糖尿病早期大鼠视网膜毛细血管细胞凋亡研究

目的：研究早期糖尿病视网膜病变大鼠视网膜毛细血管细胞凋亡及其特征。方法：腹腔内注射链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型。应用PAS染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口标记（TUNEL）法标记和透镜观察进行研究。结果：在糖尿病3月和6月,可见周细胞和内皮细胞鬼影;周细胞和内皮细胞核异染色质聚集靠边并随病程进展而加重;被TUNEL法标记的细胞核染色质分布不均,表现为环形核、新月形核等。结论：早期糖尿病视网膜病变大鼠视网膜毛细血管周细胞丧失的性质为细胞凋亡,内皮细胞亦存在凋亡。     

早期糖尿病大鼠视网膜毛细血管细胞凋亡及其特征

目的：研究早期糖尿病大鼠视网膜毛细血管细胞凋亡及其特征。方法：腹腔内注射链脲佐菌素诱导40只糖尿病大鼠模型,随机分为正常对照组（CON）、糖尿病1月组（DM1）、3月组（DM3）、6月组（DM6）。应用PAS染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口标记（TUNEL）法标记和染射电镜观察进行研究。结果：于糖尿病3月和6月组,见周细胞和内皮细胞鬼影。周细胞和内皮细胞核异染色质聚集靠边,并随病程进展而加重。被TUNEL法标记的细胞核染色质分布不均,表现为环形核、新月形核等。结论：早期糖尿病大鼠视网膜毛细血管周细胞丧失的性质为细胞凋亡,内皮细胞亦存在调亡。     

青光眼视网膜神经节细胞凋亡的实验研究

目的 研究兔的实验性青光眼视网膜神经节细胞的死亡是否有凋亡参与。方法 前房注入固定的红细胞悬液使免眼压升高,分别在术后７,１４,２１,２８天处死动物,取视网膜组织,ＴＵＮＥＬ标记染色,电镜观察。结果 电镜下可见视网膜神经节细胞死亡特征为典型的凋亡早期特征－核浓染。免疫组ＴＵＮＥＬ法实验组发现神经节细胞凋亡,而正常对照组没有发现。结论 实验性青光眼的视网膜神经节细胞死亡有凋亡参与。这为通过调探凋亡而治疗青光眼的视网膜视神经损伤提供可能。     

雌激素对视网膜光损伤的保护作用

目的：探讨雌激素对光诱导的视网膜感光细胞凋亡的抑制作用及其 机制。 方法：雌性Sprague－Dawley （SD）大鼠20只随机分为去势组和去势+雌激素组，每组各10只大鼠。 接受12h亮、12 h暗(12∶12)的循环光照射，光照强度（600.0±35.4） lx，共14次。所有 大鼠摘除 右眼球，测量视网膜外核层的厚度，脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记（TUNE L）法检测视网膜外核层凋亡的感光细胞，免疫组织化学染色结合图像分析系统观察视网膜 一氧化氮合酶（NOS）的表达及分布。 结果：光照后去势组外核层薄于去 势+雌激素组。去势 组、去势+雌激素组外核层被TUNEL法标记的阳性凋亡细胞数分别为 (0.0275±0.0069)、 (0.0162±0.0054) 个/μm²，两组间差异有统计学意义（t=4.1370，P=0.0012）。去势组及去势+雌激素组视网膜内核层NOS阳性着色细胞的积分吸光度［A，旧称 光密度（OD）］值分别为0.3675±0.0662、0.2941±0.0350，两组间差异有统计学意义（t=3.4885，P =0.0031）。 结论：雌激素可通过调控NOS的合成、抑制感光细胞的凋 亡而对视网膜光损伤起保护作用。     

人视网膜母细胞瘤的细胞凋亡

目的 观察凋亡是否为视网膜母细胞瘤（ＲＢ）细胞死亡的主要方式。方法 应用光镜（１６例）、电镜（４例）及ＴＵＮＥＬ标记（１２例）对ＲＢ进行观察研究。结果 光镜下凋亡细胞大多位于退化区。电镜下可见不同凋亡阶段的ＲＢ细胞,占瘤细胞死亡的４２％。ＴＵＮＥＬ标记阳性细胞大多位于肿瘤退化区。凋亡指数（ＡＩ）在未分化型和放疗后的ＲＢ中明显增高（Ｐ〈０．０５）,与视神经受累与否及临床分期无关（Ｐ〉０．０５）。结论 凋亡可能是导致ＲＢ细胞死亡的主要形式,诱导调亡可作为促使ＲＢ退化的一种手段。     

病理性近视视网膜变性中感光细胞的凋亡

目的：了解凋亡在病理性近视视网膜感光细胞变性中所起的作用。 方法：9例病理性近视眼球被选作病理组织学和DNA断端标记即TUNEL技术研究。 结果：在其中的4个眼球，观察到凋亡的特征性改变—分散性的视网膜感光细胞DNA的片断化。 结论：结果提示凋亡是病理性近视视网膜感光细胞死亡的一个重要机制。 （中华眼底病杂志，1996，12：144-146）     

人类视网膜神经节细胞的凋亡

为了解凋亡在脉络膜黑色素瘤引起的视网膜变性中所起的作用，８例脉络膜黑色素瘤并发各种视网膜病变的眼球被选作病理组织学和ＴＤＴｍｅｄｉａｔｅｄｂｉｏｔｉｎ－ｄＵＴＰｎｉｃｋ－ｅｎｄｌａｂｅｌｉｎｇ（ＴＵＮＥＬ）技术研究。其中４眼观察到凋亡的特征性改变—视网膜神经节细胞和内颗粒层细胞核的ＤＮＡ片断化。结果表明凋亡是脉络膜黑色素瘤并发视网膜病变中神经节细胞和内颗粒层细胞的死亡方式之一。     

人胎视网膜血管结构发育的研究

目的；观察人胎视网膜血管结构发育过程。 方法：收集134例12~38周受精龄胎儿和4例成人视网膜，进行整装铺片和切片的免疫组织化学染色检查。 结果：①梭形细胞仅存于小于27周胎儿的视网膜内；足月胎儿节细胞层血管仍有出芽．②各阶段胎儿及成人视网膜血管基膜的纤维连接蛋白免疫反应均呈阳性。层粘连蛋白和Ⅳ型胶原免疫反应分别于25周和29周出现在节细胞层血管基膜，并分别在29周和32周开始完全包裹视网膜内已形成的4层血管．③内皮细胞束管道化时管道外即出现平滑肌细胞和周细胞．④4层血管向锯齿缘扩展的同时，内皮细胞外即有星形腔质细胞和Müller细胞突起形成血—视网膜屏障胶质膜。 结论：与成人比较，不同阶段胎儿视网膜血管均存在一定的缺陷，到足月时内皮细胞仍处在增殖、迁移状态． （中华眼底病杂志，1997，13：153-156）     

兔眼视网膜下注射N-甲基右旋天冬氨酸诱导视网膜变性的组织病理学研究

目的研究视网膜下注射兴奋性氨基酸N-甲基右旋天冬氨酸（NMDA）对神经细胞变性的作用。方法取12只1个月龄有色家兔,视网膜下注射10μl（30mmol／L）NMDA（溶剂为DMEM-F12）,形成视网膜隆起,在注射12、24、48h及1周后分别处死家兔,取其视网膜组织进行免疫组织化学检测和电镜观察。应用抗Calretinin、Calbindin、PKCα抗体,分别标记视网膜无长突细胞、水平细胞及视杆双极细胞;采用原位缺口末端标记技术（TUNEL）技术标记凋亡细胞。结果损伤早期（12～24h）,实验组视网膜可见散在细胞核固缩浓染的光感受器细胞,并有无长突细胞和神经节细胞的早期严重变性;中期（48h）视网膜各层神经元均出现病理性改变;损伤晚期（1周）视网膜各层细胞数目明显减少。损伤早期,TUNEL技术标记的阳性细胞位于视网膜各层。免疫组织化学和形态学计量资料显示视网膜下注射NMDA后,水平细胞、无长突细胞及神经节细胞数目明显减少,视杆双极细胞数目基本无变化。超微结构观察显示有凋亡、坏死、水肿变性及混合型细胞死亡等多种变性形式。结论视网膜下聚集NMDA时,光感受器细胞、水平细胞、视杆双极细胞、无长突细胞及神经节细胞均表现为视网膜兴奋性毒性反应,与以往体内及体外研究结果显示的仅有内核层神经元死亡情况不同。     

实验性视网膜脱离复位后的视网膜细胞凋亡

目的研究视网膜脱离(retinaldetachment,RD)复位后的视网膜细胞凋亡的发生情况,探讨RD后视功损害的机制。方法14只成年灰兔,分为正常对照组1只,RD阳性对照组1只,实验组12只分为4组,视网膜下注射透明质酸钠建立RD模型,后分别观察1周、2周、3周、4周,观察期满取眼球进行组织切片。采用TUNEL法和细胞计数的方法进行细胞凋亡观察。结果正常对照组视网膜细胞凋亡标记基本为阴性。脱离的视网膜在内、外核层发现凋亡标记阳性细胞。在复位的视网膜上观察到凋亡标记阳性细胞,主要分布在内、外核层和神经节细胞层,并随着复位时间而变化(P<0.01)(凋亡细胞计数:1周10.50±3.41,2周6.90±2.42,3周5.50±2.07,4周1.78±1.56)。细胞计数显示实验组除观察4周组外,凋亡细胞数与正常视网膜和脱离时的视网膜分别相比,差异均有高度显著性(P<0.01)。结论RD复位后的视网膜细胞有细胞凋亡的发生,是视网膜功能恢复不良的重要原因。     

THE MANAGEMENT OF LACERATIONS OF THE ANTERIOR SEGMENT OF THE EYE.

Traffic and occupational accidents are the main causes of perforating injuries of the eye. The mechanism and the typical clinical pictures are described. Nowadays, micro-surgical techniques produce more favourable results. Treatment of iridodialysis by McCannel procedures is presented as a typical example.