不同浓度多西环素对碱烧伤大鼠角膜中转化生长因子β1和基质金属蛋白酶9表达的影响

目的　探讨不同浓度多西环素对碱烧伤大鼠角膜中转化生长因子β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）和基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）表达的影响及其调节作用。方法　SD大鼠右眼制备成角膜碱烧伤模型，随机分为对照组、0.5 g·L^-1多西环素组和1.0 g·L^-1多西环素组，每组15只。3组分别于造模后每天给予20 μL眼液溶媒、0.5 g·L^-1多西环素、1.0 g·L^-1多西环素滴眼至观察期末。于碱烧伤后第3天、第7天、第14天对角膜混浊程度进行评分，并行RT-PCR和ELISA检测角膜组织中TGF-β1、MMP-9 mRNA和蛋白的表达情况。结果　与对照组相比，碱烧伤后第7天、第14天，0.5 g·L^-1多西环素组［（2.80±0.45）分、（2.20±0.45）分］和1.0 g·L^-1多西环素组［（2.00±0.00）分、（0.60±0.55）分］角膜混浊程度评分降低，且1.0 g·L^-1多西环素组更低，差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。碱烧伤后第3天、第7天、第14 天，0.5 g·L^-1多西环素组、1.0 g·L^-1多西环素组TGF-β1 mRNA及蛋白表达量均较对照组低，且1.0 g·L^-1多西环素组表达更低，差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。碱烧伤后第3天、第7天，0.5 g·L^-1多西环素组、1.0 g·L^-1多西环素组MMP-9 mRNA及蛋白表达均较对照组低，且1.0 g·L^-1多西环素组表达更低，差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。结论　多西环素可下调碱烧伤大鼠角膜中TGF-β1和MMP-9的表达，促进角膜愈合，并呈一定程度的剂量依赖性。     

氢气水对大鼠碱烧伤角膜新生血管抑制作用的研究

目的　研究氢气水（H₂水）滴眼对大鼠碱烧伤诱导角膜新生血管（corneal neovascularization,CNV）的抑制作用并探讨H₂水抑制CNV的机制。方法　SPF级SD大鼠48只48眼,成功建立碱烧伤诱导CNV模型,随机分为空白组、对照组和治疗组。治疗组给予1.6×10^-6 H₂水滴眼,对照组给予妥布霉素地塞米松眼液滴眼,空白组不做任何处理。分别在模型建立后第1天、第3天、第7天、第14天测量CNV长度,计算CNV面积。碱烧伤后第14天深麻醉下取大鼠角膜及房水,免疫组织化学染色法检测角膜组织中PEDF蛋白表达,RT-PCR法检测角膜组织中PEDF mRNA表达,ELISA检测房水内TNF-α蛋白表达。结果　角膜碱烧伤后第3天、第7天、第14天,治疗组新生血管面积分别为（3.26±1.82）mm²、（8.59±3.98）mm²和（3.24±2.34）mm²;对照组分别为（4.27±2.68）mm²、（6.44±4.67）mm²和（15.98±4.75）mm²;空白组分别为（9.49±2.79）mm²、（17.71±4.06）mm²和（25.35±1.40）mm²。碱烧伤后第3天、7天和14天,治疗组和对照组均小于空白组,差异均有显著统计学意义（均为P＜0.01）;碱烧伤后第3天和第7天,治疗组与对照组差异均无统计学意义（均为P>0.05）;碱烧伤后第14天治疗组明显小于对照组,差异具有显著统计学意义（P＜0.01）。碱烧伤后第14天,免疫组织化学染色结果显示,治疗组角膜上皮层PEDF蛋白表达较对照组和空白组明显增强,基质层新生血管极少;RT-PCR检测结果显示,治疗组PEDF mRNA表达明显高于对照组和空白组,差异均有显著统计学意义（均为P＜0.01）;ELISA检测结果显示,治疗组房水中TNF-α蛋白含量明显低于对照组与空白组,差异均有显著统计学意义（均为P＜0.01）。结论　1.6×10^-6 H₂水滴眼能有效抑制大鼠碱烧伤诱导的CNV。     

羊膜移植对兔角膜碱烧伤早期MMP-2和TIMP-2表达的影响

目的研究羊膜移植在兔角膜碱烧伤早期治疗中的作用机制。方法对60只新西兰白兔随机分为碱烧伤组、羊膜移植组及正常对照组,实验组建立角膜碱烧伤模型,羊膜移植组于烧伤后30min实施羊膜移植手术。术后14、30、60d,观察分析角膜病理组织学改变;并应用计算机图像分析系统对角膜组织中基质金属蛋白酶-2（Matrix metalloproteinase-2,MMP-2）和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2（Tissue inhibitors of metalloproteinase-2,TIMP-2）的表达进行半定量测定。结果羊膜移植组角膜浸润及角膜基质坏死溃疡程度均较同期碱烧伤组为轻,角膜MMP-2的表达显著降低（P〈0.05）,而TIMP-2表达显著升高（P〉0.05）。结论羊膜移植可提高角膜TIMP-2表达的水平并抑制MMP-2的活性,从而在角膜碱烧伤的早期治疗中起到抑制角膜炎症和溃疡的作用。     

实验性脉络膜新生血管中环氧合酶-2、血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶-2的表达

目的研究实验性脉络膜新生血管（CNV）大鼠中环氧合酶-2（COX-2）、血管内皮生长因子（VEGF）和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达,并进一步探讨其在CNV中的作用机制及相互关系。方法应用氪红激光光凝视网膜的方法诱导制作BN大鼠的CNV模型,分别选取并制作无任何干预的对照组和实验组光凝后第3、7、14、21、30天的＂最大CNV膜＂切片,采用免疫组织化学技术检测COX-2、VEGF和MMP-2在视网膜和CNV膜中的表达。应用HPIAS-1000型高清晰度彩色病理图文分析系统测定COX-2、VEGF和MMP-2阳性染色的平均灰度值。结果 COX-2、VEGF和MMP-2在正常视网膜和脉络膜中呈弱表达,视网膜光凝后,COX-2、VEGF和MMP-2在视网膜和CNV膜中的表达在7～14 d逐渐增强,21 d时三者的表达强度均达到高峰,之后略减弱。视网膜光凝后7、14、21、30 d,实验组COX-2、VEGF和MMP-2的免疫组织化学染色平均灰度值与对照组相比差异均有统计学意义（P〈0.05）。COX-2的表达强度与VEGF和MMP-2的变化均呈正相关（r=0.967,P=0.007;r=0.966,P=0.007）。结论激光诱导的实验性CNV中COX-2、VEGF及MMP-2的表达随着时间的延长呈动态变化,CNV局部炎症诱导的COX-2表达可能是VEGF和MMP-2的上游调节因子。     

环氧合酶-2及其抑制剂对角膜新生血管作用的研究

目的 观察大鼠角膜新生血管（CNV）形成过程中环氧合酶-2（COX-2）的表达,探讨COX-2抑制剂Celecoxib对CNV的作用.方法 采用免疫组织化学方法、RT-PCR法检测碱烧伤后COX-2和VEGF蛋白、mRNA在角膜中的分布,比较实验组和对照组COX-2与VEGF蛋白和mRNA的表达量,计算二者的相关性.结果 碱烧伤2 d,CNV芽形成,4 d出现成熟的新生血管腔.活化的COX-2、VEGF蛋白和mRNA的表达在碱烧伤24 h开始增加,4 d达峰,7 d开始回落,14 d仍有表达.COX-2主要表达于大鼠角膜损伤上皮及修复的上皮层、基质层中浸润的炎性细胞和新生血管内皮细胞,VEGF与COX-2的表达部位一致.实验Ⅱ组和Ⅲ组COX-2和VEGF蛋白、mRNA表达量与对照组的差异有统计学意义（P＜0.05）,实验Ⅰ组与对照组的差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 COX-2在炎性CNV形成过程中表达上调,通过调控VEGF的表达而起重要作用.Celecoxib抑制COX-2的表达,抑制CNV形成.     

结膜瓣覆盖治疗角膜碱烧伤中MMP-9和TIMP-1的表达

目的：研究结膜瓣覆盖术治疗兔角膜碱烧伤中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）的表达机制。方法：将50只兔随机分成实验组及对照组,每组分别25只,建立兔角膜烧伤模型。实验组在角膜烧伤后当天行结膜瓣覆盖术。采用免疫组化法测定两组角膜碱烧伤后不同时间点MMP-9和TIMP-1的表达。结果：MMP-9在角膜碱烧伤后的3d开始升高,14d达到最高,之后逐渐下降;而TIMP-1在伤后即有表达,7d有所下降,于14d达到最低,21d达到峰值。实验组MMP-9的表达均明显低于对照组,且角膜碱烧伤后的3,14,21d和28d差异有统计学意义（P〈0.05）;而TIMP-1则明显高于对照组,且角膜碱烧伤后3,14d和21d差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：角膜碱烧伤的病理损伤及修复过程中,MMP-9及TIMP-1的表达密切相关。结膜瓣覆盖治疗重度角膜碱烧伤的疗效确切。     

碳酸酐酶抑制剂的局部应用对大鼠角膜新生血管形成过程中水通道蛋白1表达的影响

背景研究表明,水通道蛋白1（AQP1）与大鼠碱烧伤后角膜新生血管（CNV）的形成密切相关,碳酸酐酶抑制剂具有抑制AQP1的作用,从而可间接抑制CNV,但其全身应用不良反应较重,因此局部碳酸酐酶抑制剂布林佐胺滴眼液对CNV的作用受到关注。目的研究局部应用布林佐胺滴眼液对大鼠碱烧伤后CNV形成过程中AQP1表达的影响。方法健康SD大鼠35只按随机数字表法随机分为正常对照组5只10只眼、模型组15只30只眼和布林佐胺组15只30只眼。模型组和布林佐胺组大鼠用浸有1mol／LNaOH溶液的滤纸贴附于角膜40s建立角膜碱烧伤大鼠模型,布林佐胺组大鼠在造模后用布林佐胺滴眼液点眼,正常对照组和模型组大鼠用生理盐水点眼。造模后3d裂隙灯下对角膜烧伤程度进行分级;造模后3、5、7、10d对大鼠角膜混浊度进行评分,同时测量CNV的生长面积。造模后第10天获取大鼠角膜组织并行苏木精-伊红染色观察大鼠角膜的组织病理学改变,透射电子显微镜下观察各组角膜超微结构的改变。应用免疫组织化学法检测AQP1及血管内皮生长因子（VEGF）在各组大鼠角膜中的表达。结果裂隙灯下模型组与布林佐胺组大鼠角膜碱烧伤的评分差异无统计学意义（t=0．97,P〉0．05）。正常对照组大鼠角膜无水肿、无混浊,无CNV生成;造模后5d布林佐胺组大鼠角膜水肿、混浊评分低于模型组（t=2．18,P〈0．05）,CNV面积小于模型组（t=6．58,P〈0．01）。角膜组织病理学检查显示,布林佐胺组大鼠较模型组大鼠CNV及炎性细胞少。透射电子显微镜检查显示,模型组大鼠CNV旺盛,布林佐胺组大鼠角膜较模型组大鼠角膜血管腔少见。免疫组织化学检测表明,正常对照组大鼠角膜组织中可见AQP1和VEGF呈弱表达;模型组及布林佐胺组大鼠角膜碱烧伤后角膜组织中VEGF灰度值分别为84．92±9．49和78．18±11．41,差异有统计学意义（t=2．48,P=0．02）,2个组AQP1灰度值分别为88．01±11．03和58．10±12．14,差异有统计学意义（t=9．99,P=0．00）。结论布林佐胺滴眼液能抑制大鼠角膜碱烧伤后CNV形成过程中AQP1的高表达,从而间接影响VEGF的表达,抑制或延缓CNV的形成。     

MMP-9、TIMP-3在小鼠脉络膜新生血管形成中的作用

目的：研究MMP-9及TIMP-3 mRNA在实验性小鼠CNV形成过程中的表达,探讨二者在CNV发生机制中的作用。 方法：使用半导体二极管激光器（810nm）对C57BL/6J小鼠视网膜进行照射（120mW,75μm,0.1s）以诱导CNV形成,分别于激光后1,3d;1,2,4wk取出眼球,采用原位杂交技术及图象分析对MM-9、TIMP-3 mRNA的表达情况进行检测。 结果：MMP-9、TIMP-3 mRNA表达在CNV形成过程中均有一动态过程,MMP-9 mRNA水平1,2,4wk〉3d〉1d（P〈0.05）,而TIMP-3mRNA表达3d;1,2,4wk〉1d（P〈0.05）。 结论：MMP-9与TIMP-3 mRNA表达变化的失衡促使基质降解作用的发挥,在CNV的形成中可能发挥了一定作用。     

阿柏西普对碱烧伤大鼠角膜新生血管的抑制作用

目的　探讨阿柏西普对大鼠角膜碱烧伤后新生血管的抑制作用。方法　制备SD大鼠角膜碱烧伤动物模型,随机分成4组,每组各9只,A组、B组与C组分别给予20 g·L^-1、25 g·L^-1、30 g·L^-1的阿柏西普滴眼液,D组为生理盐水组（给予生理盐水）,每组每天2次滴眼治疗,共14 d。分别于碱烧伤后第3天、7天、14天,观察角膜新生血管（corneal neovascularization,CNV)情况并计算CNV面积。碱烧伤后第14天,处死全部小鼠,进行组织学和免疫组织化学检测各组CD34、VEGF蛋白表达情况。结果　碱烧伤后第 3天、7天和14天,A组、B组与C组的CNV面积均小于D组,差异均有统计学意义（均为P<0.05）;B组与C组在各时间点上CNV面积差异均无统计学意义（均为P>0.05）;但B组和C组与A组相比,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。HE 染色及免疫组织化学染色结果显示:角膜碱烧伤后第14天,各组角膜CD34和VEGF蛋白表达增强,与A组、B组、C组比较,D组CNV旺盛致密,CD34和VEGF蛋白表达较强。A组CNV较B组和C组多,CD34和VEGF蛋白表达增强;B组和C组棕黄色颗粒分布无明显差异。碱烧伤后第14天,酶联免疫吸附试验测定结果显示:A组、B组和C组房水中TNF-α蛋白表达水平均低于D组,差异均有统计学意义（均为P<0.05）,B组、C组与A组比较,房水中TNF-α蛋白表达水平差异均有统计学意义（均为P<0.05）,但是B组和C组间差异无统计学意义（P>0.05）。结论　阿柏西普对碱烧伤后大鼠CNV形成具有抑制作用,且25 g·L^-1阿柏西普的治疗效果最佳。     

瘦素和血管内皮生长因子在碱烧伤诱导的大鼠角膜新生血管模型中的表达

目的 观察碱烧伤后不同时期角膜的组织病理学变化,以及瘦素和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VFGF)的表达,探讨它们与角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)的关系.方法 使用碱烧伤诱导大鼠角膜新生血管模型,采用浸润1 mol·L-1 NaOH溶液、直径为3 mm的单片滤纸,准确置于大鼠右眼角膜中央30 s,制作CNV模型.25只SD大鼠右眼为实验眼,随机分成5组,每组5眼,左眼为正常对照眼.每天用裂隙灯显微镜观察角膜新生血管,分别计算新生血管长度和面积.并行HE染色和免疫组织化学检测.结果 碱烧伤后4 d、7 d、14 d、21 d,实验组CNV面积分别为:(2.55±0.15)m2、(4.15±0.36)mm2、(10.21±0.45)mm2、(8.56±0.06)mm2.免疫组织化学检测显示角膜碱烧伤后1 d,实验组瘦素、VEGF的表达开始增高,碱烧伤后14 d达高峰,14 d后瘦素、VEGF的表达下降,21 d后显著下降;其表达部位主要分布在形成的新生血管区域和上皮层;正常对照组瘦素可微弱表达于角膜上皮层和基质层,VEGF没有表达或仅在上皮基底膜有微弱表达.实验组角膜瘦素、VEGF阳性表达率较对照组明显增加(χ2=29.07,P=0.001;χ2=35.51,P=0.001),瘦素与VEGF的表达具有正相关性(r=0.95,P=0.001).结论 瘦素和VEGF表达水平与角膜新生血管的生成具有相关性,瘦素可能成为治疗CNV的靶点.     

塞来昔布与羊膜匀浆提取液对兔角膜热烧伤后角膜新生血管面积及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响

目的 比较塞来昔布与羊膜匀浆提取液对兔角膜热烧伤后角膜新生血管(comeal neovascularization,CNV)面积及基质金属蛋白酶-2(matrix metallo-proteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响,为临床上塞来昔布治疗CNV提供理论依据.方法 建立36只兔角膜热烧伤动物模型,随机分为3组:阴性对照组、羊膜匀浆提取液组、塞来昔布组,每组12只,8只用于观察,4只用于取材.各组兔均于造模后第1天开始球结膜下注射,至造模后第14天;阴性对照组注入90g· L-1生理盐水0.1 mL,羊膜匀浆提取液组注入羊膜匀浆提取液0.1 mL,塞来昔布组注入8 mg·mL-塞来昔布溶液0.1 mL.对比热烧伤后4d、7d、14 d在裂隙灯显微镜下所观察到的各组角膜的组织形态及新生血管的生长状况,并测算CNV面积;各组均于热烧伤后第7天随机取4只兔完整角膜,行免疫组织化学染色并用计算机图像分析系统检测MMP-2、MMP-9的表达.结果 角膜热烧伤后第4天,阴性对照组、羊膜匀浆提取液组、塞来昔布组都可见不同程度的角膜水肿,角膜缘血管充血扩张,新生的小血管芽呈毛刷状,垂直角膜缘切线向内生长.热烧伤后4d、7d、14 d,CNV面积阴性对照组为(11.32±1.11)mm2、(38.49±4.64)mm2、(43.30±4.39) mm2;羊膜匀浆提取液组为(9.69±1.30) mm2、(31.15±4.85) mm2、(37.19±5.27) mm2;塞来昔布组为(8.47±1.20) mm2、(30.31±4.93) mm2、(36.69±3.54)mm2.热烧伤后4d、7d、14 d,阴性对照组的CNV面积均明显大于羊膜匀浆提取液组和塞来昔布组,差异均有统计学意义(均为P＜0.05);羊膜匀浆提取液组的CNV面积与塞来昔布组相比,差异均无统计学意义(均为P＞0.05).热烧伤后第7天MMP-2和MMP-9表达阴性对照组大于羊膜匀浆提取液组和塞来昔布组,差异均有统计学意义(均为P ＜0.05);羊膜匀浆提取液组与塞来昔布组相比,差异均无统计学意义(均为P ＞0.05).结论 塞来昔布与羊膜匀浆提取液均能有效抑制角膜热烧伤后新生血管的生长,可能与其抑制MMP-2、MMP-9在热烧伤后角膜中的表达有关.     

闭角型青光眼超声乳化白内障吸出术后人工晶状体稳定性研究

目的　应用超长扫描深度的谱域眼前节光学相干断层扫描（ultra-long scan depth spectral domain optical coherence tomography,UL-OCT）观察原发性闭角型青光眼（primary angle-closure glaucoma,PACG）术后人工晶状体（intraocular lens,IOL）的稳定性。方法　选取42例（42眼）PACG患者（PACG组）和40例（40眼）年龄、性别相匹配的年龄相关性白内障（age-related cataract,ARC;ARC组）患者纳入本研究。两组患者均行超声乳化白内障吸出术联合IOL（Softec HD IOL）植入术。术后1周、1个月、3个月进行UL-OCT检查,并计算IOL偏心量、倾斜度及后囊膜与IOL后表面之间的面积（space between IOL and posterior capsule,IOL-PC space）,采用两独立样本t检验比较各个随访时间点上的组间差异。结果　术后1周、1个月、3个月,PACG组IOL的偏心量分别为（0.182±0.054）mm、（0.232±0.081）mm、（0.183±0.089） mm,ARC组分别为（0.342±0.141）mm、（0.288±0.110）mm、（0.249±0.132）mm。术后1周PACG组IOL的偏心量小于ARC 组,差异具有统计学意义（P=0.006）,两组其余时间点比较差异均无统计学意义（均为P>0.05）;术后1周、1个月、3个月,PACG组垂直轴上的倾斜度分别为（3.670±6.610）°、（-0.940±4.730）°、（0.540±9.510）°,ARC组分别为（-4.090±7.610）°、（-5.100±5.530）°、（-1.430±8.800）°。术后1周PACG组垂直轴上的倾斜度小于ARC组,差异具有统计学意义（P=0.025）,其余时间点两组比较差异均无统计学意义（均为P>0.05）。IOL在水平轴上的倾斜度组间各时间点比较,差异均无统计学意义（均为P>0.05）。术后1周、1个月、3个月,PACG组水平轴上的IOL-PC space分别为（0.111±0.091）mm²、（0.044±0.066）mm²、（0.055±0.055）mm²,ARC组分别为（0.176±0.213）mm²、（0.255±0.303）mm²、（0.059±0.066）mm²,术后1个月PACG组IOL-PC space小于ARC 组,差异具有统计学意义（P=0.045）,其余时间点两组比较差异均无统计学意义（均为P>0.05）。垂直轴上IOL-PC space各时间点两组间比较差异均无统计学意义（均为P>0.05）。结论　术后3个月内,Softec HD IOL在PACG组中的稳定性在一定程度上优于ARC组。     

过表达低氧诱导因子-1α（HIF-1α）对体外培养人视网膜血管内皮细胞增殖、炎症反应及血管生成的影响

目的　检测过表达低氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor 1 alpha,HIF-1α）对体外培养人视网膜血管内皮细胞（human retinal capillary endothelial cell,HREC）增殖、炎症反应及血管生成的影响。方法　将体外培养HREC转染人工合成的pEGFP-HIF-1α重组载体,并采用荧光定量PCR检测转染前后HREC中HIF-1α的表达变化。采用四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT）、酶联免疫吸附实验（ELISA）和Western blot分别检测过表达HIF-1α对HREC增殖、炎症反应及血管生成的影响。结果　体外转染pEGFP-HIF-1α可显著增加HREC中HIF-1α mRNA 和蛋白表达。过表达HIF-1α可显著促进HREC增殖,HREC转染pEGFP-HIF-1α后24 h、48 h及72 h A值分别为:0.34±0.04、0.57±0.04、0.83±0.05,而HREC转染pEGFP-C1后24 h、48 h及72 h A值分别为:0.26±0.03、0.44±0.04、0.61±0.04,两者相比差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。过表达HIF-1α可显著增加HREC中肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α、白细胞介素（interleukin,IL）-1β及IL-6的蛋白表达水平,TNF-α、IL-1β及IL-6蛋白表达分别为（2.63±0.57）ng·L^-1、（1.94±0.41）ng·L^-1、（5.32±0.83）ng·L^-1,而转染pEGFP-C1后HREC中TNF-α、IL-1β及IL-6蛋白表达分别为（1.20±0.34）ng·L^-1、（0.66±0.27）ng·L^-1、（1.89±0.60）ng·L^-1,两者相比差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。过表达HIF-1α可显著增加HREC中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）蛋白表达,转染pEGFP-HIF-1α后细胞VEGF蛋白的表达为6.72±0.96,而转染pEGFP-C1后细胞VEGF蛋白的表达为2.31±0.47,两者相比差异有统计学意义（P＜0.05）。结论　过表达HIF-1α可促进体外培养HREC增殖、炎症反应及血管的生成。     

角膜激光共焦显微镜在糖尿病视网膜病变中的应用

目的　探讨角膜激光共焦显微镜在观察糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）患者角膜上皮下神经丛、角膜细胞密度及形态变化中的价值。方法　选取确诊的DR患者94例（114眼）,其中非增生型糖尿病视网膜病变（non-proliferative diabetic retinopathy,NPDR）患者41例（52眼,NPDR组）、增生型糖尿病视网膜病变（proliferative diabetic retinopathy,PDR）患者53例（62眼,PDR组）,收治时间2016年1月至2017年4月,同期糖尿病无眼底改变的患者40例（40眼）作为对照组,三组均采用角膜激光共焦显微镜进行检测,对比各组角膜上皮下神经丛、角膜细胞密度及形态的变化。结果　NPDR组和PDR组患者的角膜基底层、浅基质层、中基质层、深基质层的细胞密度均显著低于对照组（均为P<0.05）;PDR组患者的角膜基底层、浅基质层、中基质层、深基质层的细胞密度均显著低于NPDR组（均为P<0.05）;NPDR组和PDR组患者的角膜内皮细胞密度、六边形细胞比例、神经纤维密度、神经纤维长度均显著低于对照组（均为P<0.05）,NPDR组和PDR组患者的内皮细胞变异率、神经分支密度均显著高于对照组（均为P<0.05）;PDR组患者的角膜内皮细胞密度、六边形细胞比例、神经纤维密度、神经纤维长度分别为（1962.0±117.3）个·mm^-2、46.1%±5.5%、（15.4±3.3）根·mm^-2、（6.2±2.7）mm·mm^-2,均显著低于NPDR组的（2381.4±144.0）个·mm^-2、58.2%±7.0%、（20.6±3.8）根·mm^-2、（8.6±2.4）mm·mm^-2（均为P<0.05）,PDR组患者的内皮细胞变异率、神经分支密度均显著高于NPDR组（均为P<0.05）。结论　角膜激光共焦显微镜能有效观察DR患者角膜上皮下神经丛、角膜细胞密度及形态变化,为临床诊断、治疗提供指导。     

不同类型白内障囊外摘除术（ECCE）对核硬度≥IV级伴低角膜内皮细胞密度白内障患者的疗效分析

目的　对比并分析单切口和双切口白内障囊外摘除术（extra capsular cataract extraction,ECCE）对核硬度≥IV级伴低角膜内皮细胞密度白内障患者的疗效。方法　回顾性分析我院2017年1月至2019年12月收治的晶状体核硬度≥IV级且角膜内皮细胞密度<1000 个·mm^-2的白内障患者共92例94眼的临床资料,其中46例46眼采用双切口ECCE治疗设为A组,46例48眼采用单切口ECCE治疗设为B组。术后随访6个月,比较两组手术时间及手术前后患者视力、散光度、角膜内皮细胞密度、角膜内皮细胞丢失率、六边形细胞比例及并发症发生情况。结果　两组患者术前基线资料、手术时间及术后视力、术后散光度、术源性散光度等相比,差异均无统计学意义（均为P>0.05）。术后6个月,A组角膜内皮细胞密度为（780.73±110.14）个·mm^-2,显著多于B组的（706.15±84.07）个·mm^-2,差异有统计学意义（P=0.00）;A组角膜内皮细胞丢失率和六边形细胞比例分别为（4.08±0.52）%和（10.14±6.60）%,均显著少于B组的（10.89±1.40）%和（27.86±9.53）%,差异均有统计学意义（均为P=0.00）。随访期内,A组患者术后角膜水肿发生率为8.70%,显著低于B组患者的37.50%（P<0.05）;A组未见大泡性角膜病变,角膜内皮细胞密度＜600个·mm^-2者4眼;B组6眼出现大泡性角膜病变,未见角膜内皮细胞密度＜600个·mm^-2者。结论　相较于单切口ECCE,双切口ECCE治疗核硬度≥IV级伴低角膜内皮细胞密度白内障患者可有效保护角膜内皮细胞,降低术后早期角膜水肿发生风险,且两种手术方式整体疗效接近。     

飞秒激光辅助的白内障手术对2型糖尿病患者术中房水细胞因子表达的影响

目的　检测合并2型糖尿病的白内障患者行飞秒辅助的白内障手术时术中房水中前列腺素E₂（prostaglandin E₂,PGE₂）、白细胞介素6（interleukin 6,IL-6）、白细胞介素1β（interleukin 1β,IL-1β）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α,TNF-α）及血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的浓度,并探讨其和术后糖尿病黄斑水肿（diabetes macular edema,DME）的关系。方法　前瞻性队列研究。将在武汉爱尔眼科医院接受飞秒激光辅助的白内障手术112例（112眼）患者纳入本研究,并按是否合并2型糖尿病分成两组:糖尿病组61例（61眼）,对照组51例（51眼）。在飞秒激光步骤完成之后立即收集2组房水样本。采用酶联免疫吸附方法检测房水样本中PGE₂、IL-6、IL-1β、TNF-α及VEGF的浓度。术前及术后均使用OCT检测并比较2组患者的黄斑中央区厚度。结果　糖尿病组房水样本中PGE₂浓度为（87.4±12.1）ng·L^-1、IL-6浓度为（39.7±6.6）ng·L^-1、IL-1β浓度为（59.2±7.2）ng·L^-1、TNF-α浓度（6.3±1.0）ng·L^-1、VEGF浓度为（274.1±40.4）ng·L^-1;对照组房水样本中PGE₂浓度为（67.6±9.4）ng·L^-1、IL-6浓度为（24.8±5.7）ng·L^-1、IL-1β浓度为（27.1±5.3）ng·L^-1、TNF-α浓度（3.1±0.5）ng·L^-1、VEGF浓度为（189.7±17.6）ng·L^-1。糖尿病组房水样本中的PGE₂、IL-6、IL-1β、TNF-α及VEGF的浓度均明显高于对照组（均为P<0.01）。房水样本中PGE₂、IL-6、IL-1β、TNF-α及VEGF的浓度释放与年龄、性别、激光固定时间及激光作用时间均无相关性（均为P>0.05）。糖尿病组术前黄斑中央区厚度为（142.5±7.6）μm,术后为（166.5±13.6）μm,术前术后无明显差异（P>0.05）。对照组术前黄斑中央区厚度为（139.4±10.2）μm,术后为（156.2±7.0）μm,术前术后差异无统计学意义（P>0.05）。结论　飞秒激光辅助的白内障手术中糖尿病患者术前术后黄斑中央区厚度均未发现明显差异,且所有患者均未出现术后黄斑水肿。     

应用光学相干断层扫描血管成像（OCTA）评估糖尿病患者早期黄斑区视网膜微循环

目的　应用光学相干断层扫描血管成像（optical coherence tomography angiography,OCTA）观察糖尿病患者早期黄斑中心凹无血管区（foveal avascular zone,FAZ）面积和黄斑区血流密度（macular vascular density,MVD）的改变及其临床意义。方法　回顾性病例研究。收集33例46眼糖尿病患者纳入研究,依据糖尿病视网膜病变国际临床分期标准将患眼分为两组,其中无糖尿病视网膜病变（no-diabetic retinopathy,NDR）组13例20眼和非增生期糖尿病视网膜病变（nonproliferative diabetic retinopathy,NPDR）组20例26眼。另选取年龄相匹配的26人（40眼）健康者作为对照组。所有受试者均接受OCTA对黄斑区视网膜行3 mm×3 mm 范围的模式扫描,获得4个层面黄斑血流密度图,同时测量FAZ面积和MVD。结果　NDR组和NPDR组FAZ面积分别为（0.392±0.028）mm²、（0.410±0.019）mm²,与对照组（0.314±0.025）mm²相比差异均有统计学意义（均为P=0.000）;NDR组和NPDR组之间的FAZ面积比较,差异有统计学意义（P=0.010）。NDR组和NPDR组的表层视网膜、深层视网膜、外层视网膜及脉络膜毛细血管层的MVD分别是0.500±0.012、0.553±0.007、0.393±0.005、0.651±0.006和0.484±0.012、0.522±0.007、0.397±0.007、0.642±0.007,与对照组（0.518±0.014、0.572±0.008、0.385±0.005、0.666±0.007）比较,差异均有统计学意义（均为P=0.000）;NDR组和NPDR组表层视网膜、深层视网膜及脉络膜毛细血管层MVD比较,差异均有统计学意义（均为P=0.000）,但两组外层视网膜MVD比较,差异无统计学意义（P=0.065）。结论　应用OCTA检查提示糖尿病患者早期黄斑区视网膜的微循环障碍,且随着病情的进展而变化。     

共聚焦显微镜观察圆锥角膜行角膜胶原交联术后早期组织形态学变化

目的探讨进展期圆锥角膜行角膜胶原交联术后早期共聚焦显微镜下的组织形态学改变。方法回顾性病例系列研究。应用共聚焦显微镜观察2017年9月至2019年3月于解放军总医院眼科行角膜胶原交联术的进展期圆锥角膜患者23例(32只眼), 其中男性15例(24只眼), 女性8例(8只眼);年龄(26±10)岁。所有患者于术前和术后1周、1个月、3个月应用共聚焦显微镜观察角膜组织结构改变、定量记录角膜上皮下神经纤维、基质细胞、内皮细胞密度和基质结构改变的深度并进行对比分析。不同时间的总体差异比较采用重复测量资料的方差分析或Friedman检验, 不同时间的差异的多重比较采用LSD-t检验或Bonferroni校正。结果角膜胶原交联术后1周, 角膜上皮细胞处于修复期, 表现为上皮基底细胞核增大、反射增强, 上皮下可见活化细胞, 浅基质肿胀呈海绵状, 深基质肿胀呈不均匀斑块状或条索状, 反射强。术后1个月, 上皮基底细胞恢复, 上皮下神经开始生长, 浅基质持续呈海绵状肿胀, 反射进一步增强, 深基质肿胀呈更粗大的斑块或条索样结构并持续至术后3个月。术前与术后3个月内, 角膜上皮下神经纤维密度差异有统计学意义(F=233.30, P<0.001), 术后1周、1个月、3个月角膜上皮下神经纤维密度分别为(0.51±0.31)、(3.65±2.21)、(8.50±4.02)mm/mm², 与术前的(14.60±2.57)mm/mm²相比均明显降低(均P<0.05);不同时间点角膜前部基质细胞密度比较, 差异有统计学意义(χ²=92.48, P<0.001), 术后1周、1个月、3个月角膜前部基质细胞密度分别为2.00(1.00, 5.75)、2.50(1.00, 5.75)、79.00(64.25, 94.00)个/mm², 与术前的347.00(345.00, 395.75)个/mm²相比均明显降低(均P<0.05)。术后3个月内角膜基质结构改变的深度范围为(400.56±86.12)μm:术后1周、1个月、3个月分别为(402.13±89.20)、(399.88±85.92)、(399.69±85.94)μm, 差异无统计学意义(F=0.80, P=0.455)。术前和术后不同时间角膜后部基质细胞密度[术前为(260.6±33.2)个/mm², 术后1周、1个月、3个月分别为(264.4±44.5)、(263.9±37.6)、(266.3±40.2)个/mm²]和内皮细胞密度[术前为(2 707.1±152.6)个/mm², 术后1周、1个月、3个月分别为(2 704.2±148.5)、(2 705.6±152.6)、(2 704.5±150.1)个/mm²]比较, 差异均无统计学意义(F=1.38, 1.01;P=0.259, 0.351)。结论圆锥角膜行角膜胶原交联术后早期, 共聚焦显微镜下可见角膜上皮和上皮下神经的改变呈现损伤修复的过程;角膜浅基质呈均匀的蜂窝状肿胀, 深基质呈不均匀斑块状或条索状肿胀;术后早期角膜基质结构改变的深度相对稳定。