甲烷生理盐水对肝缺血再灌注小鼠肝线粒体的影响

 目的 在肝缺血再灌注小鼠模型中研究甲烷对肝线粒体的影响。方法 将C57小鼠18只随机分为空白对照组(SHAM组)、缺血再灌注组(IR组)和甲烷盐水治疗组(IR+CH4组),每组6只,采用70%肝缺血再灌注模型,IR+CH4组再灌注开始前予甲烷生理盐水10 ml/kg腹腔内注射,留取标本检测氧化、抗氧化、线粒体相关指标。结果 与IR组相比,IR+CH4降低了ROS水平(t=3.154,P=0.0083)及MDA(t=3.738, P=0.028)水平,提高了GSH(t=2.687, P=0.0177)及SOD(t=3.480, P=0.0037)水平;采用Westen blot 检测蛋白的表达,与对照组相比,IR组线粒体融合蛋白Mfn1(q=7.57,P＜0.05)和OPA1(q=6.41,P＜0.05)表达减少,分裂蛋白DLP1(q=3.718,P＜0.05)表达增加;与IR组相比,IR+CH4组融合蛋白Mfn1(q=5.277, P＜0.05)增加,分裂蛋白DLP1(q=6.700,P＜0.05)表达下降;IR组PINK1(q=4.606, P＜0.05)表达上调,IR+CH4组PINK1(q=3.922, P＜0.05)表达下降。结论 甲烷生理盐水可降低氧化应激,提高机体抗氧化能力,促进线粒体融合,减少分裂,促进线粒体功能的恢复。     

高原武警官兵情绪状态及影响因素分析

 目的 探讨入伍时间、海拔高度、焦虑、抑郁和睡眠对高原武警官兵情绪状态的影响。方法 采用多阶段随机抽样方法,于 2015年4-10月,选取西藏地区的武警官兵共1621名进行横断面调查,采用情绪状态量表(POMS)评价其情绪状态。结果 (1)入伍时间(F=3224.000,P＜0.001)、海拔高度(F=1614.000,P＜0.001)、焦虑(F=4832.000,P＜0.001)、抑郁(F=4832.000,P＜0.001)、睡眠(F=1614.000,P＜0.001)对情绪状态的紧张-焦虑(T)、忧郁-沮丧(D)、愤怒-敌意(A)、有力-好动(V)、疲惫-惰性(F)、困惑-迷茫(C)六个维度的得分均有明显影响(P＜0.001);(2)入伍时间在3~5年的官兵,T、D、F和C四个维度的得分最低,而V维度的得分最高。海拔高度越高,焦虑、抑郁越重、睡眠越差,T、D、A、F、C得分越高,V得分越低;(3)多重线性回归模型结果显示:在调整了年龄、学历、婚姻状况和官兵类别后,入伍时间与V和F得分有关;海拔高度与T、D、A、F和C得分有关,与V得分无关;焦虑程度和睡眠质量与POMS量表的6个维度得分均有关系(P＜0.05)。结论 入伍3~5年的一期士官情绪状态最好,应作为部队的中坚力量。心理和睡眠干预,是改善武警官兵情绪状态的有效途径。     

miR-30a-5p和NUAK1在非小细胞肺癌中的表达及对A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响

 目的 研究miR-30a-5p和靶基因NUAK1在非小细胞肺癌中的表达及对A549细胞增殖、迁移侵袭的影响。方法 收集2016-09至2019-03在保定市第一医院行手术切除治疗的非小细胞肺癌患者癌组织和癌旁组织标本64例,QPCR和Western blot分别检测非小细胞肺癌组织样本和细胞中miR-30a-5p和NUAK1的表达;TargetScan网站预测miR-30a-5p与NUAK1间的靶向关系,双荧光素酶报告基因实验和Western blot进行验证;MTT和Transwell实验检测miR-30a-5p及联合过表达NUAK1对A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果 非小细胞肺癌组织中miR-30a-5p的相对表达量(0.33±0.14)低于癌旁组织(1.00±0.21),差异有统计学意义(t=21.237,P＜0.05);非小细胞肺癌组织中NUAK1 mRNA表达(4.13±1.87)和蛋白表达(3.41±1.62)均高于癌旁组织(1.00±0.17、1.00±0.16),差异有统计学意义(t=13.335、11.844,P＜0.05)。非小细胞肺癌细胞系H460、H1299、A549中miR-30a-5p表达量(0.35±0.03、0.51±0.05、0.28±0.03)低于人正常肺上皮细胞BEAS-2B(1.00±0.11),差异有统计学意义(F=77.100,P＜0.05);H460、H1299、A549细胞中NUAK1 mRNA相对表达量(2.98±0.30、2.39±0.24、3.42±0.36)和蛋白相对表达量(3.06±0.31、2.27±0.23、4.12±0.41)均显著高于BEAS-2B细胞(1.00±0.09、1.00±0.11),差异有统计学意义(F=46.660、63.070,P＜0.05)。结论 miR-30a-5p可通过靶向NUAK1抑制非小细胞肺癌细胞A549增殖、迁移和侵袭,提示miR-30a-5p和NUAK1可能成为一种新的临床诊断和治疗非小细胞肺癌的靶点。     

LPS对A549和Hela细胞SPLUNC1蛋白表达的影响

 目的 探讨脂多糖(LPS)对人肺腺癌上皮A549细胞和人子宫颈癌上皮Hela细胞短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1(short palate, lung and nasal epithelium clone 1, SPLUNC1)蛋白表达的影响。方法 将两类细胞各随机分为对照组、实验组,CCK-8法观察LPS与细胞增殖活性的时间-反应和剂量-反应关系,筛选各自的最佳效应浓度和作用时间,以LPS最佳效应浓度和作用时间处理后,免疫组化和免疫荧光定量法检测两类细胞SPLUNC1蛋白相对表达量的变化。结果 LPS对A549细胞的最佳效应浓度为20 mg/L,最佳效应时间为12 h,对Hela细胞的最佳效应浓度为40 mg/L,12~24 h为其最佳效应时间窗。SPLUNC1在两类细胞中均呈阳性表达,LPS处理后表达均显著上调(P＜0.05),两类细胞间比较,LPS处理后Hela细胞SPLUNC1相对表达量高于A549细胞(P＜0.05),较对照的增量值(Δ)也明显大于A549细胞(P＜0.05)。结论 SPLUNC1在宫颈癌细胞中存在表达,可能是肺腺癌和宫颈癌病变中的保护性因子,具有潜在的临床应用价值。     

乌鲁木齐市汉族新生儿出生体重现状及其影响因素

 目的 了解乌鲁木齐市汉族新生儿出生体重现状,分析影响新生儿出生体重的因素,为控制出生低体重儿和巨大儿的发生率、提高人口素质提供依据。方法 采用问卷法对随机抽取的乌鲁木齐市各级医院的1000例产妇及新生儿进行调查。结果 (1)1000例新生儿出生体重1.462~5.223 kg,平均体重为(3.312±0.541)kg,其中低体重儿35例,占3.5%;正常体重儿891例,占89.1%;巨大儿74例,占7.4%。(2)婴儿性别、母亲职业、家庭收入为新生儿出生体重的影响因素(Z=3.290,P=0.001;χ²=9.582,P=0.002;F=11.325, P<0.001)。(3)产妇孕前正常体重组、超重及肥胖组的新生儿平均出生体重高于孕前低体重组(F=6.237,P=0.002)。孕期增重情况影响新生儿平均出生体重(F=3.564,P=0.007)。结论 乌鲁木齐市汉族新生儿平均出生体重处于我国正常水平,应该保持孕期体重适度增加,避免体重增长过快,将新生儿出生体重控制在正常范围内。     

miR-214-5p通过靶向调控PTEN的表达对破骨分化和骨质疏松的影响

 目的 探讨miR-214-5p通过靶向调控PTEN的表达对破骨分化和骨质疏松的影响。方法 选取2019-03至2020-05在空军军医大学唐都医院外科进行脊柱手术的骨质疏松患者20例(骨质疏松组),同时选取非骨质疏松症患者20例为对照组,抽取两组骨髓血。将miR-214-5pmimics(miR-214-5pmimics组)、miR-214-5p空质粒(miR-214-5pvector组)、shZFAS1载体(sh PTEN组)、shZFAS1空载体(sh vector组)转染到骨质疏松患者细胞,对照组细胞不进行任何转染处理。采用RT-qPCR 检测骨髓单个核细胞中的miR-214-5p和PTEN mRNA及 Raw264.7单核巨噬细胞中NFaTc1、MMP9、TRAP、CTSK的mRNA水平;通过TRAP染色检测TRAP染色的阳性率;通过Western blot 检测PTEN、NFATc1、AKT和PI3K蛋白水平。结果 骨质疏松组miR-214-5p水平的表达明显高于对照组(P＜0.001),骨质疏松组PTEN的表达显著低于对照组(P=0.009);miR-214-5pmimics组中TRAP表达阳性率明显高于对照组和miR-214-5p vector组(P＜0.001);sh PTEN组中TRAP表达阳性率明显高于对照组和sh vector组(P＜0.001);miR-214-5p mimics组中的NFaTc1、MMP9、TRAP和CTSK水平显著高于对照组(P<0.001);sh PTEN组中的NFaTc1、MMP9、TRAP和CTSK水平显著高于对照组(P<0.001);与miR-214-5p mimics组相比,miR-214-5pmimics+PTEN组中TRAP表达阳性率显著降低(P＜0.001)。结论 骨质疏松症患者的骨髓单个核细胞中miR-214-5p表达上调,miR-214-5p可以调控PTEN表达,过表达miR-214-5p可能通过靶向PTEN促进破骨细胞分化。     

空间爬行运动训练对脑缺血幼鼠心理行为的影响

 目的 观察空间爬行运动训练对脑缺血幼鼠心理行为的影响。方法 59只7～8 日龄新生鼠随机分为对照组20只,仅做颈部皮肤的切开缝合,未结扎双侧颈总动脉;脑缺血组20只,结扎双侧颈总动脉;脑缺血运动组19只,结扎双侧颈总动脉后4 d,给本组幼鼠在自制的空间运动架上进行早期空间运动训练4周。对照组和脑缺血组不给与空间爬行训练。应用动物行为学平台(转棒仪和旷场试验)对38～40 日龄幼鼠进行运动和行为功能测定。结果 (1)脑缺血运动组和对照组幼鼠降落的潜伏期明显长于脑缺血组(t=4.159,P＜0.01;t=4.696,P＜0.01),而对照组和脑缺血运动组的幼鼠运动降落的潜伏期长短差异无统计学意义(t=1.418);(2)在旷场实验中3组幼鼠运动的总路程,以及平均速度比较差异均无统计学意义;(3)脑缺血运动组和对照组幼鼠的跨格次数、周边活动时间和距离明显长于脑缺血组(t=4.848,P＜0.001,t=6.583,P＜0.001;t=2.764,P＜0.05,t=3.988,P＜0.01;t=3.102,P＜0.05,t=3.258,P＜0.05),而对照组和脑缺血运动组的幼鼠的跨格次数、周边活动时间和距离长短差异无统计学意义;(4)脑缺血运动组和对照组幼鼠中心活动时间及路程明显短于脑缺血组(t=4.881,P＜0.01;t=3.533,P＜0.01;t=3.783,P＜0.01,t=3.142,P＜0.05),脑缺血运动组和对照组幼鼠中心活动的时间和距离比较差异无统计学意义。结论 脑缺血幼鼠表现情绪异常,运动行为状态明显受损,早期空间爬行运动训练可明显改善脑缺血幼鼠运动和协调能力及认知能力。     

乙肝相关性肝癌MLH1与p53的表达及其意义

 目的 探讨MLH1与p53在乙型肝炎病毒 (hepatitis B virus ,HBV) 感染相关性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其意义。方法 选取原位肝移植手术术后HBV相关性HCC伴肝硬化患者238例,应用免疫组化的方法检测肝癌组织和癌旁组织中MLH1与p53的表达情况,并以25例正常肝组织和良性肝病组作为对照。结果 MLH1在肝癌组织的阳性表达率为31.09％(74/238),在癌旁组织的表达阳性率为26.05％(62/238),良性肝病对照组阳性表达率为48.00％(12/25),各组表达的差异无统计学意义(P=0.053)。相关性分析显示,MLH1基因的表达与患者肝移植术前AFP含量(r=0.221,P=0.001)及术后的复发(r=-0.159,P=0.014)有相关性,与HCC组织病理学Edmondson分级(P=0.060)及TNM分期(P=0.065)有相关趋势。p53在肝癌组织的表达阳性率为47.06％(112/238),在癌旁组织的表达阳性率为0.84％(2/238),良性肝病对照组均为阴性,p53蛋白的表达在癌组织中明显高于其在癌旁及良性肝病中的表达(P=0.000);p53表达情况与患者肝移植术前AFP含量有相关性(r=0.172,P=0.008),与血管侵犯(P=0.053)及肿瘤数量(P=0.051)有相关趋势。结论 MLH1蛋白表达下调可能与HBV相关性肝癌的发生及术后的复发有关,且MLH1与p53蛋白在肝癌中的表达有一定的关联性。     

双氢青蒿素联合吉非替尼抑制肺腺癌细胞周期和迁移能力的体外研究

 目的 探究双氢青蒿素(dihydroartemisinin, DHA)联合吉非替尼(gefitinib, GEF)对肺腺癌细胞系的细胞周期和迁移能力的影响。方法 10 μM DHA和(或)50 μM GEF处理肺腺癌细胞系A549和SPC-A-1,四唑盐(methyl thiazolyl tetrazolim, MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,划痕实验检测细胞迁移,蛋白质印记法(western blot, WB)检测单独或联合应用DHA和GEF对细胞周期和迁移相关蛋白表达的影响。结果 MTT实验结果显示联合应用DHA和GEF(Com组)后,A549和SPC-A-1的增殖能力显著低于单药组和对照(NC)组,且具有时间依赖性(P＜0.05);碘化丙啶(propidium iodide, PI)单染流式细胞术检测细胞阻滞于G₀/G₁期;WB显示与NC组和单药组相比,Com组细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶4(cyclin dependent kinase 4,CDK4)和细胞周期素D1(Cyclin D1)表达显著下降;划痕实验中Com组细胞融合率显著低于NC组和单药组,并伴随基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)2和MMP9表达下降,差异均具有统计学意义(P＜0.05)。结论 DHA联合GEF可以显著抑制肺腺癌细胞的增殖和迁移,并阻滞细胞周期。     

苯并芘体外对人胎盘滋养细胞增殖和凋亡的影响及其机制

 目的 探讨苯并芘对滋养细胞的损害作用及其机制。方法 通过观察苯并(a)芘[benzo(a)pyrene, BaP]体外对人胎盘滋养细胞系JEG-3细胞增殖和凋亡的影响,并观察对芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor, AhR)及其核转位蛋白(aryl hrdrocarbon receptor nuclear translocator, ARNT)表达的作用。将BaP染毒浓度分成四组:空白对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,应用不同浓度的BaP处理人胎盘滋养细胞系JEG-3细胞24 h,四甲基偶氮唑盐(3-(4,5-dimethyl-2-thiazoly)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide, MTT)比色法检测JEG-3细胞增殖率,流式细胞术检测JEG-3细胞凋亡率。实时荧光定量PCR方法检测细胞AhR和ARNT基因mRNA的表达,Western blot检测细胞AhR和ARNT蛋白表达。结果 细胞增殖率BaP中剂量组和BaP高剂量组低于空白对照组和BaP低剂量组(P＜0.05),凋亡率BaP中剂量组和BaP高剂量组高于空白对照组和BaP低剂量组(P＜0.05)。BaP低、中、高剂量组AhR基因mRNA表达(1.71±0.15、2.10±0.17和2.29±0.16)和ARNT基因mRNA表达(1.57±0.13、1.96±0.17和2.36±0.15)均高于空白对照组(1.41±0.13、1.28±0.11)(P＜0.05),呈浓度依赖; BaP低、中、高剂量组AhR蛋白表达(29.54±2.34、34.64±2.35和39.96±2.36)和ARNT蛋白表达(39.94±2.37、45.62±2.41和51.52±2.66)均高于对照组(23.22±2.31、34.28±2.24、39)(P＜0.05),呈浓度依赖。结论 BaP体外可抑制JEG-3细胞增殖和诱导细胞凋亡,激活AhR通路可能是BaP损伤胎盘滋养细胞的机制之一。     

榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞放射敏感性影响及其机制的研究

目的 探讨榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞放射敏感性的影响及其分子机制。方法 克隆形成实验检测10、20 μg/ml榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞的放射敏感性影响。细胞分为空白对照组、单纯照射组(4 Gy X射线照射)、单纯药物组(给予10、20 μg/ml榄香烯乳);联合照射组(给予10、20 μg/ml 榄香烯乳24 h后4 Gy X射线照射)。Western blot检测DNA-PKcs、Bcl-2及P53蛋白的表达变化,并分析DNA-PKcs与Bcl-2、P53表达之间的相关性。结果 10 μg/ml榄香烯乳的放射增敏比SER_D0、SER_Dq 为1.54±0.20和1.43±0.15;20 μg/ml榄香烯乳SER_D0、SER_Dq 为1.63±0.32及1.75±0.19。与单纯照射组相比,10、20 μg/ml榄香烯乳联合照射组细胞的DNA-PKcs蛋白表达明显减少(t=7.52、8.33, P<0.05),Bcl-2蛋白表达明显减少(t=10.74、11.33, P<0.05),P53蛋白表达明显增加(t=-9.25、-7.66P<0.05)。DNA-PKcs与P53蛋白表达显著负相关(r=-0.569,P<0.05),与 Bcl-2蛋白表达显著正相关(r=0.755, P<0.05)。结论 榄香烯乳可增加人肺腺癌A549细胞的放射敏感性,其机制与下调DNA-PKcs表达抑制DNA双链损伤修复和上调p53,下调Bcl-2表达促进细胞凋亡有关。     

运动、EGCG和肉碱对肥胖大鼠体重、内脏脂肪及肝脏CPT1表达的影响

目的:探讨运动、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和肉碱(LC)对肥胖大鼠体重、内脏脂肪及肝脏肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT1)基因、蛋白表达的影响。方法:选取造模成功的肥胖大鼠50只,随机分为5组:肥胖对照组(F),运动组(S),运动+EGCG组(S+E),运动+肉碱组(S+L),运动+EGCG+肉碱组(S+E+L),每组10只。用蒸馏水将EGCG、LC溶解成无色透明的溶液,EGCG和LC的补充量均按80 mg/kg体重计算,灌胃容量为1 ml/100g体重(体重超过500g的大鼠,灌胃容量都按5ml配比),F组、S组大鼠则按照1 ml/100g体重灌胃蒸馏水。除F组外,其他四组大鼠进行低强度有氧跑台训练,负荷设定为16m/min,60min/day,大约相当于大鼠58%最大摄氧量。7周后比较各组大鼠体重、内脏脂肪系数、肝脏甘油三酯(TG)水平及肝脏CPT1基因及蛋白表达水平。结果:S组、S+E组、S+L组、S+E+L组大鼠体重显著低于F组(P<0.05),S+E+L组体重显著低于S组(P<0.05)。S+E+L组内脏脂肪系数显著低于F组(P<0.05)。S+L组和S+E+L组肝脏TG水平显著低于F组、S组和S+E组(P<0.05)。S组大鼠肝脏CPT1基因及蛋白水平与F组无显著差异(P>0.05),S+E组、S+L组、S+E+L组大鼠CPT1基因水平较F组和S组显著增高(P<0.05),S+L组和S+E+L组CPT1蛋白量较F组显著增加(P<0.05)。结论:运动、EGCG、LC联合使用可起到减重、减少内脏脂肪和改善肝脏甘油三酯水平的作用,改变肝脏CPT1表达可能是其机制之一。     

骨髓间充质干细胞对大鼠肺泡巨噬细胞Toll样受体mRNA和蛋白表达的影响

目的 观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对肺泡巨噬细胞Toll 样受体(toll-like receptor,TLR2/4)基因和蛋白的影响,为探讨骨髓MSCs移植对早期炎症介质的影响及炎症级联反应的调控机制做铺垫。 方法 巨噬细胞分为PBS对照组、骨髓MSCs对照组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对照组和LPS+骨髓MSCs处理组,各组均取1,3,6,12 h时相点。流式细胞仪检测骨髓MSCs表面标记阳性细胞率和巨噬细胞TLR2/4蛋白的表达;RT-PCR方法检测各组不同时相点巨噬细胞TLR2/4 mRNA表达变化;ELISA法检测各组不同时相点上清液中TNF-α浓度变化。 结果 与PBS对照组、骨髓MSCs对照组比较,LPS对照组巨噬细胞TLR2/4mRNA和蛋白表达明显升高(P＜0.01),1h时开始增高,12h时达到峰值;同时TNF-α浓度也明显增高(P＜0.01),6h时TNF-α浓度达到峰值。与LPS对照组比较,LPS+ MSCs组巨噬细胞TLR2/4 mRNA和蛋白表达降低(P＜0.01),TNF-α浓度也降低(P＜0.01)。 结论 LPS刺激后巨噬细胞TLR2/4 mRNA和蛋白表达升高,TNF-α浓度也升高,后者峰值时间出现略早,说明TLR2/4表达与TNF-α之间存在一个正反馈环;骨髓MSCs可以明显降低LPS刺激后巨噬细胞TLR2/4 mRNA和蛋白表达及TNF-α浓度,说明骨髓MSCs打破了上述正反馈环。     

完整迷走神经刺激对肝细胞炎症反应及细胞因子信号转导抑制因子mRNA表达的影响

目的 观察完整迷走神经刺激(IVNS)对肝细胞炎症反应及细胞因子信号转导抑制因子(SOCS)mRNA的影响.方法 以内毒素血症为全身炎症反应模型.80只SD大鼠随机分为内毒素组、迷走神经刺激组、假手术组和对照组.每组在注射前、注射后2,4,6 h共4个时相点,检测肝组织TNF-α、IL-10水平变化;RT-PCR法检测肝组织SOCS1、SOCS3 mRNA表达.结果 注射LPS后,肝组织TNF-α、IL-10水平升高,其中注射后4 h TNF-α高于注射后2,6 h(P＜0.01,P＜0.05).在LPS注射后的各时相点,迷走神经刺激组TNF-α浓度显著低于内毒素组(P(0.05).注射后4,6 h迷走神经刺激组IL-10水平显著高于注射后2 h水平(P＜0.01),且高于内毒素组(P＜0.05).注射后4 h,LPS组SOCS1、SOCS3 mRNA表达显著高于对照组及假手术组(P＜0.01);迷走神经刺激组SOCS3 mRNA水平高于内毒素组(P＜0.01).结论 IVNS能抑制肝脏炎症反应,其抗炎机制涉及SOCS信号转导途径.     

单核细胞在脂多糖刺激下发生基因转录并分泌炎症因子(IL-6)的实验研究

目的　新生儿感染导致机体严重病理变化的原因与内毒素有关 ,而内毒素的化学本质是脂多糖 (LPS) ,通过观察 LPS对新生儿脐血单核细胞 (MNC)分泌 IL-6及表达 IL-6m RNA基因的影响 ,探讨严重细菌感染时新生儿机体的防御反应机制。方法　取肝素抗凝脐血 ,用密度离心分离法分离 MNC,以 RPMI1 640培养液调整细胞浓度为 1× 1 0 6 /ml,将细胞悬液铺于 2 4孔培养板上 ,依次加入不同浓度脂多糖 (LPS)培养 3 6h或同一浓度 LPS(1 μg/ml)培养不同时间 ,收集培养上清液及细胞 ,分别用 ELISA和 RT-PCR方法测定 IL-6及 IL-6m RNA表达情况。结果　 (1 )脐血 MNC在 LPS刺激 3 ,6,1 2 ,1 8,2 4,3 6h后 IL-6分泌水平逐步增高 ,6h以后增加尤为明显 ,与其他各时间点比较有非常显著差异 (P<0 .0 0 1 )。LPS刺激组与无 LPS对照组相同时间点比较 ,6h内 IL-6变化水平无差异 ,6h以上各点有显著差异 (P<0 .0 1 )。RT-PCR方法检测显示 LPS刺激后 3 h即可见 IL-6m RNA基因表达。 (2 )脐血 MNC受不同浓度 LPS刺激时 ,IL-6分泌水平随 LPS浓度递增。(3 )全部脐血 MNC均检测到 IL-6m RNA基因表达。结论　 LPS能诱导新生儿脐血 MNC IL-6m RNA基因转录 ,从而促使IL-6合成、分泌 ,该作用呈时间、剂量依赖性变化     

^131I-Herceptin在荷人乳腺癌裸鼠模型中的生物分布及抗肿瘤活性研究

目的探讨^131I-Herceptin在荷人乳腺癌裸鼠模型中的生物分布及其对人表皮生长因子2（HER2）高表达乳腺癌的放射免疫治疗疗效。方法^131I-Herceptin采用Iodogen法制备。15只HER2高表达乳腺癌裸鼠模型分为3组：^131I-Herceptin组、Herceptin组与空白对照组,每组5只。以肌肉为参照,注射后第3,6,9天显像观察肿瘤等组织的放射性摄取并计算肿瘤／肌肉（T／M）比值。注射后1～9d,测量肿瘤大小并计算肿瘤抑制率。第9天处死裸鼠,剥离肿瘤,计算肿瘤的每克组织百分注射剂量率（％ID／g）值并以Western—Blot法、反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测肿瘤组织HER2及癌胚抗原（CEA）蛋白及基因表达水平的变化。肿瘤T／M比值与其他脏器的差别、HER2及CEA基因表达水平、蛋白表达水平在各治疗组间的差异采用One—way ANOVA检验;^131I-Herceptin组和Herceptin组肿瘤抑制率的差异采用t检验。结果^131I-Herceptin的放化纯为94％,比活度约为37kBq／μg,在注射后第9天,T／M比值达4．11,显著高于其他组织（F=12．370,P〈0．05）;肿瘤摄取分数为（16．1±1．7）％ID／g,高于其他组织、器官（F=166．150,P〈0．01）。至治疗后9d,^131I-Herceptin组抑瘤率显著高于Herceptin组[（42．0±6．9）％与（23．2±3．8）％,t=5．321,P〈0．001]。^131I-Herceptin组HER2蛋白表达（0．435±0．087与0．557±0．043,t=2．811,P〈0．05）与基因表达（0．256±0．073与0．350±0．029,t=2．678,P〈0．05）均显著低于Herceptin组。^131I-Herceptin组CEA蛋白表达（0．537±0．048与0．607±0．029,t=2．800,P〈0．05）与基因表达（0．362±0．048与0．607±0．079,t=5．932,P〈0．001）均显著低于Herceptin组。结论^131I-Herceptin对HER2高表达的乳腺癌具有很高的靶向特性,能比Herceptin更有效地抑制乳腺癌细胞分裂、增殖、分化、存活,控制肿瘤生长。     

干扰血管内皮生长因子表达联合γ射线对食管癌细胞移植瘤的影响

目的 研究反义cDNA干扰血管内皮生长因子(VEGF)表达联合γ射线对裸鼠移植瘤的影响,并观察各组裸鼠肿瘤病理组织学和细胞生物学特征的变化,为VEGF基因治疗联合放射治疗食管癌提供理论依据。方法 将32只Balb/c/nu裸鼠随机分为4组:对照组、单纯照射组、反义组和反义+照射组,使用已转染和未转染反义VEGFcDNA TE-1食管癌细胞株,分别建立裸鼠爪垫移植瘤模型, 瘤体直径0.8~1.0 cm,⁶⁰Co γ射线18 Gy单次照射单纯照射组与反义+照射组裸鼠移植瘤,对比观察各组移植瘤生长情况,检测移植瘤组织中VEGF mRNA和蛋白的表达,并分析肿瘤组织中细胞凋亡情况。结果 与未转染两组比较,转染两组瘤体生长速度慢,成瘤潜伏期延长(t=13.898, P<0.01)。反义组肿瘤体积为(1207.50±97.07)mm³,反义+照射组为(1057.5±91.50)mm³,两者差异无统计学意义(t=1.124,P>0.05),而此2组与对照组(5442.50±185.08)mm³ 和单纯照射组(2922.50±152.773)mm³ 体积间差异有统计学意义(t=9.475~21.238,P<0.01)。反义组与反义+照射组VEGF mRNA和蛋白表达较对照组和单纯照射组差异有统计学意义(F=387.394、13.519, P<0.01)。结论 抗VEGF治疗可有效地抑制裸鼠移植瘤的生长,但单纯抑制VEGF表达对增加裸鼠移植瘤放射治疗增敏效果有限,需进一步研究。     

雌激素对宫腔粘连纤维化进程及叉头框F2表达的影响

目的 探讨雌激素对宫腔粘连纤维化进程及叉头框(Fox)F2表达的影响.方法 采用0.2％Ⅰ型胶原酶消化-筛网过滤-差时贴壁分离法获取原代人子宫内膜基质细胞(HESCs)并进行鉴定.采用l0ng/ml转化生长因子β1(TGF-β1)作用于HESCs48h建立宫腔粘连细胞模型.以0、10-6、10-8、10-10、10-12mol/L雌二醇(E2)作用于模型组48h,采用qPCR及Western blotting检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(COL Ⅰ)及FoxF2的mRNA和蛋白表达.结果 免疫细胞化学法检测显示HESCs波形蛋白阳性,角蛋白18阴性.模型组α-SMA、COL Ⅰ、FoxF2的mRNA和蛋白表达均高于对照组(p＜0.05),模型构建成功.qPCR检测结果显示,与模型组相比,10-6、10-8、10-10mol/LE2组α-SMA、COL Ⅰ、FoxF2的mRNA表达除10-10mol/L E2组COL Ⅰ表达无差异外,其余各组表达均下降(P＜0.05),10-12mol/LE2组α-SMA及COL Ⅰ mRNA表达上升,但差异无统计学意义(P＞0.05),FoxF2mRNA表达下降(P＜0.05).Western blotting检测结果显示,与模型组相比,10-6、10-8、10-10mol/L E2组α-SMA、COL Ⅰ及FoxF2蛋白表达下降(P＜0.05),10-12mol/LE2组α-SMA蛋白表达上升,但差异无统计学意义(P＞0.05),COL Ⅰ及FoxF2蛋白表达下降(P＜0.05).结论 FoxF2在宫腔粘连中的表达增加.雌激素可在一定范围内逆转宫腔粘连的纤维化进程,并抑制FoxF2的表达.     

脂多糖对大鼠肺微血管内皮细胞cAMP的影响

目的探讨脂多糖（LPS）作用后,大鼠肺微血管内皮细胞（RPMVEC）cAMP浓度变化及其与B—AR变化的关系。方法分别在100ml培养瓶内接种等量RPMVEC,细胞单层汇合后分为3组：LPS组加LPS10μg／ml;LPS＋山莨菪碱组加LPS10μg／ml和山莨菪碱10μg／ml;正常对照组加等量稀释液（各组n=4）。于作用后15、90min,采用放免法测定各组RPMVECcAMP浓度。结果正常对照组RPMVECcAMP浓度为（11．83±1．35）fmol／μl;LPS组和LPS＋山莨菪碱组15、90min两个时相点RPMVECcAMP浓度均显著高于正常对照组（P〈0．01）。10μg/mlLPS作用15min,cAMP浓度显著低于10μg／mlLPS作用90min（P〈0．01）;LPS＋山莨菪碱组作用15min,cAMP浓度也显著低于作用90min（P〈0．01）。LPS组作用15min与LPS＋山莨菪碱组作用15min比较,细胞内cAMP浓度无显著差异（P〉0．05）;两组作用90min比较,cAMP浓度也无显著差异（P〉0．05）。结论LPS作用可引起RPMVECcAMP浓度显著升高,其机制可能与LPS引起的腺苷酸环化酶活化有关,而与LPS引起的β—AR变化下调无关。