基于灰色关联度分析法对半夏及其炮制品总有机酸止咳作用的谱-效关系研究

目的研究半夏及其炮制品清半夏、姜半夏、法半夏和京半夏总有机酸HPLC指纹图谱与止咳作用的相关性,建立半夏及其炮制品总有机酸与止咳作用的谱-效关系,以阐明止咳作用的物质基础。方法采用灰色关联度分析法,对半夏及其炮制品总有机酸HPLC指纹图谱的各共有峰峰面积与止咳的3个评价指标(咳嗽潜伏期、3 min内咳嗽次数及抑咳率)进行相关性分析,建立半夏及其炮制品总有机酸止咳作用的谱-效关系。结果半夏及其炮制品总有机酸对浓氨水致小鼠咳嗽有显著的抑制作用,与半夏止咳功效一致。在半夏及其炮制品总有机酸HPLC指纹图谱中,4、6(琥珀酸)、12号色谱峰所代表的化学成分与止咳作用具有较强的相关性,对止咳作用贡献较大,特别是4号色谱峰,峰面积大、关联度强。结论半夏及其炮制品总有机酸HPLC指纹图谱与其止咳作用具有相关性。通过谱-效关系研究,阐明了半夏及其炮制品止咳作用的物质基础,为其质量控制与评价提供了理论依据。     

基于止咳效价评价半夏及其炮制品品质的方法研究

目的 建立半夏及其炮制品清半夏、姜半夏、法半夏和京半夏止咳效价测定的模型与方法,为初步探索生物效价测定法用于评价半夏及其炮制品的质量提供科学依据。方法 基于小鼠浓氨水引咳模型,采用量反应平行线(2.2)法建立半夏及其炮制品止咳效价的测定方法,测定其效价值,并结合总有机酸定量测定结果,分析总有机酸的量与生物效价二者的相关性。结果 半夏炮制后,止咳效价值均升高;京半夏的止咳效价值最大,为2 105.59 U/g;其后依次为法半夏、清半夏、姜半夏;半夏止咳效价值最小,为京半夏的1/3。结合总有机酸定量分析,半夏及其炮制品的止咳效价与总有机酸的量相关,其R²为0.692 0～0.917 8,表现为总有机酸的量增加,止咳效价值增大,二者呈显著的正相关。结论 该方法重复性、精密度良好,适用于半夏及其炮制品止咳效价的测定,可作为评价其质量的方法,为完善其质量标准,构建中药质控新模式提供了科学依据。     

对叶百部总生物碱止咳作用的谱效关系研究

目的:研究全国29个产地对叶百部总生物碱的HPLC图谱与止咳作用的相关性,建立各产地对叶百部总生物碱与止咳作用的谱效关系,阐明止咳作用的物质基础。方法:采用灰色关联度分析方法,对全国29个产地的对叶百部总生物碱的HPLC图谱的8个特征峰峰面积与止咳的2个评价指标(2 min内咳嗽次数、抑咳率)进行相关性分析,研究对叶百部总生物碱止咳作用的谱效关系。结果:对叶百部总生物碱对浓氨水致小鼠咳嗽有显著的抑制作用,与百部的止咳功效一致。在全国29个产地的对叶百部总生物碱HPLC图谱中,1号金刚大碱色谱峰峰面积大、关联度强;2～8号色谱峰对止咳作用也有较大的贡献,关联度差距较小,对止咳作用起协同作用。结论:全国29个产地的对叶百部总生物碱HPLC图谱与止咳作用具有相关性。通过谱效关系研究,可阐明对叶百部止咳作用的物质基础,为其质量控制与评价提供一定的理论依据。     

半夏及其炮制品化学成分及功效的差异研究

目的研究半夏及其不同炮制品化学成分及功效的差异。方法采用HPLC法测定半夏及其炮制品清半夏、姜半夏、法半夏水提取物中8种有效成分肌苷、鸟苷、腺苷、琥珀酸、盐酸麻黄碱、甘草苷、甘草酸铵、6-姜辣素含量;通过小鼠气管段酚红法和浓氨水刺激小鼠引咳法对半夏传统功效祛痰、止咳进行药效学研究。结果半夏炮制品中肌苷、鸟苷、腺苷、琥珀酸、盐酸麻黄碱含量较半夏生品明显下降,法半夏中未检出肌苷。3种炮制品相比,清半夏中肌苷、鸟苷、腺苷、琥珀酸含量最高,姜半夏最低,与祛痰作用强弱一致,该4种成分是祛痰作用的活性成分,清半夏炮制时加入白矾,也增强其化痰功效;法半夏止咳作用最强,其次为半夏、清半夏,姜半夏作用最弱,法半夏经甘草、石灰水制后,辅料甘草(引入甘草苷、甘草酸铵)的加入增强了法半夏止咳作用。姜半夏经生姜、白矾制后,生姜(引入6-姜辣素)增强姜半夏止呕作用,减弱化痰、止咳作用。结论半夏炮制后化学成分及功效均发生一定变化,不同炮制方法对其化学成分和功效的影响不同。     

半夏皮与块茎中4类成分的比较

目的比较5个产地(甘肃、四川、山东、贵州、湖北)半夏Pinellia ternate(Thunb.)Breit.皮与块茎中总游离有机酸、总生物碱、蛋白(水溶性和醇溶性)、还原性糖的含有量。方法采用电位滴定法、比色法、Osborne法和DNS法,分别测定总游离有机酸、总生物碱、蛋白、还原性糖的含有量,并建立半夏水提取物HPLC指纹图谱。结果除水溶性蛋白外,半夏皮中上述成分含有量均显著高于块茎。HPLC指纹图谱有13个共有峰,5个产地半夏块茎中化学成分相似度均在85%以上,而皮不足70%,但两者化学成分组成相似。结论半夏皮也具有应用价值,应加以关注。     

止咳祛痰灵口服液的制备工艺及药理作用研究

目的：初步验证止咳祛痰灵口服液的消痰止咳功效。方法：采用超声提取工艺、小鼠氨水引咳法以及气管酚红排泌量。结果：小鼠氨水引咳法验证止咳祛痰灵口服液的镇咳作用，气管酚红排泌量验证了止咳祛痰灵口服液的祛痰作用。结论：止咳祛痰灵口服液具有显著的消痰止咳功能。     

半夏曲发酵过程化学成分的HPLC特征指纹图谱分析

目的:对半夏曲自然发酵过程化学成分的HPLC特征指纹图谱进行研究,为半夏曲的物质基础研究提供参考。方法:采用HPLC梯度洗脱,建立半夏曲不同发酵过程的特征指纹图谱,运用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004(A版)"进行分析。结果:HPLC指纹图谱方法学考察中RSD均3.0%,符合相关规定;指认了鸟苷、肌苷和腺苷3个特征峰。在发酵过程中,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,15,19号色谱峰所代表的化合物均存在;11,12,13,14,16,17,18号色谱峰所代表的化合物则是因为发酵而新产生的7个化合物,且11,12,13,14号色谱峰的相对峰面积非常明显,反应其成分含量较高。结论:半夏曲发酵过程特征指纹图谱的研究可在一定程度上揭示其物质基础的变化,为进一步研究半夏曲的物质基础提供参考。     

金泽排石颗粒指纹图谱的建立及对环氧合酶-2的抑制作用

目的建立10个不同批次金泽排石颗粒的HPLC指纹图谱,并初步建立其抗炎生物活性效价检测方法,构建环氧合酶-2(COX-2)与金泽排石颗粒的量效关系,科学评价并有效控制颗粒的质量。方法采用HPLC法分析10个不同批次金泽排石颗粒共有峰的相似度,并将19个共有峰归属到药材,将相似度结合SPSS统计软件聚类分析以及主成分分析结果评价10批次颗粒;用酶免疫法测定金泽排石颗粒对COX-2的半数抑制浓度(IC50)。结果 10个批次金泽排石颗粒的HPLC指纹图谱的相似度均≥0.955,聚类分析和主成分分析结果与相似度结果具有一致性。金泽排石颗粒对COX-2有明显的抑制作用,IC50为10.272 mg/m L,具有明显的量效关系。结论采用化学指纹图谱与生物活性检测多元质控体系,具有高效、快速、准确、灵敏、重现性好等特点,可以有效地评价金泽排石颗粒的抗炎生物活性,更加科学合理地控制其质量,也为其他中药制剂建立更加科学的质量控制标准提供了参考。     

抗病毒片的止咳祛痰作用

目的:研究抗病毒片止咳祛痰作用。方法:采用小鼠氨水引咳法和豚鼠枸橼酸引咳法观察止咳作用;用小鼠酚红排泌法观察祛痰作用。结果:抗病毒片能延长浓氨水或枸橼酸引起动物咳嗽的潜伏期,并减少咳嗽次数;能促进小鼠气管酚红排泌。结论:抗病毒片具有止咳、祛痰作用。     

基于化学模式识别方法分析止得咳颗粒的抗炎谱效关系

目的:研究止得咳颗粒HPLC指纹图谱与抗炎作用的谱效关系,探索其抗炎药效物质基础。方法:采用HPLC建立10批止得咳颗粒的指纹图谱并进行色谱峰归属,流动相甲醇-0.2%磷酸水溶液梯度洗脱,检测波长254 nm。综合应用相似度评价,聚类分析(HCA),主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)评价止得咳颗粒批间质量差异。采用偏最小二乘法(PLS)将指纹图谱共有峰与二甲苯致小鼠耳肿胀和小鼠棉球肉芽肿的抑制率进行关联性分析,筛选出对抗炎药效作用贡献较大的色谱峰。结果:止得咳颗粒HPLC指纹图谱标定了31个共有峰,10批样品相似度均≥0.992。HCA与PCA分析结果一致,均将样品分为3类;OPLS-DA结果发现15个成分是影响样品批间差异的主要标记物。不同批次止得咳颗粒样品均有不同程度的抗炎作用,PLS分析得出与抗炎作用呈正相关的色谱峰主要来自射干、黄芩,贡献较大的色谱峰为3,6,19,27～30号峰,其中28,30号峰依次为次野鸢尾黄素、汉黄芩素。结论:HPLC指纹图谱结合化学模式识别方法可为系统评价止得咳颗粒整体质量提供参考。止得咳颗粒对小鼠急、慢性炎症反应有一定的抑制作用,抗炎作用是多种成分共同作用的结果,射干、黄芩对该制剂发挥抗炎作用具有显著意义。     

基于化学计量学研究莪术-三棱药对水煎液物理参数与化学成分的相关性

目的 基于化学计量学对莪术-三棱药对水煎液物理参数与化学成分的相关性进行分析,探索利用直观物理参数表征化学成分含量的可行性。方法 测定莪术-三棱药对水煎液的物理参数（电导率、黏度、pH值和色度）;采用苯酚-硫酸法测定水煎液的多糖含量、考马斯亮蓝法测定水煎液的总蛋白含量,建立水煎液HPLC指纹图谱,并采用HPLC-MS/MS技术表征水煎液中化学成分组成;利用Pearson相关系数、灰色关联度、前向逐步回归法等化学计量学方法,探索物理参数与化学成分的相关性,并尝试建立以物理参数预测化学成分含量的数学模型。结果 pH值与莪术-三棱药对水煎液总蛋白、二芳基庚烷类化合物含量相关性较强,均为正相关;电导率与总蛋白、多糖含量相关性较强,均为正相关;溶液亮度与总蛋白、二芳基庚烷类化合物含量关系密切,与前者呈负相关、与后者呈正相关;总蛋白、倍半萜类和二芳基庚烷类化合物含量对溶液的红绿、黄蓝色影响较大;溶液黏度与总蛋白含量呈正相关。有机酸类成分、多糖和总蛋白的含量与物理参数的数学方程拟合度较高,可以作为快速分析莪术-三棱药对水煎液化学成分含量的依据。结论 通过化学计量学分析,莪术-三棱药对水煎液的物理参数与其化学成分呈现良好的相关性,建立的数学模型初步表明可以通过简单的物理参数表征水煎液的化学成分含量。     

治疗咳嗽中药专利复方的用药规律分析

通过分析近20年中药治疗咳嗽的专利现状,探讨中药在治疗咳嗽过程中的用药规律。在SIPO专利检索平台和中国知网的专利数据库对中药治疗咳嗽的专利进行检索,采用Clementine12.0软件进行关联性和高频中药网络分析,分析治疗咳嗽中药和配伍中药药对的使用规律。在治疗咳嗽的316首中药专利中,中药复方中使用频数最高的中药为甘草,其他使用频数较高的中药有桔梗、麻黄、陈皮、半夏等;使用的化痰止咳平喘类药偏多。常用的药对为甘草-桔梗、甘草-陈皮、半夏-甘草、麻黄-甘草。通过对中药频数、药类、药对、关联规则、高频中药网络的分析,结合中医理论可以揭示咳嗽中药复方的配伍规律,为临床用药提供依据。     

半夏和白蔹分别与生川乌合煎过程中淀粉类成分对生川乌生物碱类成分溶出的影响

目的 分析淀粉类成分在煎煮过程中对生川乌中小分子乌头类生物碱溶出的影响,初步探讨淀粉对生物碱成分的作用机制。方法 将不同来源的淀粉类成分与生川乌药材合煎,运用RRLC-Q-TOF-MS技术分析淀粉对合煎液中乌头类生物碱溶出的影响;运用HPLC-UV技术分析淀粉与生物碱单体合煎后,溶液中生物碱类成分的量;采用方差分析和偏最小二乘判别法进行差异分析。结果 与淀粉合煎后,生川乌中双酯型、单酯型和醇胺型生物碱溶出率均明显降低,其中单酯型和醇胺型生物碱在生川乌与白蔹淀粉、半夏淀粉、市售淀粉、白蔹以及半夏药材5组配伍后其降低更为显著;而生川乌中双酯型生物碱量在与除去淀粉的半夏和除去淀粉的白蔹配伍时出现明显的上升趋势。生物碱类成分直接与淀粉类成分合煎时,合煎液中生物碱量明显低于生物碱单独煎煮。结论 淀粉类成分能够在煎煮液中抑制生川乌中生物碱类成分的溶出,对于游离生物碱,淀粉类成分能够与其发生一定形式的结合,影响生物碱在水溶液中的量。     

虎掌南星超快速Real-time VPCR闭管检测方法的建立及应用

目的建立虎掌南星Pinellia pedatisecta特异性DNA的闭管式超快速检测方法,实现对虎掌南星样本的快速鉴别。方法针对虎掌南星特异性的DNA序列设计其特异性的引物和TaqMan探针,通过对扩增体系进行优化,建立虎掌南星的超快速实时荧光VPCR扩增体系,实现对虎掌南星特异性DNA的快速扩增和闭管式实时检测。同时对该方法的特异性、灵敏度和实用性进行考察。结果可以在24 min内完成对虎掌南星特异性DNA的闭管快速扩增检测;检测限低至pg级DNA;在同科属常见近缘品种中无交叉反应;对采集的7批56个"半夏"样本进行分析,检测出2个批次共16个样本为虎掌南星,且该结果与测序结果 100%符合。结论所建方法可以作为虎掌南星的特异性检测方法,具有灵敏、快速和不易污染等优点,可以为虎掌南星和半夏药材的质量控制提供参考。     

龙利叶止咳活性部位筛选及其作用机制研究

目的对龙利叶的止咳作用进行研究,筛选其活性部位,并初步研究其止咳作用机制。方法制备龙利叶75%乙醇、石油醚、醋酸乙酯、正丁醇、95%乙醇部位提取物,采用改良寇氏法研究龙利叶不同提取部位的急性毒性;采用氨水引咳法制备小鼠模型,用序贯法求出引起半数小鼠咳嗽的喷雾时间,进行止咳活性部位的筛选;采用辣椒素引咳实验,通过观察龙利叶各部位提取物对小鼠阿片受体激动作用和对ATP敏感性钾通道(KATP)的作用,探讨其作用机制。结果龙利叶75%乙醇、醋酸乙酯、正丁醇和95%乙醇部位对小鼠的半数致死剂量(LD_(50))分别为浸膏7.30、17.00、69.68、75.88 g/kg;石油醚部位最大耐受量为浸膏117.71 g/kg;75%乙醇部位和醋酸乙酯部位具有止咳作用,其止咳作用与激动中枢系统的阿片受体和KATP通道有关。结论 75%乙醇和醋酸乙酯部位为龙利叶止咳活性部位,其止咳机制与激动中枢系统的阿片受体和KATP通道有关。     

基于真实世界的高血压住院患者临床特征及中药处方用药分析

目的研究真实世界中高血压病住院患者的临床特征以及各中医证型分布特点及中药处方用药规律。方法基于回顾性研究的方法,选择本院2018年1月—2019年12月信息系统(hospital information systerm,HIS)中主诊断为高血压的住院患者,采集其入院及治疗过程中的信息,使用频数分析和关联规则分析方法进行分析。结果共纳入2064例高血压患者,其中男性1007人(49%),女性1057人(51%);以3级高血压最多见(54%);证型分布上以痰瘀互结最多见(47%);各证型发病的平均年龄以肝火亢盛年龄最低(58岁),肾气虚证型最高(68岁)。高血压第2诊断常见合并病/症以冠心病为主(40%),其次为脑梗死(20%);住院时间的节气分布方面,总体上看以小满发病人数最多,其次是立夏、处暑、芒种、小暑等,各证型又不相同。中药使用方面:处方中共包括了235种中药材,各个证型高频用药以川芎使用的频次最高,其他使用频次较多的包括天麻、当归、半夏、丹参等。5个证型共计产生核心药对44对,肝火亢盛证以天麻配伍川牛膝、杜仲置信度最高;肾气虚证以川芎配伍山药、当归置信度最高;痰瘀互结证以川芎配伍当归、地龙置信度最高;阴虚阳亢证以川芎配伍半夏、酸枣仁置信度最高。结论基于临床特征及处方用药分析,高血压的基本病理因素以瘀、痰、虚为主,用药主要为活血通络、平肝补肾之品,常用核心药物为川芎,根据不同证型常以天麻、山药、当归、半夏等与之相配伍应用。     

基于Copula函数研究莪术-三棱药对治疗“气滞血瘀”证的方剂剂量耦合效应

目的 构建Copula函数，研究莪术Curcuma Rhizoma-三棱Sparganii Rhizoma药对治疗“气滞血瘀”证的方剂剂量耦合效应。方法 从自建方剂数据库中收集治疗“气滞血瘀”证并含莪术-三棱药对的中医方剂，对其中莪术剂量和三棱剂量进行数据处理和检验，从阿基米德Copula函数族、椭圆Copula函数族中选择出最佳的Copula函数建立数学模型，描绘联合分布函数图，测算Kendall秩相关系数和Spearman秩相关系数，监测莪术剂量和三棱剂量数据间的相关性。结果 整理归纳出505首方剂。Gaussian Copula函数模型能较好地反映莪术剂量和三棱剂量之间的相关性，莪术剂量和三棱剂量的Kendall秩相关系数为0.225 6,Spearman秩相关系数为0.333 0，说明莪术剂量和三棱剂量之间具有较强的非线性关系，且呈正相关，当剂量增加时，两者之间的耦合效应会增强。结论 基于Copula函数模型，研究莪术-三棱药对在中医方剂配伍中的剂量相关性，从数据挖掘和数理统计角度为传统经典药对相须为用提供依据，为研究中药药对在中医药方剂配伍中的剂量关系提供新思路。