慢性荨麻疹自身抗体的表达情况及意义分析

目的：对慢性荨麻疹自身抗体的表达情况及意义分析。方法：收集近期在本院治疗的慢性自身免疫性荨麻疹患者78例作为观察组,同时随机选择同期健康体检者78例作为对照,检测抗FcεRI抗体、抗甲状腺自身抗体（抗甲状腺过氧化物酶自身抗体与抗甲状腺球蛋白抗体）、抗幽门螺杆菌（HP）自身抗体、抗核抗体（ENA）、抗dsDNA抗体等自身抗体表达情况,并进行比较分析。结果：与对照组相比较,慢性荨麻疹患者FcεRI抗体、抗甲状腺抗体、HP抗体、抗dsDNA等自身抗体表达阳性率均明显升高,与对照组比较差异具有统计学意义,抗核抗体阳性率差异则不具有统计学意义。与对照组相比较,慢性荨麻疹患者FcεRI抗体、抗核抗体、抗dsDNA等自身抗体表达水平明显升高,比较差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：慢性特发性荨麻疹的发病与其自身免疫背景有关,其血清内存在多种自身抗体异常表达,值得临床进一步研究应用。     

食物致敏性评价表达人IgE高亲和力受体αβγ的大鼠嗜碱性白血病粒细胞2H3细胞株的建立及鉴定

目的建立稳定表达人IgE高亲和力受体alpha、beta和gamma链(human high affinity receptor containing alpha, beta and gamma chain,hFcεRIαβγ)的大鼠嗜碱性白血病粒细胞(rat basophil leukemia,RBL)-2H3细胞株。方法将包装好的载有hFcεRIαβγ慢病毒感染目的细胞RBL-2H3细胞,实时PCR检测细胞hFcεRIαβγ的表达水平,流式细胞仪分选hFcεRIα表达阳性细胞,并检测分选后细胞hFcεRIα的表达水平。结果成功构建重组慢病毒表达载体GV348-hFcεRIαβγ和慢病毒颗粒;慢病毒能够有效感染RBL-2H3细胞,hFcεRIαβγ在RBL-2H3细胞中成功表达,hFcεRIα在RBL-2H3细胞蛋白水平成功表达。结论初步构建了hFcεRIαβγ/RBL-2H3细胞,相较于RBL-2H3细胞,该细胞表达hFcεRIα,可与人血清IgE特异性结合,能够更好地应用于食品致敏性评价体系中。     

血脂异常问答

正肝脂酶(HL)有何作用?肝脂酶在肝实质细胞中合成,是内源性甘油三酯代谢的关键酶,主要作用于极低密度脂蛋白(VLDL)、乳糜微粒(CM)残粒等小颗粒脂蛋白,同时可调节胆固醇从周围组织转运到肝脏,使肝内的极低密度脂蛋白转化为低密度脂蛋白。     

TGF-β1及TGF-βRⅠ信号转导异常与卵巢恶性肿瘤生物学行为的关系

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)、转化生长因子-βⅠ型受体(TGF-βRⅠ)在卵巢癌组织中的表达与其信号转导的临床意义.方法采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(S-P)免疫组织化学法检测85例卵巢良恶性肿瘤组织中TGF-β1、 TGF-βRⅠ的表达.结果 TGF-β1在卵巢良、恶性肿瘤组织中的表达明显高于正常卵巢组织,组间有明显差异(P＜0.05);TGF-βRI在恶性组中度阳性至强阳性的表达明显少于良性及正常对照组,三组间有明显差异(P＜0.05);TGF-β1、TGF-βRI的异常表达与临床分期有明显关系,与年龄和腹水无关,TGF-β1与上皮性癌有关,TGF-βRI的低表达与癌瘤转移、病理分级呈负相关(r=-0.283).结论 TGF-β1 、TGF-βRI的表达和信号转导异常与卵巢恶性肿瘤的无止境生长行为有关,是评估患者预后的有效参数,可能是卵巢恶性肿瘤的重要发病机制之一.     

5-脂氧酶在神经元缺氧缺糖损伤中的调节作用及机制

5-脂氧酶(5-LO)是重要炎症介质白三烯类(LTs)合成的关键性限速酶.缺氧缺糖(OGD)损伤可诱导5-LO激活,发生核膜移位和生成LTs,OGD激活5-LO与ROS-P38MAPK信号通路有关.     

慢性荨麻疹部分发病机制的临床进展

慢性荨麻疹属于临床中较为常见的反复性发作的一种过敏性疾病,主要发病原因除释放肥大细胞脱颗粒释放组胺,还能够使IgE及其受体的自身抗体FcεRI所引起Thl/Th2细胞亚群失衡和自身免疫反应及其炎症递质白三烯释放,致使后续出现炎症反应等。出现异常的免疫反应后,会对单纯用抗组胺药物治疗难度较大的慢性荨麻疹,提供出更多的治疗靶位。     

肝胰岛素抵抗的研究进展

胰岛素受体底物蛋白-2信号转导异常（影响因素如：蛋白和脂类磷酸酶、脂源性细胞因子、过氧化物酶体增生物激活受体等）、游离脂肪酸、胰淀素等均可导致胰岛素抑制内源性葡萄糖生成的能力减弱和肝糖原合成减少,一旦高分泌量的胰岛素无法代偿,即出现空腹血糖升高,表现为胰岛素抵抗。减轻肝胰岛素抵抗,作为治疗2型糖尿病是很有前景的。     

耐碳青酶烯类铜绿假单胞菌相关耐药基因及I型整合酶基因研究

目的研究耐碳青酶烯类铜绿假单胞菌的相关耐药基因及Ⅰ型整合酶基因。方法采用聚合酶链反应（PCR）法对铜绿假单胞菌碳青酶烯类耐药相关的金属β-内酰胺酶IMP、VIM、SPM、GIM基因和外膜蛋白oprD2基因及Ⅰ型整合酶基因等6种主要耐药基因进行检测与分析。结果51株耐亚胺培南和美罗培南铜绿假单胞菌SPM、GIM金属酶基因检测均阴性,16株IMP和5株VIM型金属酶基因阳性,14株耐亚胺培南铜绿假单胞菌oprD2基因阳性,其余37株铜绿假单胞菌oprD2基因阴性,7株产金属酶并同时伴有膜孔蛋白oprD2基因缺失,49株Ⅰ型整合酶基因intⅠ1阳性。结论膜孔蛋白oprD2基因缺失是铜绿假单胞菌对碳青酶烯类抗菌药物耐药的主要原因,其次是产生金属酶,Ⅰ型整合酶基因广泛存在于铜绿假单胞菌中,提示要加强对耐药基因在病原菌种属间传播和扩散的监测工作。     

辛伐他汀对高脂血症大鼠肝细胞B族Ⅰ型清道夫受体表达的影响

目的观察高脂造模组大鼠肝细胞上B族Ⅰ型清道夫受体表达的变化,及辛伐他汀造模同时给药该受体表达的变化。方法雄性大鼠共60只,随机分为三组,每组20只,正常组以普通啮齿动物颗粒饲料饲喂,对照组以高脂组方与普通颗粒饲料饲喂,治疗组以上述高脂饲料饲喂,并同时以辛伐他汀(5 mg·kg-1·d-1)灌胃,共8周,采集血液标本,观察血脂变化;取肝脏制作冰冻切片,以辣根过氧化物酶标记的去载脂蛋白E的血浆高密度脂蛋白亚组分HDL3滴加到肝组织冰冻切片上,二氨基甲苯氨染色,普通光镜下观察,计算机图像系统分析。结果(1)与正常组相比,对照组胆固醇水平明显增高,组间差异有统计学意义(P<0.01);治疗组与对照组相比,胆固醇水平明显下降,组间差异有统计学意义(P<0.01)。(2)20倍光镜初步观察结果显示:正常组棕色沉积颗粒最少,对照组棕色沉积颗粒较多,治疗组与对照组相近。计算机图像分析系统分析可见:对照组阳性灰度值大于正常组(P<0.01),治疗组阳性灰度值接近于对照组。结论高脂血症时肝细胞B族Ⅰ型清道夫受体的表达明显增加,辛伐他汀降脂治疗不能增加其表达。     

大型成年哺乳类动物绵羊阴道平滑肌细胞的原代培养改进方法研究

目的探索原代培养成年大型哺乳动物绵羊阴道平滑肌细胞(vaginal smooth muscle cells,VSMC)改良方法。方法成年绵羊阴道平滑肌取材,利用预消化组织块法(将组织剪碎呈1 mm3大小组织块,0.1%Ⅰ型胶原酶消化20 min,0.1%胰酶-EDTA与0.1%Ⅰ型胶原酶混合溶液再次消化30 min,将组织块种于培养瓶)原代培养VSMC,并与传统组织块法和酶消化法进行细胞萌出速度及增殖速度比较,提高VSMC原代培养效率;免疫荧光染色法和western bloting法检测平滑肌细胞标志物calponin及a-SMA表达鉴定VSMC。结果预消化组织块法获得原代VSMC速度快于传统组织块法和酶消化法,3 d可见细胞萌出,9 d可达80%细胞融合,"峰谷"特征明显,而酶消化法至12 d增殖至80%细胞汇合,传统组织块法约7 d可见细胞萌出,14 d可达80%细胞汇合;VSMC平滑肌标志物calponin和a-SMA均呈阳性表达(P0.05);VSMC可扩增代数有限,扩增7代后即表现出细胞形态改变,增殖缓慢,胞核内出现空泡,死亡细胞增加等表现。结论预消化组织块法可较快速多量获得绵羊VSMC。     

铜绿假单胞菌的多重耐药基因研究

目的为了解铜绿假单胞菌的多重耐药和有关机理。方法聚合酶链反应(PCR)法对多重耐药的铜绿假单胞菌进行β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因、耐消毒剂基因的检测,并对VIM基因进行测序。结果PCR显示TEM型β-内酰胺酶基因、VIM型金属β-内酰胺酶基因、aac(6′)-Ⅰ型、ant(3″)-Ⅰ型AMEs基因和qacE△1-sul1型耐消毒剂基因扩增阳性;oprD2基因扩增检测呈缺失型;VIM金属酶基因扩增产物测序,经BLAST程序分析为VIM-2型。结论铜绿假单胞菌存在多重耐药基因,以支持疗法为宜。     

体外受精胚胎转运患者卵泡液中的胰岛素样生长因子Ⅱ

在hMG和枸橼酸克罗来芬(CC)刺激周期的人卵泡液内已捡出Ⅰ型胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰ),并已知在黄体化颗粒细胞内有IGF-Ⅱ合成,促性腺激素调节IGF-ⅡmRNA表达。本文研究IGF-Ⅱ在卵泡发生中的作用及其与IGF-Ⅰ和卵泡液类固醇激素合成的关系。     

中国部分地区铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因型研究

目的调查中国部分地区临床分离铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因型分布。方法收集北京、浙江、江苏及湖北等地区5所医院临床分离的165株铜绿假单胞菌,PCR方法检测5种AMEs基因。结果165株铜绿假单胞菌111株检出AMEs基因,总检出率为67.27%,各种AMEs基因检出率分别为:aac(3)-Ⅱ28.48%、aac(6′)-Ⅰ24.85%、aac(6′)-Ⅱ32.12%、ant(3″)-Ⅰ26.06%和ant(2″)-Ⅰ31.52%,各地区AMEs基因型有较大差异。结论中国部分地区铜绿假单胞菌AMEs基因携带率高;各地区AMEs基因型有较大差异。     

铜绿假单胞菌中氨基糖苷类基因的分布与耐药性研究

目的 了解医院临床分离的多药耐药铜绿假单胞菌(MDRPA)中氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因存在状况.方法 收集临床2010年9-11月分离的铜绿假单胞菌40株进行氨基糖苷类基因检测,采用PCR法检测;统计铜绿假单胞菌的药敏结果,并分析氨基糖苷类基因和耐药性之间的关系.结果 40株铜绿假单胞菌中36株检出耐药基因,检出率为90.0％,PCR扩增出8种氨基糖苷钝化酶基因,大部分菌株均产生氨基糖苷钝化酶,其次为乙酰转移酶(ACC)和核苷转移酶(ANT),acc3Ⅱ、ant6Ⅰ、acc3Ⅳ、acc3Ⅰ、ant(3")Ⅰ基因的阳性率分别为80.0％、55.0％、25.0％、15.0％及7.5％.结论 医院临床分离的多药耐药铜绿假单胞菌中AMEs基因携带率很高,至少存在5种AMEs基因,分别为aac(3)Ⅱ、ant(6)Ⅰ、acc(6′)Ⅰ、acc(3)Ⅰ和ant(3″)Ⅰ.     

微量元素硒抗脂质过氧化作用的研究

加高脂血清对小牛主动脉平滑肌细胞的笫31代老化细胞培养两周以加强平滑肌细胞的脂质过氧化作用,并在培养液中添加不同浓度的亚硒酸钠,以VE作对照比较。结果表明,高脂培养的平滑肌细胞内过氧化脂质含量显著高于对照组,加硒剂及VE组,平滑肌细胞内过氧化脂含量均显著低于高脂组及对照组。不同剂量的硒剂显示出剂量效应关系。昆明种小鼠预服硒剂3周,然后用~(60)钴一次照射,继续服硒剂1周后测全血谷胱甘肽过氧化物酶活性。放射损伤小鼠全血谷胱甘肽过氧化物酶活性显著低于对照组;服硒组则接近对照组水平。结果显示,硒通过提高谷胱甘肽过氧化物酶活性具有抗脂质过氧化的作用。     

铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因分子流行病学研究

目的研究铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因分子流行病学. 方法用PCR方法对35株铜绿假单胞菌的氨基糖苷类耐药相关基因、氨基糖苷类修饰酶基因aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(3)-Ⅲ、aac(3)-Ⅳ、aac(6′)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅱ、 aph(3′)-Ⅵ、ant(3″)-Ⅰ和ant(2″)-Ⅰ等9种基因进行了检测与分析. 结果35株中20株检出氨基糖苷类修饰酶基因(57.1%);9种基因由高到低的检出率分别为aac(6′)-Ⅱ(34.2%)、ant(2″)-Ⅰ(28.6%)、aac(3)-Ⅱ(17.1%)、aac(6′)-Ⅰ(17.1%)、ant(3″)-Ⅰ(14.3%) 、aac(3)-Ⅰ(0)、aac(3)-Ⅲ(0)、aac(3)-Ⅳ(0)、aph(3′)-Ⅵ(0). 结论本研究表明,湖北襄樊地区铜绿假单胞菌耐氨基糖苷类药物,主要机制为产氨基糖苷类修饰酶(57.1%),本组铜绿假单胞菌中另有15株表型为氨基糖苷类药物不敏感但9种基因检测为阴性,可能存在其他修饰酶基因,或者存在16S rRNA基因突变.     

产VIM-2型金属酶铜绿假单胞菌的研究

目的分析烧伤科病房产金属酶铜绿假单胞菌的同源性、金属酶基因型及耐药谱特点。方法用E-test法进行药物敏感性试验;采用2-巯基乙醇纸片协同试验筛选产金属酶菌株,对金属酶基因和整合酶基因进行聚合酶链反应(PCR)和序列分析;碱裂解法提取质粒,质粒结合、电转化试验和质粒消除试验验证酶基因有无可转移性;应用随机扩增DNA多态性分析技术(RAPD)分析产金属酶菌株的同源性。结果48株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌2-巯基乙醇纸片协同试验阳性6株,6株菌金属酶引物VIM-2扩增阳性,经测序证实为VIM-2型金属酶,定位于质粒上;RAPD分析显示所有产酶株均来自同一克隆,都携带Ⅰ类整合酶基因。结论烧伤科病房有产VIM-2型金属酶铜绿假单胞菌流行。     

铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因检测研究

目的了解医院铜绿假单胞菌中氨基糖苷类修饰酶编码基因的存在状况。方法对临床分离的59株铜绿假单胞菌中氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因进行PCR检测。结果共检出同时含aac(6′)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ和ant(2″)-Ⅰ3种氨基糖苷类修饰酶基因的铜绿假单胞菌35株,且氨基糖苷类修饰酶基因对庆大霉素、阿米卡星的耐药表型有较高的阳性预测值>75%。结论铜绿假单胞菌对庆大霉素、阿米卡星耐药中氨基糖苷类修饰酶基因发挥着重要的作用。     

神经内科重症监护病房铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因研究

目的 了解分离自神经内科重症监护病房患者的铜绿假单胞菌(PAE)氨基糖苷类修饰酶基因存在状况.方法 对36株铜绿假单胞菌,采用ATB微生物鉴定仅鉴定细菌,用PCR法检测aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(3)-Ⅲ、aac(3)-Ⅳ、aac(6')-Ⅰ、aac(6')-Ⅱ、aph(3')-Ⅵ、ant(3″)-Ⅰ和ant(2″)-Ⅰ等9种氨基糖苷类修饰酶基因.结果 36株PAE中aac(6')-Ⅱ阳性19株52.8%、aac(3)-Ⅱ阳性17株47.2%、aac(6')-Ⅰ阳性4株11.1%和aph(3')-Ⅵ阳性1株2.8%,而其他基因均阴性,共有28株(77.8%)检出氨基糖苷类修饰酶基因.结论 神经内科重症监护病房铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因携带率很高.     

硒碘对大鼠谷胱甘肽过氧化物酶活力及甲状腺激素代谢的影响

用四种硒水平饲料和两种碘一饮水饲养大鼠观察了其甲状腺激素代谢。硒组间肝脏、肾脏Ⅰ型脱碘酶活力、血精Ｔａ含量差异显著；两碘组间甲状腺重量、甲状腺过氧化物酶活力。甲腺碘含量、肾脏ＩＤⅠ及大脑Ⅱ型脱碘酶活力差异明显；Ⅰ－组中甲状腺ＩＤ Ⅰ活力与血清三碘甲腺原氨酸含量呈显著正相关。