喉鳞癌中NO、iNOS的测定及其临床意义

目的：探讨一氧化氮（NO）、诱生型一氧化氮酶（iNOS）在喉鳞癌中的表达及其临床意义，方法：采用硝酸还原酶法测定健康人和喉癌患者血清NO3和NO2^-之和；采用逆转录－聚合酶锭反应（RT－PCR）技术检测40例不同病理分化程度，临床分期和喉鳞癌组织，癌旁组织及10例喉乳头状瘤、7例正常喉粘膜中诱生型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA的表达。结果：喉鳞癌患者血清NO含量显著高于正常对照组，喉癌组织iNOSmRNA阳性表达率为85．00％，较对照组癌旁组织（20．00％），良性肿瘤组（40．00％）、正常人组（0／7）明显增高（P＜0．0001，P＜0．005，P＜0．0001），有淋巴结转移组（19／19）显著高于无淋巴结转移组（71．42％）（P＜0．05），iNOSmRNA阳性表达与肿瘤原发部位及T分级无关，与细胞分化程度呈负相关。结论：喉鳞癌组织中存在iNOS，它可能通过合成一氧化氮（NO）在分子水平参与了参与了咆癌的发生、发展。     

喉癌喉前淋巴结转移

回顾性调查1865例行全喉切除的喉癌病例．发现120例喉癌有喉前淋巴结，其中24例发生喉前淋巴结转移。非转移性喉前淋巴结最大直径从0．2cm大小到1cm左右不等，转移性喉前淋巴结从0．2cm到最大直径1．9cm。喉前淋巴结转移率为1．3％．其中声门上癌、声门癌、声门下癌和跨声门癌的喉前淋巴结转移率分别为0．39％、0．73％、5．02％和2．55％。喉前淋巴结转移与细胞分化无关，与喉癌原发部位及肿瘤分期有关，声门下癌或侵犯声门下区的喉癌较声门上癌和声门癌易发生喉前淋巴结转移，跨声门侵犯的喉癌较声门上癌易发生喉前淋巴结转移；T3、T4期喉癌，较T1、T2期喉癌易发生喉前淋巴结转移；有喉前淋巴结转移的喉癌．易发生颈侧淋巴结转移。     

喉鳞状细胞癌及转移淋巴组织中Cyclin E的表达

目的：定量检测细胞周期素E（Cyclin E）在喉鳞状细胞癌及颈部淋巴组织中的表达,探讨其在喉癌转移中的可能作用。方法：采用激光共聚焦显微镜、多参数流式细胞技术对手术切除的21例喉鳞状细胞癌（7例伴颈淋巴结转移,14例不伴颈淋巴结转移）组织标本中Cyclin E的表达含量进行检测分析。结果：Cyclin E在喉鳞状细胞癌、阳性淋巴结、阴性淋巴结中均有不同程度的表达,喉鳞状细胞癌伴颈淋巴结转移平均荧光强度为78.12士6.54,略高于不伴颈淋巴结转移者（74.93士8．82）（P〉0．05）;阳性淋巴结平均荧光强度为93．65士7．48,明显高于阴性淋巴结（30．65士7．48）（P〈0．01）,且高于喉鳞状细胞癌伴颈淋巴结转移和不伴颈淋巴结转移者（P〈0．05）。结论：Cyclin E的异常表达是喉癌发生、发展过程中一个重要的分子事件;Cyclin E的检测可望成为临床评估喉癌淋巴结转移的指标之一。     

Fhit 蛋白与喉咽癌生物学行为相关性研究

目的：探讨脆性组氨酸三联体（FHIT）基因蛋白Fhit在喉咽癌组织中的表达状况及与该肿瘤生物学行为的可能关系。方法：采用兔抗人Fhit抗体与枸橼酸-微波-SP免疫组织化学方法检测66例喉咽癌标本中Fhit的表达状况,并分析其与组织学分级、淋巴结转移的关系。结果：①喉咽癌组织Fhit表达阳性率为42.42％（28／66）,正常喉咽组织为83.33％（55／66）,二者比较,P〈0．01;②Fhit在高、中、低分化鳞状细胞癌中的表达阳性率分别为65．38％（17／26）、38．10％（8／21）和26．32％（5／19）,各个病理分级之间比较,P〈0．01;③无淋巴结转移组Fhit表达阳性率为75.00％（12／16）,淋巴结转移组为36．OO％（18／50）,P〈0．01。结论：喉咽癌Fhit的表达较正常组织降低,其表达状况与病理分级及淋巴结转移明显相关,提示Fhit表达降低可能对喉咽癌的演化和进展具有重要作用,并有可能成为一个新的预后指标。     

喉及下咽部鳞状细胞癌中血管内皮生长因子-c及其受体FLT-4表达与淋巴结转移的相关研究

目的：研究喉及下咽部鳞状细胞癌组织中血管内皮生长因子-C（VEGF-C）及其受体VEGFR-3（FLT-4）的表达情况,以及它们在肿瘤淋巴转移、微转移中的作用和意义。方法：采用免疫组织化学SP法及图像分析技术,检测49例喉及下咽部痛组织中VEGFC、FLT-4及淋巴结中VEGF-C蛋白表达和相对含量。结果：喉及下咽部癌组织中VEGF-C的表达与病理分级密切相关（均P〈0．05）,与淋巴结转移之间存在相关关系（均P〈0．05）,与临床T分期无关。FLT-4表达与VEGF-C阳性表达呈同向性改变,与淋巴结转移相关（均P〈0．05）;喉及下咽部癌组织中,FLT-4阳性脉管数与病理分级及临床T分期差异无统计学意义（均P〉0．05）。喉及下咽部癌组织中淋巴结微转移组,VEGFC、FLT-4表达与无转移组之间的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：VEGFC在喉及下咽部癌组织中,通过其特异性受体FLT-4导致淋巴管增生,促进肿瘤淋巴转移,从而影响患者的预后;检测VEGF-C、FLT-4,对肿瘤诊断、判断患者预后具有重要临床价值。     

CK4与CK13在喉咽鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的：探讨喉咽鳞状细胞癌组织中细胞角蛋白13（CK13）和细胞角蛋白4（CK4）的表达与喉咽鳞状细胞癌临床病理特征的关系。方法：应用免疫组织化学方法检测56例喉咽鳞状细胞癌患者的癌组织标本及癌旁正常组织中CK13及CK4的蛋白表达,应用VIDAS图像分析仪分析其图像的积分光密度,并进行统计学处理。结果：CK4与CK13在癌旁正常组织中均呈强阳性表达,而在喉咽鳞状细胞癌组织中的表达下降（P〈0．01）,且与病理分化程度均呈正相关（P〈0．05）。CK4在T1、T2期的表达最强,在T3、T4期的表达依次减弱（F=93．814,P〈0．05）;CK4在Ⅰ～Ⅱ期的表达最强,在Ⅲ期、Ⅳ期中的表达逐渐减弱（F=127．894,P〈0．05）;CK4在无淋巴结转移的鳞状细胞癌组织中的表达较强,而在有淋巴结转移的鳞状细胞癌组织中表达较弱（T=10．678,P〈0．05）。而CK13与肿瘤大小、临床分期及有无淋巴结转移无显著相关。结论：CK4与CK13共同检测对喉咽鳞状细胞癌的早期诊断、手术方法的选择以及判断预后具有指导意义。     

喉鳞状细胞癌组织中CTGF和OPN的表达及其临床意义

目的：研究人喉鳞状细胞癌及其癌旁组织中CTGF和OPN表达水平并探讨两者的相互关系及其临床病理意义。方法：41例喉鳞状细胞癌和20例癌旁组织手术切除标本常规制作石蜡包埋切片，CTGF和OPN染色方法为SP免疫组织化学法。结果：41例鳞状细胞癌CTGF和OPN表达阳性率均为25例（61．0％），其评分值分别为2．41±1．60和3．10±1．63，20例癌旁组织CTGF阳性18例（90％）和OPN阳性3例（15．0％），其评分值分别为4．24±1．42和1．12±0．84，癌组织CGTF阳性率及评分明显低于癌旁组织（x^2=5．44，P〈0．05；t=4．36，P〈0．01），但OPN则相反（x^2=11．44，P〈0．01，t=5．08，P〈0．01）；颈淋巴结未转移和临床分型T1病例CTGF表达阳性率及其评分明显高于颈淋巴结转移和临床分型T3病例（P〈0．01）；颈淋巴结转移、临床分型T1及组织学分级Ⅰ级病例OPN表达阳性率及其评分明显低于颈淋巴结转移、临床分型T3及组织学分级Ⅲ级病例（P〈0．01）；CTGF表达评分与OPN表达评分呈密切负相关（r=-0．56，P〈0．01）。结论：CTGF和OPN可能是反映喉鳞状细胞癌进展、生物学行为、转移发生及预后的重要生物学标记物。     

侵及前连合的声门型喉癌手术治疗

目的 探讨侵及前连合的声门型喉癌有效的手术方法.方法 回顾性分析侵及前连合的声门型喉癌T1～T3病变,行喉前淋巴结清扫、喉裂开声门上、下联合进路处理的37例完整临床资料.其中T1病变20例,T2病变7例,T3病变10例.采用Kaplan-Meier法计算术后生存率.结果 本组治疗后3个月全部拔除气管套管并恢复了吞咽和发...     

不同声门型喉癌喉前淋巴结转移研究

目的　探讨不同声门型喉癌喉前淋巴结转移规律,为喉癌规范手术提供依据。方法　92例声门型喉癌在行不同手术时,皆常规行喉前淋巴结清扫并送检。比较喉前淋巴结阴性组及阳性组在肿瘤分期、病理分型、术后颈部淋巴结复发和局部复发、生存时间之间的差异。结果　92例喉前淋巴结阳性者5例,阳性率5.4%（5/92）,晚期喉癌（III期、IV期）较早期（I期、II期）喉前淋巴结更容易发生转移,差异有统计学意义。喉前淋巴结转移与病理分型差异无统计学意义;喉前淋巴结转移阳性组术后发生颈部淋巴结转移较阴性组高,差异有统计学意义;喉前淋巴结转移阳性组术后局部复发较阴性组高,差异有统计学意义。喉前淋巴结阴性组较阳性组生存时间长,差异有统计学意义。结论 前淋巴结在晚期声门型喉癌中发生转移率较高,手术时应常规清扫;喉前淋巴结一旦转移,其颈部和局部复发几率增加,预后较差,提示进一步的后续规范治疗的重要性。     

声门型喉癌颈淋巴结转移相关因素的研究

目的 总结声门型喉癌颈淋巴结转移发生率，探讨影响声门型喉癌颈淋巴结转移的相关因素。方法 对1983年1月—1999年5月年间中国医科大学第一临床学院耳鼻咽喉科收治的452例声门型喉癌进行回顾性分析。男女比例约为10：1，年龄42—79岁之间，平均59．3岁。结果 声门型喉癌颈淋巴结转移发生率为3．54％(16／452例)，其中早期(T1和T2期)声门型癌颈淋巴结转移发生率为0．29％(1／340例)，晚期(T3和T4期)颈淋巴结转移发生率为13．39％(15／112例)。所有转移淋巴结均位于肿瘤病变侧Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ区。结论 声门型喉癌肿瘤组织对声门下、室带等处侵及率相近，肿瘤累及上述不同部位其颈淋巴结转移的发生率差异无显著性。对于临床诊断无颈部淋巴结转移的声门型喉癌患者，不需要行颈清扫术。     

CK19和EGFR mRNA在喉癌动物模型外周血中的表达及其与淋巴转移关系

目的:探讨循环播散肿瘤细胞(CTC)与喉癌淋巴结转移的相关性,评价细胞角蛋白(CK19)和表皮生长因子受体(EGFR)在喉癌微转移诊断中的价值.方法:从30只裸鼠中随机选择25只均分为5组建立喉肿瘤模型,剩余5只为对照组,分别于接种后2、4、6、8、10周处死1组.采用RT-PCR方法检测裸小鼠外周血及肿瘤组织中CK19 mRNA和EGFR mRNA的表达,采用连续病理切片苏木精-伊红染色观察淋巴结转移,免疫组织化学(SP)法检测肿瘤组织中EGFR的表达.结果:对照组外周血中未发现CK19 mRNA和EGFR mRNA的表达,实验组外周血和肿瘤组织中CK19 mRNA阳性率分别为48%和80%,EGFR mRNA的阳性率分别为36%和76%.淋巴结转移与外周血CTC有关(r=0.655,P<0.01),且多发生在肿瘤指数生长期,转移率为60%(15/25).免疫组织化学检测EGFR蛋白在肿瘤组织阳性率为88%(22/25),外周血中EGFR mRNA表达阳性的肿瘤组织中EGFR蛋白均阳性,肿瘤组织EGFR蛋白高表达的外周血中EGFR mRNA检出率亦高.结论:RT-PCR检测外周血CK19和EGFR mRNA的表达有助于预测淋巴结转移,EGFR mRNA有望作为肿瘤诊断和治疗的新靶点.     

喉癌及喉咽癌颈部淋巴结微转移的检测及临床意义初探

目的 比较半连续切片H&E染色及免疫组化染色两种方法,用于检测喉及喉咽部鳞形细胞癌患者颈部常规病理学阴性淋巴结中微转移的检出率,并初步探讨其与临床病理因素及早期复发的关系。方法 对13例喉及喉咽部鳞型细胞癌患者经常规病理检查为阴性的15侧326个淋巴结, 采用50μm半连续切片苏木精－伊红染色法及细胞角蛋白CK(AE1/ AE3)免疫组化EnVison两步法行微转移灶检测, χ2 检验用于检验两种不同方法的阳性检出率。统计所有病例的各临床病理因素（年龄、性别、临床分型、pT 分期、肿瘤分级、原发灶浸润深度）,随访11～56个月（中位时间31个月）,采用χ2 检验分析各临床病理因素与微转移之间的相关性以及微转移与早期复发的相关性。结果 ①全部75个蜡块经半连续切片后免疫组化和苏木精－伊红染色切片各750张,免疫组化组中经CK(AE1/ AE3) 单克隆抗体标记后,共40张切片（5.33%）分别对应5 例(38.46 %) 患者中的7 个淋巴结(2.14 %)呈阳性反应。而相应的苏木精-伊红染色切片,若不与免疫组化对照,其阳性切片数为24张（3.20%）,分别对应2例患者的3个淋巴结。两组间阳性切片数的检出率差异有统计学意义（Ρ<0.05）;②除年龄外的各临床病理因素与微转移之间差异无统计学意义( Ρ>0.05) ;有微转移和无微转移患者的早期复发率差异无统计学意义(Ρ>0.05) 。结论 对于喉及喉咽鳞癌的颈部淋巴结微转移,单纯的苏木精－伊红染色切片,即使是连续或半连续切片,有经验的病理科医师仍然会有一定的漏检率,而免疫组化方法可提高其检出率。微转移与临床病理因素及预后间的可能相关性尚有待大样本和长期随访资料的进一步探讨。     

喉癌喉咽癌哨位淋巴结的临床初步研究

目的 探讨喉癌喉咽癌哨位淋巴结的检测及其对颈淋巴结转移的预测价值。方法 用手术中注射蓝染料的方法,对29例颈淋巴结NO的喉癌喉咽癌患者进行了哨位淋巴结的临床研究。手术中取蓝染的哨位淋巴结作快速冰冻病理检查,并与HE染色病理检查结果及颈清扫切除的淋巴结病理检查对照,观察哨位淋巴结转移对颈淋巴结转移癌的预测值。结果 29例中28例成功地显示了哨位淋巴结,成功率达96．6％。每例发现蓝染的哨位淋巴结1－4个,平均每例则检出2．5个。有3例患者的哨位淋巴结检测有肿瘤转移,HE染色病理检查及颈清扫切除的淋巴结病理检查均证实颈淋巴结转移。25例哨位淋巴结冰冻病理检查阴性患者,颈淋巴结清扫标本亦未查见淋巴结转移。哨位淋巴结对颈淋巴结转移的阳性正确率和阴性预测率为100％。结论 哨痊淋巴结检测对喉咽癌的淋巴结转移有重要的预测价值。