Ksp-Gpx1-k1k1载体的构建及鉴定

目的 构建含有肾组织特异性启动子(Ksp-cadherin)的Gpx1与k1k1载体质粒,为下一步构建转基因动物、研究在动物模型体内表达和基因治疗提供基础.方法 以KLK1 cDNA、GPX1 cDNA、Ksp-cadherin BAC为模板,PCR扩增获得人源Gpx1、KLK1、Ksp-cadherin cDNA.PCR产物大小与预期结果一致,序列分析完全正确.选择多个相应酶切位点,分步将Ksp-cadherin、Gpx1、KLK1插入至pIRES-EGFP质粒中.构建pKSP-GPX1-IRES-KLK1重组质粒.应用酶切鉴定和序列分析方法验证所构建载体的正确性.结果 成功构建了含有Ksp-cadherin的GpX1与k1k1载体质粒.结论 该重组载体的构建为下一步构建转基因动物,研究其在哺乳动物肾组织内过表达及在移植肾缺血冉灌注损伤的基因治疗中的作用奠定了基础.     

李世德1 杨渊1 冷静1 劳山1 黄成彬1 源一郎2 高枫1

目的:探讨单纯大剂量新型重组肿瘤坏死因子对骨肉瘤的抗肿瘤效果,以及其对人体的毒副作用.方法:5例经过病理确诊的下肢骨肉瘤患者, 采用股动静脉插管,体外循环隔离加温灌注,从氧合器加入新型重组肿瘤坏死因子500万单位至700万单位,灌注区肿瘤组织内温度保持在41～42℃之间,持续60 min.灌注后2～3周行肿瘤段骨切除,人工膝关节置换术.结果:新型肿瘤坏死因子灌注后,5 例患者疼痛明显减轻,肿瘤缩小 3.5～5.0 cm灌注区有不同程度的发热和灌注区域的炎症样红肿 ,1例出现寒战,2例发生低血压,无肾衰.组织学发现肿瘤坏死率达88%～96%.随访3个月至20个月,平均6个月.4例存活,1例术后3个月肺转移死亡,无1例发生局部复发.结论:单纯大剂量新型重组肿瘤坏死因子具有较好的抗肿瘤效果及明显的镇痛作用.有一定毒性.     

GLP-1对1型糖尿病大鼠肾脏AdipoR1和MCP-1表达的影响

目的观察胰升糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂艾塞那肽对1型糖尿病大鼠肾脏组织脂联素受体1(adipoR1)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响,探讨艾塞那肽对1型糖尿病大鼠肾脏保护作用及机制。方法 30只雄性SD大鼠,随机分为健康对照组(A组,7只)和糖尿病造模组(23只)。采用链脲佐菌素(STZ)诱导1型糖尿病大鼠模型,共有19只大鼠造模成功。将造模成功的糖尿病大鼠随机分为糖尿病组(B组,10只)和艾塞那肽治疗组(C组,9只)。C组予以艾塞那肽10μg/(kg·d)皮下注射治疗8周。用实时荧光定量PCR方法测定大鼠肾脏组织Adipo R1和MCP-1 mRNA的表达,用免疫组织化学染色法检测Adipo R1在肾脏组织中的分布及表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆脂联素水平。结果与A组比较,B组糖尿病大鼠血糖、血脂、血肌酐、尿素氮、尿白蛋白排泄率、肾脏指数、肾脏组织Adipo R1 mRNA和蛋白表达以及MCP-1 mRNA表达均显著升高(P<0.05),而血浆脂联素水平显著降低(P<0.05)。经艾塞那肽干预后,C组大鼠血浆脂联素水平较B组显著升高(P<0.05),血脂、血肌酐、尿素氮、尿白蛋白排泄率、肾脏指数、肾脏组织Adipo R1 mRNA和蛋白表达以及MCP-1 mRNA表达较B组显著降低(P<0.05),而血糖无明显变化(P>0.05)。结论艾塞那肽可能通过上调1型糖尿病大鼠血浆脂联素水平和下调肾脏组织AdipoR1和MCP-1表达,抑制免疫炎症反应,改善肾功能及减轻肾脏病理损害,产生肾脏保护作用。     

甲型H1N1流感的诊治

甲型H1N1流感（原称人感染猪流感）是由变异后的新型甲型H1N1流感病毒所引起的急性呼吸道传染病。该病是一种新发传染病,通过飞沫、气溶胶、直接接触或间接接触传播。主要临床表现为流感样症状,从目前情况看,患者病情多较轻,少数病例病情严重,进展迅速,可出现肺炎,合并呼吸衰竭、多脏器功能损伤等,严重者可以导致死亡,但病死率不高,目前为0．7％。目前对该病的认识还在进一步观察和研究中。     

甲型H1N1流感的流行病学

2009年3月墨西哥发生甲型H1N1流感流行;4月美国、加拿大等国家相继发现甲型H1N1流感病例,并迅速向世界各地蔓延。甲型H1N1流感于2009年5月传入我国,截止10月已遍及全国各省。作为一种新发传染病,由于人群对它普遍易感,自2009年9月始,暴发疫情成为该病流行的主要表现形式,并迅速播散。目前疫情已逐渐呈现本土化趋势。     

甲型H1N1流感的防治

一、什么是甲型H1N1流感 甲型H1N1流感是一种急性呼吸道传染病,其病毒为A型流感病毒,H1N1亚型猪流感病毒毒株,该毒株包含有猪流感、禽流感和人流感三种流感病毒的基因片段,是一种新型猪流感病毒,可以人传染人,严重的会导致死亡。     

甲型H1N1流感的检测

通过阐述甲型H1N1流感病毒的生物学特性以及标本采集和常用检测方法,以提高人们防范甲型H1N1流感病毒的意识,有利于该疾病的早期发现、早期诊断,防止该疾病的流行传播。     

甲型H1N1流感的研究进展

2009年3～4月从墨西哥暴发的“猪流感”（Swine influenza，SI），后被更名为甲型H1N1流感[In-fluenzaA（H1N1）]，迅速在全世界范围内蔓延。研究表明这种病毒基因组由禽流感、猪流感和人流感病毒基因混合而成，     

甲型H_1N_1流感1例

甲型H1N1流感是由甲型H1N1流感病毒引起的急性呼吸道传染病,在人际间传播．对于传染病而言,及时发现患者和隔离密切接触者对控制疫情的蔓延起着非常重要的作用．吉林省延吉市于2009年7月出现了甲型H1N1流感疫情,为此延吉市疾病预防控制中心对疫情进行了调查分析．     

丁酸钠上调白血病K562细胞CYP1A1和1B1基因的表达

目的 研究丁酸钠(NaB)在诱导白血病K562细胞分化过程中,对细胞色素CYP1A1/1B1基因转录的作用及作用机制.因为与肿瘤发生发展密切相关,细胞色素P450s(CYPs)已经成为最有潜力的抗肿瘤药物的靶标.对于白血病细胞中这些基因表达机制的研究将有助于揭示它们在造血过程以及血液肿瘤发生中的作用.方法 丁酸钠诱导K562细胞分化,RT-PCR检测CYP1A1/1B1转录水平的变化,染色质免疫沉淀(ChIP)分析乙酰化组蛋白H3和组蛋白乙酰转移酶p300与CYP1A1/1B1启动子的结合情况.结果 丁酸钠在诱导白血病K562细胞分化过程中,促进了组蛋白乙酰转移酶p300与启动子区域的结合、升高了CYP1A1/1B1基因启动子组蛋白H3乙酰化修饰水平、上调了CYP1A1/1B1基因的转录.结论 组蛋白乙酰化修饰和组蛋白乙酰转移酶p300参与了丁酸钠诱导的白血病K562细胞CYP1A1/1B1基因的转录.     

1例重症甲型H1N1流感患者的护理

总结分析1例重症甲型H1N1流感患者的临床护理经验,结果显示严格的消毒隔离措施,熟练的BiPAP呼吸机应用和心理支持等使患者转危为安。表明重症甲型N1H1流感有效治愈的关键是控制呼吸道症状,防止交叉感染、营养和心理支持。     

1例暴发性1型糖尿病的护理

暴发性1型糖尿病是日本学者Imagawa等提出的1型糖尿病的新亚型.由于尚未发现其明确的病因及自身免疫的证据,部分证据显示该病与遗传因素(如人白细胞抗原,HLA)和环境因素(如病毒感染)有关[1~4].根据1997年美国糖尿病协会(ADA)及1999年WHO对糖尿病的分型诊断方案,暂被归入特发性1型糖尿病的范畴[5].笔者所在科室在2010年12月收治了一名爆发性1型糖尿病的患者,现将该患者的诊疗护理过程介绍如下. 1病历介绍 患者王某,男性,56岁,因"腹痛、腹泻伴恶心、呕吐一天"于2010年12月23日入住笔者所在医院消化科.     

1型糖尿病种HLA-DQA1-DQB1连锁基因的特征研究

目的：探讨HLA-DQA1-DQB1连锁基因单倍体与成人缓慢进展型1型糖尿病（SPIDDM）和速发型1型糖尿病（FPIDDM）的相关性。方法：采用PCR/SSP技术检测本组1型糖尿病中102例SPIDDM患者和130例FPIDDM患者频率。结果：①HLA-DQA1＊0301-DQB1＊0201和DQA1＊0501-DQB1＊0201连锁基因单倍体与SPIDDM（Pc〈0.001）和FPIDDM（Pc〈0.001）均呈显著正相关。②HLA-DQA1＊0301-DQB1＊0301和DQA1＊0301-DQB1＊0602连锁基因单倍体与SPIDDM呈显著正相关（Pc〈0.001）。③HLA-DQA1＊0301-DQB1＊0302、DQA1＊0301-DQB1＊0303及DRB1＊0301-DQA1＊0301-DQB1＊0201连锁基因单倍体与FPIDDM呈显著正相关（均Pc〈0.05）;DQA1＊0102等位基因中SPIDDM组16例（15.69%）;FPIDDM组10例（7.69%）（P〈0.05）;DQA1＊03基因SPIDDM组47例（46.08%）,FPIDDM组79例（60.77%）（P〈0.05）;DQB1＊0601基因SPIDDM组10例（9.8%）,FPIDDM组4例（3.08%）（P〈0.01）。结论：SPIDDM和FPIDDM虽然均为自身免疫性糖尿病,但其HLA表型并不完全相同,不同的HLA表型可能是决定患者起病方式及病情发展不同的因素之一。     

CYP1A1基因 Msp1多态性与广西壮族食管癌的易感性

目的:探讨CYP1A1基因 Msp1多态性与广西壮族食管癌易感性之间的相关性.方法:采用PCR-RFLP技术检测98例食管癌患者(广西壮族)和100例健康人CYP 1A1基因 Msp1多态性的分布频率,分析其与广西壮族食管癌易感性之间的相关性,以及CYP1A1基因 Msp1多态性与吸烟、饮酒在食管癌易感性中的交互作用.结果:CYP 1A1 Msp1 3种基因型(野生型基因 m1/m1型、突变杂合型基因 m1/m2型、突变纯合型基因 m2/m2型)分布频率在食管癌组和正常对照组分别为38.8%、41.8%、19.4%及40.0%、43.0%、17.0%,两组间的频率分布在性别、年龄、吸烟、饮酒情况调整后差异无统计学意义(P>0.05).携带CYP1A1 Msp1 m2基因型的个体较携带野生型基因 m1/m1型的个体患食管癌的风险增加(ORa=1.420),但差异无统计学意义(Pa=0.387).按照吸烟、饮酒因素分层后,这种差异仍无统计学意义(均Pa>0.05).结论:单一基因CYP1A1 Msp1位点多态未表明与广西壮族食管癌易感性相关.     

疑似H1N1感染重症产妇1例的护理体会

甲型H1N1流感是一种新型流感病毒引起的急性呼吸道传染病,人类缺乏免疫,可通过近距离飞沫和接触传播,因此具有较强的传染性。2009年9月8日我院SICU收治1例疑似H1N1感染重症病例,患者为产妇,经过近2个月的积极抢救治疗,患者康复出院。现将该病例的护理体会介绍如下。     

1＋1〈2

两个水性不佳的年轻人在河边练习游泳，突然，他们同时听到河中心有孩子落水呼救。其中一个毫不犹豫地朝河心游去，另一个大喊“我帮你”!紧随其后奋臂追赶。     

Ksp-Gpx1-k1k1载体的构建及鉴定

OBJECTIVE: To construct a Gpx1 and klk1 recombinant vector containing the kidney-specific promoter Ksp-cadherin. METHODS: Human Gpx1, Klk1 and Ksp-cadherin cDNAs were amplified with PCR and inserted in a stepwise manner into the expressive vector pIRES-EGFP to construct the recombinant vector Ksp-cadherin-Gpx1-Klk1. The constructed vector was verified with restriction enzyme digestion and sequence analysis. RESULTS AND CONCLUSION: The recombinant expression vector Ksp-cadherin-Gpx1-Klk1 was constructed and identified successfully, which provides a potent tool for preparing transgenic animals to investigate gene therapy for ischemia-reperfusion injury in kidney transplantation.     

1起甲型H1N1流感暴发疫情的调查分析

目的调查分析1起学校甲型H1N1流感暴发的原因和规律,为制订甲型H1N1流感防控措施提供科学依据。方法按照《甲型H1N1流感诊疗方案(2009年试行版第二版)》对病例进行诊断,采用个案调查表对病例进行流行病学调查,并进行描述性分析。结果 70例流感样病例中,首发病例发病时间为9月1日,发病高峰为9月2～4日,分别为14例、9例、9例。首发病例未及时报告与处理和人群普遍易感是导致此次疫情的主要原因。结论加强甲型H1N1流感疫情监测工作,及时隔离病人,积极开展健康教育和易感人群的免疫接种,可预防和控制甲型H1N1流感疫情的发生和流行。     

铁路客运员确诊甲型H1N1流感1例的调查

目的:调查总结甲型H1N1流感疫情,为今后的疫情处理提供依据.方法:用现场调查与采样检测相结合的方法对2009年11月21日发生在菏泽站1例铁路职工确诊甲型H1N1流感病例进行调查.结果:此例甲型H1N1流感病例有明显的与甲型H1N1流感患者接触史,临床症状典型,以发热,体温>38℃,最高温度39.5℃,头痛、咳嗽、咽痛、全身酸痛为主,同时伴有乏力、恶心等症状.结论:病例发生在公共场所,人员密集的客运站,由于控制措施及时有效,防止了甲型H1N1流感疫情借铁路运输传播.     

HIV-1感染者1例病毒的分离

本文对1例艾滋病患者（与河南籍男友通过性途径感染）HIV-1病毒进行了分离。通过收集疾病预防控制中心实验后样品——患者的静脉血，分离其外周血单核淋巴细胞，与健康人来源的外周血单核淋巴细胞共培养以增殖HIV-1病毒。通过逆转录酶活性确定培养体系中是否有HIV-1病毒的扩增。