空肠弯曲菌鞭毛蛋白的提取与鉴定

用制备性ＳＤＳ丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）分离空肠弯曲菌Ｓ１３１株的菌体蛋白。在ＫＣｌ“染色背景下，切下６５．４７Ｋｕ蛋白带，经电泳洗脱和浓缩获得的蛋白液，免疫印迹证实为均一鞭毛蛋白．另用亚硝基胍诱导使空肠弯曲菌Ｓ１３１有动力株突变为无动力株，电镜下突变株鞭毛消失，但ＳＤＳ－ＰＡＧＥ谱上仍有６５．４７Ｋｕ鞭毛蛋白区带。提示，这种鞭毛突变可能发生在蛋白质装配阶段。     

日本血吸虫多坐分子疫苗的制备及其抗原性的研究

为了制备足量、高纯度的供血吸虫保护性免疫力研究的多价分子疫苗。通过制备型ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和电渗方法从日本血吸虫成虫分离纯化出２８ＫＤ，３１／３２ＫＤ及９７ＫＤ蛋白。经ＢＣＡ法检测蛋白含量，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测蛋白纯度和分子量，Ｗｅｓｔｒｎ－ｂｌｏｔ及ＥＬＩＳＡ检测其抗原活性。结果日本血吸虫成虫２８ＫＤ，３１／３２ＫＤ及９７ＫＤ三种纯化蛋白经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测均为单一条带并与所分离的蛋白分子量相符     

BCG 65KD热休克蛋白的纯化

目的：研究卡介苗（ＢＣＧ）６５ＫＤ热休克蛋白的提纯方法。方法：ＢＣＧ经３７℃恒温振荡培养两周，４２℃热休克处理２ｈ，培养液经离心、抽滤、盐析沉淀、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分离、电泳洗脱等步骤纯化。结果：提纯产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，其电泳区带在６５ＫＤ位置，经抑制试验表明具有较高抗原活性。结论：流程方法简单、实用，有助于对ＩＤＤＭ的诊断及其深入研究。     

双胸蚓纤溶酶Ⅲ的分离纯化及其性质研究

用硫酸铵分段盐析，ＤＥＡＥ－纤维素，ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－２５和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５柱层析的方法，从双胸蚓组织中分离纯化出一种纤溶酶，经聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）显示一条区带，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定其分子量为２２．１ＫＤ     

大肠杆菌L－天门冬酰胺酶Ⅱ基因的高效表达

用一对与大肠杆菌天门冬酰胺酶Ⅱ基因（ＡｎｓＢ）两侧序列互补的寡核苷酸Ｅ１，Ｅ２作引物，以大肠杆菌野生株ＣＰＵ２１０００９的染色体ＤＮＡ为模板，通过ＰＣＲ扩增得到约１．２ｋｂ的ＤＮＡ片段，将此片段插入ｐＫＫ２３３－２的ｔａｃ启动子下游，转化不同的大肠杆菌宿主菌株，结果表明以ＣＰＵ２１０００９为宿主菌时，转化子的酶表达量最高，重组Ｌ－天门冬酰胺酶占菌体总蛋白４８．３％，发酵液酶活力达４００ＩＵ／ｍｌ；比活为４８ＩＵ／ｍｇ蛋白，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示纯化后的重组Ｌ－天门冬酰胺酶分子量与天然酶相同，均为１４０ＫＤ。     

醛糖还原酶的分离纯化和性质分析

利用离心，盐析及ＤＥＡＥ－纤维素，羟基磷灰石，葡聚糖－Ｇ１００多步层析法将牛睾丸ＡＲ分离纯化，醛糖还原酶（ａｌｄｏｓｅｒｅｄｕｃａｓｅ，ＡＲ），并利用体外酶动力学方法测定其底物特异性，为寻长有效的醛糖还原酶抑制剂提供线索，结果；纯化的酶经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳鉴定示一单一蛋白条带，牛睾丸ＡＲ，Ｍｒ约为（４００００±１０００）ｕ，ＡＲ底物特异性，按１／Ｋｍ大小依次排列为：Ｐ－硝基苯醛；ＤＬ－甘油醛，Ｄ     

抗P^185McAb的制备,鉴定及其在免疫组化检测的应用

本文以ＨＥＲ－２／ｎｅｕ癌基因表达产物为抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，采用常规淋巴细胞杂交瘤技术立一株稳定分泌抗Ｐ＾１８５ＭｃＡｂ的杂交瘤株５Ｅ１２，ＭｃＡｂ５Ｅ１２属ＩｇＧ亚类，与ＳＫＢＲ－３，Ｔ４７Ｄ乳癌细胞系呈阳性反应，与ＨＴ２９，ＥＣ１０９，ＤＡＣ－１，ＳＰ２／０，成纤维细胞及小鼠ＮＩＨ３Ｔ３等细胞系列呈阴性反应，３０例乳癌组织石蜡切片同时以自制抗Ｐ＾１８５ＭｃＡｂ５Ｅ１２及进口ＭｃＡｂＣ－ｅ     

HPV16L1重组蛋白在甲醇营养型酵母菌中的诱导表达及鉴定

目的 ＨＰＶ１６Ｌ１重组蛋白的表达为研制ＨＰＶ１６Ｌ１预防性蛋白疫苗及诊断试剂盒打下基础。方法 ｐＰＬＣ３．５－ＨＰＶ;１６Ｌ１／ＧＳ１１５阳笥菌株,经０．５％甲醇诱导,运用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳检测Ｌ１蛋白;用鼠抗ＨＰＶ１６Ｌ１单克隆抗体,经Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测蛋白的特异笥;在透射电下观察类病毒颗粒（ＶＬＰｓ）结果 ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测结果表明,在５５ＫＤ处有诱导蛋白带的出现;经Ｗ     

高热致胚胎发育毒笥性机理的研究：——热休克蛋合成

按Ｋｉｍｍｅｌ实验条件热暴露孕天大鼠。暴露后２小时取胚胎用＾３５Ｓ－蛋氨酸标记，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ蛋白分析，可见７０和９０ＫｉｌｏｄａｌｔｏｎＫＤ热休克蛋白合成增加。７０ＫＤ ＨＳＰ合成用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析又进一步得到证实。离体培养胚胎热暴露后，用同样方法分析蛋白，证实７０和９０ＫＤ ＨＳＰｓ合成增加。结果与Ｋｉｍｍｅｌ骨骼畸形和胚胎体节融合发生率相符合。本结果为Ｇｅｒｍａｎ提出的环境致畸机     

IRRIGATION AND TRACTION THERAPY FOR OPEN FRACTURE WITH LARGE-SIZED FULL-THICKNESS SKIN-DEFICIT AND SEVERELY INFECTED WOUND

ＩＲＲＩＧＡＴＩＯＮＡＮＤＴＲＡＣＴＩＯＮＴＨＥＲＡＰＹＦＯＲＯＰＥＮＦＲＡＣＴＵＲＥＷＩＴＨＬＡＲＧＥ－ＳＩＺＥＤＦＵＬＬ－ＴＨＩＣＫＮＥＳＳＳＫＩＮ－ＤＥＦＩＣＩＴＡＮＤＳＥＶＥＲＥＬＹＩＮＦＥＣＴＥＤＷＯＵＮＤＬｉｕＧｕｏｐｉｎｇ（刘国平）ａｎ...     

恶性疟原虫多表位重组疫苗在大肠杆菌中的表达及纯化

目的 在体外表达和纯化目的的蛋白,为下一步抗攻击试验提供安全有效的产品。方法 将化学合成的恶生疟原虫保护性抗原复合基因（ＨＧＦＳＰ）与表达载体ｐＲＳＥＴ重组,在大肠杆菌ＧＩ２１进行表达;工程菌经超声破菌、离心、离子交换层析、疏水层析、分子支析等步骤纯化。结果 ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示表达产物以非融合、可溶性的形式表达,相对分子质量为２３ｋＤａ,占总菌体蛋白的２３．６５％,纯度可达９５％以上。Ｗｅｓｔｅ     

抗HSV—1杂交瘤细胞系的建立及单抗特性研究

以ＨＳＶ－１为抗原，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，取其脾细胞在ＰＧＥ介导下与ＳＰ２／０细胞常规融合，ＩＦＡ法筛选鉴定，反复克隆，共获得７株能稳定、持续分泌抗ＨＳＶ的ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系。核型分析染色体数为８７￣１０３条之间，Ｉｇ类型分别为ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ３，腹水抗体效价在１０＾－５￣１０＾－７之间免疫沉淀。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，２株与１３２Ｋ多肽发生特异性反应，只具有ＨＳＶ－１型特异性，其余３     

呼吸道感染铜绿假单胞菌的血清分型和常用抗生素体外抗菌 …

目的：研究呼吸道感染标本中铜绿假单胞菌的血清型和１２种抗生不的体外抗菌活性。方法：标本获得纯培养后应用ＶＩＴＥＫ－ＡＭＳ微生物自动分析仪鉴定细菌，用ＰＡ２０系列血清分型，用Ｋ－Ｂ纸片法按ＮＣＣＬＳ规定的标准进行敏感试验。结果：引起呼吸道感染的５９株绿脓杆菌血清分型率为９４．８３％，主要以ＰＡ６ ＰＡ２，ＰＡ４型为主，５８株菌对１２种抗生素的平均耐药率为４７．６％，对舒普深，奥复星、泰能的耐药率均在     

大肠杆菌色氨酸酶基因的克隆与表达

应用ＰＣＲ技术从Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０５中扩增出长约１．４Ｋｂ的色氨酸酶基因,将其插入高表达载体ｐＥＴ３ａ的ＮｄｅＩ／ＢａｍＨＩ位点,转化Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）,构建高产色氨酸酶基因工程菌。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳和薄层扫描表明,工程菌色氨酸酶的表达量占细胞总可溶性蛋白的６９．８％。酶活测定结果表明,７株工程菌色氨酸酶的活力比宿主菌均有不同程度的提高,其中ＷＷ－１１号比宿主菌高１６倍。     

人重组P53蛋白的制备

目的：制备人重组Ｐ５３蛋白。方法；使用含人Ｐ５３基因的重组质粒，ＰＴ７ＨＵＰ５３转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３），于培养过程中加入异丙基－β－Ｄ硫代半乳糖苷诱导转化菌表达目的蛋白Ｐ５３，然后采用溶菌、盐酸胍抽提等方法提取纯化目的蛋白。结果：最终提取物经蛋白电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）和免疫印记（Ｗｅｓｔｅｍ ｂｌｏｔ）昨天确为Ｐ５３蛋白，含量约０．３７３ｇ／Ｌ。     

人胃,十二指肠粘膜SS,AVP,PK和β—EP含量测定及其临床意义

作者应用放免分析法对２４例十二指肠溃疡（ＤＵ），１５例胃溃疡（ＧＵ）患者胃、十二指肠粘膜进行了生长抑素（ＳＳ），精氨酸加压素（ＡＶＰ）、脑啡肽（ＥＫ）和β－内啡肽（β－ＥＰ）含量测定。同时以２０例慢性浅表性胃炎（ＣＳＧ）为对照，结果表明，ＤＵ患者球、窦和体部粘膜ＳＳ含量显著低于对照，ＥＫ和β－ＥＰ显著高于对照。ＤＵ患者球部粘膜ＡＶＰ显著高于ＣＳＧ，ＧＵ组上述激素含量与对照组比较均无显著差异，提示：     

γ射线照射孕鼠致仔鼠脑内异常改变

目的；研究低剂量γ射线照射孕鼠，对仔鼠中枢神经系统发育的影响。方法：对孕１３天的小鼠进行一次＾６０Ｃｏ（１．０Ｇｙ）射线全方位照射，用克紫染 ，观察新生零天仔鼠脑形态ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法检测其蛋白结构。结果：照射组鼠脑海马伞腹侧形成异常细胞，在６５－７０ＫＤ左右出现异常蛋白。结论；低剂量γ射线照射孕鼠，影响仔鼠中枢神经系统的发育，室管膜细胞对照射损伤较敏感。     

CORRELATION BETWEEN THE NUMBER OF MITOTIC FIGURES AND THE PERCENTAGE OF Ki67-POSITIVE CELLS IN NON-HODGKIN’S LYMPHOMAS

ＣＯＲＲＥＬＡＴＩＯＮＢＥＴＷＥＥＮＴＨＥＮＵＭＢＥＲＯＦＭＩＴＯＴＩＣＦＩＧＵＲＥＳＡＮＤＴＨＥＰＥＲＣＥＮＴＡＧＥＯＦＫｉ６７－ＰＯＳＩＴＩＶＥＣＥＬＬＳ　ＩＮＮＯＮ－ＨＯＤＧＫＩＮ’ＳＬＹＭＰＨＯＭＡＳＨｕａｎｇＧａｏｓｈｅｎｇ；（黄高升）Ｆｅ...     

ANTITUMOR ACTIVTY OF LAK CELLS FROM THE C0RD BLOOD AND THE PERIPHERAL BLOOD OF NORMALDONORSANDCANCERPATIENTS

ＡＮＴＩＴＵＭＯＲＡＣＴＩＶＴＹＯＦＬＡＫＣＥＬＬＳＦＲＯＭＴＨＥＣ０ＫＤＢＬＯＯＤＡＮＤＴＨＥＰＥＲＩＰＨＥＲＡＬＢＬＯＯＤＯＦＮＯＲＭＡＬＤＯＮＯＲＳＡＮＤＣＡＮＣＥＲＰＡＴＩＥＮＴＳＸｕＸｉｕ，ＣａｏＲｏｎｇｈｕａ，ＨｏｕＧｕｉｈｕａ（Ｄｅｐｔ...     

抗HSV－1杂交瘤细胞系的建立及单抗特性研究

以ＨＳＶ－１为抗原，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，取其脾细胞在ＰＧＥ介导下与ＳＰ２／０细胞常规融合，ＩＦＡ法筛选鉴定，反复克隆，共获得７株能稳定、持续分泌抗ＨＳＶ的ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系。核型分析染色体数为８７～１０３条之间，Ｉｇ类型分别为ＬｇＧ＿１、ＩｇＧ＿（２ｇ）、ＩｇＧ＿３，腹水抗体效价在１０￣（－５）～１０￣（－７）之间免疫沉淀。ＳＤＳ—ＰＡＧＥ分析，２株与１３２Ｋ多肽发生特异性反应，只具有ＨＳＶ－１型特异性，其余３株与１２０～１２８Ｋ多肽，２株与６０Ｋ多肽发生特异性反应，具有ＨＳＶ型共同抗原特异性。７株ＭｃＡｂ与ＣＭＶ均不发生特异反应。这些杂交瘤细胞系的建立对于ＨＳＶ的临床早期、快速诊断有重要的应用价值。