BrdU-ELISA法测定四逆汤及组方药提取物对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 观察四逆汤(SNT)及组方药提取物对大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响。方法 采用MTT比色法和Brdu—ELISA法观察药物对离体大鼠VSMC增殖的影响。结果 BrdU—ELISA法结果表明四逆汤总提取物(EST)对VSMC的BrdU掺入DNA没有显著影响，而MTT测定表明：EST可以提高VSMC的脱氢酶活性。甘草(LE)、附子(AE)、干姜(GE)、甘草加附子(LAE)、干姜加附子(AGE)提取物显著提高VSMC的脱氢酶活性，同时提高VSMC的BrdU掺入DNA的水平。结论 EST可以增加VSMC的脱氢酶活性，但对VSMC的BrdU掺入DNA的水平无影响。而其他组方药提取物可以增加VSMC的脱氢酶活性，同时提高VSMC的BrdU掺入DNA的水平。     

蜂胶乙醇提取物对小鼠核酸合成代谢的影响

目的:探讨蜂胶乙醇提取物(EEP)对核酸合成代谢的影响.方法:采用放射性同位素标记物体内掺入的方法测定3H-TdR、3H-UR两种标记物在小鼠脑组织、肝脏及心脏的掺入量.结果:EEP组肝脏及心脏3H-TdR掺入量显著高于对照组(P＜0.05或P＜0.01),EEP组肝脏、心脏及脑组织3H-UR掺入量均显著高于对照组(P＜0.01).结论:EEP不仅能促进肝脏及心脏DNA合成,还能促进肝脏、心脏及脑组织RNA的合成.     

大黄酸对高糖和血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠近端肾小管上皮细胞肥大的影响

目的:探讨大黄酸(Rhein)对高糖和血管紧张素Ⅱ(angiotensin,AngⅡ)诱导的大鼠近端肾小管上皮细胞肥大的影响。方法:麻醉下,无菌分离大鼠单根近球小管并培养,以免疫细胞化学方法鉴定体外培养的肾小管上皮细胞。在高糖(30 mmol/L)环境下用AngⅡ(10-7mol/L)刺激肾小管上皮细胞肥大。与此同时,加入不同浓度的大黄酸(30、15、5 mg/L),作用72 h后检测细胞体积、3H-亮氨酸掺入量以及蛋白质含量以观察细胞肥大的变化。结果:高糖(30 mmol/L)+AngⅡ(10-7mol/L)培养72 h导致细胞体积显著增大,3H-亮氨酸掺入量及细胞内蛋白质含量显著增加。加入大黄酸处理72 h后,大黄酸30 mg/L可显著降低高糖和AngⅡ所致的细胞体积增大、3H-亮氨酸掺入量及细胞内蛋白质含量的升高。大黄酸15 mg/L降低了3H-亮氨酸掺入量及细胞内蛋白质含量,而对细胞体积无显著抑制作用。大黄酸5 mg/L可降低细胞内蛋白质含量,而对细胞体积及3H-亮氨酸掺入量无显著抑制作用。结论:大黄酸能抑制高糖和AngⅡ诱导的肾小管上皮细胞肥大。     

绿舒筋对艾氏腹水癌细胞DNA、RNA及蛋白质合成代谢的影响

本文采用核素前体掺入法研究了绿舒筋对艾氏腹水癌(EAC)细胞DNA、RNA和蛋白质合成的影响。该药在0.1～5mg/ml范围内,不同程度地抑制~3H-TdR、~3H-UR和~3H-Leu掺入到EAC细胞的DNA、RNA和蛋白质中,呈浓度依赖性。去除绿舒筋后,~3H标记物掺入曲线呈递增型,与5-FUdR掺入曲线相似,提示绿舒筋是通过干扰癌细胞及蛋白质代谢发生抗癌作用的,而非损伤DNA模板药物。     

丹参红花提取物对鼠心脏成纤维细胞胶原合成的影响

目的:探讨丹参红花提取物(DCE)对血管升压素(AVP)诱导的新生SD大鼠心脏成纤维细胞(CF)胶原合成作用的影响,为应用中成药防治高血压心肌纤维化提供理论依据.方法:运用3H-脯氨酸掺入法分别观察不同浓度和不同时间DCE对AVP诱导CF胶原合成的影响.结果:CF的3H-脯氨酸掺入率随着DCE干预浓度的增加而降低,其中100mg/L和200mg/L DCE组的3H-脯氨酸掺入率明显低于空白对照组,并具有统计学意义(P<0.01);随着DCE作用时间的延长,CF的3H-脯氨酸掺入率呈递减趋势,CF胶原合成功能与DCE作用时间呈明显的负相关.结论:DCE能够呈浓度和时间依赖性抑制AVP诱导的CF胶原合成功能,防治高血压心肌纤维化.     

冬虫夏草、大黄及肾大部切除大鼠血清对肾小管上皮细胞生长的影响

本研究利用体外肾小管上皮细胞培养及氚标记的胸腺嘧啶核普(3~H-TdR)掺入技术,观察了冬虫夏草(虫草)对细胞生长的影响,结果表明虫草可明显促进3~H-TdR 向肾小管上皮细胞内掺入(虫草组11060.63±603.04CPM,对照组8323.83±836.72CPM,P<0.001)。为此考虑虫草减轻肾小管损伤的作用之一在于促进细胞的修复。此外,我们还观察了大鼠5/6肾切除后血清及中药大黄对肾小管上皮细胞的影响,结果显示5/6肾切除后血清能明显刺激3~H-TdR 掺入到上皮细胞内,而大黄则可抑制肾小管上皮细胞的生长。     

番石榴未成熟果实提取物中甲醇组分的止泻作用

将番石榴(Psidium guajava)未成熟果实切成小块,掺入甲醇浸泡。次日,进行     

紫外光谱检测掺入四物汤的西药成分(Ⅱ)

目的:利用紫外(UV)吸收光谱检测掺入中药制剂四物汤中的西药成分.方法:在四物汤溶液中分别掺入9种西药成分,使用加权相关分析法分析掺入前后的UV光谱变化.结果:6种西药成分掺入四物汤后可以引起UV光谱的明显变化,Spearman'sp ＜0.94;另外3种对UV光谱的影响甚微,Spearman'sp＞0.95.结论:UV光谱可以作为一种快速过筛试验用于鉴别中药制剂的西药成分.     

绞股蓝总皂甙刺激淋巴细胞活化及分泌IL—2

绞股蓝总皂甙在体外能刺激大鼠和小鼠脾淋巴细胞自发性3~H-TdR掺入;与次亚适量ConA(5μg/ml)配伍,能协同刺激小鼠脾淋巴细胞3~H-TdR掺入;在体外还能刺激大鼠脾淋巴细胞自发分泌白细胞介素-2(IL-2)。提示绞股蓝总皂甙具有轻度类似ConA的促有丝分裂原样作用。     

清脑益智法方药对烟雾病脑血管壁细胞的影响

[目的]观察中药清脑益智方(QNYZ)对烟雾病脑血管平滑肌细胞增殖、蛋白质合成等的影响 ,探讨中医药治疗烟雾病的机制。[方法]使用烟雾病患者脑血管平滑肌细胞株和人血管内皮细胞 ,应用细胞计数器和5-溴脱氧尿嘧啶核苷 (BrdU)掺入记数观察。[结果]QNYZ在低浓度(100～200μg/mL)时仅部分抑制了血管平滑肌细胞(HCSMC)和脑血管平滑肌细胞 (HMSMC)的增殖 ,当QNYZ的浓度增加到500μg/mL以上(500～5000μg/mL),显示出了一个完全抑制HCSMC和HMSMC增殖的作用(P<0.01) ;对血管壁内皮细胞在低浓度(250μg/mL)及高浓度(500、1000μg/mL)时 ,对其增殖均无显著影响(P>0.05)。对平滑肌细胞内DNA合成的影响上 ,QNYZ组的BrdU掺入率低下(P<0.01),其中在HCSMC组 ,不同浓度(500、1000μg/mL)的QNYZ组间BrdU掺入率无显著差异 (P>0.05) ;而在HMSMC组 ,1000μg/mL浓度的QNYZ较500μg/mL的QNYZ可以显著降低BrdU掺入率 ,显示出一定的量效关系。[结论]QNYZ对内皮细胞 (EC)的生长无显著影响 ,同时又抑制了平滑肌细胞 (SMC)的增殖 ,起到了保护内膜完整性 ,维护内膜屏障的作用 ,从而可能在预防烟雾病脑血管事件中发挥一定的作用     

甲状旁腺素促成骨样细胞增殖作用及其与钾离子通道的关系

为研究甲状旁腺素 (PTH)促大鼠成骨样肉瘤细胞 (UMR10 6 )增殖作用及与钾离子通道活动的关系。采用磺基罗丹明(SRB)染色法观察细胞增殖改变并用膜片钳技术记录细胞膜钾离子通道电流的变化。同时用 3H- Td R掺入法测定 DNA合成的改变。结果显示 ,PTH可以明显地促进 UMR10 6细胞的增殖 ,且使 3H- Td R掺入率增加 77.14 %。在含有 PTH(10 - 8mol· L- 1 )的培养液中培养 12 h后 ,钾通道电流比对照组有明显增加 ;而且用钾通道阻断剂后 ,3H- Td R掺入率下降。表明其可促进大鼠成骨样肉瘤的 DNA合成和细胞增殖 ,且细胞膜钾通道的活动与此促增殖活动密切相关     

蜂胶乙醇提取物对肝脏蛋白质与核酸合成代谢的影响

目的:探讨蜂胶乙醇提取物(EEP)对小鼠肝脏蛋白质与核酸合成代谢的影响。方法:采用放射性同位素标记物3H-Leu、3H-TdR、3H-UR体内掺入的方法,并以液体闪烁计数仪测定3种标记物的掺入量。结果:EEP可提高肝脏内3H-Leu、3H-TdR、3H-UR的掺入量,分别比空白对照组提高了34.64%、55.34%、166.27%,其差别有统计学意义。结论:EEP有促进肝脏蛋白质、DNA、RNA合成的作用。     

清化饮对脾胃湿热证大鼠免疫功能影响的研究

目的:观察清化饮对脾胃湿热证大鼠T淋巴细胞活化及其分泌IL-2的影响。方法:以3H-TdR掺入法测定T淋巴细胞活化、增殖,及用ConA活化的小鼠脾淋巴细胞测定脾条件培养液(SCM)中IL-2水平。结果:脾胃湿热证大鼠自发性和ConA刺激的T淋巴细胞3H-TdR掺入水平显著高于正常对照组(P均0.O01),T淋巴细胞分泌IL-2水平显著低于正常对照组(P0.01);清化饮能显著降低该证大鼠T淋巴细胞自发性和ConA刺激的3H-TdR掺入水平(P0.05,P0.01),显著升高T淋巴细胞分泌IL-2水平(P0.01,P0.001)。结论:脾胃湿热证大鼠细胞免疫呈亢进状态,并伴有免疫调节功能减弱,清化饮具有调整细胞免疫应答和增强免疫调节功能的作用。     

黄芪、前胡、白蒺藜对培养的肺动脉平滑肌细胞增殖及胶原分泌的影响

目的:寻找抑制肺动脉高压肺血管重建的药物。方法:体外培养的肺动脉平滑肌细胞(PASMC)加入中药制剂黄芪口服液、前胡口服液、白蒺藜口服液分别大、小两个剂量(大剂量10mg/ml,小剂量1mg/ml)干预,并掺入~3H-胸腺嘧啶脱氧核糖核苷(`3H-TdR),~3H-脯氨酸(~3H-Pro)检测每分钟液闪值(cpm),反映 PASMC 增殖及胶原合成分泌的改变。结果:~3H-TdR掺入值在加入黄芪、前胡、白蒺藜口服液后,无论大、小剂量,PASMC 均被抑制(P<0.001);对~3H-pro 的掺入值,在加入黄芪、前胡口服液后,大剂量、小剂量皆有阻抑作用(P<0.01和 P<0.05),白蒺藜只在大剂量时有作用(P<0.01)。结论:中药制剂黄芪、前胡、白蒺藜口服液可不同程度地阻抑 PASMC 的增殖和胶原合成过程,可能对肺动脉高压肺血管结构的重建起一定防治作用。     

入静诱发循经感传治疗儿童哮喘病的生化及免疫研究

入静诱发循经感传治疗儿童哮喘病有明显的临床疗效。在取得较满意疗效的基础上,我们选择了血浆环核苷酸(cAMP、cGMP),血清皮质醇(F)、抗体IgE以及T淋巴细胞免疫功能(~sH-TdR掺入率)等指     

垂盆草小麦黄素苷体外对正常小鼠淋巴细胞增殖的影响

目的:观察垂盆草小麦黄素苷对小鼠脾脏T、B淋巴细胞转化增殖的影响.方法:采用小鼠脾细胞3H-TdR掺入法,用刀豆球蛋白(ConA)或脂多糖(LPS)刺激,测定掺入细胞DNA中3H-TdR的放射性相对数量(cpm).结果:小麦黄素苷100,10,1μg/mL(终浓度)对T淋巴细胞的cpm数有非常显著的抑制作用(均P＜0.001);小麦黄素苷100μg/mL对B淋巴细胞的cpm数有非常显著的抑制作用(P＜0.01).结论:垂盆草小麦黄素苷能明显抑制正常小鼠脾脏T、B淋巴细胞增殖.     

丹参注射液对活性氧诱导的平滑肌细胞增殖的影响

目的　探讨丹参注射液对H2 O2 诱导的血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响。方法　用H2 O2 刺激VSMC增殖 ,应用氚 -胸腺嘧啶核苷 (3H -TdR)掺入实验观察VSMC的DNA合成 ,同时测定培养液中脂质过氧化物 (LPO)的含量。结果　丹参注射液剂量依赖性地抑制H2 O2 诱导的VSMC的3H -TdR掺入量 ,降低LPO的含量。结论　丹参注射液对预防由活性氧诱导的血管平滑肌细胞增殖所引起的疾病可能具有重要作用。     

肝细胞靶向甘草次酸表面修饰脂质体的制备

目的 :研制靶向于肝细胞的甘草次酸表面修饰脂质体。方法 :化学合成 3-琥珀酸-30-硬脂醇甘草次酸酯 (Suc-GAOSt)作为导向分子 ,采用乙醇注入法制备甘草次酸表面修饰脂质体 (LP-SM-GA)。结果 :Suc-GAOSt确能掺入脂质膜中 ,掺入比例最高可达总脂质的9%。结论 :LP-SM-GA制备成功 ,可作为肝细胞主动靶向给药的潜在途径。     

川芎、黄芪对自发性高血压大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞增殖的影响

目的:探讨川芎、黄芪对自发性高血压大鼠(SHR)胸主动脉外膜成纤维细胞增殖的抑制作用。方法:以单用川芎或川芎黄芪合剂的 SHR 血清检测对培养的 SHR 胸主动脉外膜成纤维细胞~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入的影响。结果:川芎和川芎、黄芪合用对 SHR 的血压和心率没有影响,川芎血清组和川芎黄芪合剂血清组与 SHR 血清组比较,~3H-TdR 的掺入量差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。结论:川芎、黄芪能抑制 SHR 胸主动脉外膜成纤维细胞增殖,这些效应可能与它们的钙离子拮抗有关。     

蕲蛇鲞掺假的简易鉴别

蕲蛇为蝰科动物五步蛇Agkistrodon acutus(Gunther)除去内脏的干燥无杂全体,商品药材多制作成蛇鲞供药用,用时去头和鳞。近来发现有些不法分子利用鲜蕲蛇加工成蛇鲞时,掺入杂蛇、铁丝铁钉、石块、淀粉等杂质,以牟取暴利。本文介绍鉴定蕲蛇掺假的简易方法,供中药收购及销售等同道参考。1.掺入杂蛇的鉴别凡掺有杂蛇的蕲蛇鲞,其掺假部位的皮与肉的交接边缘多少有些分离,可将皮肉分开,即可见到纵贴状的杂蛇肉和块状杂蛇,这种掺杂多在身躯的中段,头尾则少见。不剥皮则折断蛇身也可检验出。2.掺入淀粉的鉴别淀粉掺入蕲蛇体