四氦唑盐法肿瘤药敏试验及应用

目的：介绍四氮唑盐（MTT）法肿瘤药敏试验的原理及临床应用。方法：以国内外大量有代表性的论文为依据进行分析、归纳整理。结果：MTT法肿瘤药敏试验在白血病、胃癌、乳腺癌、卵巢癌、食管癌、头颈癌、肺癌、骨肉瘤等方面作用独特。结论：MTT法肿瘤药敏试验简便、快捷、经济，临床相关性高，将得到更加广泛的应用。     

四氮唑盐法肿瘤药敏试验及应用

目的:介绍四氮唑盐(MTT)法肿瘤药敏试验的原理及临床应用.方法:以国内外大量有代表性的论文为依据进行分析、归纳整理.结果:MTT法肿瘤药敏试验在白血病、胃癌、乳腺癌、卵巢癌、食管癌、头颈癌、肺癌、骨肉瘤等方面作用独特.结论:MTT法肿瘤药敏试验简便、快捷、经济,临床相关性高,将得到更加广泛的应用.     

个体化裸鼠荷人肺癌肿瘤模型的建立

目的:建立人肺癌个体化可传代组织块动物模型.方法:组织块移植组将直径2mm的人肺癌新鲜标本癌组织块移植于BALB/C裸鼠背部皮下组织内,每例人肺癌新鲜标本均移植入5只裸鼠体内,成瘤者为第1代.取第1代移植瘤组织块以相同方法每例标本移植于另5只BALB/C裸鼠背部皮下组织内,成功者为第2代.重复上述传代方法得到第3代移植瘤.将人肺癌细胞株A549、H1795分别移植于BACLC裸鼠背部皮下组织内,成瘤达500 mm3后取癌组织块.分别取实验组的原代人肺癌肿瘤及第1、2、3代移植瘤部分组织,及作为对照的细胞系移植瘤组织,固定于10％福尔马林溶液中,石蜡包埋、切片、HE染色,光镜下观察比较其形态异同.结果:组织块移植组瘤细胞不仅保留了人肺癌细胞的异型性,还保持原有排列结构；而作为对照的细胞系移植瘤细胞失去了原有的排列结构,仅保留了癌细胞的异型性.结论:利用不同患者的手术切除肺癌标本所建立的裸鼠荷人肺癌肿瘤模型具有个体化特征,为肺癌个体化治疗的研究提供依据.     

金葡菌标本直接药敏200例结果分析

开展细菌标本直接药敏试验,与常规细菌药敏比较,能缩短检测时间,是一种省时、省力、省料简便快速的方法。1 金葡菌的来源,鉴定及药敏方法①菌种来源:200份金葡菌均取自本院患者,脓汁154份,烧伤创面分泌物46份。②细菌鉴定:血平板菌落呈圆形凸起、平滑、湿润、边缘整齐、不透明、有光泽,有透明溶血环。普通平板有金属光泽。革兰染色阳性,呈葡萄状排列。触酶试验阳性,血浆凝固酶试验阳性,甘露醇发酵试验阳性,鉴定为金黄色葡萄球菌。③标本直接药敏方法:取大量标本     

对67例G-杆菌菌尿症尿标本的直接药敏试验

目的 对G-杆菌感染的尿标本直接做药敏试验，然后与正式鉴定及药敏试验做对照，对比两种方法得到的抑菌环直径，从而确定G-杆菌菌尿症尿标本直接药敏试验的可行性。方法以微量加样器取尿液10ul置洁净玻片上，涂成3—5mm直径的薄涂片，行革兰氏染色，观察其染色形态，并确认是单一G-杆菌感染。油浸镜（1000x）下每个视野平均菌数≥2的尿标本疑为菌尿症。此时标本中的细菌含量相当于10^5／nd。直接于M—H培养基上行K—B法药敏试验35℃-37℃18～24h后观察结果。同时将尿标本定量培养和菌落计数，得到的纯培养菌株按美国临床试验室标准化委员会（NCCLS）推荐的纸片扩散法做对照药敏试验，所得数值与直接药敏法做对比。结果67例G-杆菌感染的尿标本的直接药敏试验与NCCLS推荐的纸片扩散法药敏试验，两者抑菌环直径无显著性差异（P〉0．05）。结论对于单一的G-杆菌感染的尿标本可直接进行药敏试验，其快速、简便、经济的特点。更加适用于临床，可在24h内报告初告药敏结果，供临床早期用药参考。     

大肠癌细胞体外药敏试验结果与临床疗效的相关性

目的 研究肿瘤体外药敏试验对大肠癌个体化治疗的应用价值及与临床近期疗效的相关性.方法 采用组织块培养-MTT终点染色-计算机图像分析法(TECIA),体外测定大肠癌细胞对氟脲嘧啶(5-Fu)、顺铂(DDP)、阿霉素(ADM)、丝裂霉素(MMC)、奥沙利伯(OXA)及联用化疗药物的敏感性.结果 42例大肠癌细胞对试验化疗药物的敏感性有高到低依次为OXA＞ DDP＞ 5-Fu＞ MMC＞ ADM＞ CBP＞MTX.联合用药试验中,5-Fu+ DDP、5-Fu+ MMC的敏感率及抑制率高于单用;临床随访中,CF敏感组和CF不敏感组采用CF方案的临床有效率分别为68.6％( 24/35)和28.6％( 2/7),差异有统计学意义(x2=3.96,P＜0.05).结论 以组织块培养为基础的MTT体外药敏试验,与临床相关性较好.筛选药物后进行针对性的个体化治疗,能预测化疗疗效,提高大肠癌患者的生存率.     

大肠癌的药物敏感试验及临床意义

目的:通过测定59例大肠癌患者对阿霉素(ADM)、5-氟脲嘧啶(5-Fu)、丝裂霉素(MMC)、卡铂(CBP)、顺铂(DDP)、氨甲喋呤(MTX)6种化疗药物的体外敏感性试验,探讨肿瘤药敏试验对大肠癌患者个体化化疗的应用价值。方法:采用组织块培养-终点染色-计算机图像分析法(TECIA)。结果:59例大肠癌对肿瘤组织的的平均抑制率由高到低依次为5-Fu>MMC>ADM>MTX>DDP,联合用药的抑制率为MMC+DDP+5-Fu>MMC+5-Fu>DDP+5-Fu。结论:大肠癌是对化疗药物敏感性较好的肿瘤,且存在着明显的异质性。体外肿瘤药敏试验在指导大肠癌的临床用药及个体化化疗方面具有重要的指导意义。     

临床血液检验中的两种不同细菌鉴定法应用分析

目的探究直接药敏试验与常规药敏试验在临床血液细菌鉴定与检验中的临床应用价值。方法对我院200例阳性血培养标本,分别给予直接法与常规法进行细菌鉴定和药敏试验对比。结果全部200份血液标本中阳性血液标本共计122份,22份G+球菌,100份G-杆菌,药敏试验结果显示,17份G+球菌,85份G-杆菌,一致率分别为77.27%和85%,两种方法总一致率为83.61%。两种检测方法药物敏感、中度敏感以及耐药差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论阳性血培养标本进行直接药敏试验,其检验结果不仅操作简便、时间短,而且检测结果准确,可广泛应用于细菌感染的临床血液检验。     

MTT法检测肾脏肿瘤药物敏感性的分析

目的：分析肾脏肿瘤化疗药物的体外敏感性。方法：对19例肾脏肿瘤手术切除标本进行常规MTT药敏试验，检测临床常用的16种化疗药物的体外抑制率，并对检测结果进行分析。结果：肾脏肿瘤对化疗药物的敏感性不高，而且不同个体对同一药物及不同药物对同一个体的敏感性差异较大。结论：单一药物的化疗不是肾脏肿瘤治疗的理想方案。     

肿瘤患者的体外药物敏感试验

目的：探讨3－（4，5）－双甲基－2噻唑－（2，5）－二甲基溴化四氮唑蓝（MTT）体外药敏法测定肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。方法：113例肿瘤患者进行了体外药敏试验。结果：肺癌患者对CBP、VM26、THP、DDP、BLM、MTX、HCPT较敏感，对VP16、DTIC、EADM、VCR不敏感；乳腺癌患者对CBP、BLM、DDP、5－FU、HCPT、MTX、THP、MMC较敏感，对VM26、VCR、VP16、TAX不敏感；神经胶质瘤患者对VM26、DDP、5－FU、MMC、ACR、ADM、BLM较敏感，对CCNU、MTX、VCR、PCB不敏感。不同个体对同一药物的敏感性以及不同阶段相同药物对不同个体的敏感性具有明显差异，不同类型的肿瘤有着不同的药敏谱。结论：化疗药物的敏感性检测对临床选择化疗药物具有重要的参考价值。MTT法为临床肿瘤化疗的药物敏感性检测提供了简便、快速的方法。     

DHA诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡及其作用机制研究

目的 探究二十二碳六烯酸(DHA)对人胃癌细胞SGC-7901生长的影响及诱导细胞凋亡的作用机制.方法 MTT法测定细胞存活率.Hoechst染色法进行细胞形态学观察.流式细胞仪检测细胞凋亡和活性氧(ROS)的变化,硫代巴比妥钠比色法(TBA法)测定细胞脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量变化,二硫代二硝基苯甲酸(DNTB)比色法测定谷胱甘肽(GSH)含量.结果 MTT和流式细胞仪分析结果显示.细胞增殖率随DHA处理浓度的递增逐渐下降,呈现明显剂量效应关系.形态学观察显示凋亡细胞细胞质凝聚、浓染,凋亡小体出现.60.80,100/μmol·L-1DHA作用细胞24 h后,MDA含量显著高于对照组(P<0.05);GSH含量下降(P<0.05).80μmol·L-1DHA处理细胞5 h后,ROS出现峰值,且抗氧化剂NAC可以减弱ROS的变化.结论 DHA可以诱导胃癌细胞SOC-7901凋亡,脂质过氧化水平和RoS升高可能是DHA诱导细胞凋亡的重要机制.     

The mitochondrial uncoupler dicumarol disrupts the MTT assay

Dicumarol is routinely added to the 3-[4,4-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay to study the role of NAD(P)H:quinone oxido-reductase in drug activation and detoxification. We assessed the direct impact of dicumarol (a mitochondrial uncoupler) on the MTT assay. Mouse mammary tumor (EMT6) and Chinese hamster ovary (CHO) cells were treated with media containing either 10 or 1% fetal bovine serum and dicumarol (0-1000 microM) mimicking standard assay conditions. MTT, clonogenic, total reactive oxygen species (ROS), and oxygen consumption assays were performed. Significant increases in the apparent viability of EMT6 and CHO cells were observed with MTT assays after short time periods with maximum effects at 2 hr. Reduced serum concentrations intensified this effect. Conversely, significant decreases in viability for both cell lines occurred after longer incubations and serum withdrawal enhanced this effect in both cell lines. Clonogenic assays provided contrasting results where viability increased significantly only in EMT6 cells (not CHO) and was smaller than that reported by MTT. Furthermore, greater dicumarol toxicity was observed in clonogenic assays. Significant toxicity compared to control occurred after 4-hr treatment (vs. 12 hr MTT) and serum withdrawal also increased the toxicity of dicumarol with extended culture. ROS production in EMT6 and CHO cells increased in a concentration-dependent manner with 20-min dicumarol administration and thereafter declined. The EC(50) for dicumarol-induced oxygen consumption was 0.84 microM in CHO compared to 1.18 microM in EMT6 cells. Cell lines are differentially sensitive to the toxicity of dicumarol and cell survival data may be skewed by its inclusion, probably due to ROS production and mitochondrial uncoupling. Dicumarol is not recommended for inclusion in the MTT assay.     

聚乳酸-替莫唑胺微胶囊对大鼠C6脑胶质瘤体外和体内抑瘤试验

目的 观察聚乳酸-替莫唑胺(PLA-TMZ)微胶囊对大鼠C6脑胶质瘤体外和体内抑瘤效果.方法 C6细胞悬液内分别加入不同浓度PLA-TMZ微胶囊样品、市售TMZ、TMZ原料药作MTT检验,对比其体外抑瘤率.将C6细胞悬液注入SD大鼠腋部皮下和皮层S1区构建皮下和脑内胶质瘤模型,在肿瘤间质内注射PLA-TMZ微胶囊和TMZ原料药,观察对比肿瘤体积变化和SD大鼠生存期.结果 大鼠C6脑胶质瘤细胞抑制率达到50%时的药物浓度(IC50):微胶囊样品200μg/ml;市售TMZ 400μg/ml;TMZ原料药未达到50%抑制率.PLA-TMZ微胶囊在皮下和脑内均有显著抑瘤作用(P＜0.01),并能延长脑内胶质瘤模型大鼠的生存期(中位生存期42d vs.31d,P＜0.01).结论 PLA-TMZ微胶囊剂可做为瘤内注射治疗胶质瘤的有效制剂.     

MTT肿瘤药敏试验中培养基的选择

目的考察RPMI1640双琼脂培养基(R)对肿瘤细胞培养的选择性,选择适合的MTT法培养基。方法用R和肿瘤细胞选择性培养基(completeassaymedium,CAM)分别进行乳腺、肠、胃癌的MTT药敏试验。结果所试的3个癌种、20个药品总体来说在两种培养基中抑制率无统计学差异(P>0.05),单个药敏在乳腺癌中长春新碱、长春地辛和吡柔比星的CAM培养抑制率大于R培养(P<0.05),在肠、胃癌中无统计学差异。结论R培养肿瘤细胞的选择性和CAM相当,但鉴于R抑制成纤维细胞能力相对比CAM弱,R可能更适合含纤维细胞较少的癌种。     

雄黄注射液体内外抗肿瘤作用研究

目的:初步探讨雄黄注射液的体内外抗肿瘤作用。方法:采用噻唑蓝(MTT)方法观察雄黄注射液对培养的人白血病细胞株K562,人肝癌细胞株HepG-2,人胃癌细胞株MGC-803,和小鼠Lewis肺癌细胞的增殖抑制作用;建立小鼠S180腹水型肉瘤模型,采用1、2、3mg/kg剂量雄黄注射液作用于小鼠模型,观察雄黄注射液体内抗肿瘤作用。结果:MTT法显示雄黄注射液对人白血病细胞株K562,人肝癌细胞株HepG-2,人胃癌细胞株MGC-803,和小鼠Lewis肺癌细胞增殖有一定的抑制作用;灌胃给予雄黄注射液对小鼠S180腹水型肉瘤生长有一定抑制作用。结论:雄黄注射液能够抑制培养的肿瘤细胞生长,灌胃给药对S180腹水型肉瘤细胞移植的模型小鼠肿瘤增殖有明显的抑制作用。     

相思子毒素P2的体内外抗肿瘤作用研究

目的:研究相思子毒素P2(abrinP2)在小鼠体外和体内的抗肿瘤活性。方法:MTT体外试验法检测abrinP2对体外多种人肿瘤细胞的生长抑制作用;体内抗肿瘤试验观察abrinP2对小鼠肿瘤的抑制作用及对体重,胸腺、脾脏指数的影响。结果:MTT结果显示abrinP2对人鼻咽癌细胞CNE-2Z、人肺癌细胞A-549、人口腔上皮细胞KB、人胃癌细胞BGC均有较强的抑制作用。体内灌胃给予不同剂量的abrinP2(0.05mg/kg、0.075mg/kg和0.1mg/kg),共10天,对小鼠肿瘤Lewis、EMT6均有较强的抑制作用,抑制率达61.69%、49.6%,各给药组与空白对照组比较差异均具有统计学意义(P<0.01),给药后小鼠体重及脏器指数与空白对照组比较稍低,但与阳性给药组比较对小鼠机体及免疫系统的损害小。结论:abrinP2在体内体外均有较强的抗肿瘤作用。     

紫杉醇自组装核壳型纳米胶束的制备与性能

本文合成了聚乙二醇-聚谷氨酸苄酯(polyethylene glycol-polybenzyl-L-glutamate， PEG-PBLG)两亲嵌段共聚物， 并采用超微透析法制备了紫杉醇/PEG-PBLG核壳型纳米胶束。通过高效液相色谱测定了胶束的载药量及药物包封率； 采用动态光散射法测定了胶束的粒径及分布； 通过体外试验研究了紫杉醇/PEG-PBLG胶束的释药特性； 采用四噻唑蓝法考察了紫杉醇/PEG-PBLG胶束的体外细胞毒性； 通过裸鼠的抑瘤试验评价了紫杉醇胶束对人肝癌细胞的疗效。结果表明， PEG-PBLG胶束能包埋疏水性药物紫杉醇； 紫杉醇/PEG-PBLG胶束的粒径为80～265 nm， 且随着载体共聚物PBLG嵌段相对分子质量的升高而增大； 紫杉醇/PEG-PBLG胶束的体外释放具有缓释特性； 当紫杉醇浓度大于20 μg·mL^-1时， 紫杉醇/PEG-PBLG胶束的细胞毒性低于相应浓度的紫杉醇/聚氧乙烯蓖麻油注射剂(P<0.05)， 紫杉醇/PEG-PBLG胶束具有与紫杉醇/聚氧乙烯蓖麻油注射剂相似的抑制肿瘤作用。综上所述， 紫杉醇/PEG-PBLG纳米胶束具有较均匀的粒径及粒径分布、 缓释特性、 低毒和较好的抗肿瘤作用。     

MTT法测定卵巢癌患者单药与联合用药的体外敏感性

目的:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定卵巢癌患者术后单药与联合用药体外敏感性,为临床个体化化疗方案的选择提供参考。方法:采用临床常用的20种化疗方案所用药物对18例卵巢癌患者的新鲜标本进行MTT法体外敏感性测定。结果:不同类型的卵巢癌及同一类型的不同个体对化疗药物的敏感性差异较大;联合用药较单一用药的平均抑制率高。结论:卵巢癌化疗敏感性个体差异大。MTT法是一种简便而快速的测定肿瘤体外药物敏感性的试验方法,可用于卵巢癌临床个体化化疗方案的选择。     

尿多酸肽对人胃癌细胞SGC7901增殖的体外抑制作用

目的：研究肿瘤细胞分化诱导剂尿多酸肽（CDA—Ⅱ）对人胃癌细胞的体外抑制作用．方法：将CDA—Ⅱ胃癌细胞株SGC7901进行体外培养，观察CDA—Ⅱ对人胃癌细胞生长曲线及形态学等方面的影响。以四唑盐（MTT）比色法测定培养板中加入CDA—Ⅱ后，人胃癌细胞SGC7901的生物活性。结果：CDA—Ⅱ可减缓胃癌细胞的生长和增殖能力，体外实验中CDA—Ⅱ剂量为1—5mg／ml，对人胃癌细胞SGC7901的作用最佳剂量为1mg／ml。结论：在体外实验中CDA-Ⅱ可抑制胃癌细胞的增殖能力，对人胃癌细胞SGC7901有显著的抑制作用。     

EGCG逆转人食管癌耐药细胞株Eca109/DDP多药耐药的实验研究

目的研究EGCG逆转人食管癌耐药株Eca109/DDP多药耐药的作用。方法采用MTT法测定药物的耐药逆转情况;Westernblot检测耐药相关蛋白的表达。结果 EGCG显著提高了DDP对耐药株Eca109/DDP的杀伤作用,EGCG可降低Eca109/DDP耐药相关蛋白的表达。结论 EGCG具有药物增敏和逆转食管癌耐药的作用。