喜炎平注射液体外降解内毒素的作用

目的探讨喜炎平降解内毒素的作用。方法采用连续倍比稀释法,将规格为2 mL:50 mg的喜炎平注射液稀释125倍、625倍、1 250倍和2 500倍,分别与1 EU.mL-1内毒素工作标准品混合,放入(37±1)℃水浴中15,30,45,60 min,应用鲎实验检测反应液中内毒素含量。结果稀释125倍、625倍、1 250倍和2 500倍的喜炎平注射液与1 EU.mL-1内毒素工作标准品混合,完全降解的时间依次是15,30,45,60 min。结论喜炎平降解内毒素的作用有浓度和时间依赖性。随喜炎平稀释倍数的增加,降解内毒素作用逐渐减弱;随时间延长,喜炎平降解内毒素作用增强。喜炎平有较好的降内毒素的作用。     

黄芩中黄芩苷的抗内毒素作用

目的 探讨黄芩中黄芩苷的抗内毒素作用。方法将黄芩苷配成0.5%水溶液，鲎实验法进行抗内毒素定量测定；内毒素致家兔发热实验检测黄芩苷体内抗内毒素作用；脂多糖致小鼠死亡实验测定黄芩苷保护作用及黄芩苷对脂多糖致小鼠过度释放肿瘤坏死因子（TNF）和一氧化氮（NO）的影响实验，研究黄芩苷的抗内毒素作用。结果0.833 g· mL 1黄芩苷可使4 EU内毒素降解为0.546 EU，破坏率为87.45%；0.5%黄芩苷溶液可显著降低内毒素引起的家兔体温升高，同等剂量脂多糖引起的小鼠死亡率从70.0%降为10.0%；黄芩中的黄芩苷可抑制脂多糖致小鼠血清中TNF和NO的过度释放，其抑制率呈剂量依赖性。结论 从黄芩中提取分离出的黄芩苷有抗内毒素作用。     

毛细管区带电泳快速测定银黄口服液中的黄芩苷和绿原酸含量

目的建立了毛细管电泳法测定中药复方制剂银黄口服液中绿原酸、黄芩苷的方法。方法以弹性石英毛细管柱为分离柱,25 mmol.L-1硼砂缓冲溶液(用0.2 mol.L-1HAc和0.1 mol.L-1NaOH调pH至9.0)为运行缓冲液,分离电压为15kV,检测波长为325 nm。结果在优化的条件下,20 min内实现了2种物质的良好分离,绿原酸、黄芩苷峰面积和浓度分别在0.1~1.0和0.2~2.0 mg.mL-1呈良好线性;检出限分别为:绿原酸0.02 mg.mL-1;黄芩苷0.04 mg.mL-1,回收率在97%~102%。结论该方法适合该品种的质量控制。     

硫酸阿托品注射液中细菌内毒素的鲎试剂检查法

目的:建立硫酸阿托品注射液细菌内毒素检查法.方法:采用中国药典2005年版附录细菌内毒素检查法.结果:硫酸阿托品注射液稀释至0.25 g·L-1及更低浓度时,用灵敏度分别为0.25 EU·mL-1和0.125 EU·mL-1的鲎试剂检测细菌内毒素,无干扰因素影响.结论:硫酸阿托品注射液细菌内毒素限值确定为50 EU·mg-1,可应用鲎试剂进行细菌内毒素法检查.     

黄芩苷联合左氧氟沙星对铜绿假单胞菌生物膜的影响及相关机制

目的:通过在体外建立铜绿假单孢菌生物膜模型,研究黄芩苷联合左氧氟沙星对黏液型铜绿假单胞菌生物膜的协同杀菌效果并探讨其可能机制。方法:选取临床分离的呼吸道铜绿假单胞菌,采用平板培养法建立体外生物膜模型,连续稀释法分别测定左氧氟沙星和黄芩苷的最低抑菌浓度;采用多功能酶标仪测定左氧氟沙星单独作用以及与黄芩苷联用后生物膜内活菌的荧光强度;采用硫酸-苯酚法检测黄芩苷对藻酸盐含量的影响。结果:当黄芩苷浓度大于5 mg.L-1时,生物膜内活菌数减少(P<0.05);黄芩苷与左氧氟沙星存在协同抗菌作用,随着黄芩苷浓度升高,协同抗菌作用增强(P<0.05或P<0.01);黄芩苷可增强左氧氟沙星对生物膜内藻酸盐含量的降解作用。结论:黄芩苷与左氧氟沙星联用,可显著增强其抗菌活性,降低细菌耐药发生。     

板蓝根中邻氨基苯甲酸的抗内毒素作用

目的研究板蓝根中邻氨基苯甲酸(o-aminobenzoic acid,OABA)的抗内毒素作用.方法将邻氨基苯甲酸配成0.5%水溶液,鲎试验法进行抗内毒素定量测定;内毒素致家兔发热实验检测邻氨基苯甲酸体内抗内毒素作用;脂多糖(LPS)致小鼠死亡试验测定邻氨基苯甲酸保护作用及邻氨基苯甲酸对脂多糖致小鼠过度释放肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和一氧化氮(NO)的影响试验,研究邻氨基苯甲酸的抗内毒素作用.结果 0.833 mg·mL-1邻氨基苯甲酸可使4 EU内毒素降解为0.668 EU,破坏率为84.4%;0.5%邻氨基苯甲酸溶液可使内毒素引起的家兔体温升高显著降低,使同等剂量脂多糖引起的小鼠死亡率从70%降为20%;板蓝根中的邻氨基苯甲酸可抑制脂多糖致小鼠血清中TNF-α和NO的过度释放,其抑制率呈剂量依赖性.结论从板蓝根中分离出的邻氨基苯甲酸有抗内毒素作用.     

磺胺嘧啶钠注射液细菌内毒素检查方法的研究

建立磺胺嘧啶钠注射液细菌内毒素的检查方法.采用<中国药典>2005年版附录细菌内毒素检查法.磺胺嘧啶钠注射液在12.5mg·mL-1及以下浓度时,用灵敏度为0.25 EU·mL-1的鲎试剂检测细菌内毒素,无干扰因素影响.磺胺嘧啶钠注射液细菌内毒素限值确定为 0.1EU·mg-1,可应用鲎试剂进行细菌内毒素法检查.     

注射用药用辅料枸橼酸细菌内毒素检查法的可行性研究

目的:建立注射用药用辅料枸橼酸的细菌内毒素检验方法。方法:按照《中国药典》2010年版二部附录细菌内毒素检查法试验和结果判断,采用供试品稀释法和pH调节法进行试验。结果:在供试品稀释法中,枸橼酸0.125 mg.mL-1及其以下浓度对湛江安度斯生物有限公司生产的鲎试剂与细菌内毒素反应无干扰;枸橼酸0.0625 mg.mL-1及其以下浓度对湛江博康海洋生物有限公司生产的鲎试剂与细菌内毒素反应无干扰。使用0.03 EU.mL-1的鲎试剂可对其进行细菌内毒素检查。在pH调节法中,枸橼酸用1 mol.L-1氢氧化钠调节pH值至6.0后,对鲎试剂与内毒素反应最大不产生干扰的浓度为0.5 mg.mL-1,使用0.25 EU.mL-1或灵敏度更高的鲎试剂可对其进行细菌内毒素检查。结论:建立其细菌内毒素检查法是可行的,可用于其质量控制。     

注射用盐酸川芎嗪细菌内毒素检查法的研究

目的 建立注射用盐酸川芎嗪细菌内毒素检查方法.方法 参照《中国药典》2010年版二部细菌内毒素检查法进行试验.结果 将注射用盐酸川芎嗪稀释至0.06 mg· mL-1时,对细菌内毒素和鲎试剂的反应无干扰作用.结论 该品种可采用细菌内毒素检查法控制药品质量,其内毒素限值为每1 mg盐酸川芎嗪中含内毒素的量应小于2.0 EU·mg-1.     

黄芩苷PC12细胞跨膜转运的实验研究

目的研究黄芩苷神经元跨膜转运的特点,部分阐释黄芩苷发挥神经系统保护作用的物质性基础。方法以PC12细胞为研究对象,使用高效液相色谱(HPLC)、质谱(MS)法检测黄芩苷孵育细胞内的物质含量及相关代谢产物。结果 100 mg.L-1黄芩苷给药30 min后,胞内黄芩苷浓度达峰值,8 h后胞内已测不出黄芩苷;在50～400 mg.L-1的给药浓度下,胞内黄芩苷含量与给药剂量呈正相关;抑制剂Verapamil与Nimodipine对黄芩苷转运有明显影响;同时胞内检测出黄芩素、6-甲氧基-黄芩苷两种结构类似物。结论黄芩苷能够浓度依赖性的跨膜入胞,此过程受相关抑制剂影响,并产生代谢产物。     

板蓝根中4(3H)-喹唑酮的抗内毒素作用

目的 研究板蓝根中4(3H)-喹唑酮(QZO)的抗内毒素作用.方法 鲎试验法测定抗内毒素;内毒素致家兔发热实验检测其体内抗内毒素作用;脂多糖致小鼠死亡实验测定QZO的保护作用及其对脂多糖致小鼠过度释放肿瘤坏死因子(TNFα)和一氧化氮(NO)的影响,研究QZO的抗内毒素作用.结果 0.832 mg·ml-1QZO可使4 EU内毒素降解为1.19 EU,破坏率71.31%;0.5%QZO溶液可使内毒素引起的家兔体温升高显著降低,使同剂量脂多糖引起的小鼠死亡率从70%降为30%;板蓝根中的QZO可抑制脂多糖致小鼠血清中TNFα和NO的过度释放,抑制率呈剂量依赖性.结论 从板蓝根中提取分离出的QZO有抗内毒素作用.     

注射用脱氧核苷酸钠细菌内毒素检查方法的研究

建立注射用脱氧核苷酸钠细菌内毒素的检查方法.按<中国药典>2005年版二部附录细菌内毒素检查法进行试验.注射用脱氧核苷酸钠在1mg·mL-1稀释浓度下无干扰作用,L=0.25EU·mg-1.可用细菌内毒素检查法检查注射用脱氧核苷酸钠的内毒素.     

黄芩苷灌胃给药经兔眼血-房水屏障的通透性

目的:研究黄芩苷灌胃给药经兔眼血.房水屏障的通透性.方法:建立测定黄芩苷兔眼房水和血浆药物浓度的HPLC方法,色谱条件:Diamonsil C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液(47:53);流速为1.0 mL·min-1;检测波长为279 nm;柱温为35 ℃;以对二甲氨基苯甲醛为内标物.健康纯种日本长耳白兔单剂量灌胃黄芩苷80 mg·kg-1后,比较不同时间兔眼房水和血浆药物浓度,绘制药物浓度-时间曲线,用3p87药动学软件计算黄芩苷在房水和血浆中的药动学参数.结果:在本色谱条件下,黄芩苷在房水和血浆中的线性范围分别为0.02～0.25和0.012 5～24.0 mg·L-1,相关系数(r)分别为0.996 8和0.998 2.黄芩苷在房水中的AUC0～12h显著低于血浆[(0.639±0.067) vs (80.1±2.1)h·mg·L-1,P<0.01],各个时间点比较,黄芩苷在房水中的质量浓度均显著低于其血浆中的质量浓度(P<0.01).结论:黄芩苷经灌胃给药较难通过血-房水屏障进入眼内.     

注射用泮托拉唑钠的细菌内毒素检查

目的建立注射用泮托拉唑钠细菌内毒素的检查方法。方法按《中国药典》2005年版(二部)附录ⅪE进行实验和结果判断。结果用标示量灵敏度0.25EU.mL-1的鲎试剂,注射用泮托拉唑钠的有效检测浓度为0.13mg.L-1,3批注射用泮托拉唑钠内毒素均小于1.88EU.mL-1。结论本品可以用细菌内毒素检查法代替家兔热源检查法。     

黄芩提取物中有效成分黄芩苷和汉黄芩苷在糖尿病大鼠中的药动学研究

目的比较黄芩提取物中主要成分黄芩苷和汉黄芩苷在糖尿病大鼠和正常大鼠体内的药动学.方法腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,灌胃黄芩提取物后取血分离血浆,采用HPLC-Uv法检测血浆中黄芩苷和汉黄芩苷浓度,以矩量法计算药动学参数,AUC(0-τ)的计算采用梯形法.采用黄芩提取物与大鼠粪便温孵,从肠道代谢研究黄芩苷和汉黄芩苷动力学改变的初步机制.结果与正常大鼠比较,糖尿病大鼠给予黄芩苷和汉黄芩苷后体内Cmax1明显增加[黄芩苷(6.07±0.95)vs.(17.01±3.60)μg·mL-1,P＜0.01;汉黄芩苷(3.50±0.72)vs.(9.34±2.04)μg·mL-1,P＜0.01],Cmax2明显增加[黄芩苷(1.61±0.18)vs.(7.39±3.04)μg·mL-1,P＜0.01;汉黄芩苷(1.95±0.52)vs.(6.72±2.60)μg·mL-1,P＜0.01],AUC(0-τ)也明显增加[黄芩苷(38.72±7.25)vs.(86.70±20.91)μg·mL-1·h,P＜0.01;汉黄芩苷(39.20±12.10) vs.(69.40±24.20)μg·mL-1·h,P＜0.01],粪便悬浮液中黄芩苷降解也加快(Ke0.087 vs.0.173 min-1).结论黄芩苷和汉黄芩苷在糖尿病大鼠与正常大鼠之间存在明显的药动学差异,在糖尿病大鼠肠道内代谢加快.     

阿莫西林钠细菌内毒素检查法的可行性探讨

目的建立阿莫西林钠细菌内毒素检查的方法.方法按<中国药典>2000年版二部附录细菌内毒素检查法和细菌内毒素检查法应用指导原则进行试验.结果本品在5.0mg·mL-1稀释浓度以下无干扰作用,L=0.2EU·mg-1.结论本品可用细菌内毒素检查法代替热原检查法.     

注射用阿奇霉素细菌内毒素检查方法的研究

考察了6批注射用阿奇霉素的细菌内毒素检查法的可行性。按《中国药典》2005年版细菌内毒素检查法。结果可见,浓度为0.2 mg.mL^-1的样品稀释液对标示灵敏度为0.25 EU.mL^-1的鲎试剂无干扰作用。本品稀释为0.2 mg.mL^-1的溶液后,可用灵敏度为0.25 EU.mL-1的鲎试剂进行检测。     

HPLC法测定注射用双黄连中黄芩苷血浓度及其在家兔体内药物动力学

目的:建立HPLC法测定双黄连粉针剂中黄芩苷血浓度并研究其在家兔体内药物动力学。方法:采用Hypersil C18色谱柱(250 mm×4．6 mm,5μm);流动相:乙腈-水-磷酸(25:75:0．2);流速:0．8 ml·min-1;检测波长:275 nm;柱温:30℃;进样量20μl。结果:线性范围为0．5～595．3 mg·L-1,平均回收率为(93．2±7．1)％,日内、日间RSD均小于10．0％(n=5),最低检测浓度为0．1 mg·L-1。黄芩苷在家兔体内主要药动学参数:t1/2α=6．7 min,t1／2β=118．8 min,V(c)=0．0866 L·kg-1,AUC0-t= 8980．1 mg·min·L-1,AUC0-∞=9204．4 mg·min·L-1,MRT0-t=14．2 min,MRT0-∞=17．9 min,CL(s)=0．0079 L·min-1·kg-1。结论:该法适于黄芩苷及其制剂的血浓度测定。     

甲氨喋呤注射液中细菌内毒素的测定

目的:定量检测甲氨喋呤注射液中的细菌内毒素含量.方法:采用动态浊度法鲎试验对样品中的细菌内毒素进行检测.结果:3批甲氨喋呤注射液在浓度高于1.56 g·L-1时,影响细菌内毒素的测定,而在0.78 g·L-1或更低浓度时则没有干扰作用;所测样品(100g·L-1)细菌内毒素的含量均小于150 EU·g-1.结论:可建立甲氨喋呤注射液的细菌内毒素检查法.     

顺铂原料药细菌内毒素检查方法的研究

建立顺铂原料药的细菌内毒素的检查方法.方法参照《中国药典》2005年版二部附录进行.本方法选用灵敏度为0.25EU·mL-1的鲎试剂,供试品浓度在0.25 mg·mL-1 ～1.0 mg·mL-1之间,通过鲎试剂灵敏度复核、预试验、干扰试验和供试品的细菌内毒素检查,结果证明此方法检查顺铂原料药的细菌内毒素可行.