塑料包埋技术在骨组织研究中的应用

目的研究塑料包埋技术制作的不脱钙硬组织切片,确定制作的关键步骤及用于骨组织研究的优点。方法选取狗胫骨节段或带有金属种植体的骨材料塑料包埋,LeicaSP1600切片机（德国）切片,用苦味酸品红染色观察,并与常规石蜡包埋相比较。结果不脱钙骨组织经塑料包埋技术处理后,可清楚地观察类骨质形成、多孔材料及种植体周围骨组织的整合程度。与常规石蜡包埋相比,染色层次分明,组织移位形变小。结论应用规范塑料包埋技术制作不脱钙硬组织切片,更有利于行骨形态计量分析以及材料与骨整合的研究。     

塑料包埋技术在骨组织研究中的应用

目的 研究塑料包埋技术制作的不脱钙硬组织切片,确定制作的关键步骤及用于骨组织研究的优点.方法 选取狗胫骨节段或带有金属种植体的骨材料塑料包埋,LeicaSP1600切片机(德国)切片,用苦味酸品红染色观察,并与常规石蜡包埋相比较.结果 不脱钙骨组织经塑料包埋技术处理后,可清楚地观察类骨质形成、多孔材料及种植体周围骨组织的整合程度.与常规石蜡包埋相比,染色层次分明,组织移位形变小.结论 应用规范塑料包埋技术制作不脱钙硬组织切片,更有利于行骨形态计量分析以及材料与骨整合的研究.     

苯胺蓝、核固红肾组织染色法

由于肾执行功能的复杂性而决定了组织结构的复杂性。在教学中用常规染色方法不易观察与区分肾各部分结构,影响教学结果。经过多次实验与摸索,用苯胺蓝、核固红对肾组织进行染色,取得了较满意的结果。ｌ材料与方法ｌ．１材料健康成人肾,Ｚｅｎｋｅｒ固定液固定２４～４８ｈ,常规脱水透明,石蜡包埋。１．２方法（１）石蜡切片 ４～ ６ｕｍ,切片脱蜡;（ ２）入ｌ％高碘酸 １５ ｍｉｎ;（３）蒸馏水洗 ２次,入亚硫酸钠溶液（亚硫酸钠 １０ ｇ,加蒸馏水 ４０ ｍｌ,溶解后加 １００％乙醇１０ ｍｌ）１２ ｈ;（４）蒸馏水冲洗数次,…     

塑料包埋结合四环素荧光标记制作不脱钙骨组织切片的实验研究

目的探讨塑料包埋技术结合四环素荧光标记制作不脱钙骨组织切片的关键步骤及应用。方法选取四环素荧光标记的兔股骨进行塑料包埋,Leica SP 1600切片机切片,荧光显微镜观察后用苦味酸品红染色,并与常规石蜡包埋切片相比较。结果四环素荧光标记不脱钙骨组织经塑料包埋技术处理后,可清楚地观察类骨质形成、植入体及周围骨组织的整合程度,与常规石蜡包埋相比,染色层次分明,组织移位形变小。结论应用塑料包埋技术制作四环素荧光标记不脱钙骨组织切片,有利于行骨形态计量分析以及植入体与骨整合的研究。     

Research on plastic embedding combined with tetracycline fluorescence labeling in undecalcified bone tissue

目的 探讨塑料包埋技术结合四环素荧光标记制作不脱钙骨组织切片的关键步骤及应用.方法 选取四环素荧光标记的兔股骨进行塑料包埋,Leica SP 1600切片机切片,荧光显微镜观察后用苦味酸品红染色,并与常规石蜡包埋切片相比较.结果 四环素荧光标记不脱钙骨组织经塑料包埋技术处理后,可清楚地观察类骨质形成、植入体及周围骨组织的整合程度,与常规石蜡包埋相比,染色层次分明,组织移位形变小.结论 应用塑料包埋技术制作四环素荧光标记不脱钙骨组织切片,有利于行骨形态计量分析以及植入体与骨整合的研究.     

火棉胶包埋法在制作断层解剖学标本上的应用

随着断层解剖学、医学影像学的发展,制备与磁共振图像（ＭＲＩ）相匹配的断层解剖学标本也有很大提高。作者自１９９６年至今,改进传统的火棉胶包埋方法,对结构精细,临床意义重大的局部进行包埋,用大脑切片机制成断层标本,取得了很好的效果。现将有关制备方法和取材事项介绍如下：１　火棉胶包埋法的技术要点１．１　组织的制备和包埋步骤取用经福尔马林固定后的成人鞍区和脊柱腰部为实验材料,步骤如下：①标本脱钙：所用材料用１０％盐酸浸泡７～１５ｄ,直至骨组织可用针刺入时为止;②冲洗：取出标本,用循环水冲洗２４ｈ;③常规…     

HAS快速脱钙液的研制和应用

水杨酸溶液具有松解胶原、溶解脂肪的作用［１］，临床上常用于疣和鸡眼病的治疗。由于骨组织中的主要成分是无机盐和胶原，故我们试验将水杨酸（ｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄ）与盐酸（ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｃａｃｉｄ）、醋酸（ａｃｅｌｉｃａｃｉｄ）制成快速脱钙液（简称ＨＡＳ液），用于钙化和骨组织标本的快速脱钙，结果显示其具有脱钙作用迅速，组织结构保存良好，切片染色清晰的优点。我们对ＨＡＳ液的研制及应用进行总结，现介绍如下。一、材料与方法１．ＨＡＳ液的配制：取３６％～３８％的盐酸８ｍｌ，９９％醋酸５ｍｌ，水杨…     

细胞涂片免疫组织化学染色体会

细胞涂片免疫组织化学染色法，具有取材方便，易行，病人痛苦小，而用于临床。但常因内源性血浆蛋白以及红细胞干扰。使背景出现非特异性染色，不利于观察阳性结果〔１〕。作者采用淋巴细胞分离液处理标本后进行涂片，免疫组化染色可克服上述缺点并能取得比较满意的阳性结果，介绍如下。１　方法１－１　新鲜肝素抗凝胸、腹水（自然沉淀后）２ｍｌ，或骨髓液２ｍｌ加无Ｃａ《Ｍｇ《Ｈａｎｋ液（ｐＨ７－２～７－６）２ｍｌ。１－２　取淋巴细胞分离液２ｍｌ于１０ｍｌ试管中。１－３　将稀释的骨髓液或胸、腹水，轻轻铺在分离液表面，形成…     

塑料包埋不脱钙大块骨组织切片及染色

近 1年来 ,笔者采用Ｌｅｉｃａ 2 5 0 0型切片机 ,制作塑料包埋不脱钙大块骨组织切片 ,获得 8～ 10 μｍ厚完整切片。游离片染色 ,着色效果良好。1　材料与方法1.1　取材部位　狗桡骨 ,大小 35ｍｍ× 15ｍｍ ,于 10 %～2 0 %中性福尔马林液内固定 1～ 2ｄ ,流水冲洗 1～ 2ｈ。1.2　包埋剂的制备　 1号试剂 :甲基丙稀酸甲脂 40 0ｍｌ,邻苯二甲酸二丁酯 10 0ｍｌ,二甲苯 5 0 0ｍｌ。 2号试剂 :甲基丙稀酸甲酯 80 0ｍｌ,邻苯二甲酸二丁酯 2 0 0ｍｌ。 3号试剂 :甲基丙稀酸甲酯 80 0ｍｌ,过氧化苯甲酰 2 0ｇ ,邻苯二甲二丁酯2 0 0ｍｌ。 4号试剂…     

恶性黑色素瘤中细胞角蛋白的表达

一、材料和方法１材料：收集本院恶性黑色素瘤（下称恶黑）标本１２例,其中皮肤原发恶黑９例,淋巴结内转移性恶黑３例。无色素性恶黑２例。组织用４％甲醛液固定,石蜡包埋,切片均作ＨＥ染色和细胞角蛋白、波形蛋白、ＨＭＢ４５、Ｓ１００染色。２方法：免疫组化...     

骨髓活检标本脱钙方法的比较

在病理外检制片和科研工作中,血液科送检较多的是骨髓活检标本,也是较难制片的组织之一。骨髓石蜡切片需经完全脱钙,才能制成理想的石蜡切片。如何合理有效地选择脱钙液,这对于制片的完整,保存骨髓细胞结构使ＨＥ染色清晰,提高骨髓制片质量是非常重要的。我科从１９９７年初开始采用混合脱钙液代替传统的５％硝酸用于骨髓活检标本脱钙,经实际应用效果良好。１　　材料与方法①　混合脱钙液［１］：甲醛１００　ｍｌ,甲酸８０　ｍｌ,盐酸７０　ｍｌ,三氯化铝６０　ｇ,冰醋酸２５　ｍｌ,生理盐水１００　ｍｌ。②　经１０％甲醛固…     

一种霉菌染色的新方法

一种霉菌染色的新方法张海，张谷一、材料与方法１．试剂配制（１）５０％硝酸银溶液：取４ｇ硝酸银溶解于８ｍｌ的蒸馏水。（２）０．５％甲酸—明胶溶液：取２ｇ明胶溶解于１００ｍｌ的蒸馏水，加０．５ｍｌ甲酸。（３）改良银染工作液：（１）和（２）以体积２：１均匀...     

不脱钙骨组织包埋技术的改进

在骨组织切片上同时进行组织形态学计量与免疫组化有较大难度。这是因为常用的包埋介质石蜡只能用于不含钙或含钙很少的组织,而骨组织富含钙盐,所以必须先脱钙。脱钙的骨组织可做免疫组化与原位杂交,但骨小梁的结构遭到了破坏,不能进行组织形态学计量,从而丢失了骨的生长与钙化方面的信息。塑料包埋的不脱钙骨组织虽能行组织形态学计量,却难以兼顾免疫组化与原位杂交。因此,建立一种可靠的、简便的且同时适应于三者的不脱钙骨组织包埋方法是骨病理学研究的关键。     

甲基丙烯酸羟乙酯塑料包埋切片技术在小鼠胎脑组织学分析中的应用

目的 探索塑料包埋切片法在小鼠胎脑组织学分析中的应用。 方法 取胚胎期13.5d（E13.5）小鼠,4% 多聚甲醛4℃固定过夜,分离胎鼠头部,甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)塑料包埋组织并切片;对切片进行HE 染色。 结果 与石蜡包埋相比,采用HEMA塑料包埋的方法进行胎鼠脑组织学分析,形态结构保存较完整、HE染色效果较清晰。 结论 利用塑料包埋技术进行小鼠胎脑组织学分析,优于石蜡包埋方法。     

结直肠癌淋巴结微转移的流式细胞术检测

一、材料与方法１．材料：２５例结直肠癌选自１９９７年６月～１９９８年８月间第一军医大学附属南方医院普外科手术标本,经常规病理检查淋巴结转移阴性者。将肿瘤根治术切下的标本在半小时内分三站：（１）肠壁,（２）肠系膜中部,（３）肠系膜根部,摘取所属淋巴结,切取每个淋巴结的一半行常规病理检查（石蜡包埋,ＨＥ染色）;另一半新鲜制备细胞悬液或液氮冷冻备检。非癌淋巴结取自结直肠息肉病切除标本的肠周。２．标本的处理：将２５例患者的１６２枚淋巴结分别放入１．５ｍｌＥｐｐｅｎｄｏｒｆ管中,剪碎后加入１ｍｌ生理盐水,…     

MCP-1 mcAb和Losartan拮抗Ang Ⅱ介导的VSMCs的增殖与迁移效应的实验研究

目的探讨单核细胞趋化蛋白－１单克隆抗体（ＭＣＰ－１－ｍｅＡｂ）或Ｌｏｓａｒｔａｎ 拮抗血管紧张素Ⅱ（ＡｕｇⅡ）介导的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）增殖与迁移效应的可能性，为防治动脉硬化提供一定的理论依据。方法采用改良的Ｂｏｙｄｅｎ小室法检测 ＶＳＭＣｓ的迁移效应；以 ＭＴＴ法、~３Ｈ－ＴａＲ掺入法、~３Ｈ－脯氨酸标记法和ＶＳＭＣｓ计数评价ＶＳＭＣｓ的增殖效应。将培养ＶＳＭＣｓ分为 ５组； ２％胎牛血清（ ２％ＦＣＳ）组、 ＡｕｇⅡ组（其浓度为 １０－１０～１０－６ｍｏｌ／Ｌ）、Ｌｏｓａｒｔａｎ组（其浓度为 １０－７～１０－５ｍｏｌ／Ｌ）、ＭＣＰ－ｌｍｃＡｂ组（终浓度为 １０μｇ／ｍｌ）和阳性对照组（含５％的酵母多糖活化血清）。结果（１） ＡｕｇⅡ具有剂量依赖性的促进 ＶＳＭＣｓ的增殖与迁移效应；（２） ＭＣＰ－１ｍｃＡｂ或 Ｌｏｓａｒ－ｔａｎ能有效地拮抗ＡｕｇⅡ介导的ＶＳＭＣｓ增殖与迁移效应。结论 ＭＣＰ－１ｍｃＡｂ或Ｌｏｓａｒｔａｎ对动脉硬化性疾病可能具有较大的应用前景。     

塑料包埋制片技术在骨髓诊断中的应用

塑料包埋制片技术在骨髓诊断中的应用周荣妹骨髓活检标本常用传统的石蜡包埋及ＨＥ染色法，经脱钙和长时间的固定，常使细胞形态失真和某些物质的丧失，从而影响了结果判定。至８０年代初，国外用塑料包埋薄切片技术处理骨髓活检标本，细胞收缩小，能切出１～２μｍ的满意...     

抗人胎盘层粘连蛋白P1单克隆抗体的制备与初步应用

在纯化人胎盘层粘连蛋白Ｐ１段（简称Ｐ１）的基础上，应用杂交瘤技术获得两株抗Ｐ１的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）３Ａ１５和１Ｂ５。两株ＭｃＡｂ均属ＩｇＧ１，同人纤维连接蛋白和Ⅳ型胶原无交叉反应。纯化的腹水ＭｃＡｂ效价分别为６．４×１０－７（３Ａ１５）和２×１０－８（１Ｂ５），分别识别Ｐ１分子上的不同表位。利用ＭｃＡｈ３Ａ１５和１Ｂ５建立了双ＭｃＡｂ夹心ＥＬＩＳＡ，用于检测Ｐ１的下限为１０ｎｇ／ｍｌ，标准曲线在１０～５００ｎｇ／ｍｌ之间呈直线关系。对１００例健康献血员、１８例慢性肝炎患者和１２例肝硬化患者血清Ｐ１的检查结果分别为３３．８±１１．６、６７．３±３１．７和１０７．５±５８．４ｎｇ／ｍｌ。     

用Bouin液固定不脱钙制作胎儿指骨整体切片

组织学观察是骨组织研究的重要手段之一[1],由于骨组织致密、坚硬,并含有骨胶等成分,所以要制作一张高质量的切片(和软组织相比)有一定的困难[2].近年来出现的塑料包埋等[3,4]不脱钙骨切片及染色技术尚不够成熟和稳定[2].我们在教学过程中用胎儿指骨的整体切片做为观察软骨内成骨和骨组织组成及细胞结构的标本,制作时采用Bouin液做为固定液,用氯仿做为透明剂,不需脱钙制作出切片的组织和细胞的形态结构完整,染色鲜明、色泽深浅适当.而将皮肤和结缔组织等一起固定包埋制作骨切片的文献极少.现将我们的经验报道如下.     

石蜡包埋颈全喉大切片的制备与体会

过去在制备大切片时，一般应用明胶包埋，但切片太厚（４００μｍ），影响观察〔１〕。我们利用石蜡包埋制备颈全喉大切片，取得了良好的结果。１材料和方法１１尸检材料为全喉和手术切除的喉癌标本。根据需要从水平、冠状和矢状三个方向把喉切开，用１５％的福尔马林固...