蛋白酶激活受体-1在结肠癌组织中的表达及其临床意义

目的：观察并探讨蛋白酶激活受体-1（proteinase activated receptor-1,PAR-1）在结肠癌组织中表达的临床意义。方法：用免疫组织化学方法检测65例结肠癌及其癌旁肠组织中PAR-1的表达情况。结果：PAR-1的表达在结肠癌组织中高于癌旁肠组织,随肌壁癌组织浸润度和淋巴结转移程度的提升而增高,均有显著差异（P〈0.01）;PAR-1的表达虽随着癌分化程度降低而增高,但无显著差异（P〉0.05）。结论：PAR-1的表达与结肠癌发展及临床病理分期有关,可作为结肠癌临床预后指标之一。     

结肠癌组织中蛋白酶活化受体-1的表达及意义

目的 探讨结肠癌组织中蛋白酶活化受体-1（PAR-1）mRNA的表达情况及其临床意义.方法 实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测33例结肠癌患者癌组织及其相应癌旁组织中PAR-1 mRNA的表达情况,分析PAR-1 mRNA与结肠癌分化程度、病理分期以及转移等指标的相关性.结果 结肠癌组织中PAR-1 mRNA的表达明显增高,比邻近癌旁组织平均高4.99倍;二者ΔCt比较,t=9.15,P〈0.01.同时低分化的结肠癌患者组PAR-1 mRNA表达量明显高于中、高分化患者组,P〈0.01;有转移患者组的PAR-1 mRNA表达量明显高于无转移患者组,P〈0.01;而在结肠癌临床Ⅰ~Ⅱ期与Ⅲ~Ⅳ期患者组之间,PAR-1 mRNA表达量差异无统计学意义,P〉0.05.结论 PAR-1 mRNA在结肠癌中高表达,且与结肠癌的分化及是否转移有关.     

T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1表达水平与胃癌生物学行为的关系

目的探讨T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1（Tiam1）在胃癌组织、癌旁组织、胃良性病变组织中的表达水平，及其与胃癌转移等生物学行为的关系。方法用实时荧光定量逆转录PCR（FQ-Rt-PCR）方法，对66例胃癌患者的癌组织、癌旁组织及11例胃良性病变患者的组织标本中Tiam1 mRNA进行定量检测。结果66例胃癌患者的癌组织、癌旁组织中Tiam1 mRNA表达阳性率分别为92．4％、19．7％，11例胃良性病变患者的组织标本中有1例患者有Tiam1 mRNA表达，3类组织标本的差异有统计学意义（χ^2=78．96，P〈0．01）；胃癌组织中Tiam1 mRNA表达量高于癌旁组织，且与患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤原发部位无关（P〉0．05），但随着淋巴结转移的发生、浸润深度加深、分化程度降低、TNM分期增高，而呈现增高趋势（P〈0．05）。结论FQ-Rt-PCR检测Tiam1表达具有较高的敏感性和特异性，Tiam1与胃癌生物学行为密切相关，有可能成为胃癌转移的基因治疗新靶点。     

Wnt-1和PAR-1在胃癌中的表达及其病理特征的相关性研究

目的探讨Wnt-1和PAR-1在胃癌的表达与临床病理学特征的关系以及2者在胃癌组织中表达的相关性。方法用免疫组化方法检测78例胃癌及其癌旁胃组织中Wnt-1和PAR-1的表达情况,运用统计学分析Wnt-1和PAR-1在胃癌的表达与临床病理学特征的关系,以及Wnt-1和PAR-1在胃癌的表达的相关性。结果 Wnt-1和PAR-1在胃癌的表达明显高于正常胃组织(P<0.05);Wnt-1和PAR-1的表达阳性组具有更高的淋巴结转移率(P<0.05);Wnt-1和PAR-1的表达与患者的性别和年龄无关,与肿瘤的大小、肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移情况以及TNM分期密切相关(P<0.05);且Wnt-1和PAR-1在胃癌中的表达成正相关。结论 Wnt-1及PAR-1的表达可促进胃癌的侵袭和转移。2者高表达均与胃癌的浸润深度、区域淋巴结转移、TNM分期、淋巴管浸润及较高淋巴结转移率有关,可作为胃癌恶性程度的预测因子,并且2者在胃癌组织中的表达呈正相关性。     

MMP-2，TIMP-2，MMP-9的表达与胃癌侵袭转移的关系

目的检测胃癌组织以及癌旁胃组织中MMP．2、TIMP．2、MMP．9的表达差异,并分析其对胃癌侵袭转移能力的影响及其可能机制。方法将97例胃癌组织以及89例癌旁胃组织制作成组织芯片,用免疫组织化学半定量的方法检测MMP-2、TIMP-2、MMP-9在胃癌组织及癌旁胃组织中的表达程度并分析其与临床病理参数的关系。结果MMP-2、TIMP-2、MMP-9在89例胃癌组织和配对的癌旁胃组织中的表达均有显著差异（P〈O．01）,其中MMP-2在胃癌组织的表达大于其在癌旁非肿瘤胃组织,而TIMP．2、MMP．9在胃癌组织的表达小于其在癌旁非肿瘤胃组织。MMP-2的高表达率与胃癌组织的临床分期,浸润深度,淋巴结转移显著正相关（P〈0．01）;TIMP．2与胃癌组织的临床分期,浸润深度（P〈0．01）,淋巴结转移（P〈0．05）显著负相关。MMP．9在肠型胃癌的表达要显著高于弥漫型胃癌（P〈O．05）。MMP-2的高表达与TIMP-2的高表达显著负相关（P〈O．01）。结论MMP-2可促进胃癌的侵袭转移,在胃癌组织高表达;TIMP-2抑制胃癌的侵袭转移,在胃癌组织低表达;MMP-2的表达与TIMP-2的表达显著负相关。MMP-9在胃癌组织表达低,．在肠型胃癌中的表达显著高于弥漫型胃癌,与TIMP-2的表达无显著相关性。     

PPARγ、PTEN、Akt在胃癌中的表达及其与胃癌生物学行为的关系

目的：检测人胃癌组织中过氧化物酶增殖激活受体γ（PPARγ）、10号染色体缺失张力蛋白同源的磷酸酶基因（PTEN）、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Akt）mRNA表达,探讨其与胃癌生物学行为的关系。方法应用逆转录PCR法检测60例人胃癌组织及相应癌旁组织,20名正常胃组织中PPARγ、PTEN、Akt mRNA的表达情况,并分析三者与胃癌分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移、浸润深度和临床分期及患者性别、年龄之间的关系,同时分析三者的相关性。结果胃癌组织中PPARγ及Akt mRNA表达水平高于癌旁组织及正常胃组织（P＜0.05）,而PTEN mRNA 表达水平明显较癌旁组织及正常胃组织低（P＜0.05）,在癌旁组织与正常胃组织间PPARγ、PTEN、Akt mR-NA的表达水平均无明显差异。胃癌组织中PPARγ、PTEN、Akt mRNA表达量与患者性别、年龄、肿瘤大小及分化程度无关,而与胃癌的 TNM分期、侵犯浆膜、淋巴结转移及远处转移相关（P＜0.05）。PPARγ与PTEN 的表达呈负相关（rs ＝-0.492,P＜0.05）,与 Akt 表达呈正相关（rs ＝0.623,P＜0.05）,PTEN与Akt表达呈负相关（rs ＝-0.565,P＜0.05）。结论 PPARγ、Akt在胃癌中高表达而PTEN呈低表达,三者中存在明显相关,联合检测可作为判断胃癌恶性程度和预后的指标。     

Smac和Apollon基因在胃癌中的表达及与细胞凋亡的关系

目的研究Smae、Apollon基因在胃癌组织表达及两者在胃癌发生中的作用关系。方法逆转录．聚合酶链式反应（RT-PcR）检测Smac、Apollon的mRNA在38例胃癌组织，15例癌旁组织和10例正常组织的表达情况。结果38例胃癌标本中表达Smac有20例（52．6％），而除3例癌旁组织外，其他癌旁组织和正常胃组织中均见Smae表达，可见8m8c在胃癌组织中低表达和非胃癌组织中高表达，具有统计学意义（P〈0．05）。Apollon在癌组织、癌旁组织和正常胃组织中分别有29例（76．3％）、4例（26．7％）和0例（0％）表达，Apollon在胃癌组织、癌旁组织和正常组织中Apollon的表达差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论Apollon在胃癌组织中高表达，其表达和Smac呈明显的负相关，两者的互相作用可能是导致胃癌发生、发展的重要因素。     

D2-40标记阳性淋巴管密度、上皮型钙黏蛋白、β-连环蛋白异常表达与胃癌转移的关系——附84例检测报告

目的：探讨D2-40标记阳性淋巴管密度（1ymphaticvesseldensity,LVD）、上皮型钙黏蛋白（E．cadherin,E．cad）、β-连环蛋白（β-catenin,β-cat）异常表达与胃癌转移的关系。方法：用SP免疫组化染色法,检测D2-40标记阳性LVD、E-cad及β-cat在84例胃癌组织、相应癌旁组织、20例正常胃组织中的表达水平并进行比较,同时分析3者的相关关系。结果：D2—40标记阳性LVD在癌旁组织中明显高于胃癌组织及正常胃组织（P〈0．05～0．01）,胃癌组织及癌旁组织存在E-cad及B．cat的异常表达。相关分析结果显示,胃癌癌旁组织D2．40标记阳性LVD增高与E．cad的异常表达相关（r=0．27,P〈0．05）,但与β-cat异常表达无明显的相关性（r=0．16,P〉0．05）。结论：胃癌组织中高密度的淋巴管主要集中于癌旁区,且与E—cad的异常表达有关,可能参与了胃癌淋巴结转移的发生。     

阻抑素在胃肠癌中的表达情况及其临床意义

目的检测阻抑素（PHB）在胃肠癌中的表达情况，探讨PHB对胃肠肿瘤诊断的价值。方法采用免疫组织化学法检测PHB在胃肠癌癌组织和癌旁组织中的表达情况。结果PHB在胃肠癌组织的表达量明显高于其相应癌旁组织的表达量，差异有极显著性（P〈0．01）；PHB在低分化胃癌、肠癌组织中的表达阜明显高于中分化癌组织，差异有极显著性（P〈0．01）。结论PHB在胃肠癌中特异性高表达，检测胃癌、肠癌组织中PHB的表达对胃癌、肠痛及其分化程度具有潜在诊断价值，为胃肠癌的临床诊断和治疗奠定了实验基础。     

胃癌组织P16和P53蛋白表达的研究

目的研究胃癌组织中P16和P53蛋白的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学方法,对57例胃癌组织和癌旁组织、38例正常胃组织中p16和p53基因表达产物进行检测,并结合临床进行讨论和分析。结果胃癌组织中P16蛋白的阳性率为21.1%（12/57）,明显低于癌旁组织59.6%（34/57）和正常胃组织89.5%（34/38,P〈0.05）;P53蛋白的阳性率为80.7%（46/57）,明显高于癌旁黏膜组织42.1%（24/57）和正常胃组织0%（0/38,P〈0.05）。P16和P53蛋白表达与胃癌组织学类型、浸润深度、分化程度及淋巴结转移有关（P〈0.05）。结论胃癌组织P16和P53蛋白的异常表达与胃癌发生发展、淋巴结转移和预后可能有关。     

乳腺癌TGF-β1和BRCA2表达及意义

目的：探讨乳腺癌TGF-β1和BRCA2表达意义。方法：应用免疫组化S-P法检测乳腺癌、癌旁组织及正常乳腺组织中TGF-β1和BRCA2的表达水平。结果：TGF-β1、BRCA2在c-erbB-2阳性组与阴性组比较有统计学意义（P〈0．05）,在癌组织分别与癌旁组织和乳腺组织的表达比较有统计学意义（P〈0．01）。结论：TGF-β1及BRCA2在乳腺癌中过表达,与c-erbB-2表达有一定协同性,联合三者的检测,可同时成为预测乳腺癌预后的指标。     

蛋白酶激活受体1在胰腺癌细胞中的表达、作用及其临床意义

目的 探讨蛋白酶激活受体1(PAR1)在胰腺癌细胞株Bxpc-3的表达及意义.方法 采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增法检测胰腺癌细胞株Bxpc-3中PAR1 mRNA的表达;设置对照组与实验组,实验组加PAR1激动荆(PAR1-AP),而对照组不加PAR1-AP,利用PAR1-AP观察其对胰腺癌细胞迁移和增殖能力的影响.结果 胰腺癌细胞中存在PAR1m RNA的高表达;实验组细胞迁移比对照组明显增快,实验组和对照组平均每视野细胞数为(148.425±16.123)个vs(54.012±4.614)个(t=21.950,P<0.01).实验组细胞增殖也高于对照组,实验组和对照组每分钟闪烁值为8 450±1159 vs 4 098±671(t=7.330,P<0.05).结论 PAR1在胰腺癌细胞中高表达,并能促进其迁移和增殖,表明PAR1与胰腺癌的转移能力和恶性程度密切相关;PAR1可以作为判断胰腺癌预后的生物学指标及治疗的新靶点.     

The angiopoietin pathway is modulated by PAR-1 activation on human endothelial progenitor cells

OBJECTIVES: The importance of protease-activated receptor-1 (PAR-1) in blood vessel development has been shown in knock-out mice. As endothelial progenitor cells (EPCs) express functional PAR-1, we examined whether PAR-1 stimulation by the peptide SFLLRN interfered with the angiopoietin pathway, that is EPC commitment, proliferation and migration. METHODS AND RESULTS: Given the strong PAR-1 expression on CD34+ cells, we tested the effect of SFLLRN 75 micromol L(-1) on the emergence of EPCs from cord blood. PAR-1 activation did not modify the number of colonies or the day of emergence, in keeping with the lack of induction of angiopoietin 1 gene expression. Conversely, SFLLRN treatment of EPCs induced angiopoietin 2 gene expression and protein synthesis. Experiments with polyclonal blocking antibodies showed that angiopoietin 2 was involved in the proliferative effect of PAR-1 activation. PAR-1 activation also enhanced migration toward angiopoietin 1 in a Boyden chamber assay. CONCLUSIONS: Our study demonstrates that PAR-1-induced proliferation of EPCs involves angiopoietin 2. PAR-1 also enhances EPC migration toward angiopoietin 1. These findings might explain the role of thrombin in neovascularization via the angiopoietin pathway.     

人胃癌组织中Ezrin、ICAM-1的表达及意义的研究

目的 探讨Ezrin、ICAM-1在胃癌中的表达及其意义.方法 应用免疫组化S-P法检测Ezrin、ICAM-1在78例胃癌组织、30例胃良性病变组织、30例正常胃黏膜组织的表达,分析其与临床病理特征的关系及相关性.结果 ①胃癌组织中Ezrin、ICAM-1蛋白表达阳性率显著高于胃良性病变及正常胃黏膜组织(P<0.01),有淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组(P<0.05),13、T4组明显高于T1、T2组(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ期组明显高于Ⅰ、Ⅱ期组(P<0.05).②胃癌组织中Ezrin蛋白表达水平与粘附分子ICAM-1蛋白表达水平之间呈正相关(r=0.46,P=0.00).③联合检测Ezrin、粘附分子ICAM-1在胃癌组织中的表达可明显提高检测胃癌转移的敏感性和特异性(P<0.05).结论 Ezrin、粘附分子ICAM-1的过度表达与胃癌的发生发展及侵袭转移有关,联合检测两种指标能明显提高检测胃癌转移的敏感性和特异性.     

利用组织芯片检测水通道蛋白1在乳腺癌组织中的表达

目的检测水通道蛋白1（AQP1）在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法购买含有32对乳腺癌组织标本及癌旁正常乳腺组织标本的组织芯片,应用免疫组织化学方法检测AQP1的表达。结果乳腺癌组织和癌旁正常乳腺组织中AQP1的平均表达率分别为70.56±14.71%、18.64±8.54%,二者存在显著差异（P〈0.05）。结论 AQP1在乳腺癌组织中表达增高,AQP1可能与乳腺癌生长、转移有关。     

Lipid raft localization regulates the cleavage specificity of protease activated receptor 1 in endothelial cells

Summary.  Background:  The endothelial protein C receptor (EPCR)-dependent cleavage of protease activated receptor 1 (PAR-1) by either activated protein C (APC) or thrombin in lipid rafts initiates protective signaling responses in endothelial cells. Objectives:  To investigate the mechanism by which APC and thrombin interact with and cleave PAR-1 in lipid rafts. Methods:  We constructed two types of PAR-1 cleavage reporter constructs in which a secreted alkaline phosphatase (ALP) was fused to the extracellular domain of PAR-1. The first construct has a transmembrane domain capable of uniformly anchoring the fusion protein to the membrane surface, while the second construct has the recognition sequence for targeting the fusion protein to lipid rafts/caveolae in transfected cells. Results:  Both APC and the Gla-domainless (GD)-APC cleaved the PAR-1 exodomain with similar efficiency in HUVECs transfected with the first construct. Unlike APC, GD-APC did not cleave PAR-1 in cells transfected with the second construct; however, prior treatment of cells with S195A mutants of either protein C or thrombin led to the GD-APC cleavage of PAR-1 with a comparable or higher catalytic efficiency. The same results were obtained if the cellular signaling properties of APC and GD-APC were monitored in the TNF-α-induced endothelial cell apoptosis and permeability assays. Conclusions:  The lipid raft localization renders the scissile bond of the PAR-1 exodomain unavailable for interaction with coagulation proteases. The binding of either the Gla-domain of protein C to EPCR or exosite-1 of thrombin to the C-terminal hirudin-like sequence of PAR-1 changes the membrane localization and/or the conformation of the PAR-1 exodomain to facilitate its recognition and subsequent cleavage by these proteases.     

P27kipl、CyclinD1在膀胱癌中的表达及其意义

目的:通过检测P27kipl与CyclinD1在膀胱癌中的表达,以探讨两者在膀胱癌发生发展中的作用及其与临床病理特征的关系.方法:对80例标本进行SP免疫组织化学方法检测P27kipl、CyclinD1的表达水平,其中正常组织28例,膀胱癌组织52例.结果:P27kipl、CyclinD1在正常膀胱组织中的表达率和在膀胱癌组织中的表达差异均具有显著性(P＜0.01).P27kipl蛋白在低分化组中的表达水平显著低于高分化组(P＜0.01)和中分化组(P＜0.01),CyclinD1表达水平在低分化组中显著高于高分化组(P＜0.01),在中、低分化组间差异无显著性(P＞0.05).P27kipl的表达与临床分期无关,而CyclinD1的表达与临床分期相关.P27kipl与CyclinD1的相互关系呈负相关.结论:P27kipl蛋白的低表达或缺失在膀胱癌的发生中起重要作用,是膀胱癌发生中的早期分子事件.CyclinD1的过表达参与了膀胱癌的发生,并与其发展密切相关,可作为评价预后的指标之一.膀胱癌的发生发展与P27kipl、CyclinD1蛋白的异常表达密切相关,联合测定P27kipl、CyclinD1蛋白的表达对膀胱癌的诊断、治疗有一定的指导意义,可作为膀胱癌诊断和预后评价的重要参数.