登革病毒血清型2 E蛋白Ⅲ区单克隆抗体的制备及其诊断特异性研究

本研究旨在制备抗登革病毒(dengue virus,DENV)血清型2 (DENV2)E蛋白Ⅲ区(envelope protein domainⅢ,EDⅢ)单克隆抗体(简称单抗)并研究其诊断特异性。合成编码DENV2-EDⅢ的基因并将其克隆入原核表达质粒pET21a;将重组质粒转入大肠埃希菌菌株BL21;用重组表达的EDⅢ免疫小鼠;将小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞株SP2/0融合;将可产生识别抗EDⅢ单抗的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔;采用蛋白G亲和层析法从腹水中纯化单抗;采用间接ELISA和间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence assay, IFA)评估所制备的单抗识别DENV血清型1～4 (DENV1～4)的能力。本研究成功表达了DENV2-EDⅢ,并制备出3株杂交瘤细胞,杂交瘤细胞所分泌的小鼠源性单抗既可识别DENV2,又可交叉识别DENV1、DENV3和DENV4。     

罗哌卡因和布比卡因腰麻的临床对比研究

目的 对比研究15mg罗哌卡因和10mg布比卡因腰麻临床作用。方法 选择下肢手术患者60例 ,18～75岁 ;ASAI～II级 ,随机分为两组 ,按3:2被认为是等效比率分别给予罗哌卡因15mg和布比卡因10mg,药液和10%GS配成重比重液。在L3、4间隙采用硬膜外腰麻联合穿刺技术行腰麻操作。比较观察两组患者感觉和运动阻滞的起效和恢复上的异同 ,并观察用药后术中和术后不良反应。结果罗哌卡因运动阻滞起效时间慢于布比卡因(p<0.05) ,运动恢复时间快于布比卡因(p<0.01),术中肌松阻滞程度弱于布比卡因(p<0.05或p<0.01)。结论 15mg罗哌卡因腰麻作用弱于10mg布比卡因     

ICU先天性心脏病患儿术后医院感染的特征分析

目的 探讨先天性心脏病患儿术后在ICU发生医院感染的临床特征及预防措施,以期减少医院感染的发生率。方法 收集2011年1月-2012年12月ICU先天性心脏病术后监护的378例患儿,观察其术后医院感染的发生率、病原菌的分布与医院感染因素进行相关性分析,采用SPSS17.0进行统计分析。结果 21例患儿发生医院感染,感染率为5.56%;共检出细菌31株,主要为洋葱伯克霍尔德菌与大肠埃希菌,均占16.13%;单因素分析结果显示,患儿年龄、入住ICU天数、手术持续时间、输血量、呼吸机使用时间、胸腔引流时间、导尿管留置时间是发生医院感染的相关危险因素;多因素logistic回归分析结果表明,入住ICU时间、手术持续时间、输血量、呼吸机使用时间、胸腔引流时间、导尿管留置时间是发生医院感染重要的危险因素。结论 加强医院感染管理,针对术后感染的危险因素,采取相应的预防与控制措施,可减少医院感染的发生。     

早发型与迟发型呼吸机相关性肺炎的对比分析

目的分析迟发型呼吸机相关性肺炎(VAP)的临床特点及病原菌的分布,并与早发型VAP作一比较,为临床经验性用药提供参考依据。方法选取2010年3月-2012年11月103例VAP患者,按照发生VAP的时间不同分为早发型及迟发型,比较两者在临床特征、病原学及预后的差异;采用SPSS17.0软件进行分析,计量资料以均数±标准差表示,组间计量资料比较采用t检验,计数资料采用χ2检验。结果早发型VAP组79例患者痰培养阳性58例,阳性率为73.4%,分离出病原菌73株,以鲍氏不动杆菌、洋葱伯克霍尔德菌、MRSA、肺炎克雷伯菌为主,分别占16.4%、15.1%、15.1%、13.7%;迟发型VAP组24例患者痰培养阳性20例,阳性率为83.3%,分离出病原菌33株,以鲍氏不动杆菌、洋葱伯克霍尔德菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌为主,分别占21.2%、18.2%、18.2%、12.1%;两组患者的简化急性生理学评分Ⅱ(SAPSⅡ)、5d内发生急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的例数、机械通气时间、住ICU时间及预后比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SAPSⅡ评分高及发生ARDS的患者发生迟发型VAP的概率更高,鉴于迟发型VAP患者二重感染的发生率更高,临床可能更需要联合用药。     

Maresin 1通过调控miR-340增强巨噬细胞吞噬功能

目的：研究促消退介质Maresin 1（MaR1）在脓毒症模型中促进巨噬细胞吞噬功能的机制。方法：通过检测F4/80表达情况评估小鼠原代巨噬细胞纯度。体内外脓毒症模型验证脂多糖（LPS）和/或MaR1对miR-340表达的影响。骨髓巨噬细胞转染miR-340模拟物（mimic）或抑制剂（inhibitor）后,qRT-PCR检测miR-340的表达量,评估转染效率。荧光显微镜及流式细胞仪检测小鼠原代巨噬细胞转染miR-340 mimic后巨噬细胞吞噬荧光微球能力的变化。最后收集临床样本检测脓毒症患者血浆中miR-340的表达与健康志愿者的区别。结果：经荧光显微镜和流式细胞仪鉴定小鼠原代巨噬细胞纯度达90%以上。体内外脓毒症模型均显示miR-340的表达明显升高（P＜0.05）。脓毒症患者与健康志愿者相比血液中miR-340的表达也显著增强（P＜0.05）。荧光显微镜及流式细胞仪检测小鼠原代巨噬细胞转染miR-340 mimic后,巨噬细胞吞噬荧光微球的能力降低（P＜0.05）。在体内外脓毒症模型中,MaR1均明显降低miR-340的表达水平（P＜0.05）。结论：MaR1通过抑制miR-340的表达,增强巨噬细胞吞噬功能,在脓毒症病理生理过程中发挥抗炎促消退作用。     

丙泊酚滥用和依赖性的研究进展

丙泊酚广泛用于麻醉诱导、维持和用于ICU镇静.除临床用药外,静脉注射丙泊酚可使人产生欣快感、愉悦、性幻想和去抑制.临床资料和动物实验研究发现丙泊酚存在滥用和依赖.现就丙泊酚滥用的一些临床报道和造成依赖的可能机制作一综述.     

异丙酚靶控输注对腰麻联合硬膜外麻醉病人的镇静作用

目的:研究对腰麻联合硬膜外麻醉病人实行异丙酚靶控输注(TCI)镇静的临床可行性.方法:选择30例妇科手术病人,ASAⅠ～Ⅱ级,靶控浓度最初为0.5 μg/ml,随后每3 min递增0.3μg/ml,当OAA/S评分达2分,再以0.1μg/ml递减,记录不同OAA/S评分的异丙酚效应浓度(Ce)、脑电双频谱指数(BIS)及BP、HR、SPO2.观察镇静期间病人的不良反应.结果:苏醒时间为(4.2±0.4)min.各OAA/S评分之间异丙酚Ce、BIS值、SBP、SDP、SPO2总体分布均不同或不全相同(P＜0.01).OAA/S评分2分、3分、4分时异丙酚Ce分别为(2.18±0.17)μg/ml、(1.85±0.19)μg/ml和(0.89±0.10)μg/ml,BIS值分别为(71.2±3.1)、(79.8±9.2)和(92.3±3.0).OAA/S评分与异丙酚Ce、BIS值的r1=-0.92(n=90,P＜0.01)和r2=0.89(n=150,P＜0.01);BLS值与异丙酚Ce的r3=-0.97(n=90,P＜0.01),它们的直线回归方程为BIS=-15.0Ce 105.9.结论:异丙酚TCI与BIS结合用于腰麻联合硬膜外麻醉的术中镇静具有更好的可控性,镇静深度适中,对正常体重的中青年病人的呼吸循环影响较小.     

肾上腺素对小鼠巨噬细胞中促炎／抗炎介质比值的影响

目的：研究肾上腺素对脂多糖（LPS）诱导的小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7中促炎介质［肿瘤坏死因子（TNF-α）、一氧化氮（NO）、环加氧酶-2（COX-2）］和抗炎介质［血红素氧化酶-1（HO-1）、白介素10（IL-10）］表达及NF-κB活化的影响。 方法： 以10 μg/L的LPS刺激体外培养的RAW264.7细胞作为炎症模型，加入不同浓度的肾上腺素（1、5、10、50 μmol/L）孵育24 h后，收集培养上清并提取细胞总蛋白，酶联免疫法测定上清中TNF-α、IL-10浓度，Griess法检测上清NO含量(以NO2-/NO3-表示)，免疫印迹法检测细胞总蛋白中COX-2、HO-1、IκB-α的含量。 结果： 10 μg/L的LPS明显诱导TNF-α、NO(NO2-/NO3-)、COX-2、IL-10及HO-1的产生；LPS+肾上腺素组与LPS单独作用组相比促炎介质TNF-α、NO(NO2-/NO3-)、COX-2的表达量显著下降，而抗炎介质IL-10、HO-1的表达却明显增强；肾上腺素与LPS共同作用组中IκB-α的含量与单独LPS作用组相比无明显差异。 结论： 肾上腺素下调LPS诱导的巨噬细胞中促炎介质的表达同时促进抗炎介质的表达，这种效应并不通过影响NF-κB的活化来实现。     

高容血液稀释联合控制性降压对腰椎手术病人肾小球功能和内环境的影响

目的 探讨术前急性高容血液稀释联合控制性降压对腰椎手术病人肾小球功能和内环境的影响。方法 将30例腰椎骨折椎板减压、切复内固定病人随机分为两组,术前急性高容血液稀释联合术中硝普钠控制性降压组(联合组)和单纯硝普钠控制性降压组(对照组),每组15例。测定联合组插管后稀释前(T0)、稀释后降压前(T1)、降压后30min(T2)和停降压后30min(T3)四个时间点,对照组插管后降压前(T1)、降压后30 min(T2)和停降压后30 min(T3)三个时间点动脉血K 、Na 、Ca2 、Cl-浓度和血气分析以及血浆β2-微球蛋白(β2-MG)的变化。结果 pH值:联合组T1-3较T0降低(P<0.01),而且低于对照组(P<0.05),T1、T2和T3之间无明显改变(P>0.05)。两组K 、Na 、Ca2 、Cl-和BE的变化比较无统计学意义(P>0.05)。联合组β2-MGT1低于T0(P<0.05);对照组T2较T1升高(P<0.05),而且高于联合组(P<0.05)。结论 硝普钠控制性降压可降低肾小球滤过率,术前急性高容血液稀释可以改善术中控制性降压对肾小球滤过率的影响,对内环境无明显影响。     

不同麻醉方法对胃癌患者围术期IL-1、IL-6、TNF-α、血糖及皮质醇水平的影响

肿瘤患者存在着免疫调节功能的缺损,异常的免疫调节功能不仅与麻醉方法、手术创伤的应激有关,而且与细胞因子平衡相关。本研究旨在观察不同的麻醉方法对手术前后血液动力学、II-1、IL-6、TNF-α、血糖及皮质醇水平的影响,以探索胃癌患者围术期免疫功能的变化,为临床麻醉提供参考。