食管癌组织中ToPoⅡ表达与癌细胞体外药敏反应关系的研究

目的探讨食管癌组织中ToPoⅡ表达与癌细胞体外药敏反应的关系.方法收集本院1999年至2003年手术切除的食管癌组织标本50例,经免疫组织细胞化学方法测定其组织中ToPoⅡ表达状态,用MTT法检测ToPoⅡ不同功能状态下各种肿瘤细胞对化疗药物Vp-16(足叶乙甙,ToPoⅡ抑制剂)的敏感性及差异.结果以Vp-16的IC50值计算,ToPoⅡ高表达组患者是低表达组患者的1/6,显示出较高的化疗敏感性.结论食管癌组织中ToPoⅡ功能状态可能对其化疗的敏感性有影响.     

SPHK1在调节小细胞肺癌多药耐药中的作用

背景与目的小细胞肺癌约占全部肺癌的15%,化疗是其主要的治疗方法之一,虽然早期对一线化疗方案敏感,但极易出现多药耐药而导致治疗失败。前期基因芯片发现SPHK1与小细胞肺癌的耐药性相关,本研究进一步探讨SPHK1在小细胞肺癌多药耐药中的作用。方法首先通过QRT-PCR和Western blot从基因和蛋白水平检测化疗敏感细胞株H69及多药耐药细胞株H69AR中SPHK1的差异表达;转染siRNA下调H69AR细胞中的SPHK1的表达,通过CCK8检测细胞对各种化疗药物（ADM, DDP, VP-16）的敏感性变化,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡的变化。同时收集小细胞肺癌化疗前组织和血液标本,将其分为化疗敏感组和耐药组,QRT-PCR检测小细胞肺癌患者血液标本中SPHK1的表达,免疫组化法检测小细胞肺癌患者组织标本中SPHK1的表达,分析SPHK1与小细胞肺癌患者预后相关性。结果 SPHK1在耐药细胞H69AR中的表达明显高于H69,下调H69AR中SPHK1的表达能够增加细胞对化疗药物的敏感性,促进细胞的凋亡,细胞周期发生G0/G1期阻滞,SPHK1在小细胞肺癌耐药患者中的表达较敏感患者明显增加,SPHK1的表达与患者的性别、年龄无关,与疾病的分期、对化疗的敏感性及生存时间密切相关,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 SPHK1参与调节小细胞肺癌多药耐药,SPHK1可作为评估小细胞肺癌化疗敏感性及临床预后的潜在靶基因。     

肺癌中p53及nm23与多药耐药基因表达的相关分析及预后意义

目的探讨肺癌中p53和nm23与GST-Pi、ToPoⅡ、P-gp表达的相关性及预后意义.方法用免疫组化法对76例肺癌进行p53、nm23、GST-Pi、ToPoⅡ和P-gp检测分析,并随访.结果 76例肺癌中p53、nm23、GST-Pi、ToPoⅡ、P-gp的阳性表达率依次为76.3%、17.1%、51.3%、25.0%和15.8%.p53和nm23表达与GST-Pi、ToPoⅡ、P-gp三种耐药基因表达无关(P>0.05),与淋巴结转移相关(P<0.01).三种耐药基因的阳性表达与肺癌的组织学类型相关(P<0.05),与淋巴结转移及临床分期相关(P≤0.01),与性别、年龄无关(P>0.05).结论部分肺癌患者体内存在多药耐药基因(MDR1)或对GST-Pi、ToPoⅡ、P-gp介导的抗癌药物已产生耐药.p53及nm23在肺癌中的表达与多药耐药无关;与淋巴结转移呈负相关,对判断肺癌的预后有重要意义.肺癌中多药耐药基因的表达与组织学类型、淋巴结转移、临床分期相关.     

TopoⅡα在乳腺癌组织中表达及其与蒽环类药物敏感性的关系

目的探讨拓扑异构酶Ⅱα（TopoⅡα）在乳腺癌组织中表达及其与蒽环类药物化疗敏感性的关系。方法采用免疫组化方法对68例乳腺癌患者组织石蜡标本进行TopoⅡα表达的检测,并对其表达状态与蒽环类药物疗效的相关性进行统计学分析。结果TopoⅡα阳性患者蒽环类化疗疗效高于阴性患者（P〈0．05）,蒽环类抗肿瘤药物化疗有效患者中TopoⅡα阳性率高,而含蒽环类药物化疗方案化疗疗效与TopoⅡα表达无相关性。结论TopoⅡα可作为评估乳腺癌的生物学行为及其预后、预测蒽环类药物对于化疗的敏感程度的指标。     

β-tubulin—III基因的表达与长春瑞滨治疗非小细胞肺癌疗效关系的研究

目的：研究非小细胞肺癌（NSCLC）患者肿瘤组织中β-微管蛋白-Ⅲ（[3-tubulin-III）基因的表达与患者对长春碱类药物化疗敏感性的关系，为患者选择适当的药物治疗提供依据。方法：共入选35例NSCLC患者，随机分入长春瑞滨（NVB）联合顺铂（PDD）或卡铂（CBP）组成NP方案化疗组和吉西他滨（GEM）联合PDD或CBP组成GP方案组，观察两组对化疗的反应；同时以RT—PCR法检测患者病理组织中β-tubulin-III mRNA的表达，以Westernblot检测β—tubulin-III蛋白的含量。结果：NP组19例，GP组16例，两组患者临床特点无明显差别，对化疗总的有效率相似，在NP组内，有效10例，无效9例，有效患者的肿瘤组织中β-tubulin．III mRNA测量值为4．8±1．9，而无效患者为15．8±8．0，两者有显著性差异（P〈0．01）；有效患者β-tubulin．III蛋白的测量值为3．7±1．5，无效患者为13．5±6．2（P〈0．01）。GP组7例无效，9例有效，有效与无效患者肿瘤组织中β-tubulin-III mRNA和β-tubulin-III蛋白表达均无显著性差异（P〉0．05）。结论：NSCLC患者肿瘤组织中β—tubulin-III基因的表达与患者对长春碱类药物的敏感性有关，β—tubulin-Ⅲ基因高表达，提示对长春碱类药物的敏感性低，宜换用其他药物治疗。     

P-gp、ToPoⅡα、GST-π和c-erbB2在子宫内膜癌中的表达及其意义

目的:探讨P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、DNA拓扑异构酶Ⅱα(topoisomerase Ⅱα.ToPo Ⅱα)、谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-S-transferase π,GST-π)和原癌基因c-erbB2在子宫内膜癌中的表达情况及其临床意义.方法:运用免疫组织化学SP法检测P-gp、ToPoⅡα、GST-π和c-erbB2在127例子宫内膜癌中的表达情况.结果:127例子宫内膜癌中,P-gp表达率为63.0%,ToPoⅡα为44.9%,GST-π为70.1%,c-erbB2为47.2%;P-gp和GST-π共同表达率为50.7%.P-gp、GST-π和c-erbB2的表达率,低分化高于中、高分化子宫内膜癌(P＜0.05);ToPoⅡα表达率,中、高分化高于低分化子宫内膜癌(P＜0.05).单因素分析表明,p-gp、GST-π和c-erbB2的表达与子宫内膜癌患者的生存期和不良预后有关.COX回归分析表明,P-gp表达、P-gp和GST-π共同表达与患者的生存率有关,ToPoⅡα高表达对患者有保护趋势.结论:P-gp、ToPoⅡα、GST-π和c-erbB2等多因素联合作用是子宫内膜癌多药耐药性的主要作用机制.测定子宫内膜癌患者进行此4项指标,对于患者预后的估计和制定合理的化疗方案具有积极的指导意义.     

P-gp、ToPoⅡα、GST-π和c-erbB2在上皮性卵巢癌中的表达及其意义

[目的]探讨P-gp、ToPoⅡα、GST-π和c-erbB2在上皮性卵巢癌的表达情况及其临床意义。[方法]运用免疫组织化学技术(SP法)检测P-gp、ToPoⅡα、GST-π和c-erbB2在147例上皮性卵巢癌中的表达情况。[结果](1)147例上皮性卵巢癌中,P鄄gp表达63.9%;ToPoⅡα表达45.6%;GST鄄π表达70.1%;c鄄erbB2表达51.7%;P鄄gp和GST鄄π共同表达者50.7%。(2)P鄄gp、GST鄄π和c鄄erbB2表达率,低分化与中、高分化卵巢癌比较有显著性差异(P<0.05),ToPoⅡα表达率,中、高分化高于低分化卵巢癌,比较有显著性差异(P<0.05)。(3)单因素分析表明,P鄄gp、GST鄄π和c鄄erbB2表达与卵巢癌患者的生存期和不良预后有关。COX回归分析表明,P鄄gp表达、P鄄gp和GST鄄π共同表达与患者的生存率有关,ToPoⅡα高表达对患者有保护趋势。[结论]P鄄gp、ToPoⅡα、GST鄄π和c鄄erbB2等多因素联合作用是卵巢癌多药耐药性的主要作用机制。对卵巢癌患者进行此四项指标的测定,对于患者预后的估计和制定合理的化疗方案具有积极的指导意义。     

TOPOⅡa与蒽环类新辅助化疗的疗效观察

目的探讨TOPOⅡa的表达与蒽环类新辅助化疗的疗效关系及新辅助化疗敏感性的预测指标。方法采用免疫组化的方法检测100例乳腺癌患者化疗前TOPOⅡa的表达情况,并评估其与乳腺癌新辅助化疗疗效的关系。结果100例乳腺癌患者,TOPOⅡa的阳性表达率为47.0%;TOPOⅡa的表达状态与化疗疗效及疗效的程度密切相关（P=0.005;P=0.011）。结论TOPOⅡa过表达的患者能从蒽环类化疗中获取更多的益处;TOPOⅡa可能成为预测蒽环类化疗敏感性的独立预后指标。     

miR-181d 对小细胞肺癌化疗药物敏感性的影响

目的:探讨miR-181d 在调节小细胞肺癌化疗敏感性中的作用。方法:通过QRT-PCR和Westernblot检测小细胞肺癌敏感细胞株H 69及耐药细胞株H 69AR中miR-181d 的差异表达。上调H 69AR细胞中的miR-181d 表达,检测miR-181d 和BCL 2表达;通过CCK 8 检测细胞对各种化疗药物（ADM、DDP 、VP- 16）的敏感性变化,QRT-PCR检测87例小细胞肺癌组织标本中miR-181d 表达,所有患者均接受EP方案（依托泊苷＋顺铂）化疗,分析其与患者预后及生存时间的关系。结果:miR-181d 在H 69AR及对化疗耐药患者中呈低表达,同时伴随着BCL 2 高表达（P < 0.001）。 上调miR-181d 能降低BCL 2 表达水平,增加H 69AR细胞对化疗药物（ADM、DDP 、VP- 16）的敏感性（P < 0.01）。 miR-181d 的表达与肿瘤的分期、对化疗药物的敏感性及生存时间相关（P <0.001）,高表达miR-181d 的患者总生存时间（OS）和无进展生存时间（DFS）较低表达者延长（P < 0.001）。 结论:miR-181d 可能在小细胞肺癌多药耐药中发挥着重要的作用,miR-181d 可望作为评价小细胞肺癌疗效的预测指标。      

ToPoⅡ、MRP、GST-π在胃癌组织中的表达及其与预后的关系

[目的]探讨多药耐药基因相关蛋白在胃癌组织中的表达及其与预后的关系。[方法]免疫组化方法检测109例胃癌组织中ToPoⅡ、MRP、GST-π的表达,并分析他们与胃癌临床病理特征和预后间的关系。[结果]109例胃癌组织中,ToPoⅡ、MRP、GST-π阳性率分别为74.3%、40.4%和48.6%。3种蛋白各自表达的阳性组与阴性组比较,1、3、5年生存率均无统计学差异。高危组（2个以上危险因素）1、3、5年生存率分别为85.1%、57.4%、46.8%;低危组（1个危险因素）1、3、5年生存率分别为85.5%、64.5%、61.3%,但差异无统计学意义（χ2=0.15,P=0.926）。[结论]ToPoⅡ、MRP、GST-π与胃癌临床病理特征相关,3种耐药蛋白的联合检测可能成为预测胃癌患者预后的指标。     

肺癌组织中耐药相关基因的表达及其临床意义

目的：探讨肺癌组织中耐药相关基因的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化技术检测治疗前肺癌组织标本中P-gp、MRP和LRP表达。结果：72例非小细胞肺癌中P-gp、MRP、LRP阳性率分别为61％,49％，65％，并有部分共表达。9例小细胞肺癌中P-gp、MRP、LRP阳性率分别为56％，22％，44％，也有部分共表达。在TNM各分期中P-gp、MRP、LRP阳性表达无明显差异（P＞0．05），随访中化疗有效组P-gp、MRP、LRP阳性表达分别为29％（4／14）、36％（5／14）、21％（3／14），无效组P-gp、MRP、LRP性表达分别为83％（20／24）、67％（16／24）、75％（18／24）。有效组P-gp、LRP表达低于无效组（P＜0．05），随访中死亡16例，P-gp、MRP、LRP阳性表达分别占43％（7／16），31％（5／16），64％（11／16）。LRP阳性组占比例最高，提示LRP阳性表达预后差，其与预后关系密切。结论：肺癌耐药为一多途径多基因参与的过程，联合检测肺癌组织中耐药相关基因的表达有助于判断化疗疗效及预后。     

ToPoll、MRP、GST-π在胃癌组织中的表达及其与预后的关系

[目的]探讨多药耐药基因相关蛋白在胃癌组织中的表达及其与预后的关系.[方法]免疫组化方法检测109例胃癌组织中ToPoⅡ,MRP,GST-π的表达,并分析他们与胃癌临床病理特征和预后间的关系.[结果]109例胃癌组织中,ToPo Ⅱ,MRP,GST-π阳性率分别为74.3%,40.4%和48.6%.3种蛋白各自表达的阳性组与阴性组比较,1、3、5年生存率均无统计学差异.高危组(2个以上危险因素)1、3、5年生存率分别为85.1%,57.4%,46.8%;低危组(1个危险因素)1,3,5年生存率分别为85.5%、64.5%、61.3%,但差异无统计学意义(X2=0.15,p=0.926).[结论]ToPo Ⅱ,MRP,GST-π与胃癌临床病理特征相关,3种耐药蛋白的联合检测可能成为预测胃癌患者预后的指标.     

MTT法在非小细胞肺癌优化治疗方案中的应用

目的:通过非小细胞肺癌体外原代细胞的培养,对其常用的化疗药物进行敏感性检测,探讨不同化疗药物之间的敏感性差异,筛选出最佳的化疗药物或联合化疗方案。方法:应用MTT显色分析法测定40例非小细胞肺癌实体瘤标本对9种化疗药物及其组成的联合化疗方案的敏感性或耐药性,并比较结果。结果:非小细胞肺癌化疗敏感性个体差异较大。联合化疗药物的敏感性明显优于单药,P=0.038。各药物平均抑制率由高到低的顺序依次为DDP HCPT>DDP VP16>HCPT>DDP NVB>DDP ADM IFO>ADM>CTX ADM VCR>DDP>NVB>VP16>CBP>IFO>VP16 CBP>VCR>CTX。无论是单药组间比较,还是联合药物组间比较,其敏感性的差异均有显著差异,均P<0.01。结论:体外肿瘤细胞药敏试验对临床肿瘤化疗用药有很强的指导性,并能发现耐药病例。对非小细胞肺癌患者进行化疗时,应尽量选择联合用药方案。     

SELDI-TOF-MS技术在检测肺癌化疗敏感性相关蛋白质中的研究

[目的]应用SELDI-TOF-MS技术探索肺癌患者血清中与化疗敏感性相关的蛋白质。[方法]收集2005年4月至2008年11月初治晚期肺癌28例化疗前血清标本,以CM10芯片（阳离子交换蛋白芯片）为检测介质,经表面加强激光解吸电离—飞行时间—质谱（SELDI-TOF-MS）测定蛋白质质谱,筛选出各化疗方案CR、PR、SD、PD的患者血清中蛋白表达的肽链指纹图谱,寻找与肺癌患者化疗敏感相关的差异蛋白峰,用人工神经网络建立肺癌血清蛋白质指纹图谱化疗敏感相关模型,并做交叉验证评估其诊断的敏感度和特异性。[结果]通过化疗获益组与化疗抗拒组比较,得到7个差异蛋白峰,并以此建立诊断预测模型,其敏感度为92.31%,特异性为100%。验证结果敏感度为76.92%,特异性为87.50%。其中m/z为5482、4969的蛋白质峰在化疗获益组中表达明显高于化疗抗拒组,而m/z为4140的蛋白质峰在化疗抗拒组中表达明显高于化疗获益组。[结论]运用SELDI-TOF-MS技术所建立的肺癌血清蛋白质指纹图谱模型在预测肺癌化疗敏感性中具有较好敏感度与特异性,可望成为较好的预测工具。     

非小细胞肺癌p16基因表达与放疗敏感性的关系

目的：研究非小细胞肺癌（NSCLC）p16基因的表达与放疗敏感性的关系。方法：采用免疫组化检测68例晚期NSCLC的p16表达,该组病例均予以总量为55Gy的常规放疗,分析p16的表达与放疗疗效之间的关系。结果：有57．4％的晚期肺癌p16阴性表达,并且与癌细胞的分化程度密切相关;68例NSCLC采用放射治疗的疗效与癌细胞p16表达高度相关,p16阳性表达的患者其疗效明显好于p16阴性组的疗效（P〈0．05）。结论：NSCLC中存在高频率的p16基因失活,并且p16基因的表达与否可能影响肿瘤细胞对放射治疗的敏感性,因此检测肺癌p16基因的表达可能有助于判断肺癌对于放射治疗的反应,并藉此判断患者的预后,这对于指导临床肿瘤治疗具有重要的参考意义。     

肺癌患者外周血中PTOV1的表达与肿瘤对化疗药物顺铂和多西紫杉醇的敏感性的关系

目的 探究肺癌患者外周血中PTOV1的表达情况与肿瘤对化疗药物顺铂和紫杉醇的敏感性的关系.方法 选取56例肺癌患者作为研究对象.采用ECIA法检测化疗药物顺铂和紫杉醇的敏感性,采用RT-PCR法检测患者PTOV1表达水平,分析其与药物敏感性之间的关系.结果 根据药敏结果可知,肺癌对多西紫杉醇的体外敏感率为46.43％,...     

STMN 1m RNA在非小细胞肺癌中的表达与紫杉醇类药物化疗效果和患者生存率的关系

目的：RT－PCR法检测STMN1 mRNA在非小细胞肺癌石蜡组织中的表达与患者紫杉醇治疗疗效以及生存率的关系。方法：RT－PCR法检测135例非小细胞肺癌及20例正常肺组织中STMN1 mRNA的表达,探讨STMN1 mRNA表达水平与紫杉醇类药物化疗效果的关系。通过随访STMN1 mRNA不同表达水平的患者,探讨STMN1 mRNA表达水平与患者生存率的关系。结果：STMN1 mRNA表达水平在肺癌组织中显著高于正常肺组织（P＝0．021）。STMN1 mRNA低表达患者无进展生存期为13．0个月,而高表达者为8．0个月（P＝0．037）。紫杉醇类化疗方案在STMN1 mRNA 高表达组中的疗效显著低于 STMN 1 mRNA 低表达组（P＝0．028）,而在无紫杉醇类化疗患者中,两组之间疗效评价差异没有显著性（P＝0．912）。结论：STMN1 mR-NA在肺癌组织中高表达。STMN1 mRNA高表达与较短的生存期相关,STMN1 mRNA表达水平与紫杉醇类药物化疗效果有关。mRNA高表达组的患者化疗疗效较差,提示STMN1 mRNA高表达对紫杉醇耐药。     

蛋白tau表达与乳腺癌紫杉类新辅助化疗敏感性的关系

目的:探讨原发性乳腺癌组织中tau蛋白的表达与乳腺癌紫杉类药物新辅助化疗敏感性的关系.方法:应用免疫组化法对113例原发性乳腺癌患者术前穿刺样本进行tau蛋白表达水平的检测,分析其与紫杉类药物化疗敏感性的关系.结果:乳腺癌组织中tau蛋白表达的阳性率为24.78%(28/113);紫杉类药物新辅助化疗后,达到病理完全缓解(pCR)的患者40例,存在残留癌的患者73例.pCR组tau蛋白阳性率为12.50%(5/40),残留癌组tau蛋白阳性率为31.51%(23/73),两者之间差异有统计学意义,χ2=5.008,P=0.025.结论:tau蛋白表达水平与乳腺癌紫杉类药物化疗敏感性呈负相关,检测tau蛋白表达状态对预测乳腺癌紫杉类药物新辅助化疗的敏感性可能具有一定的指导意义.     

DDX17在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:探索DDX17在非小细胞肺癌及癌旁组织中的表达差异及其临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测非小细胞肺癌患者肿瘤组织及相应癌旁组织中DDX17的表达情况。分析DDX17表达与患者临床病理特征之间的相关性,以及DDX17对患者生存预后的预测价值。结果:DDX17在非小细胞肺癌组织中的表达量明显高于癌旁组织,其表达高低与肿瘤大小、淋巴结转移状态和病理分期显著相关。随着肺癌分期提高,DDX17的表达也增加。DDX17高表达和低表达患者的中位总生存时间分别为16个月和38个月(HR 3.15,95%CI 2.036~4.874),差异具有统计学意义(P<0.001)。单因素和多因素分析显示,DDX17的表达、病理分期、淋巴结转移状态和是否接受辅助化疗是非小细胞肺癌患者独立的生存预后不良指标。结论:DDX17高表达于非小细胞肺癌组织,是独立的预后预测因子。     

胃癌多药耐药表达与凋亡指数相关性

目的：研究多药耐药（multidrug resistance,MDR)基因表达与凋亡指数（apoptosis index,AI)在胃癌中的表达及与预后的关系,探讨它们之间相关性。方法：应用抗鼠抗人P-gp。GST-π和拓扑异构酶Ⅱ（topoisomeraseⅡ,ToPoⅡ）单克隆抗体对80例胃癌进行免疫组化研究,用Tunel法测定细胞凋亡指数。结果：AI、P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp)表达与临床分期呈正相关（P＜0.05),谷胱甘肽转移酶π（glutathione-s-transferase-π,GST-π）表达强度与生存期相关（P＜0.05),ToPoⅡ表达与组织分化程度相关（P＜0.05),其中P-gp表达与GST-π高度相关（P＞0.01)。GST-π与ToPoⅡ表达相关（P＜0.05),而细胞凋亡指数与MDR表达不相关（P＞0.05)。结论：MDR基因产物表达（P-gp,GST-π和ToPoⅡ）具相关性,但与Al不相关。MDR表达可能由一系列相同基因组调控,而细胞凋亡则可能属于不同基因调控系列。