lncRNA-135调控miR-592维持小鼠胚胎干细胞多能性

目的筛选并确定调控miR-592作用的关键lncRNA,探讨其对miR-592沉默靶基因cep135的调控作用。方法利用lncRNA基因芯片筛选小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells, mESCs)及KO miR-592 mESCs中差异的lncRNA从而找出关键调控分子lncRNA-135。利用转染试剂干扰lncRNA-135的表达,使用Western印迹法、双荧光素酶报告系统及免疫细胞化学染色等技术检测lncRNA-135对miR-592及其靶基因cep135的表达影响,进而阐明lncRNA-135对mESCs多能性的调控作用。结果lncRNA基因芯片分离确定了527条差异表达的lncRNA,经过生物信息学分析及qRT-PCR验证,确定了评分最高的lncRNA-135为关键作用分子。双荧光素酶报告系统证实了lncRNA-135能够结合miR-592以干扰其沉默靶基因cep135。而Western印迹法和免疫细胞化学染色结果则证实lncRNA-135通过作用于miR-592,阻止其对cep135的抑制作用,进而促进mESCs的多能性。结论lncRNA-135可以通过充当miR-592的“分子海绵”从而调节与mESCs多能性维持有关的多个基因的表达,这将可能帮助建立调控性miRNA网络与mESCs多能性之间的联系。     

药物性肝病135例回顾性分析

分析药物性肝病的病因和临床特点,提高临床医师对该病的认识。方法采用回顾性分析方法对135例药物性肝病住院患者的用药史、临床表现、肝功能指标以及治疗转归进行综合分析。结果引起肝病的相关药物中,抗生素类药占20.00%(27/135),抗肿瘤药及免疫抑制剂占17.04%(23/135),解热镇痛抗炎药占13.33%(18/135),抗结核药占11.85%(16/135),中药占10.37(14/135),降糖药占4.44%(6/135),抗甲状腺类药占4.44%(6/135),激素类药占3.70%(5/135),抗痛风药占2.96%(4/135),降脂药占2.96%(4/135),抗癫痫药占1.48%(2/135),减肥药占0.74%(1/135),皮肤病用药占0.74%(1/135),藏药占0.74%(1/135),升白细胞药占0.74%(1/135),除草剂占0.74%(1/135),疫苗占0.74%(1/135),另有4例(2.96%)用药不详。无任何临床表现38例(28.29%),纳差或乏力58例(42.96%),上腹部不适27例(20%),黄疸58例(42.96%),皮疹20例(14.83%),瘙痒16例(11.85%),发热14例(10.37%),肝大11例(8.29%)。经停药并给予保肝解毒治疗,82.22%的病例预后较好。结论临床上多类药物可引起药物性肝病,其发病无性别差异,中老年病人多发。临床医师应提高对药物性肝病的认识,掌握其临床特点,重视对药物性肝病的防治。     

miR-135b通过靶向FOXO1促进子宫内膜癌细胞的增殖

目的探讨miR-135b在子宫内膜癌中的表达及对子宫内膜癌细胞增殖的作用的机制。方法运用RT-PCR的方法检测22 对子宫内膜癌组织及相应的癌旁组织中的miR-135b 和FOXO1 的表达;运用RT-PCR 的方法检测JEC、Ishikawa、HEC-1-B、 RL-952这4种子宫内膜癌细胞株中miR-135b和FOXO1的表达。分别转染miR-135b的模拟物抑制物于子宫内膜癌细胞株,通 过RT-PCR检测转染的效果,通过MTT增殖试验检测对子宫内膜癌细胞增殖的影响。通过RT-PCR的方法检测FOXO1 mRNA 的变化,Western blotting 检测在FOXO1 蛋白的变化。结果miR-135b 在子宫内膜癌组织中较对应的癌旁组织表达增高（P< 0.05）, FOXO1在子宫内膜癌组织中较对应的癌旁组织表达降低（P<0.05）。荧光定量PCR显示子宫内膜癌细胞中miR-135b与 FOXO1表达趋势成负相关。miR-135b能促进子宫内膜癌细胞增殖（P<0.05）。上调miR-135b能够降低FOXO1 mRNA和蛋白 的表达（P<0.05）,下调miR-135b能够提高FOXO1 mRNA和蛋白的表达（P<0.05）。结论miR-135b在子宫内膜癌的发生发展 中发挥重要的作用,其部分分子机制可能是通过调控靶基因FOXO1而发挥作用。     

miR-135a-5p通过调控Bcl-2/Bax通路对青光眼视网膜神经节细胞凋亡的作用机制

目的 探讨miR-135 a-5 p与Bcl-2/Bax间的关系及其对青光眼视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡的作用和机制.方法 建立BALB/C小鼠青光眼模型,检测眼压和视网膜RGCs数量及miR-135 a-5 p表达.实验用RGCs细胞分为miR-135 a-5 p组、空白组、miR-135 a-5 p抑制组,mi...     

miRNA-135b 对鼻咽癌细胞侵袭 和转移的促进作用

目的 研究miRNA-135b 对鼻咽癌CNE1 细胞系侵袭和转移的影响和作用机制。方法 用逆转录聚 合酶链反应（RT-PCR）检测miRNA-135b 在鼻咽癌CNE1 细胞系中的表达,分别在鼻咽癌CNE1 细胞系中 过表达和下调miRNA-135b,通过微孔滤膜培养小室及双室联合培养系统（Transwell TM）检测肿瘤细胞迁移和 侵袭能力,采用Western blotting 检测大型肿瘤抑制因子同源蛋白2（LATS2）的表达。结果 miRNA-135b 在 鼻咽癌CNE1 细胞系中高表达,通过增强miRNA-135b 表达,鼻咽癌CNE1 细胞的侵袭和转移能力有所提升; 通过靶向miRNA-135b 干扰载体,下调miRNA-135b 表达,鼻咽癌CNE1 细胞的侵袭和转移能力有所下降。 增强miRNA-135b 表达,LATS2 活性和表达下降,而下调miRNA-135b 表达,LATS2 活性和表达上升。结 论 miRNA-135b 过表达会提升鼻咽癌CNE1 细胞的侵袭和转移能力,下调miRNA-135b 表达可有效抑制鼻 咽癌细胞增殖,促进细胞凋亡。miRNA-135b 的表达可能通过影响LATS2 活性影响鼻咽癌细胞的生长。     

低钾型周期性瘫痪135例临床分析

目的分析135例低血钾型周期型瘫痪的发病原因,临床表现特点及治疗方法。方法对本院近五年来收治135例低血钾型周期性瘫痪的临床资料进行回顾性分析。结果通过口服、静脉补钾后135例低血钾型周期性瘫痪全部痊愈。结论寒冷、疲劳、饱餐等原因是低血钾型周期性瘫痪的诱发因素,避免诱发因素结合临床口服静脉补钾治疗,疗效满意。     

miR-135b对子宫内膜癌HOXA10基因表达的调控作用

目的 探讨miR-135b对子宫内膜癌中HOXA10基因表达的调控作用.方法 RT-PCR方法检测28例子宫内膜癌组织及相应癌旁组织中miR-135b及HOXA10的表达;用miR-135b模拟物及抑制物转染RL-952子宫内膜癌细胞株,RT-PCR检测转染效果并检测FOXO1 mRNA的变化,划痕实验检测转染后对细胞迁移的影响,流式细胞技术检测转染对细胞增殖的影响,Western blot检测HOXA10蛋白的变化.结果 miR-135b在子宫内膜癌组织中较对应的癌旁组织表达升高(P<0.05),HOXA10则降低(P<0.05),经miR-135b模拟物转染后,子宫内膜癌细胞中HOXA10 mRNA和蛋白的表达水平下降(P<0.05);经miR-135b抑制物转染后,子宫内膜癌细胞中HOXA10 mRNA和蛋白的表达水平升高(P<0.05);miR-135b能促进子宫内膜癌细胞的增殖(P<0.05).结论 miR-135b 在子宫内膜癌发生发展中有一定作用,子宫内膜中HOXA10的异常表达受miR-135b的调控.     

星状神经节阻滞治疗原发性痛经的疗效观察

目的:观察采用星状神经节阻滞(SGB)治疗原发性痛经的临床效果。方法:选取我院就诊的原发性痛经患者135例,采用星状神经节阻滞法进行治疗。观察治疗前后症状及临床体征的变化。结果:痊愈、显效、有效、无效依次为60.0%(81/135例)、20.0%(27/135例)、13.3%(18/135例)、6.7%(9/135例)。结论:星状神经节阻滞是治疗原发性痛经的有效方法。     

由脑膜炎奈瑟菌W135血清群引起的5例脑膜炎球菌病患儿的临床表现和转归

在法国由脑膜炎奈瑟菌W135血清群(N.m eningi-tidis W135)引起的脑膜炎球菌病正在增加,在儿童缺乏有关这些感染的临床及其转归的资料,作者对在2000年6月至2002年12月间住院的5例脑膜炎奈瑟菌W135血清群感染患儿进行了报道。其常有脑膜外脓毒性和(或)非脓毒性并发症,对1例迟发的脑膜炎球菌感染后综合征进行了报道。在脑膜炎奈瑟菌W135血清群感染患儿中需要对潜在的脑膜外并发症进行仔细的临床评估,并且需要对患儿进行长期随访。由脑膜炎奈瑟菌W135血清群引起的5例脑膜炎球菌病患儿的临床表现和转归@Faye A.$Serv.de Péediat.Gén., H…     

石家庄市首例W135群流行性脑脊髓膜炎病例的回顾性调查

目的回顾性分析石家庄市2013年首次发现的W135群流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)病例特征,为流脑防控提供依据。方法对国家急性脑炎/脑膜炎症状监测项目报告的脑炎/脑膜炎病例进行流行病学个案调查,对其血标本和脑脊液标本进行常规检测、培养、RT-PCR检测。结果病例临床表现为高热、剧烈头痛、意识障碍等症状,脑脊液呈化脓性改变,与以往流脑特点相似;病前无同类病例接触史、流脑疫苗接种史及外出史。RT-PCR检测脑脊液W135群脑膜炎奈瑟菌阳性。结论 2013年石家庄市首次发现W135群流脑病例,提示存在W135群流脑潜在暴发的可能,应加强监测,采取有效措施,避免疫情蔓延。     

虚拟切片在组织学实验教学中的应用

虚拟切片是以多重分辨率格式存储、全组织切片的高倍率数字图像,用特殊的软件可在网页上浏览这些切片,模拟在显微镜下观察传统的组织玻片。虚拟切片作为一种新型医学形态学科实验教学手段,应用于组织学教学和考试,解决了传统形态学实验应用普通显微镜存在的多种问题,实现了资源共享,促进了教学质量和教学效果提高。本文主要对利用虚拟切片进行组织学实验教学中的优势与出现的问题进行探讨,旨在让这一先进的教学手段在形态学实验教学中得到更合理更科学的应用。     

HE染色切片褪色后免疫组化染色方法研究

目的探讨HE染色切片褪色后免疫组织化学染色方法。方法HE染片放人二甲苯中浸泡,清除盖玻片和树胶;梯度酒精水化,蒸馏水洗涤;置入0．25％高锰酸钾5rain,蒸馏水洗,40．5％草酸溶液漂白,蒸馏水洗,自然晾干;滴PLLS1滴于组织片上,摇匀,将切片在60℃烘箱中烘60min烘干;PBS洗5rain×3次;组织需要进行水浴抗原热修复;与对照片按标准S-P方法进行免疫组化染色。结果所有对照片与试验片均为阳性,无一例脱片。结论此方法可用于HE片褪色做免疫组化染色,具有实用价值。     

深圳市气传花粉调查分析

目的对深圳市区空气中气传花粉的种类分布及其飘散情况进行调查,分析本地区致敏气传花粉的主要种类,为防治气传花粉所导致的变应性疾病及本地区城市绿化品种的选择提供资料。方法在深圳市福田区儿童医院设点,于6米高度放置花粉采集器,将涂有软凡士林粘附剂的25.4 mm×76.2 mm×1 mm的载玻片,放置于花粉采集器内,每24小时更换载玻片,连续一年时间,用甘油胶染色,光镜下观察花粉的种类及数量,并进行记录。全年共曝片357张,丢失7张,破损1张。结果深圳全年均有花粉飘散,曝片共识别花粉26种,9 432粒。3～5月为高峰,曝片见花粉5 955粒,占全年总数63.14%,12月~1月最少,曝片见仅见花粉127粒,占全年总数1.35%。播散花粉中木麻黄花粉数量最多,4 382粒,占全年总数46.46%,3～4月为高峰期,除6～8月未见播散外,其余时间均有不同数量出现;其次为苏木科花粉,1 897粒,占全年总数20.11%。结论深圳市全年均有气传花粉播散,每年3～5月为高峰期,主要气传花粉种类为木麻黄属和苏木科。     

三种固定液对大、小鼠肠道组织石蜡切片质量的影响

目的对比三种固定液对大、小鼠肠道组织石蜡切片质量的影响,优选大、小鼠肠道组织切片固定液。方法选择三种常用的固定液:10%中性福尔马林固定液,Bouin’s固定液,改良Davidson’s固定液,对SD大鼠和KM小鼠小肠组织进行固定,常规制作石蜡切片、HE染色,对比观察其染色效果。结果三种固定液对大、小鼠肠道组织石蜡切片质量存在影响,单纯福尔马林固定的切片存在肠粘膜上皮脱落、坏死的假象;Bouin’s固定液和改良Davidson’s固定液则可避免这一假象的出现,而且切片结构更精细、清晰,但是,HE染色的色彩不如单纯福尔马林固定液的鲜艳。结论 Bouin’s固定液和改良Davidson’s固定液固定的大、小鼠肠道组织的石蜡切片质量优于10%中性福尔马林固定液。     

两种氨基修饰的基因芯片表面制备方法比较

目的 探讨两种氨基化方法修饰玻片表面的过程及其在基因芯片制备中应用的可行性。方法 玻片经清洗、硅烷化后,一种用多组分多氨化合物包被,经次亚苯基二异硫氰酸盐表面活化;另一种方法采用的包被剂是丙烯酸-丙烯酰胺单体,活化剂是碳二亚胺/N-羟基琥珀亚胺酯官能团分子。将被修饰好的玻片用于λ噬菌体基因组DNA芯片的制备,并进行杂交检测分析。结果 经两种方法修饰后玻片表面分别形成分支结构和聚合物涂层,与商业化的芯片比较发现,两种芯片杂交、扫描检测后显示所得点阵的杂交信号均匀、稳定、清晰,杂交点饱满、同一性好。结论 两种方法修饰的玻片用于制备基因芯片均取得了成功,其中丙烯酸-丙烯酰胺聚合物包被法处理过程简单、成本低廉、能大规模生产,是一种较理想的芯片表面制备方法。     

两种氨基修饰的基因芯片表面制备方法比较

目的探讨两种氨基化方法修饰玻片表面的过程及其在基因芯片制备中应用的可行性。方法玻片经清洗、硅烷化后，一种用多组分多氨化合物包被，经次亚苯基二异硫氰酸盐表面活化；另一种方法采用的包被剂是丙烯酸-丙烯酰胺单体，活化剂是碳二业胺／N-羟基琥珀亚胺酯官能团分子。将被修饰好的玻片用于λ噬菌体基闲组DNA芯片的制备，并进行杂交检测分析结果经两种方法修饰后玻片表面分别形成分支结构和聚合物涂层，与商业化的芯片比较发现，两种芯片杂交、扫描检测后显示所得点阵的杂交信号均匀、稳定、清晰，杂交点饱满、同一性好。结论两种方法修饰的玻片用于制备基因芯片均取得了成功，其中丙烯酸-丙烯酰胺聚合物包被法处理过程简单、成本低廉、能大规模生产，是一种较理想的芯片表面制备方法。     

海南省16个疟区市县“三热”病人血片抽查复检结果分析

目的了解基层疟原虫镜检人员的镜检技术、血片制作和染色水平,提高镜检质量,为海南省2018年前实现消除疟疾目标提供科学依据。方法 2008～2010年对琼海市、琼中县等16个市县＂三热＂病人血片抽样复检。结果复检血片21 817张,复检符合率为99.3%;其中阴性血片和阳性血片复检符合率分别为99.99%、93.14%;血片制作和染色优中等级血片分别占92.33%和88.89%。结论镜检符合率都达到了较高水平,但漏检、假阳性、虫种错检及染色效果不佳的问题仍然存在。因此,有针对性的加强基层镜检人员的培训,提高其镜检技术、血片制作和染色水平,以及镜检人员的责任心,是目前疟防工作的重要内容之一。     

Capture of cervical exfoliative cells on a glass slide coated by 3-glycidyloxypropyl trimethoxysilane and poly-L-lysine

A new modification method for glass slides was developed and applied to make ThinPrep Pap smears, in order to increase the adhesion ability of cervical exfoliative cells. 3-glycidyloxypropyl trimethoxysilane (GOPS) was coated on the glass slides firstly on the slides, then poly-L-lysine (PLL) was covalently modified onto the above epoxy-terminated slides to form GOPS-PLL double decorated slides. The modified slides were characterized using X-ray photoelectron spectroscopy (XPS) and atomic force microscopy (AFM). The cell adhesion ability effect was tested and compared with traditional PLL coated slides by fixing the cervical exfoliative cells on the double adorned slides. The control test was conducted by the bare glass slides unmodified. The cell morphology of cervical exfoliative cells adhered on different slides was observed under the microscope after Papanicolaou staining. The number of cervical exfoliative cells on the unmodified slides, PLL coated slides and GOPS-PLL coated slides was 1030±300, 3283±226 and 4119±280 (n=12), respectively. The data among the three different modification methods showed significant differences (one-way analysis of variance, ANOVA test, P<0.05). The cell capturing effect of the GOPS-PLL slide was the best among the three different modified slides. In addition, the GOPS-PLL slide could enhance the uniformity of the adhered cells and be widely applied to the ThinPrep system for cervical carcinoma screening to increase the accuracy rate of diagnosis.     

PowerPoint辅助临床理论课教学存在的问题

PowerPoint制作方面的问题主要有：单页幻灯片文字太多，每课时幻灯片页数过多，多媒体资料缺乏或应用不当，缺乏美感等。幻灯片辅佐讲课中的问题主要有：教师成了幻灯片解说员，讲述内容过多，忽视传统教具的使用等。丰富的临床医学知识，高超的授课技能和良好审美能力的结合，是实现在临床理论课教学中完美制作和正确使用PowerPoint的根本途径。     

应用不同方法对新生儿胆红素检测的结果分析

目的　了解不同测试方法对新生儿胆红素 (NBIL)结果的影响。方法　分别用干片未结合胆红素及结合胆红素 (BuBc)、干片总胆红素 (TB)以及传统的湿化学法同时测定 40例新生儿黄疸患儿血清中总胆红素含量。结果　干片BuBc测定的结果明显高于干片TB测定的值 ,两者存在显著差异 (P <0 .0 5 ) ;干片BuBc与湿化学法测定的结果亦具有明显差异 (P <0 .0 5 ) ;而干片TB和湿化学法测定的结果之间没有差别 (P >0 .0 5 )。结论　不同的测定方法可以导致新生儿胆红素结果的偏差。建议临床医生自始至终选用同一种测试方法 ,以免方法学差异带来误导