小分子药物kartogenin保护终板软骨退变的实验研究

目的：研究小分子药物kartogenin（KGN）对终板软骨组织细胞外基质分泌的影响,探讨其在终板软骨以及椎间盘退变中的作用。方法：建立大鼠椎间盘体外器官退变模型,分为对照组、退变组（穿刺注射生理盐水）、KGN处理组（穿刺注射100nmol／LKGN）,利用HE染色观察终板软骨及椎间盘形态,番红一固绿染色观察终板软骨细胞外基质的分泌。通过Realtime—PCR评价三组终板软骨组织中Ⅱ型胶原、蛋白多糖、SOX-9的表达变化,Westernblot检测Ⅱ型胶原、SOX-9蛋白表达变化。结果：HE染色结果显示与对照组比较,退变组椎间盘髓核消失,终板软骨减少,发生明显退变,KGN处理组椎间盘结构较完整;番红一固绿染色可见实验组较对照组终板软骨细胞外基质分泌增多。Reahime-PCR结果显示退变组终板软骨组织Ⅱ型胶原、蛋白聚糖及SOX-9表达明显下调,KGN处理组中终板软骨组织Ⅱ型胶原、蛋白聚糖及SOX-9表达上调;Westernblot结果显示实验组软骨细胞中Ⅱ型胶原、SOX-9蛋白表达明显增高。结论：体外穿刺及培养能够诱导椎间盘及终板软骨的退变,小分子药物KGN能够促进终板软骨细胞外基质的分泌从而保护终板软骨及椎间盘的退变。     

骨刺不是刺

骨刺在医学上称为骨赘,又称骨质增生,是软骨被破坏后,软骨膜过度增生而产生的新骨,经骨化后形成骨赘,这是骨性关节炎病理过程中的一种代偿反应.骨刺是骨性关节炎的特征之一.     

骨形态发生蛋白-2基因转染骨髓基质干细胞复合壳聚糖体外构建组织工程软骨的实验研究

目的观察转人骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因的骨髓基质干细胞(BMSCs)向软骨细胞方向分化的能力,并种植于壳聚糖体外构建组织工程软骨。方法应用慢病毒介导把人BMP-2基因和增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因转入大鼠BMSCs,通过荧光观察、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Westernblot、免疫组织化学等方法检测BMP-2、Ⅱ型胶原表达及软骨基质分泌情况;噻唑蓝(MTT)检测转基因后细胞的增殖活力。结果BMP-2基因和eGFP基因成功转染BMSCs,Ⅱ型胶原及蛋白聚糖的表达均显著增强,细胞种植壳聚糖支架后生长、粘附良好。结论BMP-2可在BMSCs内表达,并诱导其向软骨方向分化;与壳聚糖复合培养可构建组织工程骨。     

核心蛋白聚糖和细胞因子的相互作用

核心蛋白聚糖（decofin）为蛋白聚糖（PG）的一种，属分泌型的富含亮氨酸的小分子蛋白聚糖家族，由于其能修饰胶原原纤维因此也称为饰胶蛋白聚糖。decofin由富含亮氨酸的核心蛋白和一条糖胺聚糖链组成．在调节细胞黏附、迁徙、增殖，胶原纤维形成及对转化生长因子（TGF）-β活性调节中起重要作用。近来发现decofin高表达可以使TGF—β和白细胞介素（IL）-1β的水平降低，相反，使IL-4和肿瘤坏死因子（TNF）-α水平升高，说明decorin在细胞因子产生的调节中起着重要作用。细胞因子是由免疫细胞、成纤维细胞和内皮细胞等产生的调节细胞功能的高活性多功能蛋白多肽分子。     

核心蛋白聚糖与聚蛋白多糖酶在不同膝关节评分患者关节软骨中的表达情况

<正>膝骨关节炎(KOA)是中老年人群中常见的骨关节退行性疾病,其可导致关节疼痛、畸形、活动障碍等症状,严重影响患者生活质量~([1])。其病因尚未明确,但关节透明软骨的退行性改变目前被认为与KOA的发生密切相关~([2])。核心蛋白多糖(DCN)是富含亮氨酸的小分子蛋白聚糖家族(SLRP)成员之     

益气化瘀补肾方对大鼠损伤椎间盘软骨终板细胞的影响

目的观察益气化瘀补肾方对大鼠损伤椎间盘软骨终板细胞的影响方法选择SPF级Wistar大鼠椎间盘分离软骨终板并培养,将生长良好的细胞随机分为正常组、诱导损伤组与给药组。正常组细胞培养用胎牛血清体积分数为0.005的DMEM培养基;诱导损伤组给予体积分数为0.005的胎牛血清与浓度为10μg/L的白介素-1β(IL-1β)混合的DMEM培养基;给药组为益气化瘀补肾方含药血清加体积分数为0.005的胎牛血清与浓度为10μg/L的IL-1β混合的DMEM培养基。使用细胞增殖—毒性检测试剂盒(CCK-8)检测各组大鼠椎间盘软骨终板细胞增殖的影响。实时荧光定量PCR检测聚集蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶-13基因的表达差别。流式细胞仪检测益气化瘀补肾方对软骨终板细胞凋亡的影响。结果正常组软骨终板细胞正常生长,增殖良好,诱导损伤组椎间盘软骨终板细胞的增殖受到明显抑制,给药组软骨终板细胞增殖缓慢,3组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。与正常组比较,诱导损伤组软骨终板细胞蛋白聚糖、Ⅱ型胶原基因表达下调,基质金属蛋白酶-13基因表达上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。而给药组较诱导损伤组软骨终板细胞蛋白聚糖、Ⅱ型胶原基因表达上调,基质金属蛋白酶-13基因表达下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论益气化瘀补肾方含药血清能够抑制IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞损伤,起到延缓椎间盘推变的作用。     

骨刺不是刺

骨刺在医学上称为骨赘，又称骨质增生，是软骨被破坏后，软骨膜过度增生而产生的新骨，经骨化后形成骨赘，这是骨性关节炎病理过程中的一种代偿反应。骨刺是骨性关节炎的特征之一。增生的骨赘通常在骨骼的两端四周同时存在，但投影在平面的X线片上，可能仅表现为基底宽、尖端细的粗刺形状。为了便于描述，即称其为“骨刺”。     

环丙沙星致损伤的胎儿关节软骨的免疫组织化学研究

目的：探讨受损的胎儿关节软骨中纤维连接蛋白（FN）、Ⅱ型胶原表达量的改变。方法：取12例孕妇因感染服用环丙沙星后的中、晚期引产的胎儿关节软骨,用免疫组化LSAB法测定软骨组织中纤维连接蛋白、Ⅱ型胶原的表达情况。结果：（1）Ⅱ型胶原在正常胎儿关节软骨全层基质中呈弥漫均质分布,环丙沙星组软骨组织中Ⅱ型胶原表达明显减少,部分软骨细胞胞浆中出现Ⅱ型胶原的表达;（2）正常胎儿关节软骨中仅软骨表层和深层基质及血窦内皮细胞有FN的表达,软骨细胞胞浆和中层基质中未见FNA的表达,而环丙沙星组胎儿关节软骨FN的表达增中,尤以软骨中层细胞胞浆、软骨细胞表面及软骨囊较为显著。结论：环丙沙星可引起胎儿关节软骨中纤维连接蛋白表达增加,Ⅱ型胶原表达减少。我们认为这是软骨细胞受损后的表现。     

骨头上长“刺”不一定是坏事

正去医院挂号检查、拍X光片,结果显示骨头上长了"刺"!"刺"听起来就让人感到尖锐、疼痛。于是很多人认定,长了骨刺就是坏事。事实如何呢?长骨刺是身体在"维稳"骨刺是人体骨关节退化而出现在骨边缘的赘生骨。在X线上看,和原本光滑的骨表面并不和谐,所以称它们为"骨刺",或者"骨赘"。就像长皱纹一样,随着年龄的增长,人的关节软骨也在逐渐退化,就在这时,骨刺产生了。这是关节软骨磨损、消耗,关节和脊柱逐渐变得     

中医药治疗退行性膝关节炎80例临床观察

退行性骨关节病是由于关节及软骨组织退变,关节软骨变性断裂、软骨下骨增生、硬化,关节边缘骨刺增生和滑膜、关节囊的充血、水肿肥厚等而引起的临床一组症状,其主要特点是：关节软骨的变性,并在软骨下和关节周围有新的骨质增生,可以发生在全身所有的关节,临床上以膝关节、髋关节和脊柱关节多见,亦有称为肥大性关节炎、     

周期性应力条件下整合素过表达对大鼠软骨细胞的影响

目的：探讨周期性应力条件下整合素过表达对大鼠软骨细胞的影响。方法体外分离培养大鼠软骨细胞,随机分为上调组（A组,整合素过表达质粒的慢病毒转染）和对照组（B组,空白质粒的慢病毒转染）。将细胞置于周期性应力场中培养,采用Western blot法检测细胞外调节蛋白激酶1／2（ERK1／2）蛋白表达和磷酸化水平,实时定量荧光PCR检测蛋白聚糖和Ⅱ型胶原基因表达水平,细胞计数试剂盒（CCK‐8）检测软骨细胞增殖情况。结果 A组整合素表达高于B组（0.824±0.029 vs ．0.419±0.014）（P＜0．05）。与B组相比,在周期性应力作用下,A组ERK1／2磷酸化水平、蛋白聚糖和Ⅱ型胶原基因表达、细胞增殖均增加（P＜0．05）。结论整合素过表达可以促进周期性应力作用下软骨细胞的增殖和基质合成。     

六味地黄丸对兔退变椎间盘髓核及纤维环的保护作用

目的探讨六味地黄丸对兔退变椎间盘髓核及纤维环细胞的保护作用。方法选择8月龄成年新西兰兔6只利用异常应力负荷及椎间失稳法建立新西兰兔腰椎椎间盘退变模型,病理切片确认模型成功后,取椎间盘分离软骨终板,将髓核及纤维环组织进行细胞培养,将生长良好的细胞随机分为对照组、损伤组与含药组。对照组细胞培养用胎牛血清体积分数为0.01的DMEM培养基;损伤组给予体积分数为0.01的胎牛血清与浓度为5μg/L的TNF-a混合的DMEM培养基;含药组为体积分数为0.01的六味地黄丸含药血清加体积分数为0.01的胎牛血清与浓度为5μg/L的TNF-a混合的DMEM培养基。使用细胞增殖—毒性检测试剂盒(CCK-8)检测各组兔退变椎间盘细胞增殖的影响。实时荧光定量PCR检测聚集蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶-13基因的表达差别。结果对照组椎间盘细胞初期正常生长,增殖良好,随着时间延长,细胞数量减少,凋亡细胞数量增多,细胞外基质胶原减少,细胞形态变化快。损伤组能够明显抑制椎间盘软细胞的增殖,细胞及细胞外基质胶原数量减少明显,同时间点比较,细胞凋亡数量增多,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05),而含药组细胞增殖缓慢,细胞数量下降缓慢,细胞凋亡数量减少,细胞外基质胶原成分下降不明显,3组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,损伤组椎间盘细胞蛋白聚糖、Ⅱ型胶原mRNA表达下调增加,基质金属蛋白酶-13基因表达上调明显。与损伤组比较,而六味地黄丸含药血清组椎间盘细胞蛋白聚糖、Ⅱ型胶原mRNA表达上调,基质金属蛋白酶-13基因表达下调,3组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论六味地黄丸含药血清能够抑制TNF-a诱导的兔退变椎间盘细胞损伤,起到延缓椎间盘损伤的作用。其机制可能与上调蛋白聚糖及Ⅱ型胶原表达及下调基质金属蛋白酶表达有关。     

骨髓间充质干细胞及其在软骨组织工程中的应用研究进展

由创伤及非创伤性病理损害如感染性关节炎以及类风湿性关节炎等所造成的关节软骨缺损是临床上常见的病症。由于软骨结构特殊（由Ⅱ型胶原交织形成的三维网状结构及内埋其中的软骨细胞和蛋白多糖所构成）。软骨组织内无血管,基质纤维网内的软骨细胞增生及迁移能力有限．使得软骨损伤后软骨自身修复的能力差。目前临床上尚无很好的方法来治疗软骨缺损。利用组织工程学方法所开展的基础和临床研究是近年来的研究热点之一。而优化种子细胞源是应用这一技术的前提和关键．而其中所应用的种子细胞主要包括自体软骨细胞和成体干细胞。     

医药科技

鲨鱼软骨可治癌 据《侨报》报道,鲨鱼软骨已成为目前药学界积极研究的抗癌药品。 研究表明,鲨鱼软骨中的“抗新生血管增生因子”能增强人体内的免疫力,减弱人体内癌细胞增生时周边血管网的形成,使癌细胞因缺少营养而萎缩,进而被人体自身的抗毒素瓦解。 此外,鲨鱼软骨中含有“软骨素”及“黏多糖”等成分,可以活化人体内淋巴细胞及巨噬细胞等免疫功能、帮助软骨关节重建,故对于预防肿瘤、加速伤口复原和改善风温、骨刺及关节炎有相当的成效。     

人羊膜的研究进展

通过大量查阅国内外有关人羊膜的基础和临床应用研究文献并总结这些研究成果。可以人了解羊膜的来源广,价格低、与细胞相容性好、抗原性低,羊膜上皮层具有上皮细胞及成纤维细胞生长因子等多种细胞生长因子,而基底膜含有Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ等多种类型胶原、纤维桥接蛋白及多种糖蛋白,由于这些结构的特殊性,使其能够促进多种细胞的生长。近年来随着组织工程生物工程对羊膜的进一步研究,人羊膜在临床中的应用会更加被重视。     

胶原的生物特性及腰椎间盘突出髓核胶原的变化

近二十年来,胶原的研究受到了重视。胶原是脊椎动物主要的结构蛋白,在人体约占蛋白质总量的1/3。目前公认,胶原主要分为五种类型。Ⅰ型胶原含量较多,是人和其它动物主要的胶原成分,其大量存在于皮肤、肌腱、骨、主动脉及牙质中。Ⅰ型胶原分子形成宽大的胶原纤维,使它所在的结缔组织具有较高的抗张强度。Ⅱ型胶原主要存在于透明软骨及椎间盘内,所形成的胶原纤维直径较小。Ⅲ型胶原主要存在于胎儿皮肤、心血管组织、骨膜及瘢痕组织,它的分布     

蛋白聚糖与临床

蛋白聚糖(PGs)的研究始于19世纪末,最早从软骨组织中分离获得硫酸软骨素。20世纪50年代,人们才逐步认识到糖胺聚糖链(GAG)是与一些蛋白成分共价相连的。由于PGs是非常复杂的生物大分子,直到60～70年代,完整的PGs分子才得以分离纯化。随着分子生物学研究技术的飞速发展及向...     

健骨胶囊对兔骨性关节炎软骨组织中蛋白聚糖含量的影响

目的:探讨健骨胶囊对骨性关节炎模型兔关节软骨组织中蛋白聚糖含量的影响。方法:建立早期软骨退变降解的骨性关节炎动物模型,将模型动物分为模型组、健骨胶囊低、中、高剂量组和正常对照组,采用生物化学方法测定蛋白聚糖的含量。结果:给骨性关节炎模型兔连续喂服健膏胶囊14 d后,可显著地提高兔膝关节软骨中蛋白聚糖含量。结论:健骨胶囊可能对骨性关节炎有一定的改善和治疗作用。     

健固片的毒理学安全性评价

正健固片是以氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素、葛根提取物、柠檬酸苹果酸钙和维生素D3为原辅料制成的具有增加骨密度功能的保健食品。氨基葡萄糖是一种氨基单糖,主要存在于机体的关节软骨中,是关节软骨基质合成蛋白聚糖必需的重要物质。硫酸软骨素是一种蛋白多糖分子,是软骨的主要成分。氨基葡萄糖和硫酸软骨素对人类的骨质疏松症治疗具有协同效     

骨刺：长在骨，刺在心

骨刺,其实是普通百姓的叫法,医学上称骨赘,是人体退行性交的一种表现,主要由软骨退变引起,通常生长在关节两端及活动度较大的脊柱骨边缘。它就像白头发,到了一定年龄的人都会长。据统计,40岁以上的人,90％都深受骨刺的疼痛折磨。