两种不同检测系统测定半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的方法学评价

目的评估两种半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cystatin C，Cys C）检测系统的分析性能。方法Cys C分别采用Dade Behring（德灵）公司出品的颗粒增强散射免疫比浊法（PENIA）和上海景源医疗器械有限公司出品的透射免疫比浊法试剂盒进行测定，评价的方法学指标为精密度、线性范围、抗干扰性、相关及偏倚。结果Cys C浓度在0．6—5．0mg／L时，两家试剂总变异系数（CV）〈8％，检测线性范围为0．4—6mg／L。血红蛋白〈10g／L，胆红素〈300mg／L，维生素C〈5g／L对两家试剂检测干扰〈10％，在可接受范围内。甘油三酯（TG）≤20mmol／L时德灵试剂检测不受影响（干扰〈10％）。景源试剂TG≥15mmol／L时低值血浆干扰〉10％，高值血浆不受干扰。50份血样进行相关性分析的结果显示景源检测试剂盒与德灵的PENIA测定方法相关性良好（r=0．98，P〈0．01）。线性回归分析经Cusum检验显示两方法间偏倚不具有统计学意义（P〉0．05），但是景源测定结果较德灵结果偏低，平均偏倚为-0．16。对同一份样本景源与德灵测定Cys C的最小至最大偏差范围为1．1％-23％，平均为5．1％。结论两种方法的精密度、抗干扰性、线性范围符合要求，但是系统问测定结果存在一定偏差。     

近红外颗粒速率免疫透射法测定血胱抑素C的性能评价

目的应用美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）的评价方案，客观地对近红外颗粒速率免疫透射比浊法测定血液中胱抑素C（CystatinC,Cys C）的性能进行评价。方法利用IMMAGE800特定蛋白仪的近红外颗粒速率免疫透射比浊法（以下简称免疫透射比浊法），对方法进行精密度、线性、干扰试验及与AULYMPUSAU2700全自动生化仪免疫透射法进行比较分析。结果Cys—C浓度的低值,高值两者分别为：批内CV为2.3％、2．09％；批间CV为3．31％、2．42％;日间CV为3．93％、2．48％：总CV为4．85％、2．85％日均值为0．891mg／dl、5．381mg／dl。样本在F—Bil干扰物试验中。浓度为0．11～1.13μmol／L，测定结果无干扰；在C—Bil干扰物试验中，浓度在0．12～1．16μmol／L，测定结果无干扰。在Hb干扰物试验中，浓度在0．4858～4．858g／L测定结果无干扰。在乳糜浊度干扰物试验中．浓度在155～1550度．测定结果无干扰。与AULYMPUS AU2700全自动生化仪的免疫透射比浊法比较有良好的相关性。Y=0．992X＋0．186，γ=0．990，P〈0．01。免疫透射比浊法测定结果略低，两种方法的平均偏差为0．1720mg／L；多于95％的测定值落在0．1073mg／L到0．2367mg／L。结论建立在IMMAGE800特定蛋白仪上用国产免疫透射试剂的近红外颗粒免疫透射比浊检测方法，进行方法学评价，证明该方法的重复性、准确性是符合临床检测要求的。     

近红外颗粒速率免疫透射法测定血胱抑素C的性能评价

目的应用美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）的评价方案，客观地对近红外颗粒速率免疫透射比浊法测定血液中胱抑素C（CystatinC,Cys C）的性能进行评价。方法利用IMMAGE800特定蛋白仪的近红外颗粒速率免疫透射比浊法（以下简称免疫透射比浊法），对方法进行精密度、线性、干扰试验及与AULYMPUSAU2700全自动生化仪免疫透射法进行比较分析。结果Cys—C浓度的低值,高值两者分别为：批内CV为2.3％、2．09％；批间CV为3．31％、2．42％;日间CV为3．93％、2．48％：总CV为4．85％、2．85％日均值为0．891mg／dl、5．381mg／dl。样本在F—Bil干扰物试验中。浓度为0．11～1.13μmol／L，测定结果无干扰；在C—Bil干扰物试验中，浓度在0．12～1．16μmol／L，测定结果无干扰。在Hb干扰物试验中，浓度在0．4858～4．858g／L测定结果无干扰。在乳糜浊度干扰物试验中．浓度在155～1550度．测定结果无干扰。与AULYMPUS AU2700全自动生化仪的免疫透射比浊法比较有良好的相关性。Y=0．992X＋0．186，γ=0．990，P〈0．01。免疫透射比浊法测定结果略低，两种方法的平均偏差为0．1720mg／L；多于95％的测定值落在0．1073mg／L到0．2367mg／L。结论建立在IMMAGE800特定蛋白仪上用国产免疫透射试剂的近红外颗粒免疫透射比浊检测方法，进行方法学评价，证明该方法的重复性、准确性是符合临床检测要求的。     

斑点金免疫渗滤法检测谷氨酸脱羧酶抗体及临床应用

目的：探讨斑点金免疫渗滤法快速测定谷氨酸脱羧酶抗体在糖尿病患者中的临床应用价值。方法：采用斑点金免疫渗滤法（DIGFA）检测88例糖尿病患者和40例正常人群的血清谷氨酸脱羧酶抗体（GAD－Ab)，并与酶联免疫吸附法（ELISA）作方法学的比较。结果：DIGFA法检测1型和2型糖尿病患者的血清GAD－Ab阳性率分别为61．3％和19．3％，有显著性差异（P＜0．01），且均明显高于正常人群。与ELISA法比较，两种方法的检出率无显著性差异（P＞0．05）。结论：血清谷氨酸脱羧酶抗体在1型及有高度1型糖尿病倾向的人群中检出率较高，可作为糖尿病分型的依据，斑点金免疫渗滤法快速、简便、可靠、有实用价值。     

ADA、TB-Ab-IgG检测对结核性胸膜炎诊断及鉴别诊断的临床价值

目的探讨胸水和血清腺苷脱氨酶（ADA）、结核抗体（TB—Ab—IgG）检测对结核性胸膜炎的诊断价值。方法采用斑点金免疫渗滤试验（DIGFA）和酶连续监测法对117例患者进行胸水和血清TB_Ab．IgG和ADA检测分析。结果87例结核性胸膜炎患者胸水、血清中TB-Ab-IgG的敏感性分别为62．0％和70．1％,特异性分别为93．1％和86．6％。ADA活性在结核性和癌性胸水中分别为52．51和10．26U／L（P〈0．01）。以胸水ADA≥40U／L做为诊断结核的临界值,其敏感性为79．3％,特异性为86．6％;以胸水ADA／血清ADA〉1．00为临界值,其敏感性为97．7％,特异性为96．6％。结论胸水和血清ADA、TB—Ab—IgG检测对结核性胸膜炎和非结核性胸膜炎具有诊断和鉴别诊断价值。     

雅培ARCHITECT ci8200全自动生化免疫分析仪FlexRate法检测酶活性评价

目的 评价雅培ARCHITECT ci8200全自动生化免疫分析仪启动FlexRate法检测超高酶活性样本的可靠性。方法 用雅培原装配套试剂和国产利德曼试剂分别以FlexRate法测定丙氨酸转氨酶（ALT）、门冬氨酸转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰转移酶（GGT）、淀粉酶（AMY）5种常用酶的重复性、线性范围，与其他仪器作方法学对比。结果 5种酶用雅培试剂检测批内变异系数（CV）：常规法为0．48％～1．06％，FlexRate法为0．23％～0．48％；利德曼试剂检测批内CV：常规法为0．63％～1．14％，FlexRate法为0．21％～0．68％。仪器启用FlexRate功能，ALT、AST、ALP、GGT、AMY的可报告范围分别至少延伸至3896U／L、3324U／L、6530U／L、6872U／L、8972U／L。2种试剂的FlexRate法与贝克曼LX20比较有良好的相关性，经同一酶校准品校正后5种酶的系统误差均〈5％。结论 以FlexRate法在测定超高酶活性样本时，结果可靠，避免假阴性错误，提高工作效率，同时适用于原装配套及国产试剂。     

金标法快速定量检测C反应蛋白

目的：评价金标法快速定量检测C反应蛋白（CRP）的临床应用价值。方法：对金标法定量检测CRP进行了评价，内容包括重复性、线性、可比性、抗干扰性和稳定性。结果：批内重复测定高、中、低值，CV≤5．5％，日间重复测定质控血清结果（23．55±0．83）mg／L，CV3．5％；线性回归方程P=0．995X＋0．172，r=0．999：甘油三酯和）胆红素对试验结果无干扰；与免疫速率散射比浊法的相关性分析，r值为0．995；全血与血清结果比值0．85～1．15：全血标本在缓冲液中保存60min内结果均无多大变化。结论：金标法快速定量检测CRP具有良好的重复性、线性和方法学的相关性，抗干扰能力强，适合应用于临床常规工作     

血细胞分析仪CRP测定性能的评价

目的了解血细胞分析仪CRP测定的性能特点。方法对ABXMicrosCRP血细胞分析仪系统测定CRP的精密度、携带污染率、线性、稳定性和相关性等指标进行测试。结果ABXMicrosCRP仪器测定CRP的精密度批内变异系数（CV）〈5．1％、批间CV〈10％及日间CV〈4．3％，均在临床可接受范围内。携带污染率小于1．20％；室温或4℃冷藏条件下保存的抗凝血标本48h内，CRP结果稳定性较好，相对偏差小于6．0％。线性范围1．0—70．0mg／L，检测低限可达1．0mg／L。该仪器测试的CRP结果和BNII仪器测试的结果（0—219．0mg／L范围）高度相关，相关系数r2=0．9659（血清）、回归方程Y=0．9967X-0．3985；r^2=0．9594（全血）、Y=0．9088X-0．1382；仪器测定的血清CRP结果与全血CRP结果也高度相关，相关系数r^2=0．9527、Y=1．0017X-0．8982。通过测试溶血标本和高脂血症标本，发现对MicrosCRP测试方法无明显干扰。结论ABXMicrosCRP仪器测定的CRP结果准确、可靠，可在临床使用。     

血清肌红蛋白比浊法测定试剂的评价及其初步临床应用

目的 通过评价肌红蛋白测定试剂的性能,建立一种用全自动生化分析仪检测肌红蛋白的免疫比浊法。 方法 利用标记抗体检测抗原的比浊法原理,进行精密度、线性、回收率、干扰试验。 结果 本法标准曲线y＝7．3635＋0．9739x,r＝0．9997。正常人血清肌红蛋白浓度的批内CV％为0．25％,批CV％为1．49％。心肌梗塞病者的则分别人1．3％与2．23％,回收率为97．1％～104．7％。血清TG＞5．0mmol／L或Hb＞500mg／L对肌红蛋白的检测才有干扰。测定100例健康体检者血清肌红蛋白（SMb）含量为20．7～58．9μg／L。33例急性心肌梗塞（AMI）患者的SMb的含量为542±178μg／L。 结论 该法具有快速、灵敏、简便、准确的优点,对AMI的诊断有较高的应用价值。     

i—CHROMATMReader免疫荧光分析仪测定超敏C反应蛋白性能评价

目的对i-CHROMATMReader免疫荧光分析仪检测超敏C反应蛋白0aypersensitiveC—reactiveDrotein,hs—CRP）的性能进行验证和评价。方法根据美国临床和实验室标准化协会（CLSI）标准,结合工作实际,设计实验方案,对韩国i-CHRO．MAwReader免疫荧光分析仪检测hs—CRP的检出限、精密度、准确度、线性、可比性、参考区间、加样量、干扰等主要分析性能进行验证和评价,将实验结果与厂商f韩国BoditechMedInc公司）提供的分析性能进行比较。结果批内精密度（CV％）为3．90％～6．17％、批间精密度（CV％1为4．04％～5．56％,均在厂商承诺范围内;检出限为0．5mg／L,符合临床要求;准确度实验显示i—CHROMA^TM Reader免疫荧光分析仪与Beekman-CoulterImmage免疫分析仪检测结果有较好的相关性：仪器对标本类型无特殊要求,全血与血清标本测定hs—CRP结果差异无统计学意Y-（P〉0．05）,有较好的可比性;20个结果均小于8mg／L,即大于8mg／L样本为0,可以引用厂商参考范围0．00～8．00mg／L;甘油三酯、胆红素对检测结果的影响在可接受的范围内,抗干扰能力符合要求。结论i—CHROMAmReader免疫荧光分析仪检测hs—CRP各项性能指标符合质量目标要求,同时它具有操作简便、检测迅速、精密度高、准确度好、线性范围广、抗干扰能力强等优点,值得推广应用。     

血清淀粉样蛋白A与C反应蛋白联合检测的临床应用价值

目的评估血清淀粉样蛋白A(SAA)与C反应的蛋白(CRP)联合检测的临床应用价值。方法采用胶体金法和免疫散射比浊法对82例感染性疾病组(包括15例肺炎、23例急性支气管炎、17例急性阑尾炎、16例急性胆囊炎、11例胰腺炎)患者及92名正常对照组的血清SAA和CRP水平进行检测,并比较两者间的浓度中位数及各疾病组的阳性检出率。结果感染性疾病组患者血清SAA与CRP浓度中位数水平分别为149.50 mg/L、34.20 mg/L,明显高于正常对照组分别为4.60 mg/L、3.82 mg/L,差异有统计学意义(P0.05);感染性疾病组血清SAA,与CRP阳性检出率分别为87.80%与79.26%。结论感染性疾病时,SAA与CRP水平变化趋势基本一致,且较CRP更为敏感。SAA与CRP都可作为一种监测炎症的有价值的标志物[1],SAA与CRP联合检测可以更有效的提高感染性疾病的检出率,为临床医生提供更敏感的诊断依据。     

速率散射比浊法测定血清可溶性转铁蛋白受体及临床应用

目的评价速率散射比浊法测定血清可溶性转铁蛋白受体（sTfR）,并探讨sTfR在区分缺铁性贫血（IDA）与其他类型贫血中的作用。方法用速率散射比浊法测定IDA组、其他贫血组及正常对照组的血清sTfR,并按美国临床实验室标准化研究所（CLSI）评价方案系统评价其重复性、回收率、线性范围和溶血、脂血、胆红素对sTfR测定的干扰影响。结果速率散射比浊法测定血清sTfR在0.73～8.23mg/L内线性良好（线性回归方程为Y=1.031X-0.12,r=0.9978）,批内和批间变异系数（CV）均〈4%,回收率分别为94.2%和98.6%。干扰试验发现,胆红素〈325μmol/L、三酰甘油〈19.8mmol/L和血红蛋白〈5g/L对测定结果无明显干扰。IDA组血清sTfR的浓度为（2.89±1.31）mg/L,其他贫血组血清sTfR的浓度为（1.53±1.42）mg/L,正常对照组sTfR的浓度为（0.84±0.15）mg/L。与其他贫血组及对照组比较,IDA组血清sTfR明显升高,受试者工作特征（ROC）曲线下面积（AUC）达0.939（P〈0.01）。结论速率散射比浊法检测血清sTfR简单、快速、检测线性范围宽,能有效抵抗溶血、脂血、黄疸的干扰,在IDA的诊断及与其他贫血的鉴别诊断上有明显的实际应用价值,值得临床推广。     

C-反应蛋白和淀粉样蛋白A在手足口病诊疗中的应用研究

目的探讨联合检测血清淀粉样蛋白A（SAA）和C-反应蛋白（CRP）在手足口病诊断及预后评估中的临床应用价值。方法采用荧光聚合酶链反应技术检测205例疑似手足口病患儿人肠道病毒71型核酸和柯萨奇病毒A16型核酸的感染情况;采用速率散射法测定205例疑似手足口病患儿血清CRP和SAA水平。结果手足口病组血清SAA明显高于非手足口病组,差异有统计学意义（P〈0.01）;CRP水平高于非手足口病组,差异有统计学意义（P〈0.05）;SAA与CRP比值高于非手足口病组,差异有统计学意义（P〈0.05）;手足口病重症组血清SAA与CRP明显高于非手足口病普通组,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论联合检测血清SAA和CRP水平及了解SAA和CRP变化情况有助于小儿手足口病的早期诊断以及危重症的早期识别。     

非血液透析慢性肾功能衰竭患者血清淀粉样蛋白A与肾性贫血、肾性营养不良的关系

目的探讨非血液透析慢性肾功能衰竭（chronic renal failure,CRF）患者血清淀粉样蛋白A（serum amyloidA protein,SAA）水平与肾性贫血、肾性营养不良之间的关系。方法依据肾小球滤过率（glomerular filtrationrate,GFR）将62例CRF（CRF组）患者分为3个亚组：A组16例、B组18例、C组28例。采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测各组患者血清SAA水平。并测定血常规、肝、肾功能。并与20例健康体检者（对照组）进行对比。结果CRF组血清白蛋白（Alb）、血红蛋白（Hb）水平均明显低于对照组（P均〈0.01）,A、B、C 3组血清SAA水平均显著高于对照组（P均〈0.05）。相关分析结果显示,CRF患者血清SAA水平与Alb、Hb均呈负相关（r分别=-0.461、-0.643,P均〈0.01）。结论非血液透析CRF患者存在血清SAA水平升高,这种微炎症状态可能通过不同的机制参与并加速了肾性贫血及肾性营养不良的发生。     

改良缺血修饰白蛋白测定方法（白蛋白-钴结合试验）的建立

目的建立改良的缺血修饰白蛋白（IMA）测定方法[白蛋白-钴结合（ACB）试验]。方法以1-亚硝基-2-萘酚（NN）代替二硫苏糖醇（DTT）作为显色剂,确定试验的基本条件（最佳波长、反应时间、试剂稳定性等）,并对该试验的精密度、敏感性、线性等进行评价。测定急性心肌梗死（AMI）和胸痛患者的IMA值并进行统计学分析。结果改良ACB试验最佳吸收波长为410 nm,反应体系0～25 min时吸光度值变化稳定,试剂在室温和4℃30 d内性能稳定,反应体系线性良好。批内变异系数（CV）为2.67%,批间CV为5.44%。应用显色剂NN对钴离子（Co2＋）的最低检出限为0.488 mg/L,应用DTT为7.812 mg/L。三酰甘油（TG）〈2.02 mmol/L、血红蛋白（Hb）〈6.9 g/L、总胆红素（TBil）〈66.0μmol/L时无干扰。AMI组为（1.195±0.320）吸光度单位（ABSU）,胸痛组为（0.855±0.068）ABSU,二者差异有统计学意义（P〈0.01）。结论以NN作为显色剂测定IMA的ACB试验灵敏、方便、简单,适合批量测定。     

Automated measurement of a constitutive isotype of serum amyloid A/SAA4 and comparison with other apolipoproteins

A constitutive isotype of serum amyloid A (SAA4) is present mostly in high density lipoprotein (HDL) and a little in other lipoproteins. In this study, we developed an automated method for measuring SAA4 concentration in serum by kinetic nephelometry of anti-SAA4 antibody-coated latex agglutination. Rabbit antibodies generated by immunization of recombinant SAA4 were found to have no apparent reactivity with acute phase SAA. The values determined by this method and by the previous enzyme immunoassay showed good agreement (r=0.862). Serum SAA4 values of 26 healthy adults ranged from 37–109 mg/L (mean; 62 mg/L). Their SAA4 concentrations were not significantly related with those of apolipoprotein A-I, A-II, B, C-II, C-III or E. Also, SAA4 did not correlate with cholesterol in preparation after removal of very low density lipoprotein and low density lipoprotein. These suggest the unique behavior of SAA4 in lipoprotein metabolism, while what contributes to variation of SAA4 levels in serum, especially in HDL, remains to be clarified. J. Clin. Lab. Anal. 11:363–368, 1997. © 1997 Wiley-Liss, Inc.     

人血清淀粉样蛋白A磁微粒化学发光免疫分析定量检测方法的建立及性能评价

目的 建立人血清淀粉样蛋白A(human serum amyloid A,SAA)磁微粒化学发光免疫分析定量检测方法。方法 采用基于磁微粒化学发光免疫分析的双抗体夹心法定量检测人血液中SAA含量。评价该方法学的空白限、精密度、线性、回收率和钩状效应等分析性能指标,并用以上方法检测60例细菌或病毒感染患者血清和40例正常人血清,进行临床比对试验研究。结果 该方法的空白限为0.1 mg/L; 分析内精密度不高于5%,分析间精密度不高于10%; 在2～200 mg/L范围内,线性相关系数可达0.990; 准确度偏倚不高于15%; 回收率在100%±15%以内; 样本中SAA的含量为10 000 mg/L时,未发现钩状效应; 与西门子免疫比浊法试剂平行比对试验,回归方程为:Y=1.099 8X-2.673 9,相关系数r2为0.983 4。结论 该方法灵敏度高、精密度好、线性范围宽和临床相关性好,具有一定的临床应用价值。     

PCT、hs-CRP、SAA检测在脓毒血症早期诊断的临床应用价值

目的 探讨降钙素原（procalcitionin,PCT）、超敏C-反应蛋白（high sensitive C-reactive protein,hs-CRP）及血清淀粉样蛋白A（serum amyloidA,SAA）对脓毒血症早期诊断的临床应用价值,为感染性疾病的诊治提供有效的实验依据.方法 通过测定300例非脓毒血症患者和120例脓毒血症患者的PCT、hs-CRP和SAA水平,分析PCT、hs-CRP和SAA在两组间的关系,并应用ROC曲线及Logistic回归方程进行分析.结果 脓毒血症组PCT、hs-CRP和SAA检测水平均明显高于非脓毒血症组,差异均有统计学意义（P均＜ 0.05）.PCT用于诊断脓毒血症的ROC曲线下面积（0.909）高于hs-CRP（0.683）和SAA（0.571）,当以PCT=1.84 ng/mL为诊断脓毒血症的cutoff值时,灵敏度为78.3％,特异性为92.6％.Logistic回归分析结果显示,PCT的偏回归系数最大为0.716,对脓毒血症的诊断有较好的诊断效能.结论 血清PCT水平能早期、准确预测和诊断脓毒血症,值得临床广泛应用.     

一种消除维生素C对三酰甘油测定干扰的方法

目的利用乙二胺四乙酸二钠铁（高价铁）消除维生素C（Vit C）在三酰甘油（TG）测定中的干扰，建立双试剂终点法测定TG。方法采用双试剂终点法测定血清TG。结果本法日内变异系数（CV）为1．13％、1．33％；日间变异系数（CV）为1．29％、1．46％；平均同收率为98．2％；线性可达10．0mmol／L。结论本法可以有效的消除血清中Vit C对TG测定的干扰，且适于自动化分析。     

Sensitive, direct colorimetric assay for copper in serum

We have developed a sensitive procedure for determination of serum copper by use of the color reagent 4-(3,5-dibromo-2-pyridylazo)-N-ethyl-N-sulfopropylaniline. After mixing serum sample and reagent, and incubating at 37 degrees C for 5 min, we measure the absorbance of the resulting chelate complex at 580 nm (molar absorptivity, 80,000 L.mol-1.cm-1). Results of the method varied linearly with copper concentration to at least 5 mg/L; the lower limit of detection was 0.1 mg/L. Within-run CVs were 1.6% and 3.3% for copper concentrations of 1.03 and 0.72 mg/L, respectively (n = 10 each). Between-run CV was 2.8% at 1.22 mg/L (n = 14). Results of the proposed method (y) correlated well with those determined by standard atomic absorption spectrophotometric techniques (x): y = 0.99x - 0.02 mg/L; Syx = 0.08; r = 0.977; n = 56. Iron, zinc, cadmium, cobalt, and lead do not interfere.