄性大鼠随机分为两组,每组6只,实验一组单用丹酚酸B（2.5 g/kg）给药;另一组丹酚酸B合用匹伐他汀（0.5 mg/kg）.两药合用时先丹酚酸B后匹伐他汀相继灌胃,间隔15 min,眼球静脉取血,探讨有机阴离子转运多肽（organic anion transporting polypeptides,OATP）底物匹伐他汀对丹酚酸B的药动学影响.然后,游离大鼠原代肝细胞,考察匹伐他汀对大鼠原代肝细胞摄取丹酚酸B的影响.结果 丹酚酸合用匹伐他汀后,丹酚酸B的药动学特性发生明显变化,AUC（0t）、AUC（0-∞）和Cmax分别增加了54.63％、69.72％、50.56％.随着匹伐他汀浓度增加,其对大鼠原代肝细胞摄取丹酚酸B的抑制作用逐渐增强,IC50为（5.21±1.68）μmol/L.结论 丹酚酸B肝脏转运机制可能与OATP密切相关.     

大鼠血浆中活性寡肽RX 31的HPLC-MS/MS定量分析方法研究

目的建立快速、灵敏的液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定大鼠血浆中活性寡肽RX31的浓度。方法血浆样品经甲醇蛋白沉淀后,以0.1%甲酸-甲醇为流动相梯度洗脱,CapcellMGⅢCl8柱分离。采用电喷雾电离源,以多反应监测（MRM）方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z640.3→m/z623.3（RX31）和m/z596.1→m/z287.1（内标,RX20）。结果在本实验条件下,血浆中RX31的线性范围为3.91～500ng/ml,定量下限为3.91ng/ml,日内、日间精密度（相对标准差,RSD）均小于12%,准确度（相对误差,RE）在-11%～5%。结论该法快速、灵敏、准确,可用于RX31的药代动力学研究。     

亲水色谱-质谱联用（HILIC-MS）定量测定大鼠血浆中美金刚浓度及药代动力学研究

目的建立灵敏、可靠的亲水色谱-质谱联用（HILIC-MS）方法测定大鼠血浆中美金刚的浓度。方法血浆样品前处理采用蛋白沉淀,用HILIC-MS法测定。通过电喷雾电离源以选择离子监测（SIM）方式进行正离子检测,用于定量分析的离子分别为m/z 180（美金刚）和m/z 285（内标Ro 64-0802）。色谱分离采用Amide-80柱（100 mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈-水-甲酸（70∶30∶0.1,v/v/v,0.35 ml/min）为流动相。结果美金刚的线性范围为2～500 ng/ml,相关系数r2为0.99882,定量下限为2 ng/ml,批内、批间精密度在3.9%和5.6%以内,准确度控制在84.9%～111.2%。结论本方法通过HILIC技术,使美金刚保留时间增加,基质抑制降低并使检测灵敏度提高。该方法成功应用于大鼠血浆测定研究中。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中拉米夫定浓度

 目的 试图建立测定人血浆中拉米夫定浓度的液相色谱-串联质谱法.方法 以吉西他滨为内标,内标法定量.流动相:甲醇-10 mmol/L乙酸铵(12: 88,v/v);质谱采用离子喷雾离子源,扫描方式为多反应监测(MRM),用于定量分析的离子反应分别为m/z 230m/z 111.9(拉米夫定)和m/z 263.8m/z 111.9(吉西他滨);药动学参数采用DAS2.0软件处理获得.结果 拉米夫定和内标吉西他滨的保留时间分别为2.9 min和2.4 min;拉米夫定的线性范围为0.0100~2.0000 μg/ml ,r=0.9996,回归方程:Y=0.0032X+0.0003,最低检测浓度为0.0100 μg/ml;提取回收率为95%～105%范围内;日内日间精密度RSD<6%.结论 此法适合人体血浆拉米夫定浓度的监测及生物利用度研究,结果准确、可靠.     

衍生化LC-MS/MS测定大鼠血浆中新型抗流感药物帕拉米韦及其在药代动力学研究中的应用

目的：建立灵敏、可靠的衍生化LC-MS/MS新方法测定大鼠血浆中帕拉米韦的浓度。方法：血浆样品前处理包括蛋白沉淀和用盐酸（10mol/L）-甲醇（10：90,体积比）为衍生化试剂的衍生化反应,测定采用LC-MS/MS。通过电喷雾电离源以选择反应监测（SRM）方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z343→284（帕拉米韦衍生物）和m/z299→152（内标Ro64-0802衍生物）。色谱分离采用ZorbaxRX-C8柱（2.1mm×150mm,5μm）,以乙腈-水-甲酸（30：70：0.1,体积比,0.2ml/min）为流动相。结果：测定帕拉米韦的线性范围为10～10000ng/ml,相关系数r2为0.9940,定量下限为10ng/ml,批内和批间RSD%分别在5.0%和7.1%以内,准确度控制在89.9%～106.1%。结论：本方法通过衍生化反应,使帕拉米韦保留时间增加,基质抑制降低并使检测灵敏度提高。该方法成功应用于帕拉米韦非临床和临床研究中。     

HPLC-MS 测定大鼠体内白杨素及其药代动力学简

目的建立HPLC—MS的方法测定大鼠血浆中白杨素含量。方法以柚皮素为内标；采用WatersXteraC-18色谱柱（150mm×4．6mm，5μm）分离，柱温设定为30oC；梯度洗脱：A相为乙腈，B相为0．05％甲酸；流速为0．8ml·min，使用分流器将0．2ml·min。的洗脱液注入离子源；选择离子监测检测（SIM）：白杨素m／z255[M＋H]＋，内标柚皮素m／z273[M＋H]＋。结果本研究所采用的方法检测限为1．5ng·ml-1，定量限为4．0ng·ml-1，且精密度、稳定性及回收率满足测定要求，并成功用于白杨素在大鼠体内的药动学评价。结论本研究建立了快速、准确的HPLC—MS法用于测定大鼠血浆中的白杨素含量，并成功拟合其药动学参数，白杨素在大鼠体内的药动学特性符合二室开放模型含量。     

HPLC法测定抗栓保心片中丹酚酸B的含量

目的建立高效液相色谱法测定抗栓保心片中丹酚酸B含量的方法。方法色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse SB-C18（4.6mm×150mm,5μm）;流动相：5%甲醇（含0.5%磷酸）-甲醇（65∶35）;流速：1mL/min;检测波长：286nm;柱温：30℃。结果丹酚酸B保留时间约为14min,与相邻峰的分离度〉1.5。以峰面积对进样浓度（μg.mL-1）线性回归,丹酚酸B回归方程为Y=0.082 50X＋0.376 6,r=0.999 9,线性范围20.90～348.3μg.mL-1。加样回收率为98.3%,RSD为2.0。结论本方法操作简便,测定结果准确可靠,可用于抗栓保心片中丹酚酸B的含量测定。     

GC／MS法测定人血浆中地芬尼多药物浓度及其在药代动力学研究中的应用

目的建立GC/MS法测定人血浆中地芬尼多的含量,用于药代动力学研究中血药浓度的测定。方法液-液萃取法进行血样前处理,分析采用（15 m×0.25 mm×0.25μm）DB-17MS毛细管柱,载气为氦气,载气流速为1.0 ml/m in;进样口温度250℃,炉温升程：100℃→280℃（按25℃/m in的速度升温,且在280℃保持1 min）再升至300℃（按50℃/min的速度升温,且在300℃保持1.6 m in）;MS源温度230℃,四级杆温度150℃,电子轰击能量为70 eV。结果地芬尼多及内标的保留时间分别为7.8 min及7.97 min,其定量碎片基峰分别为m/z98和138。地芬尼多在1300 ng/ml浓度范围内,浓度与响应呈良好的线性关系（r2=0.999）;定量下限为1 ng/ml,准确度在82%104%范围内;地芬尼多的提取回收率为72.7%90.0%;批内和批间RSD分别在2.7%和3.9%以内,准确度在101.5%114.1%范围内;地芬尼多人血浆样品在-20℃保存10 d及在室温放置24 h稳定;其甲醇溶液在4℃冰箱保存21 d稳定。结论本研究建立的GC/MS方法测定人血浆中地芬尼多浓度,特异性好、灵敏度高,适用于盐酸地芬尼多口崩片在健康受试者体内的药代动力学研究。     

LC-MS/MS法检测小鼠静注水溶性紫杉醇偶合物后血浆中的药物浓度

目的建立灵敏、特异的LC-MS/MS方法测定小鼠血浆中紫杉醇浓度,并应用于小鼠静注水溶性多聚（L-谷氨酸）-丙氨酸-紫杉醇偶合物的药物动力学研究。方法用甲基叔丁基醚提取小鼠血浆样品,以多西紫杉醇为内标,在BetaBasicC18色谱柱上以流动相乙腈-水-甲酸（65∶35∶0.1,体积比）分离,流速为0.2ml/min;采用液相色谱-质谱-质谱联用仪,通过电喷雾离子化电离源,以选择反应监测方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z854.2→286.1（紫杉醇）和m/z808.3→527.2（多西紫杉醇）。结果测定紫杉醇的线性范围为0.5～1000ng/ml,相关系数r为0.9995,定量下限为0.5ng/ml,日内日间精密度分别小于11.52%和13.11%,准确度控制在87.05%～100.87%,提取回收率为85.04%～93.63%。结论该法快速、灵敏度高、专一性好,成功应用于小鼠静注10mg/kg水溶性多聚（L-谷氨酸）-丙氨酸-紫杉醇偶合物的药物动力学研究。     

HPLC-MS／MS联用技术测定人血浆中9-硝基喜树碱的含量

目的建立HPLC-MS—MS法测定人血浆中9-硝基喜树碱浓度。方法以喜树碱为内标，流动相为乙腈-2％甲酸水溶液（55：45，V／V），色谱柱为Agilent C18（3．5μm，2．1mm×150mm），电喷雾离子源（ESI），正离子多反应监测（MRM）方式进行检测。用于定量分析的离子对分别为[M＋H]^＋m／z 394．2→m/z 350．0（9-硝基喜树碱），[M＋H]^＋m／z 349.1→m/z 305．3（喜树碱）。结果9-硝基喜树碱线性范围1～300μg·L^-1内呈良好线性关系（r=0．9990），定量下限为1μg·L^-1。日内、日间精密度的RSD均〈15％，平均回收率为76.02％，RSD为5．7％。结论本方法专属性强，生物样品处理方便，灵敏度高，适用于9-硝基喜树碱临床药动学研究。     

HPLC-MS / MS 法测定 Beagle 犬血浆中硝苯地平的含量简

目的建立HPLC—MS／MS法测定Beagle犬血浆中硝苯地平的方法。方法以尼莫地平为内标,血浆样品经乙酸乙酯提取,采用ZorbaxExrend,C-18柱（2．1mm×100mm,3．5μlm）进行分离,乙腈-10mmolNH。CH3COOH缓冲液（印：40）为流动相,流速为0．3m1·min-1,柱温为40℃。质谱采用电喷雾离子化源,正离子检测,扫描方式采用多反应监测（MRM）,定量离子分别为硝苯地平m／z347．2→日15．2．内标尼莫地平m／z419．2→日43．3。结果硝苯地平在0．2～200ng-ml。浓度范围内线性关系良好,最低定量限为0．2ng·ml-1。结论本方法简便、准确、专属『生好,适用于硝苯地平在Beagle犬体内血药浓度检测及药代动力学研究。     

HPLC-MS/MS测定比格犬血浆中非诺贝酸浓度及其药代动力学研究

目的建立快速有效的HPLC-MS/MS方法测定比格犬血浆中非诺贝特的代谢物非诺贝酸,并探讨其在比格犬体内的药代动力学。方法 4只健康雄性比格犬随机分为两组,在禁食状态下口服给药〔非诺贝特片（纳米）和对照药Tri-cor〕,HPLC-MS/MS测定非诺贝酸浓度。流动相为甲醇-水（0.1%甲酸）,在200μl.min-1流速下梯度洗脱,地西泮为内标,色谱柱为Thermo Syncronic-C8,柱温：20℃。质谱测定利用多离子监测扫描模式,电离方式为ESI正离子模式,检测离子反应非诺贝酸为m/z 319.10→232.86,地西泮为m/z 285.04→193.04。血药浓度数据经Origin Pro 7.5与WinNonlin Phoenix软件处理,计算主要药动学参数。结果本方法中非诺贝酸在5～1000 ng.ml-1范围内线性良好（r2〉0.98）,定量下限为5 ng.ml-1。方法的精密度准确度,专属性,绝对回收率,稳定性和基质效应均符合要求。非诺贝特纳米片和Tricor在比格犬体内的主要药动学参数：tmax为（1.50±1.16）和（1.94±2.48）h、t1/2为（8.58±3.41）和（8.02±2.08）h、Cmax为（5857.20±3563.44）和（6697.56±3912.92）ng.ml-1、AUC为（25 328.13±16 009.09）和（26 379.89±17 392.47）ng.h.ml-1。结论建立了准确、灵敏的HPLC-MS/MS检测方法用于比格犬血浆中非诺贝特代谢产物非诺贝酸的含量测定;研究了非诺贝酸在比格犬体内的药代动力学,结果显示非诺贝酸在比格犬体内的代谢动力学过程呈单室模型,该结果为不同来源非诺贝特片的生物等效性研究奠定了基础,为非诺贝特临床安全合理用药提供参考依据。     

LC/MS/MS法测定家兔血浆和房水中咪哒酚衍生物含量及其药代动力学研究

目的建立准确、灵敏、可靠的LC/MS/MS方法,定量检测家兔血浆和房水中咪哒酚衍生物浓度,并用于家兔给予咪哒酚衍生物滴眼后血浆及房水中药代动力学研究。方法血浆及房水样品经蛋白沉淀前处理,内标选用Amms,液相色谱柱为TOSOHTSKgel Amide,流动相为含0.1%甲酸的甲醇∶水（80∶20,体积比）,仪器选用Finni-gan公司TSQ Quantum型液相色谱-质谱联用仪,采用电喷雾离子化电离源（ESI）,选择反应离子监测（SRM）方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 381→308（咪哒酚衍生物）和m/z 285→138（Amms）。结果在本实验条件下,咪哒酚衍生物与内标Amms分离良好,保留时间分别为1.48和1.55 min,血浆和房水中药物浓度分别在5~2000和10~10 000 ng/ml范围内线性关系良好,相关系数（r2）分别为0.9971和0.9999,定量下限分别为5和10 ng/ml,回收率均大于80%,日内、日间精密度均小于15%（n=5）。结论该方法快速、准确、灵敏度高,专属性好,可用于咪哒酚衍生物在家兔体内的药物代谢动力学研究。     

在线固相萃取-液质联用法测定小鼠血浆中寡肽RX31肽的药代动力学研究

目的建立测定昆明小鼠血浆中RX31肽的在线固相萃取-液质联用法（on-line SPE HPLC-MS/MS）。方法血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,取上清经on-line SPE,以甲醇和0.1%甲酸为流动相,资生堂CAPCELL PAK MGⅢ柱分析;采用电喷雾电离源,以多反应监测（MRM）方式进行正离子检测,采用外标法对RX31肽样品进行定量分析。结果与结论定量分析的离子反应为m/z 640.3→m/z 303.3。测定昆明小鼠血浆中RX31肽的线性范围为10～500 ng/ml,最低定量限（LLOQ）为10.0 ng/ml,方法学符合药代动力学研究要求。将该法应用于昆明小鼠单次皮下注射RX31肽（10、30和90 mg/kg）后的药代动力学研究中,利用单一的固相萃取柱完成了全部血浆样品的定量分析。此方法为RX31肽的非临床药代动力学研究提供了可靠的数据,对其临床研究具有重要的参考价值。     

LC-MS/MS法测定裸鼠肝脏中6＇-羟基爵床定A的浓度

目的建立测定裸鼠肝组织中6＇-羟基爵床定A浓度的LC-MS/MS法,并用于裸鼠的组织分布研究。方法色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18柱;流动相为水（含0.1%甲酸）-乙腈（含0.1%甲酸）,梯度洗脱,流速0.5 ml.min-1,柱温为室温。采用ESI源,以多反应监测方式分别监测离子对m/z 410.8→136.9（6＇-羟基爵床定A）和m/z 386.1→122.0（内标丁螺环酮）。肝组织匀浆后采用蛋白沉淀法进行预处理。结果 6＇-羟基爵床定A在裸鼠肝组织中的线性范围为1.0～2000ng.ml-1,日内精密度RSD小于8.61%;日间精密度RSD小于8.15%,回收率在89.3%～98.3%范围内。结论该方法简单、灵敏、准确,适用于裸鼠肝组织中6＇-羟基爵床定A的浓度测定及其组织分布研究。     

HPLC-MS/MS法定量研究比格犬口服氨氯地平后的血浆药代动力学

目的建立比格犬血浆中氨氯地平的HPLC-MS/MS定量测定方法。方法 HPLC分离采用Zorbax SB-C18柱,流动相为乙腈-水（42∶58,0.1%甲酸,4 mmol·L-1醋酸铵）,流速为0.2 ml·min-1;质谱检测采用电喷雾（ESI）离子源,正离子多反应监测（MRM）方式检测。血浆样品经甲醇-乙腈混合液沉淀蛋白、高速离心后进样分析,检测反应为m/z409.4-238.1（氨氯地平）,m/z256.2-167.0（苯海拉明,内标）。结果氨氯地平在比格犬血浆中定量范围为0.5～500 ng·ml-1,日内和日间精密度≤9.04%、回收率高且血浆样品稳定性好。结论本方法特异、快速、准确、可靠,可满足氨氯地平比格犬血浆动力学研究需要。     

HPLC-MS/MS法定量研究比格犬口服替米沙坦后的血浆药代动力学

目的建立比格犬血浆中替米沙坦的HPLC-MS/MS定量测定方法。方法液相色谱分离采用Zorbax SB-C18色谱柱,流动相为乙腈-4 mmol·L-1醋酸铵水（40∶60,0.1%甲酸）,流速为0.2 ml·min-1;质谱检测采用电喷雾（ESI）离子源,正离子多反应监测（MRM）方式检测。血浆样品经乙腈沉淀蛋白、高速离心后进样分析,检测反应为m/z 515.2-276.3（替米沙坦）,m/z 256.2-167.0（苯海拉明,内标）。结果替米沙坦在比格犬血浆中定量范围为0.5~2000 ng·ml-1,日内和日间精密度≤9.13%、回收率满足血浆测定要求,且血浆样品稳定性好。结论本方法特异、快速、准确、可靠,可满足替米沙坦比格犬血浆动力学研究需要。     

LC／MS／MS测定比格犬血浆中丁螺环酮浓度及其在药代动力学研究中的应用

目的：建立LC／MS／MS测定比格犬血浆中丁螺环酮的方法,并应用于其缓释制剂药代动力学研究。方法：血浆样品经液-液萃取,内标选用曲马多,色谱柱采用Zorbax SB-C18柱（2．1mm×100mm,3．5μm）;流动相为甲醇-水-甲酸（40：60：0．1）,流速0．2ml／min;用美国Finnigan公司TSQ Quantum型液相色谱-质谱联用仪器,配有电喷雾离子化电离源（ESI）,正离子检测模式,扫描方式为选择反应监测（SRM）,用于定量分析的离子反应分别为m／z 386．2→121．97（丁螺环酮）和m／z 264．3→58．0（内标,曲马多）。结果：测定丁螺环酮的线性范围为0．025→7．5μg/L,相关系数为0．99893,提取回收率为72．2％,方法回收率为99．1％,日内日间精密度均小于10．7％,血浆中丁螺环酮的最低定量下限为0．025μg／L。结论：该方法简便、快速、准确,灵敏度高,专一性好,成功应用于丁螺环酮缓释制刺的药代动力学研究。     

液质联用法测定龙胆水煎剂中三种环烯醚萜的含量

目的利用液质联用（LC／MS／MS）方法测定龙胆水煎剂中环烯醚萜类化合物龙胆苦苷、獐牙菜苦苷和马钱苷的含量。方法色谱柱为J’Sphere ODS-H80（150mm×2．0mm，4μm）；流动相为甲醇-10mmol·L^-1醋酸铵溶液（30：70）；流速为200μl／min。样品经电喷雾离子源（ESI）正离子化后，通过三级四极杆串联质谱仪，采用多反应离子监测方式测定样品中龙胆苦苷（m／z 357．2-195．3）、獐牙菜苦苷（m／z 392．1→195．2）和马钱苷（m／z 408．4→229．1）浓度。结果在该分析条件下，3种化合物能够同时进行检测。龙胆苦苷浓度在200～5000ng·ml^-1范围内线性关系良好，回归方程为Y=1．26×10^3X＋2．27×10^3，r=0．9983；獐牙菜苦苷浓度在20-500ng·ml^-1范围内线性关系良好，回归方程为Y=360X＋144，r=0．9991；马钱苷浓度在20-500ng·ml^-1范围内线性关系良好，回归方程为Y=782X＋42．6，r=0．9994。对照品峰面积精密度RSD分别为龙胆苦苷2．52％，獐牙菜苦苷2．77％和马钱苷2．89％；平均加样回收率分别为龙胆苦苷98．2％，獐牙菜苦苷99．1％和马钱苷99．7％。结论该方法灵敏、准确、特异性强。     

氨氯地平对比索洛尔在大鼠体内药动学的影响

目的探讨氨氯地平对比索洛尔在大鼠体内药动学的影响。方法 12只大鼠随机分为两组,一组给予比索洛尔灌胃,另一组给予比索洛尔与氨氯地平灌胃,分别采用液相色谱-串联质谱法测定两组大鼠血浆中比索洛尔的血药浓度。用DAS2.0程序软件拟合药动学参数,比较两者的药动学参数。结果单独给药组和联合给药组的主要药动学参数:Cmax分别为(513.36±56.02)和(585.21±77.52)ng/ml,t1/2:(1.30±0.51)和(1.51±0.65)h,AUC0-t:(433.70±50.98)和(721.16±218.09)ng/(h.ml),CL/F:(38.02±5.63)和(25.9±5.18)L/(h.kg),两组间AUC0-t和CL/F的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论建立的液相色谱-串联质谱法专属性、准确性、灵敏度适宜。氨氯地平可延长比索洛尔在大鼠体内的吸收和排泄,对比索洛尔的药代动力学有显著影响。