坎离颗粒对压力负荷超载所致舒张性心力衰竭大鼠心肌肌质网钙转运的影响

目的探讨坎离颗粒改善舒张性心力衰竭大鼠左室舒张功能的可能作用机制。方法 56只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、中药组和缬沙坦组,每组14只。除假手术组外其余各组采用腹主动脉缩窄法制成心脏压力负荷超载心力衰竭模型。术后1周中药组给予坎离颗粒溶液6.75 g/(kg·d)灌胃,缬沙坦组给予缬沙坦混悬液7.2μg/(kg·d)灌胃,假手术组、模型组给予等量双蒸水灌胃,每日1次,共干预32周。观察各组大鼠心肌肌质网形态学变化、钙摄取功能、钙ATP酶2a(SERCA2a)活性及其蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠心肌肌质网钙摄取速率显著降低,心肌组织SERCA2a活性降低,SERCA2a蛋白表达增加(P0.05或P0.01);心肌肌质网明显减少,线粒体空化严重。与模型组比较,中药组心肌肌质网钙摄取速率提高,SERCA2a活性、蛋白表达明显增高(P0.05或P0.01);心肌肌质网、线粒体结构完好。结论坎离颗粒可能通过增加心肌组织SERCA2a蛋白和活性、促进心肌肌质网钙摄取速率,从而改善舒张性心力衰竭大鼠左心室舒张功能。     

补阳还五汤对舒张性心衰大鼠心肌线粒体能量代谢及AMPK/PPARα信号通路的影响

目的:探讨补阳还五汤基于腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)信号通路对舒张性心衰(DHF)大鼠心肌线粒体能量代谢的影响及其机制研究。方法:将48只SD大鼠随机分为假手术组与模型组,模型组大鼠运用腹主动脉缩窄法建立DHF大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组,补阳还五汤组(12.72 g·kg~(-1)·d~(-1)),酒石酸美托洛尔组(0.004 5 g·kg~(-1)·d~(-1)),灌胃给予相应药物,假手术组、模型组给予等量的去离子水,各组均每日灌胃1次。药物连续干预8周后,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠外周血中单磷酸腺苷(AMP),二磷酸腺苷(ADP),三磷酸腺苷(ATP)的含量;采用投射电镜检测心肌线粒体超微结构的变化;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠心肌组织中AMPK,PPARα,PPARγ辅助激活因子1α(PGC-1α)的蛋白表达量。结果:与假手术组比较,模型组大鼠AMP,ADP含量显著升高,ATP含量显著下降(P0.05,P0.01);与模型组比较,补阳还五汤组、酒石酸美托洛尔组大鼠AMP含量明显降低(P0.01),ADP含量下降(P0.05),ATP含量升高。与假手术组比较,模型组大鼠线粒体数量减少,形态异常;与模型组比较,补阳还五汤组、酒石酸美托洛尔组大鼠线粒体数量明显增加,形态明显改善。与假手术组比较,各组大鼠AMPK蛋白表达量无统计学差异;与假手术组比较,模型组PPARα,PGC-1α蛋白表达水平明显降低(P0.05)。与模型组比较,补阳还五汤组、酒石酸美托洛尔组PPARα,PGC-1α蛋白表达水平明显升高(P0.05)。结论:补阳还五汤可能是通过改善线粒体结构和功能,激活AMPK并上调AMPK/PPARα信号通路的表达,从而改善衰竭心脏的能量代谢,延缓心衰进展。     

不同治则方剂对心衰大鼠心功能及内质网应激的影响

目的观察三种不同治则方剂对心衰大鼠心功能及内质网应激分子CHOP、JNK和SERCA2a的表达影响。方法采用阿霉素腹腔注射法建立大鼠心衰模型,分为模型组、赖诺普利组、八珍汤组、血府逐瘀汤组、补阳还五汤组。另设空白对照组。给药4周后行心脏超声检测大鼠心功能,采用Western blot检测大鼠心肌CHOP、JNK及SERCA2a的蛋白表达。结果行心脏超声发现,与空白对照组比,模型组及各给药组ESV、EDV明显升高(P0.05),LVEF、SV水平明显下降(P0.05);经药物干预后,四给药组ESV、EDV较模型组明显下降(P0.05),LVEF、SV水平明显升高(P0.05);给药组组间比较,补阳还五汤组较其他三给药组ESV、EDV明显下降(P0.05),LVEF、SV水平明显升高(P0.05)。在CHOP、JNK及SERCA2a的蛋白表达上,与空白对照组比,模型组及各给药组CHOP、JNK的表达明显升高(P0.05),SERCA2a的表达明显下降(P0.05);经药物干预后,四给药组较模型组CHOP、JNK的表达明显下降(P0.05),SERCA2a的表达明显升高(P0.05);给药组组间比较,补阳还五汤组较其他三给药组CHOP、JNK的表达明显下降(P0.05),SERCA2a的表达明显升高(P0.05)。结论八珍汤、血府逐瘀汤、补阳还五汤均可改善心衰大鼠心功能及下调CHOP、JNK的蛋白表达,上调SERCA2a的蛋白表达,效果以补阳还五汤最明显。     

益气活血药对心梗后心功能不全大鼠心肌细胞RYR2、SERCA2a及PLB mRNA表达的影响

目的:探讨党参、黄芪、丹参等益气活血药对心梗后心功能不全大鼠心肌细胞RYR2,SERCA2a,PLB mRNA表达的干预作用。方法:SD大鼠42只,冠状动脉前降支结扎术后随机分成3组:假手术组(对照组)、模型组、中药组。模型组和对照组给予生理盐水灌服。中药组给予益气活血中药浸膏灌胃,治疗4周和8周后分别杀死一半大鼠,取出心脏PCR检测RYR2、SERCA2a及PLB mRNA。结果:各组心衰大鼠RYR2、SERCA2a及PLB mRNA的表达较对照组下降,但中药干预4周后中药组RYR2、SERCA2a及PLB mRNA表达较模型组都有明显增高(P<0.05)。中药干预8周后,RYR2、SERCA2a mRNA仍然高于模型组(P<0.05)。结论:党参、黄芪等中药能抑制心梗后心衰大鼠RYR2、SERCA2a及PLB mRNA下降的作用,但缺乏特异性,可能与益气活血药能促进心肌细胞的能量代谢,防止心衰后心肌细胞的凋亡,心室重构有关。     

补肾活血复方介导钙转运蛋白肌浆网上的心肌钙转运蛋白、受磷蛋白调节内质网应激缓解慢性心衰大鼠心肌损伤

目的 观察补肾活血复方对慢性心力衰竭(chronic heart failure, CHF)大鼠钙转运蛋白肌浆网上的心肌钙转运蛋白(sarcoplasmic reticulum Ca²⁺-ATPase2a, SERCA2a)、受磷蛋白(phospholamban, PLB)的影响,进一步探讨内质网应激与心肌损伤、心衰的相互关系。方法 将雄性SPF级SD大鼠60只,随机选取15只为分成空白组,其余45只进行冠脉结扎后力竭式游泳构建CHF造型,再随机分配为心衰组、补肾活血复方组、卡托普利组。空白组与补肾活血复方组,分别应用等剂量的生理盐水与补肾活血复方(9.2 g/kg)灌胃,卡托普利组运用卡托普利(12.5 mg/kg)灌胃,各组干预4周后,运用动物心脏超声仪器记录心率、射血分数、收缩—舒张心室内径等。各组N段脑钠肽前体含量,苏木精—伊红染色观察大鼠心肌损伤情况,同时检测：SERCA2a、PLB。结果 与空白组相比,模型组的SERCA2a含量明显降低。与模型组相比,空白组、补肾活血复方组、卡托普利组表达明显升高(P<0.01)。补肾活血复方组、卡托普利组两组相...     

生脉散对糖尿病大鼠心脏钙转运蛋白的调节作用

目的:探讨生脉散对糖尿病大鼠心功能和钙转运蛋白表达的影响。方法:高脂饲料喂养雄性SD大鼠4周后注射链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组、曲美他嗪组和生脉散组,对照组全程以普通饲料喂养,以上各组灌胃给药12周并监测大鼠体质量、血糖及动态超声心动,给药后第12周Western blot检测心肌组织钙转运相关蛋白表达水平。结果:与对照组比较,糖尿病模型大鼠第8周开始出现左心室射血分数(EF)及短轴缩短率(FS)降低,左室收缩功能降低;曲美他嗪组、生脉散组自给药第8周EF、FS增高,模型组PLB表达增高, SERCA2a、PLB ~(Ser16+Thr17)、NCX1蛋白表达降低;曲美他嗪、生脉散组给药12周后PLB ~(Ser16+Thr17)、SERCA2a、NCX1表达增加。结论:生脉散可以通过调节心脏钙转运蛋白增强肌浆网钙回摄,改善糖尿病大鼠心脏收缩功能,为临床防治糖尿病并发的心脏收缩功能损伤提供理论依据。     

苓桂养心汤对扩张型心肌病大鼠心肌保护作用及肌浆网钙调控蛋白的影响

目的:明确苓桂养心汤对扩张型心肌病(DCM)大鼠心功能、心肌的保护作用;观察苓桂养心汤对DCM大鼠损伤心肌肌浆网(SR)钙调控相关蛋白的影响,探讨其可能的作用机制。方法:以60只SD大鼠腹腔注射阿霉素1.0 mg/kg/次,每周2次,连续6周,总量12 mg·kg-1建立DCM模型,另设正常组(10只),观察2周,8周后将存活DCM模型大鼠随机分为培哚普利组、苓桂养心汤组、模型组,连续灌胃给药8周。治疗后对上述各组大鼠行心脏超声检查;采血测定大鼠血清B型尿钠肽(BNP)水平及肌钙蛋白-Ⅰ(cTnI);取大鼠左心室心肌进行苏木素-伊红(HE)染色和透射电子显微镜检测大鼠心肌病理学形态。采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blot)分别测定大鼠心肌肌浆网钙泵(SERCA2a),钙释放通道(RyR2),受磷蛋白(PLB),肌集钙蛋白(Calsequestrin),L-型钙离子通道(CAV1.3)的mRNA及蛋白表达水平。结果:与模型组比较,苓桂养心汤组可以改善DCM模型大鼠的心腔大小、心功能、心肌损伤及心肌病理学形态。与模型组比较,苓桂养心汤组SERCA2a,RyR2,CAV1.3,Calsequestrin mRNA表达升高;PLB mRNA表达下降。与模型组比较,苓桂养心汤组SERCA2a及Calsequestrin蛋白表达升高;PLB蛋白表达下降。结论:苓桂养心汤能缩小DCM大鼠左心室内径,提高左心室射血分数和缩短率,降低血清BNP和cTnI水平,保护DCM大鼠损伤心肌,改善心功能。苓桂养心汤可部分调控DCM大鼠心肌肌浆网钙泵,兰尼碱受体,受磷蛋白,肌集钙蛋白,L-型钙离子通道的mRNA基因和蛋白表达。苓桂养心汤治疗DCM大鼠的作用机制,可能与通过调节DCM大鼠心肌肌浆网钙调控相关蛋白的基因及蛋白表达,改善心肌细胞钙转运及心脏舒缩功能有关。     

扩心方对扩张型心肌病大鼠肌浆网Ca2+-ATP酶及受磷蛋白的影响

目的: 研究扩心方对阿霉素诱导扩张型心肌病模型大鼠心功能、心肌损伤的保护作用,探讨扩心方作用机制。方法: 50只Wistar大鼠腹腔注射阿霉素6周建立DCM模型,开始造模4周后随机分为模型组,扩心方高、中、低剂量组,卡托普利组（每组各10只）,连续灌胃给药四周,另设10只正常对照。正常组和模型组以生理盐水灌胃。治疗结束后,对各组大鼠进行心脏超声检查,病理形态学检测,以及用反转录-聚合酶链反应和蛋白质免疫印迹法分别检测心肌组织中SERCA2α、PLB的mRNA和蛋白含量。结果: 与正常对照组相比, 模型组心功能减弱,出现心肌病理损害,SERCA2α与PLB表达异常;与模型组相比,扩心方组可以改善DCM大鼠的心功能、心肌病理学形态,同时,提高SERCA2αmRNA和蛋白表达、抑制PLB mRNA和蛋白表达。结论: 扩心能提高DCM大鼠的左心室射血分数和缩短率,减轻心肌损伤,改善心功能,同时调控DCM大鼠SERCA2α、PLB的表达。提示扩心方改善DCM大鼠心功能的作用机制,可能与纠正心肌肌浆网钙调控相关蛋白-SERCA2α、PLB的异常表达相关。     

强心方改善心肌梗死后心力衰竭大鼠心功能的实验研究

目的:观察强心方对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌重构的影响,探讨其治疗心肌梗死后心力衰竭大鼠的作用机制。方法:选取结扎左冠状动脉法制备大鼠心肌梗死后慢性心力衰竭动物模型;将心肌梗死的54只大鼠随机分为强心方组、缬沙坦组、模型组,每组18只,另选10只为对照组,对照组大鼠穿线后不行冠脉结扎,其余操作同模型组。12周后通过彩色多普勒超声心动图检测左室舒张末期内径(LVDd)、左室收缩末期内径(LVDs)、射血分数(EF);采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定血浆钙调磷酸酶(Ca N)的水平;采用Western Blotting法检测心肌钙调控蛋白肌浆网钙泵(SERCA2a)、雷尼丁受体2(RYR2)、活化T细胞核因子(NFAT3)蛋白表达。结果:模型组即未经中药和西药灌胃治疗的大鼠心功能明显下降,心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2表达均明显下降,差异有统计学意义(P 0. 05); Ca N、NFAT3的表达明显升高,差异有统计学意义(P 0. 05)。给予强心方灌胃治疗后强心方组,大鼠的心功能得到明显的改善,心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2的表达得到明显的升高,差异有统计学意义(P 0. 05),Ca N、NFAT3水平明显降低。结论:强心方能够有效的改善心力衰竭大鼠的心功能,改善钙回摄及钙释放,抑制心肌重构,其作用机制可能与抑制Ca N-NFAT3信号通路相关。     

自拟强心汤对心梗后心力衰竭大鼠心肌舒缩功能的实验研究

目的:探讨自拟强心汤对心梗后心力衰竭大鼠心肌舒缩功能的作用机制。方法:采用结扎左冠状动脉法制备大鼠心梗后慢性心力衰竭动物模型;8周后,给予药物灌胃治疗;经治疗4周后,采用通过颈动脉插管测定大鼠血流动力学状态,通过实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法和Western Bolt法检测心肌钙调控蛋白肌浆网钙泵(SERCA2a)、雷尼丁受体2(RYR2)mRNA水平及其蛋白表达量。结果:模型组大鼠的心功能显著下降,主要表现在血流动力学参数改变,其中左室舒张末期压(LVEDP)明显升高(P0.01),左室收缩压(LVSP)、左室上升最大速率(+LVdp/dtmax)及左室下降最大速率(-LVdp/dtmax)绝对值均降低(P0.05);心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2 mRNA水平及其蛋白表达量均明显下降(P0.05)。给予自拟强心汤干预后,能够有效的降低心力衰竭大鼠LVEDP水平(P0.05),升高LVSP、+LVdp/dtmax、-LVdp/dtmax水平(P0.01);能够升高心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2 mRNA及其蛋白表达量的水平(P0.05)。结论:自拟强心汤能够有效的改善心力衰竭大鼠的心功能,其机制可能与升高心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2的蛋白表达量,改善钙循环有关。     

黄芪对慢性心衰大鼠心功能及心肌肌浆网钙泵基因表达的影响

目的:探讨黄芪对慢性心衰大鼠心功能及心肌肌浆网钙泵基因(SERCA2a)表达的影响.方法:60只大鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪组(20 g/kg)和卡托普利组(0.05 g/kg).采用缩窄腹主动脉法制备慢性心衰模型,造模后第13周开始灌胃给药,连续给药12周后测定大鼠在体血流动力学指标,并采用RT-PCR、Western blot方法检测左室组织SERCA2a基因的表达.结果:模型大鼠左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)均较假手术组显著升高(P＜0.01或P＜0.001),卡托普利和黄芪均能降低模型大鼠LVSP(P＜0.05或P＜0.01)、LVEDP(P＜0.05或P＜0.01);模型组大鼠左心室SERCA2a基因表达较假手术组下调(P＜0.05),黄芪能上调模型大鼠SERCA2a基因表达(P＜0.05),而卡托普利对其表达无明显影响.结论:黄芪能改善慢性心衰大鼠心功能障碍,并以改善舒张功能为主,其机制可能与上调心肌SERCA2a基因表达有关.     

黄芪及丹参对肥大心肌细胞肌浆网钙转运干预作用研究

目的:研究黄芪注射液、丹参注射液对体外培养肥大心肌细胞钙瞬变的影响及其作用机制。方法:实验对象分为5组:对照组、模型组、黄芪组、丹参组、联合用药组,给予相应药物后于24、48、72h,用激光共聚焦显微镜测钙瞬变波荧光强度峰值及半高宽度。采用RT-PCR法及Western blot法测定钙离子转运关键蛋白肌浆网钙泵(SERCA2a)及受磷蛋白(PLB)mRNA转录水平及其蛋白表达。结果:各时点模型组钙瞬变荧光强度净变化降低,半高宽度增加,SERCA2a mRNA及蛋白含量减低,PLB mRNA含量降低,蛋白含量增加。黄芪注射液、丹参注射液及其联合应用可于不同时间点,不同程度改善钙瞬变荧光强度净变化、半高宽度、SERCA2a mRNA及蛋白含量。结论:黄芪注射液,丹参注射液可以改善肥大心肌细胞钙瞬变功能,其机制可能与改善SERCA2a及PLB基因及蛋白含量有关。     

益心舒胶囊对心力衰竭大鼠心肌细胞钙调控蛋白的影响

在确定益心舒胶囊(Yixinshu Capsules,YXS)治疗心力衰竭(heart failure,HF)的基础上,从心肌细胞钙调控蛋白的角度探究YXS促进心衰大鼠心脏功能恢复的分子机制。将SD大鼠的左冠状动脉前降支结扎4周制备心肌缺血所致的心力衰竭动物模型,将大鼠随机分为假手术组(Sham,生理盐水)、模型组(HF,生理盐水)、益心舒胶囊高剂量组(HF+YXS-H,1 600 mg·kg~(-1)·d~(-1))、益心舒胶囊低剂量组(HF+YXS-L,800 mg·kg~(-1)·d~(-1))和阳性药缬沙坦组(HF+VST,8 mg·kg~(-1)·d~(-1)),连续灌胃6周后,处死大鼠,取心肌组织,采用实时定量PCR(RT-PCR)及蛋白质印迹(Western blot)法测定与心肌细胞钙调控相关基因及蛋白的表达。结果显示,与模型组相比,YXS治疗后增强心肌钙调控相关基因Atp2a2,Ryr2,CACNA1C和PRKACA转录水平,并提高p-Ryr2,CACNA1C及SERCA2a蛋白水平,而降低NCX1水平。另一方面,YXS治疗明显降低RIP3及其底物CaMKⅡ蛋白磷酸化水平,并增强了PLB磷酸化表达。综上所述,YXS治疗调节心肌钙调控相关基因及蛋白的表达,同时通过抑制RIP3及其底物CaMKⅡ蛋白磷酸化的水平,并促进PLB上的Ser16残基磷酸化,增加了SERCA2a蛋白表达,表明YXS可能通过CaMKⅡ/PLB/SERCA2a通路调节心肌钙稳态,提高肌浆网钙泵摄钙能力,使细胞内游离Ca~(2+)趋于稳定,从而促进心衰大鼠心脏功能的恢复。该研究揭示了YXS在心力衰竭治疗中可能的作用机制,特别是从干预钙调控蛋白的角度,促进了YXS的临床应用。     

丹参总酚酸对慢性心衰大鼠肌浆网Ca~(2+)-ATP酶、受磷蛋白表达的影响

目的:观察丹参总酚酸对慢性心力衰竭大鼠心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(Ca2+-ATPase,SERCA)、受磷蛋白(Phospholamban,PLB)的蛋白表达的影响,探讨丹参总酚酸抗心力衰竭的作用机制。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支造成心肌梗死后慢性心力衰竭模型,连续给予丹参总酚酸4周后,采用蛋白印迹(Western Blot)技术检测心肌组织的SERCA和PLB蛋白表达水平及PLB的磷酸化水平。结果:与心力衰竭模型组相比,丹参总酚酸能明显升高SERCA及磷酸化受磷蛋白(phosphorylated Phospholamban,P-PLB)的蛋白表达及PLB的磷酸化水平。丹参总酚酸能明显降低PLB/SERCA比值。结论:丹参总酚酸能升高SERCA的蛋白表达,升高P-PLB的蛋白表达及PLB的磷酸化水平,降低PLB/SERCA比值,减轻PLB对SERCA功能的抑制,这可能是丹参总酚酸抗心力衰竭的机制之一。     

大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤模型肌浆网钙调控相关蛋白表达及当归补血汤的干预作用

目的建立缺氧/复氧大鼠H9c2心肌细胞损伤模型,观察心肌细胞肌浆网钙调控相关蛋白表达及当归补血汤对H9c2细胞缺氧/复氧损伤钙超载的影响。方法 JC-1染色流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位,Fluo-3 AM钙离子荧光探针检测细胞内钙离子浓度,RT-PCR荧光相对定量检测大鼠心肌肌浆网Ca转运ATP酶(SERCA2a)、L型钙通道(CAV1.3)、兰尼碱受体(RyR1,RyR2)、受磷蛋白(PLB)、肌集钙蛋白(CASQ)的mRNA表达水平。结果与正常对照组比较,模型组细胞早期凋亡显著增加(P0.05),细胞内钙离子浓度增加明显(P0.05),CAV1.3mRNA表达水平显著升高(P0.05),RyR1和CASQmRNA表达明显降低(P0.05)。SERCA2a和PLB mRNA表达水平亦降低但差异无统计学意义。当归补血汤干预后,与模型组比较,能够显著降低复氧损伤细胞的早期凋亡率(P0.05),细胞内钙离子浓度降低,差异具有统计学意义(P0.05)。SERCA2a和CASQ mRNA水平显著增加(P0.05),PLB和RyR1 mRNA虽有不同程度的增加,CAV1.3mRNA水平降低,但差异均无统计学意义(P0.05)。结论 H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤后出现明显的钙超载及肌浆网钙调节蛋白调节紊乱现象,当归补血汤能够通过升高肌浆网钙调节蛋白SERCA2a和CASQ mRNA的表达,减轻复氧后钙超载,降低复氧损伤H9c2心肌细胞早期凋亡率。     

补阳还五汤对大鼠脊髓损伤后BMPRⅠa,Ⅱ表达的影响

目的:探讨补阳还五汤对脊髓损伤后轴突再髓鞘化与BMPR(骨成型蛋白受体)Ⅰa,Ⅱ蛋白表达的影响。方法:将90只大鼠随机分为补阳还五汤组、模型组、假手术组,每组再分为3小组,每小组10只;假手术组单纯咬除T10椎板,不损伤脊髓,模型组和补阳还五汤组采用自制改良的Allens撞击器来制备T10节段脊髓损伤大鼠模型,术后补阳还五汤组给予补阳还五汤浓缩液灌胃4周,各组大鼠于造模后1d、1周、2周、3周、4周进行行为学BBB功能评分(Basso,BeattieBresnalan locomotor rating scale),于造模后1周、2周、4周,随机选取每组中的每1小组,处死后取T10脊髓组织,通过苏木精-伊红染色观察脊髓组织形态学改变,通过免疫组化检测BMPRⅠa,Ⅱ蛋白表达情况。结果:造模后4周,补阳还五汤组大鼠BBB评分明显高于模型组,P0.05,差异有统计学意义。分析免疫组化检测结果提示:造模后1周、2周、4周,模型组脊髓损伤节段BMPRⅠa,Ⅱ蛋白表达量大量增加,假手术组BMPRⅠa蛋白少量表达,补阳还五汤组BMPRⅠa,Ⅱ蛋白表达少于模型组,各组组间差异有统计学意义(P0.05)。结论:补阳还五汤可作用于脊髓损伤后BMP(骨形态发生蛋白)信号通道的相关蛋白,并对其有一定的抑制作用,降低BMPRⅠa,Ⅱ受体的表达,促进脊髓损伤后残存轴突再髓鞘化,进而促进神经功能修复。     

益气活血方对慢性心力衰竭大鼠心肌NCX与SERCA2a mRNA及蛋白表达水平的影响

目的观察益气活血方(由丹参、黄芪、香加皮等组成)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌钠钙交换蛋白(Sodium-calcium exchanger,NCX)与肌浆网钙泵-2a(SR calcium ATPase-2a,SERCA2a)mRNA及蛋白表达水平的影响,初步探讨益气活血方改善慢性心衰大鼠心功能的作用机制。方法采用结扎大鼠冠状动脉左前降支的方法制备急性心肌梗死后慢性心力衰竭模型。实验分6组:假手术组,模型组,卡托普利组,益气活血方高、中、低3个剂量组,连续ig给药4周后取材,检测心肌组织NCX与SERCA2a mRNA及蛋白表达。结果各给药组均可不同程度的下调NCX mRNA的表达,上调SERCA2a mRNA的表达,其中益气活血方高、低剂量组以及卡托普利组与模型组比较有显著性差异(P<0.05);各给药组均能降低NCX/SERCA2a mRNA的比值,与模型组比较差异显著(P<0.05)。各给药组均有下调NCX蛋白、上调SERCA蛋白表达的趋势,但与模型组相比无显著差异(P>0.05)。结论益气活血方能够降低CHF大鼠NCX mRNA的表达,升高SERCA mRNA的表达,降低NCX/SERCA mRNA的比值,调节心肌细胞内钙循环,从而改善心肌的舒缩功能,其可能为益气活血方改善心脏功能、抗心力衰竭的机制之一。     

补阳还五汤对腹主动脉缩窄致大鼠心肌肥厚肌浆网钙摄取功能的影响

目的 观察补阳还五汤对腹主动脉缩窄致大鼠心肌肥厚的影响以阐明其对心肌肌浆网钙泵（sarcoplasmic reticulum calcium,SERCA2a）摄取的分子调控机制。方法 采用腹主动脉缩窄法制作压力超负荷大鼠心肌肥厚模型。造模4周后,分为假手术组（S组）,模型组（M组）,依那普利组（E组）,补阳还五汤组（BYHWD组）,给药12周后观察各组大鼠的左室收缩压（left ventricular systolic pressure,LVSP）、左室舒张末压（left ventricular end diastolic pressure,LVEDP）、左室内压最大上升速度（+dp/dtmax）、左室内压最大下降速度（ dp/dtmax）、心输出量（cardiac output,CO）、心脏及左心质量指数变化（heart mass index,HMI;left ventricular mass index,LVMI）,并且采用ELISA法检测血清中心房利钠肽（atrial natriuretic peptide,ANP）、脑钠肽（brain natriuretic peptide,BNP）的含量,以及观察各组肌浆网中SERCA2a活性以及SERCA2a、受磷蛋白（phospholamban,PLN）及磷酸化的表达情况。结果 与S组比较,M组LVSP及LVEDP显著升高（P<0.05）, dp/dtmax及CO下降明显（P<0.05）,心肌组织明显肥厚,血清中ANP、BNP含量增高（P<0.05）,SERCA2a活性及表达量下降（P<0.05）,SERCA2a/PLN比值及PLN磷酸化程度降低（P<0.05）。与M组比较,BYHWD组可明显降低LVEDP,提高 dp/dtmax及CO（P<0.05）;可显著减轻心肌肥厚,降低血清ANP及BNP含量（P<0.05）,增加SERCA2a活性（P<0.05）,提高SERCA2a、Ser16及Thr17蛋白表达相对含量（P<0.05）;具有显著提高SERCA2a/PLN比值和PLN磷酸化程度的作用（P<0.05）。结论 补阳还五汤能够改善心衰大鼠血流动力学,提高心输出量,减轻心肌肥厚及提高心肌SERCA2a摄取功能。     

燧心胶囊对慢性心力衰竭大鼠保护作用及机制研究

目的:探究燧心胶囊对慢性心力衰竭(CHF)大鼠的保护作用及机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为5组:假手术组(A组)、模型组(B组)、燧心胶囊高剂量(10.8 g/kg)组(C组)、燧心胶囊低剂量(2.7 g/kg)组(D组)、卡托普利(5.83 mg/kg)组(E组)。连续给药12周后,测定各组大鼠心输出量,血流动力学监测左室收缩压(LVESP)、左室舒张压(LVEDP)、左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和左心室内压最大下降速率(-dp/dtmax),心肌组织钠钙交换蛋白(NCX)及肌浆网钙泵2a(SERCA2a)蛋白行IHC染色,利用PCR及Western Blot(WB)实验检测心肌组织中NCX和SERCA2a mRNA及蛋白表达量。结果:①与A组比较,B组NCX蛋白表达量增多,SERCA2a蛋白表达量减少;心输出量降低(P0.05);左心室收缩末期内径LVESP及左心室舒张末期内径LVEDP均显著升高(P0.05),±dp/dtmax明显减慢(P0.05);NCX mRNA及蛋白表达量增多(P0.05),SERCA2a mRNA及蛋白表达量减少(P0.05)。②与B组比较,C组、E组NCX蛋白表达量减少,SERCA2a蛋白表达量增多;心输出量增多(P0.05),LVESP及LVEDP均显著降低(P0.05),±dp/dtmax明显升高(P0.05);NCX mRNA及蛋白表达量减少(P0.05),SERCA2a mRNA及蛋白表达量增多(P0.05)。③D组大鼠上述结果与B组大鼠比较,差异无统计学意义(P 0.05)。结论:燧心胶囊对慢性心力衰竭大鼠心肌组织具有保护作用,可通过下调NCX的表达、上调SERCA2a的表达,调节CHF大鼠的心室舒缩功能。     

补阳还五汤对局灶性缺血模型大鼠认知能力及PI3/KAKT信号通路的影响

目的:观察补阳还五汤对局灶性缺血模型大鼠认知能力的改善作用,同时探讨其对PI3K-AKT信号通路的影响。方法:选取30只SD大鼠按数字随机法分为假手术组、模型组及中药组,每组10只。模型组及中药组接受改良急性局灶性缺血模型制备(MCAO术)成模后中药组大鼠接受补阳还五汤灌胃,1次/d,连续干预14 d。假手术组及模型组大鼠接受等剂量的生理盐水灌胃,时间同中药组。干预结束后,比较各组行为学、脑梗死体积、海马形态学、脑组织PI3K、Akt、p-Akt蛋白/mRNA水平变化。结果:补阳还五汤可明显缩短大鼠游泳轨迹路程及逃避潜伏期,与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05);补阳还五汤可缩小MCAO大鼠的脑梗死体积,与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05);补阳还五汤可减少MCAO后大鼠海马组织病理损伤征象,上调PI3K、p-Akt、Bcl-2蛋白及mRNA表达,降低Bax蛋白及mRNA水平,与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:补阳还五汤可改善MCAO大鼠认知能力,其作用机制可能与介导PI3K-AKT信号通路有关。