中药复方对大鼠急性脑出血血脑屏障的影响

目的:观察脑出血模型大鼠脑组织中伊文斯蓝含量变化,分析大鼠急性脑出血后血脑屏障的损伤及中药复方对其产生的影响。方法:实验于2006-01/2006-04在青岛大学医学院急诊研究室完成,选用SPF级Wistar雄性大鼠80只,以数字表法随机分为4组,即正常对照组、生理盐水组、模型组、中药复方组,每组各20只。中药复方组成:钩藤、黄芩、丹参、川芎。购于青岛山大天源药业公司,均为地道药材,钩藤产自广东,黄芩、丹参产自河北,川芎产自四川,水提醇沉,配成浓度1g/mL。伊文斯蓝为美国进口分装,福州麦新公司提供。脑内注血法制备急性脑出血大鼠模型,中药复方组,造模后即予以6.3mL/kg中药复方灌胃(相当于6.3g/kg的生药)治疗,2次/d。各组大鼠均于术后6h,4,7,14d开颅取出血侧脑半球(每组每个时间点各5只)。杀检前采用舌下静脉注射伊文斯蓝,观测伊文斯蓝在脑组织中的含量以反映脑血管通透性的变化,从而评价急性脑出血后血脑屏障的损伤及中药复方对其影响。结果:实验大鼠80只全部进入结果分析。①术后6h,4,7,14d模型组脑组织伊文斯蓝含量均高于正常对照组,差异有非常显著性意义[(175.88±19.73),(10.15±1.65);(237.41±15.48),(10.62±1.84);(210.44±12.25),(10.11±1.95);(160.75±20.8),(10.27±1.77)μg/g;P<0.01]。②术后6h,4d中药复方组脑组织伊文斯蓝含量与模型组比较差异无显著性意义[(168.54±18.87),(240.24±17.66)μg/g;P>0.05],术后7d,14d中药复方组与模型组比较差异有非常显著性意义[(18.88±5.95),(12.35±2.34)μg/g;P<0.01]。③术后14d中药复方组与正常对照组、生理盐水组比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:急性大鼠脑出血后6h至14d持续存在血脑屏障损伤,中药复方治疗脑出血可能与促进血脑屏障损伤的修复有关。     

脑脉通注射液对大鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用

背景：脑脉通注射液是治疗缺血性脑血管病的中药复方制剂，具有拮抗钙超载，调节前列素与血栓素系统的失衡状态，阻断自由基介导的脂质过氧化反应而保护大脑。目的：观察脑脉通注射液对大鼠脑组织含水量和Ca^2＋含量、超氧化物歧化酶活性、脂质过氧化物、6-酮-前列素1α、血栓素水平的影响，并与复方丹参注射液做比较。设计：随机对照实验。单位：成都中医药大学实验中心。材料：实验于1997—10／1998—02成都中医药大学实验中心完成。选择健康雄性Wistar大鼠72只，随机分为6组，每组12只。①正常对照组：不进行模型制备，自由饮水，常规饲养。②模型组：腹腔注射生理盐水1．67mL／kg，2次／d。⑧复方丹参注射液1，67mL／kg组：腹腔注射复方丹参注射液1．67mL／kg，2次／d。④脑脉通注射液3．33，1．67，0．84mL／kg组：腹腔注射脑脉通注射液3．33，1．67，0．84mL／kg，2次／d。方法：各组大鼠用药48h后，于麻醉状态下快速断头处死，立即取出脑组织，从两半球中间切开分成两份，一份在低温下制备脑组织匀浆采用放射免疫分析法待测6-酮-前列素1α和血栓素B2水平评估前列素与血栓素系统的平衡状态、采用改进的邻苯三酚自氧化法和硫代巴比妥酸比色法检测超氧化物岐化酶活性和脂质过氧化物水平评估自由基介导的脂质过氧化情况。另一份立即在电子天平上称取干、湿重，计算脑组织含水量评估脑水肿情况。采用原子吸收分光光度法检测脑组织Ca^2＋含量评估钙超载情况。主要观察指标：①各组大鼠脑组织含水量和Ca^2＋含量。②各组大鼠脑组织超氧化物歧化酶活性、脂质过氧化物含量。⑧各组大鼠脑组织6-酮-前列素1α和血栓素B2含量。结果：72只大鼠均进入结果分析。①各组大鼠脑组织含水量和Ca^2＋含量：模型组明显高于正常组[（82．27&;#177;1．32）％，（77、24&;#177;1．36）％；（267．47&;#177;15．69），（37．55&;#177;13．23）μg，P〈0、01]，4个治疗组的脑组织含水量均有不同程度的减轻，脑脉通注射液3．33mL／kg组效应最强[（78．74&;#177;1、41）％]，复方丹参注射液1．67mL／kg组最弱[（81．45&;#177;1．52）％]。复方丹参注射液各组Ca^2＋含量均有不同程度降低，存在剂量效应依赖性，而复方丹参注射液1．67mL／kg组Ca^2＋含量与模型组接近[（253．66&;#177;12．85）μg／g，P〉0．051。②各组大鼠脑组织超氧化物歧化酶活性、脂质过氧化物含量：模型组超氧化物歧化酶活性明显低于正常组[（86．18&;#177;3．17），（131．86&;#177;4．67）μkat／g，P〈0．011，经过治疗后脑脉通3个剂量组的超氧化物歧化酶活性均有提高，存在剂量效应依赖性（P〈0．01），脑脉通注射液3．33mL／kg组效应最强[（119．02&;#177;4．00）μkat／g]，复方丹参注射液1．67mL／kg组超氧化物歧化酶活性与模型组接近（P〉0．05）。模型组脂质过氧化物含量高于正常组[（52．46&;#177;3．25），（32．29&;#177;2．23）μmol／L，P〈0．01]，各治疗组的脂质过氧化物含量均显著低于模型组，而脑脉通注射液3.33，1．67，0．84mL／kg组的疗效优于复方丹参注射液1．67mL／kg组[（35．68&;#177;2．86），（41．54&;#177;2．47），（45．71&;#177;3．14），（47．84&;#177;2．71）μmol／L，P〈0．011。⑧各组大鼠脑组织6-酮-前列素1α和血栓素B2含量：模型组脑组织6-酮-前列素1α含量明显低于正常组（P〈0．01），4个治疗组均能提高6-酮-前列素1α含量，脑脉通注射液3.33，1．67,0．84mL／kg组的疗效优于复方丹参注射液1．67mL／kg组[（43．84&;#177;2．98），（35．01&;#177;4．32），（29．97&;#177;3．81），（22．89&;#177;3．64）ng／g，P〈0．011。模型组脑组织血栓素B2含量明显高于正常组（P〈0．01），经治疗后4个治疗组与模型组比较均能显著降低脑组织血栓素B2含量，且存在剂量差异，而复方丹参注射液1．67mL／kg组的效果低于脑脉通注射液3．33，1．67，0．84mL／kg组[（40．58&;#177;1．34），（32．85&;#177;1．43），（34．31&;#177;1．39），（37．27&;#177;1．52）ng／g，P〈0．011。结论：脑脉通注射液可减轻脑水肿、拮抗钙离子、调节血栓素和前列腺素系统失衡、提高抗氧化酶活性和抗自由基损伤作用，从而起到保护脑组织结构和功能的治疗效应，且有一定的效量关系，脑脉通注射液的效果优于复方丹参注射液。     

淫羊藿、鹌鹑复方对免疫力低下小鼠免疫功能的影响

目的：观察验方淫羊藿、鹌鹑复方对免疫力低下小鼠免疫功能的影响。 方法：实验于2005—09／10在三峡大学医学院天然药物实验室完成。①选用昆明系雄性小鼠30只，鼠龄三四个月，体质量（20&;#177;2）g。将昆明系雄性小鼠随机分为3组：空白对照组、模型组和中药复方治疗组，每组10只。②空白对照组：实验进程中正常饲养不作任何处理；模型组：腹腔内注射80mg／kg环磷酰胺造成免疫力低下模型。1次／d。同时灌服生理盐水25mL／（kg&;#183;d）；中药复方治疗组：腹腔内注射80mg／kg环磷酰胺造成免疫力低下模型，1次／d,同时灌胃淫羊藿、鹌鹑复方粉剂溶解液（复方粉末来源于淫羊藿、鹌鹑复方胶囊。由三峡大学第一临床医学院和长阳县人民医院制备，其主要成分为淫羊藿、鹌鹑、肉苁蓉等中药材。淫一鹑胶囊为医院制剂，2g／粒）25g／（kg&;#183;d）。3组均连续干预10d。③用药10d后，取其脾制成脾细胞悬液。采用流式细胞仪检测脾组织T细胞亚群。④组间计量结果差异比较采用t检验。 结果：30只小鼠均进入结果分析。①型组小鼠脾脏CD^3＋，CD^4＋ T细胞亚群百分比和CD^4＋／CD^8＋明显低于空白对照组[（36．95&;#177;2．17）％，（26．27&;#177;2．58）％，1．61&;#177;0．21；（47．11&;#177;1．72）％，（36．14&;#177;1．95）％，1．89&;#177;0．12，P〈0．05—0．01]；中药复方治疗组明显高于模型组[（44．04&;#177;2．02）％，（28．20&;#177;1．37）％，2．23&;#177;0．11。P〈0．05-0．01]。②模型组小鼠脾脏CD^8＋T细胞亚群百分比明显低于空白对照组[（16．34&;#177;1．72）％，（19．16&;#177;2．02）％，P〈0．05]。高于中药复方治疗组[（12．65&;#177;1．12）％。P〈0．01]。 结论：淫羊藿、鹌鹑复方能够显著改善免疫力低下小鼠的免疫功能。     

涤痰汤对脑出血大鼠神经元线粒体内细胞色素C释放的影响

目的：观察大鼠脑出血后血肿周围神经元线粒体内激活半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶及诱导细胞凋亡的细胞色素C的释放规律以及血肿变化和中药涤痰汤的干预作用。方法：实验于2003-10／2004-03在中南大学中西医结合研究所实验室进行。取健康SD大鼠65只，随机分成4组：正常组（n=5），假手术组（n=20），模型组（n=20），涤痰汤组（n=20），除正常组外，其余3组设4个时间点：6h，1，3,5d，每个时间点5只大鼠。正常组不干预，模型组和涤痰汤组用脑内立体定位注射含0．4U Ⅻ型胶原酶的生理盐水2 μL诱导大鼠脑出血模型，假手术组注入2 μL生理盐水。涤痰汤组大鼠手术清醒后即灌服涤痰汤中药煎液（半夏、南星各12g，橘红7．5g，枳实、赤茯苓各10g，石菖蒲、人参各5g，竹茹3．5g，甘草2．5g）生药2．67g／（kg&;#183;d），模型组和假手术组用蒸馏水灌胃，2mL／次．2次／d。神经元线粒体内细胞色素C的释放情况应用免疫组织化学法检测，不同时间点大鼠脑内血肿的最大直径用直尺测量。结果：65只动物均进入结果分析。①脑组织细胞色素C阳性细胞计数：正常组未见阳性细胞；假手术组仅于6h，1d时见少数阳性表达细胞，余时间点未见阳性细胞；模型组血肿周围于6h出现阳性表达细胞，1d阳性细胞计数达高峰，3d出现轻度下降，5d明显下降[（12．66&;#177;2．12），（51．74&;#177;2．13），（35．46&;#177;2．84），（17．34&;#177;2．08）个]；涤痰汤组与同时间模型组比较在6h计数无明显差异[（12．68&;#177;2.06）个，P〉0．05]，1,3,5d时阳性细胞减少明显[（50．28&;#177;2．87）,（31．12&;#177;3．05）,（13．18&;#177;2.94）／个，P〈0．05]。②脑血肿的最大直径：正常组和假手术组无血肿形成；模型组造模后于1d达到最大，3d有所变小，5d最小[（4．08&;#177;0．16），（3．58&;#177;0．15），（2．48&;#177;0．15）mm]；涤痰汤组在3d时血肿小于模型组[（3．22&;#177;0．26）mm，P〈0．05]，5d时差距更明显[（1．70&;#177;0．19），P〈0．01]。结论：脑出血后血肿周围的神经元细胞色素C释放明显增多，而且是脑出血的一个早期事件，从脑出血后6h即开始，1d最明显，而后逐渐下降；涤痰汤具有阻止细胞色素C释入胞浆的作用，从而阻断凋亡信号进一步传导，保护脑出血后神经元免于凋亡；同时促进血肿的吸收。     

温胆汤的睡眠改善作用与失眠大鼠脑中胆囊收缩素8表达的关系

目的：分析中药复方温胆汤改善睡眠的作用与脑肠肽-胆囊收缩素8表达的关系。方法：实验于2004-09／2005-01在黑龙江中医药大学中医方药分析实验室完成。选择健康雄性Wistar大鼠28只，按随机数字表法分为4组，即正常对照组、对氯苯丙氨酸化失眠模型组、温胆汤组及地西泮组，每组7只。除正常对照组外，其余3组大鼠腹腔注射对氯苯丙氨酸复制大鼠失眠模型，动物出现昼夜节律消失，白天也活动不停，整体观察与正常对照组有明显不同，表明模型复制成功。模型复制成功后，每日8：00am按1mL／kg体积灌胃给药，温胆汤组大鼠给予600g／L温胆汤水煎液（由半夏10g，竹茹10g，枳实10g，橘皮15g，甘草5g，茯苓7．5g，生姜5片、大枣1枚（5g）组成，6．1g／kg生药）；地西泮组给予92g／L地西泮水溶液；正常对照组和对氯苯丙氨酸化失眠模型组给予蒸馏水，1次／d，共6d。于末次给药50min后，将大鼠直接脱颈椎处死，取所需脑组织，按照免疫组织化学方法处理后，在CMIAS多功能真彩色病理图像分析系统下分析温胆汤对失眠大鼠皮质及下丘脑胆囊收缩素8表达的影响。结果：28只大鼠全部进入结果分析，无脱失。各组大鼠大脑皮质及下丘脑胆囊收缩素8阳性细胞百分率比较：对氯苯丙氨酸化失眠模型组大鼠皮质、下丘脑胆囊收缩素8阳性细胞百分率均显著低于正常对照组[（3．35&;#177;0．33）％，（15．14&;#177;0．69）％；（5．95&;#177;0．84）％，（27．96&;#177;2．42）％，t=3．6003．12．8119，P〈0．01]，温胆汤组大鼠皮质、下丘脑胆囊收缩素8阳性细胞百分率均显著高于对氯苯丙氨酸化失眠模型组[（5．47&;#177;0．89）％，（24．6&;#177;1.77）％，t=2.1211，9．4600，P〈0．01]。地西泮组大鼠皮质、下丘脑胆囊收缩素8阳性细胞百分率与对氯苯丙氨酸化失眠模型组相近[（4．17&;#177;0．18）％．（16．82&;#177;1．70）％，P〉0．05]。结论：中药复方温胆汤可以明显增强失眠大鼠大脑皮质、下丘脑胆囊收缩素8的阳性表达，进而增加大鼠睡眠，推测胆囊收缩素8可能是“胃不和”与“卧不安”之间的物质基础。     

赤芍总苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护效果

目的：观察赤芍总苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的作用并分析可能的作用机制。 方法：实验于2005-11／2006-01在安徽医科大学基础医学院生理教研室与药理学教研室完成。健康Wistar大鼠100只，随机数字表法分成5组：假手术组，模型组，赤芍总苷3mg／kg组，赤芍总苷6mg／kg组，阳性药物组（灌胃灯盏花素），每组20只。赤芍总苷3mg／kg组、赤芍总苷6ms／ks组和阳性药物组分别灌胃相应的药物，给药容积为5mL／kg体质量，1次／d，连续6d。假手术组与模型组分别灌胃等量的生理盐水。应用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，观察缺血2h再灌注24h后赤芍总苷对大鼠脑组织梗死面积（梗死百分比=梗死灶质量／右侧大脑半球质量&;#215;100%）、丙二醛含量及乳酸脱氢酶活性、Na^＋-K^＋-AT-Pase与Ca^2＋-ATPase活性的影响。 结果：实验大鼠100只均进入结果分析。①实验大鼠脑组织梗死面积百分比：赤芍总苷3mg／kg组、赤芍总苷6mg／kg组、阳性药物组与模型组相比均减少[模型组（27．4&;#177;3．3）％，赤芍总苷3ms／ks组（23．3&;#177;3．6）％，赤芍总苷6mg／kg组（18．2&;#177;5．3）％，阳性药物组（19．3&;#177;4．1）％，P＜0．05&;#177;0．01]。②实验大鼠脑组织中丙二醛和乳酸脱氢酶含量：模型组与假手术组相比丙二醛含量升高，乳酸脱氢酶活性降低，赤芍总苷3mg／kg组、赤芍总苷6mg／kg组、阳性药物组与模型组相比，可降低脑组织中的丙二醛含量，增高脑组织中乳酸脱氢酶活性[丙二醛含量：假手术组（2．11&;#177;0．32）μmol／g，模型组（7．43&;#177;1．24）μmol／g，赤芍总苷3mg／kg组（3．14&;#177;0.77）μmol/g，赤芍总苷6mg／ks组（2．54&;#177;1．08）μmol/g，阳性药物组（2．86&;#177;0．83）μmol／g；乳酸脱氢酶活性：假手术组（55．84&;#177;3．50）μkat／g，模型组（20．50&;#177;2．17）μkat／g，赤芍总苷3mg／kg组（28．0&;#177;5．83）μkat／g，赤芍总苷6mg／kg组（44．3&;#177;4．50）μkat／g，阳性药物组（34．01&;#177;5．17）μkat／g，P＜0．05～0．01。③实验大鼠脑组织中Na^＋-K^＋-ATPase与Ca^2＋-ATPase活性：模型组与假手术组相比均降低，赤芍总苷3mg／kg组、赤芍总苷6ms／ks组、阳性药物组与模型组相比均升高[Na^＋-K^＋-ATPase活性：假手术组（21．54&;#177;4．98）mkat／g，模型组（13．32&;#177;3．42）mkat／g，赤芍总苷3ms／ks组（16．74&;#177;2．76）mkat／g，赤芍总苷6mg／kg组（20．58&;#177;2．16）mkat／g，阳性药物组（18．12&;#177;4．98）mkat／g；Ca^2＋-ATPase活性：假手术组（15．00&;#177;2．40）mkat／g，模型组（7．32&;#177;1．44）mkat／g，赤芍总苷3mg／kg组（9．36&;#177;2．40）mkat/g，赤芍总苷6mg／kg组（13．26&;#177;1．98）mkat／g，阳性药物组（11．40&;#177;1．80）mkat／g，P＜0.05～0.01]。 结论：赤芍总苷可降低局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑梗死面积百分比，抑制脂质过氧化反应，改善梗死后脑组织的能量代谢。     

乳酸脱氢酶抗体对大鼠血管源性脑水肿的干预效应

目的：从酶屏障的角度观察乳酸脱氢酶抗体对大鼠血管源性脑水肿的干预作用。 方法：实验于2005-06-10／07-10在南方医科大学附属南方医院神经内科实验室完成。①分组：60只清洁级Wistar大鼠随机分为正常组、脑水肿组、脑水肿甘露醇组与脑水肿乳酸脱氢酶抗体组，每组15只。每组取10只用于脑组织水分含量测定，其余5只用于脑毛细血管伊文思蓝渗出量测定。②模型制备及给药：用腹腔注射苯肾上腺素的方法制成血管源性脑水肿模型。正常组不注射苯肾上腺素及治疗药物，直接断头取脑；脑水肿组制备模型后不给予治疗药物，即刻断头取脑；脑水肿甘露醇组在制成模型后由股静脉注射甘露醇（20g／L，0．5g／kg），30min后断头取脑；脑水肿乳酸脱氢酶抗体组在制成模型后腹腔注射乳酸脱氢酶抗体（10mL／kg），30min后断头取脑。通过水分分析仪分别测定各组脑灰、白质水分含量百分比。用伊文思蓝测定血脑屏障的通透性。 结果：60只大鼠均进入结果分析。①脑水肿甘露醇组和脑水肿乳酸脱氢酶抗体组脑灰、白质的水分含量百分比显著低于脑水肿组[灰质：（72.69&;#177;1．90）％，（72．78&;#177;1.34）％,（76.53&;#177;1.39）％，P〈0．0l：白质：（73．63&;#177;1．11）％，（69．58&;#177;2．73）％．（77．45&;#177;2．38）％，P〈0．01]。脑水肿甘露醇组与脑水肿乳酸脱氢酶抗体组相比脑灰质水分百分比差异无显著性意义（P〉0．05），白质水分含量差异有显著性意义（P〈0．01）。②脑水肿甘露醇组和脑水肿乳酸脱氢酶抗体组伊文思蓝渗出量与脑水肿组相比有显著性下降[（0．0626&;#177;0．0033），（0．0441&;#177;0．0056），（0．0736&;#177;0．0032）A／g（P〈0．01）].与脑水肿甘露醇组相比，脑水肿乳酸脱氢酶抗体组伊文思蓝渗出量有显著下降（P〈0．01）。 结论：甘露醇可降低灰质、白质水肿，但降低血脑屏障通透性差。乳酸脱氢酶抗体对减少血管源性脑水肿大鼠脑灰、白质水分含量、降低血脑屏障通透性均有显著效果。血管源性脑水肿中血脑屏障的通透性改变与乳酸脱氢酶活性有关，乳酸脱氢酶抗体对血管源性脑水肿有治疗作用。     

益肾降浊汤对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织抗氧化酶活力的干预效应

目的：观察脑缺血再灌注后大鼠脑组织丙二醛、钙离子含量和超氧化物歧化酶活性的变化，探讨益肾降浊汤对其损伤脑组织抗氧化酶活力的影响。 方法：实验于2003-04／2004—09在承德医学院基础医学研究所进行。采用Wister大鼠120只，雌雄各半，随机分为5组，每组24只，即正常对照，假手术组，模型组，益肾降浊汤组，都可喜组。益肾降浊汤由泽泻、何首乌、黄连、肉苁蓉、石菖蒲、三七组成，由承德市药材公司提供，水煎、过滤、浓缩至每毫升药液含生药2．53g；都可喜（阿米三嗪与萝巴新按一定比例的混合制剂），法国施维雅药厂生产，上海福达制药有限公司分装（批号：90841）。对模型组．益肾降浊汤组，都可喜组在造成大鼠高脂血症的基础上，进行脑缺血再灌注。都可喜组按20mg／kg都可喜，益肾降浊汤组按2．53g／kg生药．灌胃给药，均为1次／d，从术前3d开始至杀检为止。假手术组，高脂血症大鼠仅做双侧颈总动脉分离术，然后缝合，不进行缺血再灌注，正常对照组：不加任何处理。各组分别于造模后第1，7，15天断头取脑，每时间点8只。用羟胺法测超氧化物歧化酶活性，TBA法测丙二醛含量，用原子分光光度法测钙离子含量。 结果：实验大鼠120只全部进入结果分析。①第1，7，15天模型大鼠超氧化物歧化酶活性与正常大鼠相比明显降低[（16．05&;#177;3.17），（16.33&;#177;1．97），（17．01&;#177;4．03），（22．11&;#177;2.29）NU／mg；P〈0．05～0．01]；而益肾降浊汤组酶活性与同期模型组相比，显著升高[（18．89&;#177;2．36），（20.36&;#177;2.46），（22．98&;#177;2．14）NU／mg；P〈0.05-0.01]。②模型组大鼠3个时间点脑组织内丙二醛含量显著高于正常对照组[（11．78&;#177;1．32），（10.15&;#177;1．44），（8.15&;#177;2．16），（8．56&;#177;1．46）μmol／g，P〈0．05-0.01]，而益肾降浊汤组3个时间点的丙二醛含量较同日期模型组明显降低[（11.78&;#177;1.32），（10.15&;#177;1．44），（8．15&;#177;2．16）μmol／g，P〈0．05-0．01]。③各组钙离子含量与丙二醛含量呈现相同的变化趋势。 结论：益肾降浊汤可提高脑组织内超氧化物歧化酶活性，降低缺血再灌后脑组织丙二醛含量及钙离子含量，能增加脑缺血再灌注模型大鼠脑组织抗氧化酶的活性，保护脑神经元。     

加减二仙汤对急性不完全脑缺血大鼠脑水肿的影响

目的：探讨加减二仙汤对急性不完全脑缺血再灌注大鼠脑组织含水量和超氧化物歧化酶活性的变化及缺血再灌不同时间脑组织的形态学改变。方法：实验于2002—12在泰山医学院形态学实验室完成。①选择99只中老年Wistar大鼠，随机分成假手术组11只、再灌对照组44只和再灌实验组44只。其中后两组又分为再灌6，24h，3，7d组，每组11只。②制备急性不完全脑缺血再灌模型，再灌实验组大鼠造模前给予加减二仙汤煎剂（由仙茅，仙灵脾，当归，黄芪，丹参，红花等中药组成，由泰山医学院附属医院中药房提供，每毫升含生药量14mg），假手术组和再灌对照组灌胃等量生理盐水。③各组于观测时间点取脑组织检测含水量和超氧化物歧化酶活性，并进行形态学研究。结果：99只大鼠均进入结果分析。①再灌实验6，24h，3d组脑含水量明显低于再灌对照6，24h，3d组[6h：（79．49&;#177;2．29），（81．04&;#177;0．09]％，t=2．374．P〈0．05：24h：（78．97&;#177;2．84]，（81．92&;#177;0.95）％t=3．257，P〈0．01；3d：（76．77&;#177;0．51）,（79．88&;#177;0．76）％，t=4．837，P〈0.11。②再灌实验6，24h，3d组超氧化物歧化酶活性明显高于再灌对照6，24h，3d组[6h：（122．41&;#177;8．85），（113．40&;#177;9．00）μg／g，t=4．471，P〈0．01；24h：（123．40&;#177;10．24），（118．54&;#177;4．16）μg／g,t=2．451，P〈0．05；3d：（131.36&;#177;5．08），（127．74&;#177;3.38）μg／g,t=2．963，P〈0．05]。⑧形态学研究结果表明，再灌对照组脑组织损伤严重，主要表现为顶叶皮质毛细血管内液体渗出，管腔狭窄甚闭锁，神经细胞损伤、皱缩甚者脱失；而再灌实验组损伤明显减轻。结论：给予加减二仙汤大鼠脑组织含水量降低，超氧化物歧化酶活性升高，说明加减二仙汤可减轻脑水肿产生、抑制再灌注损伤，保护脑组织。     

参仙汤对多发性脑梗死性痴呆大鼠学习记忆能力的干预效应

背景：解放军总医院自行研制的参仙汤方，经临床初步观察28例脑血管性痴呆患者，其智能量表分值有明显提高。目的：观察中药复方参仙汤对多发性脑梗死性痴呆大鼠学习记忆的影响，并对其抗自由基损伤能力进行分析。设计：双盲随机对照实验。单位：解放军总医院中医科。材料：实验于1997-05／12在解放军总医院中医科完成。选取3个月龄SD大白鼠72只，随机分为6组：正常对照组，痴呆模型组，阿尼西坦组，参仙汤30，15，7．5g／（kg&;#183;d）剂量组，12只／组。参仙汤由人参、仙灵脾、何首乌、地龙等组成。按传统煎药法煎取药液，以恒温水浴锅分别浓缩成含生药2．0，1．0，0．5g／mL。方法：参仙汤30，15，7．5g／（kg&;#183;d）剂量组分别按成人每公斤体质量剂量的20，10，5倍给予参仙汤灌胃，剂量分别为生药30，15，7．5g／（kg&;#183;d）；阿尼西坦组给予100mg／（kg&;#183;d）阿尼西坦灌胃；痴呆模型组和正常对照组分别灌以等量生理盐水。连续给药7d，第7天给药后1h开始造模。除正常对照组外，其余各组均造模。左心室注射液体石蜡栓子0．25mL/kg，建立多发性脑梗死模型。造模后继续给药至42d。然后采用水迷宫实验对大鼠学习记忆能力进行评估。实验结束后1h将各组大鼠脱臼处死，进行组织、脏器各项生化指标的测定。主要观察指标：参仙汤对多发性脑梗死性痴呆大鼠水迷宫作业时间、作业正确次数、脏器生化指标的影响。结果：实验纳入72只大鼠，操作过程中脱落9只，最后共63只大鼠进入结果分析。①参仙汤对多发性脑梗死性痴呆大鼠水迷宫作业时间的影响：与痴呆模型组比较，参仙汤15，30g／（kg&;#183;d）剂量组于迷宫实验第5天均明显缩短[（24．1&;#177;13．3），（14．7&;#177;6．9），（13．7&;#177;7．5）s，P均〈0．051、②参仙汤对多发性脑梗死性痴呆大鼠水迷宫作业正确次数的影响：与痴呆模型组比较，参仙汤15，30g／（kg&;#183;d）剂量组于迷守实验第5天均显著增加[（1．70&;#177;2．07），（3．82&;#177;1．89），（4．36&;#177;1．75）次，P〈0．011。⑧参仙汤对多发性脑梗死性痴呆大鼠超氧化物歧化酶的影响：勺痴呆模型组比较，参仙汤15，30g／（kg&;#183;d）剂量组脑、肝组织超氧化物歧化酶活力均显著增加[（127．2&;#177;7．2），（1713&;#177;11．5），（181．7&;#177;10．9）μkat／kg，P〈0．001；（168．0&;#177;93．7）．（185．8&;#177;14．9），（200．7&;#177;15．4）μkat／kg，P〈0．05，P〈0．011。④参仙汤对多发性脑梗死性痴呆大鼠丙二醛含量的影响：与痴呆模型组比较，参仙汤15，30g／（kg&;#183;d）剂量组脑、肝组织丙二醛含量均明显降低[（296．0&;#177;37．8），（204．6&;#177;43．5），（1973&;#177;43．5）nmol／g，P〈0．001；（238．9&;#177;60．8），（160．3=29．4），（152．1&;#177;34．4）nmol／g，P〈0．01]。⑤参仙汤对多发性脑梗死性痴呆大鼠丙二醛含量的影响：与痴呆模型组比较，参仙汤15，30g／（kg&;#183;d）剂量组脑、肝组织脂褐素含量均明显降低[（10.88&;#177;1．95），（6．35&;#177;155），（5．85&;#177;1．23）μg/g，P〈0．001：（7．17&;#177;1．75），（4．38&;#177;1．54），（3．69&;#177;1．24）μg／g，P〈0.01]．结论：中药参仙汤具有提高多发性脑梗死性痴呆大鼠脏器组织超氧化物歧化酶活力、减轻脂质过氧化反应、降低组织丙二醛和脂褐素含量的作用，通过减轻脑缺血再灌注的自由基损伤，从而改善多发性脑梗死性痴呆大鼠的学习记忆能力。