IκB-α基因转染HCC9204细胞对NF-κB和MMP-9表达的影响

目的观察高转移性人肝癌细胞系HCC9204转染抑制性κB基因(IκB-α)后核因子-κB(NF-κB)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的改变。方法采用脂质体法将IκB-α基因转染HCC9204细胞,应用Western-blot及RT-PCR法检测MMP-9和NF-κB的表达;通过基底膜侵袭实验检测肿瘤细胞的浸润和转移能力。结果HCC9204细胞转染pcDNA3-IκB-α后,细胞内NF-κB蛋白表达下降,同时伴随MMP-9mRNA表达水平和细胞侵袭、转移能力的明显下降。结论NF-κB活性被抑制后引起细胞侵袭、转移能力的下降可能是由于MMP-9表达下降所致。     

表皮生长因子促进胰腺癌细胞侵袭和转移的实验研究

目的 探讨表皮生长因子（epidermal growthfactor，EGF）促进胰腺癌细胞侵袭和转移的分子机理。方法 EGF对胰腺癌细胞系NOR—P1的增殖、黏附及侵袭能力的影响分别用WST-1细胞增殖实验、细胞黏附实验和Transwell体外侵袭实验检测；MMP-9和MMP-2的活性及表达分别用明胶酶谱分析和Western印迹、RT—PCR检测；NF-κB活性用凝胶电泳迁移实验检测。结果 EGF能够明显促进胰腺癌细胞的侵袭能力，但对胰腺癌细胞的黏附力及增殖并无明显影响；EGF明显上调胰腺癌细胞的NF-κB和MMP-9的活性及表达，但对MMP-2活性及表达无影响；NF-κB抑制物四氢化吡咯二硫代氨基甲酸盐（PDTC）能够明显抑制EGF所诱导的NF-κB活性，同时也抑制EGF所诱导的MMP-9表达及胰腺癌细胞的侵袭力。结论 EGF通过活化NF-κB促进胰腺癌细胞的MMP-9的表达和侵袭力，采用NF-κB抑制剂PDTC阻断NF-κB通路能够降低胰腺癌细胞的侵袭力。     

肿瘤坏死因子-α对肿瘤抑制基因RECK在HepG2细胞中表达的调节作用

目的 探讨肿瘤坏死因子（TNF）-α对人肝癌细胞HepG2肿瘤抑制基因RECK表达的影响，检测核转录因子（NF）-κB在RECK基因表达的调控中的作用。方法 将培养的细胞分为3组，A组用4种浓度的TNF-α（1、5、50、100μg／L）作用人肝癌细胞HepG2细胞株6h，B组用浓度为50μg／L的TNF-α分别作用HepG2细胞1、6、12、24h，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测RECK mRNA的表达；C组将NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡硌烷（PDTC，10mol／L）与TNF-α（50μg／L）同时作用以及TNF-α（50μg／L）单独作用于HepG2细胞6h，凝胶滞留电泳实验（EMSA）DNA结合反应检测NF-κB出的活性，RT-PCR和Western blot分别检测RECK基因mRNA和蛋白的表达。明胶酶谱试验检测细胞MMP-9的活性。结果HepG2细胞中RECK基因无表达。TNF-α作用后RECK的表达显著增高，作用呈时间和剂量依赖关系（P〈0．01），TNF-α能激活NF-κB并能显著抑制HepG2细胞MMP-9的活性（P〈0．01），而PDTC能显著的抑制这种作用（P〈0．01）。结论TNF-α能上调RECK基因在肝癌细胞系HepG2中的表达同时抑制细胞MMP-9的活性。而NF-κB可能参与了这一过程。     

ERK1/2-核因子-κB通路介导乙型肝炎病毒x蛋白抑制过氧化物酶体增殖物激活受体-α表达

目的 研究乙型肝炎病毒X蛋白（HBx）对过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）-α的抑制作用，并探讨其中的内在机制。方法 培养人肝癌细胞系HepG2，转染HBx表达质粒，Western blot方法检测PPAR-α、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK，ERK1／2）和IκB蛋白的变化，凝胶迁移率实验检测核转录因子（NF）-κB蛋白的活性改变，分别加入MAPK和NF-κB特异性的抑制剂PD98059与吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC），观察PPAR-α蛋白的变化。结果（1）HBx质粒转染HepG2后，与对照组相比，ERK2表达增加，NF-κB被激活，PPAR．a的表达下调；（2）阻断NF-κB后，NF-κB的活性下降，PPAR-α的表达增加；（3）阻断MAPK后，转染HBx表达质粒，NF-κB的活性下降，PPAR-α的表达增加。结论 HBx抑制细胞核转录因子PPAR-α的表达，可能与ERK1／2-NF-κB激活有关。     

IκBα突变体对激素难治性前列腺癌细胞放疗敏感性的影响

目的:探讨转染IκBα突变体(IκBαM)基因对激素难治性前列腺癌放疗敏感性的影响.方法:将IκBαM基因转染入激素难治性前列腺癌PC 3M细胞系,采用Western blot法检测癌细胞IκBαM基因表达.X射线照射后,采用MTT比色法检测癌细胞体外生长活性;采用Annexin V-FITC和碘化吡啶双染色流式细胞仪法检测癌细胞凋亡率;采用NF-κB DNA结合ELISA检测癌细胞核内NF-κB活性.结果:Western blot证实转染IκBαM基因的PC-3M细胞表达高水平IκBαM蛋白.采用12 Gy X射线照射后,pcDNA 3.1/IκBαM转染组PC3M细胞生长活性较未转染组明显减弱;而其细胞凋亡率显著高于未转染组细胞.与未转染组相比,pcDNA 3.1/IκBαM转染组细胞核内NF-κB DNA结合活性降低.结论:IκBαM能阻断放疗引起的激素难治性前列腺癌细胞NF-κB活化,增强放疗对癌细胞的诱导凋亡作用.     

通过核转录因子-κB诱导基质金属蛋白酶的表皮生长因子对胆管癌细胞侵袭的影响

目的 探讨表皮生长因子通过核转录因子（NF）-κB诱导基质金属蛋白酶促进胆管癌细胞侵袭的机制。方法 检测胆管癌细胞株HuCCT1在表皮生长因子（EGF）同浓度下的细胞侵袭力及细胞增殖情况；采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及Western blot分析方法，检测基质金属蛋白酶（MMP）-2及MMP-9在不同EGF浓度下的基因和蛋白表达；采用凝胶电泳迁移率试验（EMSA）检测NF-κB在不同EGF浓度下的活性。结果 随着EGF浓度的增加，胆管癌细胞株HuCCT1侵袭细胞数也随之增加，具有明显的浓度依赖性。而EGF浓度的变化对HuCCT1细胞的增殖无明显影响。EGF明显上调HuCCT1细胞中MMP-9的mRNA和蛋白表达水平，MMP-2不受影响。EGF增强NF-κB的活性；PDTC和布洛芬明显抑制EGF诱导的HuCCT1细胞侵袭力。结论 EGF能够增强胆管癌细胞的侵袭力，其增强的侵袭力可能是通过NF-κB信号传导路径，激活MMP-9而实现的。     

核因子κB圈套策略对膀胱癌细胞侵袭力的影响

目的 探讨核因子(NF)-κB环状哑铃型圈套寡核苷酸(CD-ODN)对膀胱癌NF-κB活性和细胞侵袭能力的影响以及有关的作用机制.方法 脂质体介导法瞬时转染CD-ODN及其突变体(CD-ODN-mut)入膀胱癌BIU87细胞株,荧光素酶报告基因的方法检测不同处理组NF-κB活性的改变;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western-blot检测尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)的表达水平;重建基底膜试验检测细胞侵袭能力的变化.结果 转染CD-ODN后BIU87细胞株NF-κB活性被抑制,uPA的表达水平下降,细胞侵袭能力减弱,而转染CD-ODN-mut后无此作用.结论 NF-κB组成性活化可促进uPA的表达,从而导致膀胱癌细胞的侵袭和转移.而CD-ODN能有效的阻断这一通路,降低膀胱癌的侵袭潜能.     

丹参酮IIA对胃癌细胞的抑制作用及其与NF-κB信号通路的关系

目的：探讨丹参酮IIA（tanshinone IIA）体外对人胃癌SGC7901细胞的作用及其对NF-κB信号通路的影响。 方法：不同浓度丹参酮IIA（0.5、1、2、4 μg/mL）作用SGC7901细胞不同时间（24、48、72 h）后,用MTT法检测细胞增殖情况。丹参酮IIA（2 μg/mL）作用SGC7901细胞48 h后,用流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法检测NF-κB p65亚单位、IκB-α、磷酸化IκB-α、IKK-α/β、磷酸化IKK-α/β的水平;ELISA法检测p65亚单位的DNA结合活性。 结果：MTT结果显示,丹参酮IIA（1、2、4 μg/mL）明显抑制SGC7901细胞的增殖,并呈明显的时间与浓度依赖性（均P<0.05）;凋亡分析显示,丹参酮IIA处理组细胞凋亡率明显高于对照组（P<0.05）;NF-κB信号通路相关分子检测显示,与对照组比较,丹参酮IIA处理组细胞p65、IKK-β及其磷酸化蛋白水平明显下降（均P<0.05）,IκB-α水平无明显改变（P>0.05）,但其磷酸化蛋白水平明显降低（P<0.05）,而IKK-α及其磷酸化蛋白表达水平表达变化均不明显（均P>0.05）;NF-κB亚单位p65的DNA结合活性明显下降。 结论：丹参酮IIA可抑制人胃癌SGC7901细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能是降低NF-κB信号通路的活性有关。     

脂氧素A4对脂多糖活化小鼠巨噬细胞NF-κB和TNF-α转化酶的影响

目的 研究脂氧素A4（LXA4）对脂多糖（LPS）活化的小鼠巨噬细胞NF-κB及TNF-α转化酶的影响。方法 小鼠RAW 264．7巨噬细胞株培养于细胞培养板,随机分为空白对照组、LPS处理组（LPS 1μg/ml）和LPS＋LXA4组（LPS 1μg/ml＋LXA4 10^-7mol/L）。酶联免疫吸附法测定上清液TNF-α水平,提取细胞总蛋白,Western blot法测定NF-κB p65、IκB-α及TNF-α转化酶含量,荧光素酶报告质粒测定NF-κB活性。结果 LXA4抑制LPS活化的RAW 264．7巨噬细胞IκB-α降解、NF-κB p65核转位及NF-κB活性,同时抑制TNF-α蛋白表达和上调TNF-α转化酶蛋白表达。结论 LXA4通过抑制NF-κB活性和下调TNF-α转化酶表达而减少LPS活化的RAW264．7巨噬细胞分泌TNF-α。     

磷酸丝氨酸磷酸化酶在肝细胞癌中的表达及其促进增殖和转移的作用机制

背景与目的 磷酸丝氨酸磷酸化酶（PSPH）在多种肿瘤中表达上调，发挥促进肿瘤生长和转移的作用，但其在肝细胞癌（HCC）中的作用尚未完全清楚。因此，本研究旨在探讨PSPH在HCC中的表达与作用及其作用机制。方法 分别用Western blot和qRT-PCR检测PSPH在HCC组织和癌旁组织中以及不同HCC细胞株（HepG2、Huh-7、HCCLM3）与正常肝细胞株（HL-7702）中的表达。HepG2细胞过表达或敲低PSPH后，分别用CCK-8、EdU染色、Transwell侵袭实验及Western blot法检测PSPH对HepG2细胞增殖、侵袭以及细胞增殖标记蛋白CCND1和Ki-67表达的变化；同时，用Western blot法检测自噬相关蛋白LC3-II/LC3-I、p62以及侵袭相关蛋白MMP-9的表达，用免疫荧光法检测p65蛋白入核情况。结果 与癌旁组织比较，HCC组织中PSPH蛋白的表达明显上调；与正常肝细胞比较，各HCC细胞株中的PSPH基因的表达明显升高（均P<0.05）。过表达PSPH后，HepG2细胞的增殖和侵袭能力明显增强，CCND1和Ki-67的表达明显上调，LC3-II/LC3-I表达上调而p62表达下调，p65蛋白核转位明显增加，MMP-9表达明显上调（均P<0.05）；敲低PSPH后，HepG2细胞的上述指标均呈相反变化（均P<0.05）。NF-κB通路抑制剂能抑制过表达PSPH对p65入核的促进作用和对MMP-9的上调作用，而NF-κB通路激动剂能逆转敲低shikonin对p65入核的抑制作用和对MMP-9的下调作用（均P<0.05）。结论 TNF-α在HCC中表达上调，PSPH高表达能增强HCC细胞增殖与转移能力，其作用机制可能涉及对自噬的抑制作用以及对NF-κB/MMP-9信号通路的活化作用。     

胃癌细胞中&beta|肾上腺能受体与NF-κB通路及其下游侵袭相关因子的关系

目的：探讨胃癌细胞中β肾上腺能受体（β-ARs）与NF-κB通路及下游侵袭相关因子的关系。 方法：分别用不同浓度普萘洛尔（10，30，100 μmol/L）和异丙肾上腺素（50，100，200 μmol/L）作用胃癌BGC-823和SGC-7901细胞株24 h后，用RT-PCR检测血管内皮生长因子（VEGF）,环氧化酶2（COX-2）,基质金属蛋白酶2（MMP-2）,基质金属蛋白酶9（MMP-9）mRNA表达；用Western blot检测上述因子及NF-κB p65蛋白表达。 结果：与对照细胞比较，普萘洛尔呈浓度依赖性降低两种胃癌细胞VEGF，COX-2，MMP-2，MMP-9的mRNA表达，而异丙肾上腺素则呈浓度依赖性升高上述因子的mRNA表达（均P<0.05）；与对照组细胞比较，普萘洛尔作用后，两种胃癌细胞上述因子及NF-κB p65蛋白的表达明显下调，而异丙肾上腺素作用后则呈反向变化，且作用均呈浓度依赖性（均P<0.05）。 结论：β-ARs与胃癌侵袭、转移密切相关，且其作用机制可能与增加NF-κB通路活性及其下游侵袭相关分子的表达有关。     

地塞米松对脂多糖刺激THP-1释放炎性因子的影响及其机制

目的探讨地塞米松（Dexamethasone,DEX）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的人外周血单核细胞（human peripheral mononuclear cell,THP-1）炎症因子释放的影响及其机制。方法体外培养人THP-1单核细胞,随机分为对照组（Control）、脂多糖组（LPS）和地塞米松组（DEX）。地塞米松组（1microg/ml）孵育地塞米松2 h后与脂多糖组（0.1μg/ml）均加入脂多糖刺激24 h。应用免疫蛋白印迹电泳法（Western blotting）检测各组细胞总蛋白、糖皮质激素受体（Glucocorticoid receptor ,GR）、磷酸化的糖皮质激素受体（p-GR）,IκB-α,磷酸化 IκB-α（p-IκB-α）,核因子κB （NF-κB）,磷酸化核因子κB （p-NF-ΚB）,巨噬细胞炎症趋化因子（MCP-1）的水平。用 ELISA 检测各组细胞培养上清中 MCP-1,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素-6（IL-6）的表达水平,用实时定量 PCR（RT-PCR）检测各组细胞MCP-1,TNF-α和IL-6mRNA表达水平。结果 Westernblotting检测显示脂多糖组与对照组相比,脂多糖组 p-GR、p-NF-κB、p-IKB-α和 MCP-1蛋白表达水平明显升高（P〈0.05）,IκB-α表达明显下降（P〈0.05）,GR和 NF-KB表达水平无明显差异（P〉0.05）;RT-PCR 和 ELASA 检测显示MCP-1,TNF-α和IL-6分泌水平和mRNA 表达水平均明显增高（P〈0.05）。与脂多糖组相比,地塞米松组p-NF-κB,p-IKB-α和MCP-1蛋白水平表达明显下降,以及 MCP-1,TNF-α和 IL-6分泌和mRNA水平也均表达明显降低,但p-GR和IκB-α蛋白表达水平明显增加（P〈0.05）,但在 NF-κB和 GR表达水平依然无明显差异（P〉0.05）。结论地塞米松预处理可通过激活糖皮质激素受体而下调 NF-κB活化从而抑制脂多糖诱导单核细胞THP-1产生的炎症反应。     

抑制核转录因子κB活性对SGC7901/VCR细胞mdr1表达及凋亡的影响

目的 观察突变型IκBα抑制核转录因子κB(NF-κB)活性对耐药胃癌细胞株SGC7901/VCR中多药耐药基因1(mdr1)的表达及细胞凋亡的影响.方法 突变型IκBα真核表达重组体(pCMV4-mIκBα)经脂质体介导转染至SGC7901/VCR细胞中,凝胶迁移率实验(EMSA)检测SGC7901/VCR细胞核内NF-κB活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测细胞内mdr1的表达,荧光分光光度法检测罗丹明123(Rh123)的胞内聚集,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 pCMV4-mIκBα瞬时转染人SGC7901/VCR细胞24 h后,可显著抑制NF-κB活性达64%,抑制mdr1的表达达75%,使Rh123在细胞内的聚集增加2.3倍.转染24 h后SGC7901/VCR细胞凋亡率为(14.15±1.52),与对照组(4.37±1.31)比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 突变型IκBα抑制NF-κB活性对耐药胃癌细胞株mdr1的表达有直接抑制作用,并促使耐药胃癌细胞凋亡.     

9型重组腺相关病毒介导抗核转录因子-κB核酶基因体外转染大鼠心肌细胞及对核转录因子-κB活性的影响

目的 观察9型重组腺相关病毒(rAAV9)介导抗核转录因子-κB(NF-κB)核酶基因(rAAV9-ECFP-R65)对大鼠心肌H9C2细胞的转染及对NF-κB活性的影响.方法 rAAV9-EGFP-R65按转染复数(MOI)1×106v.g./cell转染H9C2细胞,在倒置荧光显微镜下观察增强型绿色荧光蛋白(EGFP)阳性表达,采用流式细胞仪检测转染效率.Alamar Blue法检测rAAV9-EGFP-R65对H9C2细胞增殖影响.肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、rAAV9-EGFP-R65及PDTC处理H9C2细胞,凝胶迁移滞后实验(EMSA)检测NF-κB活性.结果 转染后第1天EGFP开始表达,表达强度随着时间延长而逐渐增强,第5天达到高峰,此时流式细胞仪检测转染率为(32.27±3.19)%.Alamar Blue法检测表明转染组细胞增殖末受影响.常态下H9C2细胞NF-κB有一定活性,TNF-α刺激后NF-κB活性明显增高,而rAAV9-EGFP-R65、PDTC抑制NF-κB活性.结论 rAAV9-ECFP-R65能够有效地转染H9C2细胞,对细胞增殖无明显抑制,并能显著抑制H9C2细胞NF-κB活性.     

表皮生长因子介导的NF-κB促进胰腺癌细胞MMP-9表达及侵袭的实验研究

目的 观察表皮生长因子(EGF)对胰腺癌细胞增殖、黏附及侵袭力的影响及其对核因子-κB(NF-κB)和细胞基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响,探讨EGF促进胰腺癌侵袭的相关机理.方法 通过细胞增殖、黏附及侵袭实验,观察在EGF影响下胰腺癌细胞黏附、增殖及侵袭能力变化;通过RT-PCR、MMPs明胶酶谱分析、Western blot及EMSA,检测胰腺癌细胞的MMP-2和MMP-9 mRNA及其蛋白表达以及NF-κB活性变化;并观察NF-κB抑制物吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对EGF诱导的胰腺癌细胞NF-κB活性、MMP-9 mRNA及其蛋白表达以及肿瘤细胞侵袭力的变化.结果 EGF能够增强胰腺癌细胞的侵袭能力,具有剂量依赖性(P＜0.05).EGF对胰腺癌细胞的黏附力及增殖力无明显影响.EGF处理后,肿瘤细胞的MMP-9蛋白和mRNA表达明显升高,EGF浓度为50 ng/ml时,肿瘤细胞的MMP-9表达最强,但对MMP-2蛋白和mRNA的表达则无影响.随着EGF浓度的增加,NF-κB活性增强,具有浓度依赖性(P＜0.05).与EGF单独处理相比,经PDTC和EGF共同处理后的胰腺癌细胞NF-κB活性与MMP-9蛋白和mRNA表达均降低;PDTC和EGF共同处理后的胰腺癌细胞侵袭力较EGF单独处理和对照均减弱(P＜0.05).结论 EGF通过激活NF-κB的活性,诱导MMP-9表达,促进胰腺癌细胞的侵袭,而这一过程可以被PDTC抑制.     

核因子-κB圈套对Kupper细胞活化的抑制作用及其机制

目的探讨核因子-κB（NF-κB）圈套对大鼠Kupper细胞（KCs）活化的抑制作用及其机制。方法分离大鼠KCs并随机分为3组：正常对照组、内毒素（LPS）刺激组及NF-κB圈套组，后者KCs在LPS刺激前转染NF-κB圈套。除对照组外，两个实验组培养液中加入终浓度为1mg／L的LPS。于LPS刺激6h后，凝胶电迁移率改变分析法（EMSA）检测NF-κB蛋白结合活性，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测KCs膜表面CD80mRNA表达，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测培养上清肿瘤坏死因子（TNF）-α和白细胞介素（IL）-6表达情况。结果转染NF-出圈套可以高效抑制KCs激活。EMSA结果显示NF-κB活性仅为LPS组的0．53，RT—PCR结果显示KCs CD80 mRNA表达仅为LPS组的0．46，ELISA结果显示培养上清TNF-α表达量仅为LPS组的0、37，IL-6仅为LPS组的0．60。结论NF-κB圈套可以高效抑制NF—κB的转录活性，降低KCs膜表面共刺激分子和细胞因子的产生，为活体内应用NF—κB圈套提供了可靠的实验依据。     

穿心莲内酯对肺癌细胞NF-κB的活性以及MMP-9表达的影响

目的:观察穿心莲内酯(Andrographolide,AD)对肺癌H3255细胞的生长抑制作用以及对基质金属蛋白酶(matrix metalloprotein,MMP)-9表达与活性的影响,并研究其可能的分子机制。方法:体外培养H3255细胞,MTT法检测细胞的增殖情况;RT-PCR检测MMP-9 mRNA表达,明胶酶谱实验检测其酶活性;Western blot检测NF-κB p65亚基的核转位以及IκB磷酸化情况。结果:AD能以剂量和时间依赖性方式抑制H3255细胞增殖;不同浓度的AD能降低MMP-9的mRNA表达水平和酶活性。结论:AD对肺癌细胞增殖具有抑制作用,其机制可能与抑制I-κBα磷酸化而抑制NF-κB激活,最终抑制MMP-9的活性有关。     

核因子-κB诱骗寡核苷酸增强阿霉素对肝癌耐药细胞化疗敏感性的机制

目的 研究核因子（NF）-κB诱骗（decoy）寡核苷酸对肝癌耐药细胞株HepG2／阿霉素（ADM）化疗敏感性的影响及其内在机制。方法培养肝癌耐药细胞株，转染FITC标记的NF-κB decoy寡核苷酸，通过荧光显微镜和共聚焦显微镜进行核内定位的观察，凝胶迁移率实验检测转染前后NF-κB结合活性的变化，加入ADM，噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖，采用流式细胞仪和TUNEL法检测细胞凋亡，观察转染NF-κB decoy寡核苷酸后肝癌耐药细胞对化疗药物的敏感性变化，DEVD-pNA降解法检测Caspase-3的活性变化，Western blot检测bcl-2蛋白表达的变化。结果转染荧光标记的NF-κB decoy寡核苷酸1h，倒置荧光显微镜和共聚焦显微镜显示定位于细胞核内，凝胶阻滞分析实验（EMSA）分析示NF-κB decoy寡核苷酸能够降低NF-κB核内结合，加入化疗ADM（0.1mg／L）后，ADM作用24h后出现细胞凋亡，流式细胞术、TUNEL法检测NF-κBdecoy寡核苷酸转染HepG2／ADM细胞的凋亡，与对照组相比，凋亡指数增加，Caspase-3的活性增加，bcl-2的表达下调。结论 NF-κB decoy寡核苷酸转染肝癌耐药细胞株HepG2／ADM后，能够抑制NF-κB的激活，Caspase-3活性增加和bcl-2的表达下调是其增加化疗药物的敏感性的可能机制。     

核因子кB诱捕物寡核苷酸对肾小管上皮细胞炎症因子表达的影响

目的 研究核因子(NF)κB结合位点诱捕物寡核苷酸(NF-κB decoy ODN)对肾小管上皮细胞的NF-κB活性及下游炎症因子表达的影响。方法 (1)鱼精蛋白-脂质体法转染NF-κB decoyODN:将NF-κB decoy ODN与鱼精蛋白、脂质体混合,转染至TNF-α刺激培养的大鼠肾小管上皮细胞内,测定转染率。(2)凝胶电泳迟滞分析测定转染 NF-κB decoy ODN后细胞NF-κB活性。(3)RT-PCR方法检测转染NF-κB decoy ODN后细胞 ET-1、iNOS、ICAM-1、VCAM-l以及MCP-1 mRNA表达水平。结果 当+/-比例为4时,鱼精蛋白-脂质体法转染率高达93.20％;转染NF-κB decoy ODN可抑制TNF-α激活的NF-κB活性,从而进一步抑制ET-1、iNOS、ICAM-1、VCAM-I和MCP-1的mRNA表达。结论(1)鱼精蛋白-脂质体法是一种不受血清影响的高效率转染方法。(2)NF-κB decoy ODN在体外通过抑制NF-κB活性,进而影响肾小管上皮细胞炎症因子的表达。