苦参碱对人肺癌SPC-A-1细胞Bcl-2、Fas表达的影响

目的了解苦参碱（matrine）作用人肺癌细胞株SPC-A-1后其相关凋亡基因Fas、Bcl-2的变化。方法不同浓度苦参碱作用于体外培养人肺癌细胞株SPC-A-1,流式细胞术检测其凋亡相关基因Bcl-2、Fas蛋白表达的改变。结果不同浓度的苦参碱处理人肺癌SPC-A-1细胞后,流式细胞仪检测随着苦参碱浓度的升高,Bcl-2的表达量减少、Fas的表达量增加且呈剂量效应（P〈0．05）。结论苦参碱诱导人肺癌细胞株SPC-A-1细胞凋亡,其机制可能与降低Bcl-2、升高Fas等活性有关。     

阿司匹林对结肠癌细胞凋亡及环加氧酶-2基因表达的影响

目的：探讨阿司匹林对结肠癌化学预防的机理。方法：培养结肠癌细胞株Caco-2，用不同浓度阿司匹林进行干预，对细胞增殖、凋亡及环加氧酶-2(COX-2)基因表达进行观察、检测。结果：高浓度阿司匹林组细胞大量死亡．低浓度促进细胞凋亡；与对照组相比，随着阿司匹林浓度增加，COX-2基因表达逐渐减少。结论：低浓度阿司匹林能促进结肠癌细胞凋亡，下调COX-2基因表达。     

槲皮素对人结肠癌细胞体外增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的研究植物化学药物槲皮素对人结肠癌细胞的生长抑制作用和凋亡诱导效应。方法分别用不同浓度的槲皮素对人结肠癌细胞（Lovo细胞株）进行干预,采用MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期。结果与对照组相比,槲皮素对Lovo细胞具有显著的增殖抑制作用（P〈0.05）,细胞增殖抑制随浓度增加、时间延长逐渐降低,呈现量-效、时-效关系。槲皮素引起明显的细胞周期阻滞（P〈0.05）,将细胞周期阻滞在G2/M期。槲皮素呈浓度依赖性诱导细胞凋亡（P〈0.05）。结论槲皮素对结肠癌Lovo具有增殖抑制效应及凋亡诱导效应,是一种具有发展潜力的抗结肠癌药物。     

三氧化二砷及紫杉醇对人结肠癌细胞MTA1 mRNA表达水平影响研究

目的探讨三氧化二砷、紫杉醇对人结肠癌细胞Caco-2细胞株肿瘤转移相关基因1(MTA1)mRNA表达水平的影响。方法采用噻唑兰(MTT)法检测不同浓度三氧化二砷、紫杉醇对Caco-2细胞生长的抑制率,采用逆转录实时定量聚合酶链反应检测Caco-2细胞MTA1mRNA表达水平。结果随着药物浓度升高,三氧化二砷、紫杉醇对Caco-2细胞生长的抑制率逐渐升高,MTA1 mRNA表达水平则逐渐降低;药物对Caco-2细胞生长的抑制率与MTA1 mRNA表达水平呈负相关(r=-0.636,P0.05)。结论三氧化二砷、紫杉醇对Caco-2细胞生长的抑制作用,以及对MTA1mRNA表达水平的调控作用具有浓度依赖性,对Caco-2细胞生长的抑制作用与MTA1mRNA表达水平呈负相关。三氧化二砷、紫杉醇对Caco-2细胞生长的抑制作用可能与降低MTA1mRNA表达水平有关。     

下调人四旋蛋白1表达后奥沙利铂耐药结肠癌细胞雌激素受体相关受体α水平变化

目的观察下调人四旋蛋白1表达后奥沙利铂耐药结肠癌细胞株增殖及凋亡及雌激素受体相关受体（estrogen receptor related receptor,ERR）α水平变化。方法以Western blot法和实时定量（qRT）-PCR法检测结肠癌细胞及奥沙利铂耐药细胞中人四旋蛋白1及ERRα在蛋白和mRNA水平表达,以ERRα抑制剂XCT790下调ERRα表达,Western blot法、流式细胞术及MTT检测L-OHP-SW620细胞人四旋蛋白1、凋亡及增殖。采用siRNA下调人四旋蛋白1表达,Western blot法、qRT-PCR、流式细胞术及MTT检测L-OHP-SW620细胞AKT,p-AKT,人四旋蛋白1及ERRα表达、凋亡及增殖。结果人四旋蛋白1及ERRα蛋白在L-OHP-SW620细胞株中表达高于SW620细胞（t＝6.127,P〈0.01,t＝12.579,P〈0.01）,TSPAN1mRNA在L-OHP-SW620细胞株中表达高于SW620细胞（t＝9.085,P〈0.01）。XCT790抑制ERRα表达后XCT790组L-OHP-SW620细胞早期凋亡率高于阴性对照（NC）组（t＝3.297,P〈0.01）;XCT790组细胞培养72 h后生存率为（45.264±6.249）%,低于阴性对照组（63.364±9.472）% （t＝4.537,P〈0.01）。siTSPAN1组与NC组对比,p-AKT蛋白水平上调（t＝8.139,P〈0.01）,ERRα蛋白水平下调（t＝6.452,P〈0.01）,小干扰人四旋蛋白1组细胞早期凋亡率为（17.541±2.317）%,低于NC组（32.892±3.296）% （t＝4.526,P〈0.01）,小干扰人四旋蛋白1组在培养72 h后细胞生存率为（49.653±5.945）%,低于NC组（67.376±7.834）% （t＝3.109,P〈0.05）。结论下调人四旋蛋白1表达上调p-AKT蛋白,降低ERRα蛋白表达,奥沙利铂耐药细胞株增殖降低,凋亡增加,耐药性减弱。     

酒石酸锑钾对结肠癌的抑制作用

【目的】观察酒石酸锑钾(PAT)对人结肠癌细胞、结肠癌裸鼠移植模型抑瘤及凋亡诱导作用。【方法】将不同浓度PAT作用于体外培养人结肠癌SW480细胞。采用MTT法检测PAT对结肠癌SW480细胞的生长抑制作用,并计算生长抑制率;60只裸鼠皮下注射结肠癌细胞株SW480建立移植瘤模型,随机分为4组,每组15只。分别在荷瘤鼠腹腔内注射氟尿嘧啶、生理盐水及不同剂量的PAT,给药15d,末次给药24h后计算抑瘤率并观察肿瘤细胞的凋亡。利用TUNEL法进行凋亡检测。免疫组化分析凋亡调控基因Bcl-2的表达。【结果】PAT对结肠癌移植瘤生长有显著性抑制作用,肿瘤细胞凋亡增加;TUNEL法观察到棕褐色着染的凋亡阳性细胞;免疫组化显示PAT作用下Bcl-2基因阳性细胞数降低。【结论】PAT可通过诱导结肠癌SW480细胞的凋亡抑制结肠癌裸鼠皮下移植瘤。     

大黄素对胃癌细胞生长及Bcl-2表达的调控

目的:研究大黄素对人胃腺癌SGC-7901细胞生长及凋亡的影响及对Bcl-2基因表达水平的改变,探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的可能机制.方法:将不同浓度的大黄素作用于体外培养的人胃腺癌细胞,MTT法观察细胞增殖率的改变;流式细胞仪检测细胞凋亡;细胞免疫组化法检测Bcl-2蛋白表达.结果:各实验组均抑制胃癌细胞的生长,细胞增殖率随大黄素浓度的升高和作用时间的延长而下降,与对照组相比差异有统计学意义(P ＜ 0.01);各实验组作用于胃癌细胞48 h后,凋亡细胞可以检出且与对照组相比差异有统计学意义(P ＜ 0.01);各实验组可不同程度地下调胃癌细胞Bcl-2蛋白表达水平,与对照组相比差异有统计学意义(P ＜ 0.01),并呈浓度相关性.结论:大黄素体外可以抑制人胃腺癌SGC-7901细胞的增殖及诱导细胞的凋亡;大黄素诱导SGC-7901细胞凋亡可能与其下调Bcl-2蛋白表达有关.     

染料木黄酮诱导人结肠癌SW480细胞凋亡及机制

目的 探讨染料木黄酮（GEN）诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的生物学效应及抗肿瘤机制。方法 通过MTT法检测GEN对该细胞系生长的影响；应用PI染色流式细胞术（FCM）分析GEN处理前后的细胞周期分布的变化；SP免疫组化法检测细胞内bcl-2、Bax蛋白的表达。结果 GEN能抑制SW480细胞增殖，呈浓度依赖性。流式细胞仪示不同浓度GEN作用于SW480细胞，出现G2／M阻滞；SP免疫组化结果表明GEN处理细胞72h后，Bax蛋白表达升高，bcl-2蛋白表达下降。结论 GEN有诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的作用，其机制与bcl-2／Bax比值下降有关。     

BCL-2、Caspase-3、NF-KB在黄芪总苷诱导人白血病NB4细胞凋亡过程中作用

本研究探讨黄芪总苷（astragaloside,AST）对急性早幼粒细胞白血病（APL）NB4细胞株的凋亡诱导作用及其分子机制。采用AST处理人APL细胞株NB4,CCK-8比色法检测细胞增殖抑制率,FITC—Annexinv／PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;不同浓度AST作用NB4细胞后RT-PCR检测BCL-2mRNA表达,Westernblot检测NF-KB、BCL-2、caspase-3蛋白表达水平。结果表明,AST作用NB4细胞48h后,浓度依赖性地抑制NB4细胞的增殖,且随着AST的浓度增加,细胞凋亡率也由4．69％上升到40．85％。RT—PCR结果显示,BCL-2mRNA表达减弱;Westernblot结果显示,NF—KB及BCL-2蛋白表达减弱,caspase-3表达增强。结论：降低NF-KB、BCL-2表达并最终激活caspase-3的表达可能是AsT诱导NB4细胞株凋亡的机制之一。     

姜黄素雷公藤内酯醇对前列腺癌细胞PC3及血管内皮生长因子影响的比较

目的研究姜黄素（curcumin,Cur）、雷公藤内酯醇（triptolide,TL）对非雄激素依赖性前列腺癌细胞株PC3细胞体外作用及其血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达的影响。方法分别用梯度浓度的Cur和TL作用于PC3细胞,MTT法检测细胞生长活性;流式细胞仪测定细胞周期及凋亡的变化;半定量RT-PCR法检测PC3细胞内VEGF mR-NA的表达;ELISA检测细胞上清液中分泌VEGF蛋白的浓度。结果Cur及TL都能呈剂量与时间依赖性显著抑制PC3细胞的生长,不同浓度组之间及不同作用时间组之间的差异均有统计学意义（P〈0.01）。Cur、TL诱导PC3细胞分别出现剂量依赖性G2/M、S期阻滞（P〈0.01）,且各浓度组凋亡细胞比例差异有统计学意义（P〈0.01）;PC3细胞内VEGF mRNA的表达和细胞上清液中分泌VEGF蛋白亦呈剂量依赖性降低。结论Cur、TL能显著抑制体外PC3细胞的生长,分别促进细胞周期阻滞于不同时期,增加凋亡,并且VEGF mRNA及蛋白的表达明显降低,两药抑制肿瘤和血管生长机制不同。     

塞来昔布抑制人结肠癌细胞Caco-2细胞增殖及其分子机制

目的研究塞来昔布在体外抑制人结肠癌细胞Caco-2生长增殖及其抗肿瘤的相关分子机制。方法体外培养人结肠癌细胞Caco-2,分组为正常组(无任何干预)及塞来昔布组。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测塞来昔布在相同浓度下,不同时间对于胃癌细胞增殖的影响,并计算半数抑制浓度(IC50)值;反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检环氧化酶-2(COX-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的mRNA的表达影响。结果 MTT结果显示:相同干预浓度塞来昔布抑制人胃癌细胞增殖,其24 h,48 h,72 h的IC50分别为:99.519±10.355μmol/L、71.546±6.446μmol/L、59.622±15.999μmol/L;RT-PCR结果显示:人结肠癌细胞Caco-2正常对照组及塞来昔布干预组COX-2mRNA灰度值分别为:0.808±0.021,0.101±0.002(t=19.037,P=0.000);MMP-9 mRNA灰度值分别为:0.798±0.031,0.190±0.002(t=18.987,P=0.002)。结论塞来昔布可能通过抑制COX-2、MMP-9的mRNA的表达,从而抑制结肠癌细胞增殖。     

塞来昔布联合 PDTC 对人结肠癌细胞 HT-29 的抑制增殖和促凋亡作用及其机制

目的研究塞来昔布联合吡咯烷二硫氨基甲酸（PDTC）对人结肠癌细胞HT-29增殖、凋亡的影响及其对COX-2、NF-κB、Caspase-3基因表达的影响,探讨塞来昔布联合用药抗肿瘤的机制。方法用不同浓度的塞来昔布（30、60、120、240μmol／L）（单药组）以及不同浓度塞来昔布联合不同浓度的PDTC（50、100μmol／L）（联合组）分别处理人结肠癌细胞,采用CCK-8法检测细胞的增殖情况,流式细胞术分析细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR检测各组细胞COX-2、NF-κB、Caspase-3表达的变化。结果塞来昔布单药组对结肠癌细胞具有抑制增殖、促进凋亡作用,其作用随着药物浓度、给药时间的增加而增强（P均〈0．05）;同时检测到COX-2、NF-κBKBmRNA的表达降低（P均〈0．05）,Caspase-3表达升高（P〈0．05）,且具有浓度依赖性;联合组较同一塞来昔布浓度的单药组上述作用更明显（P均〈0．05）。结论塞来昔布单药组和联合组均能抑制人结肠癌细胞的增殖,促进其凋亡;联合组作用强于单药组;其机制可能与COX-2、NF-κB的下调和Caspase-3表达上调有关。     

浅蓝菌素对人胰腺癌细胞株BXPC-3的影响及机制

目的研究脂肪酸合酶（FAs）抑制剂浅蓝菌素（Cer）对胰腺癌BXPC-3细胞体外生长和凋亡的影响,并初步探讨可能的作用机制。方法采用不同浓度（0、2．5、5、10、20、40Ixg／m1）Cer处理BXPC-3,细胞增殖与毒性检测法（ccK8）检测OD值,计算对照组和各实验组的抑制率,并计算CerIC50;取Cer浓度为0、5、10、20μg／ml处理BXPC-3细胞后进行流式细胞术及AnnexinV／PI早期凋亡检测细胞凋亡率和细胞周期的变化;反转录聚合酶链反应（RT．PCR）检测FASmRNA、Bcl-2mRNA、BaxmRNA表达水平的变化;免疫印迹法（Westernblot）检测细胞凋亡因子Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果（1）Cer可明显抑制BXPC-3细胞的生长,并随着浓度的增加和作用时间的延长而明显增强（P〈0．05）。（2）BXPC-3细胞经Cer作用48h后,细胞周期S期比例上升,（32期细胞比例下降（P〈0．05）。细胞有明显凋亡,以早期凋亡为主。（3）BXPC-3细胞经Cer作用48h后,FASmRNA、Bel-2mRNA的表达呈浓度依赖性下降,BaxmRNA呈浓度依赖性上升,各浓度组与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。（4）Cer作用于BXPC-3细胞48h可使细胞中的Bcl．2蛋白表达下降,Bax蛋白表达升高,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论Cer以时间、浓度依赖方式抑制胰腺癌BXPC-3细胞的生长,其机制可能与调控细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡有关。     

FADD在L-OHP抑制裸鼠人结肠癌皮下移植瘤生长中的表达

[目的]探讨Fas相关死亡结构域蛋白（Fas associated protein with death domain,FADD）在奥沙利铂（L—OHP）抑制裸鼠人结肠癌皮下移植瘤生长中的表达及其可能机制。【方法】建立BALB／C-nu／nu裸鼠SW480人结肠癌皮下移植瘤模型,L-OHP行瘤体内注射,与氟尿嘧啶治疗进行对比。观察各组肿瘤瘤重和体积变化,计算抑瘤率。采用HE染色和TUNEL法检测瘤体组织肿瘤细胞凋亡情况,Western-blotting检测FADD蛋白表达情况。【结果】L-OHP和氟尿嘧啶均能显著抑制裸鼠皮下移植瘤的生长,且L-OHP对移植瘤的抑制作用和L-OHP组肿瘤细胞凋亡率明显强于（高于）氟尿嘧啶和5-Fu组,差异有统计学意义（P〈0．05）。TUNEL法观察到棕褐色的阳性肿瘤凋亡细胞,Western-blotting结果显示FADD蛋白表达增加。[结论]L-OHP通过诱导SW480细胞凋亡从而抑制裸鼠人结肠癌皮下移植瘤,其作用机制可能与激活凋亡死亡受体途径、FADD表达上调有关。     

THP与ADM对乳腺癌的体外生长抑制及诱导凋亡研究

目的比较吡柔比星(THP)和阿霉素(ADM)对乳腺癌细胞的体外抑制及凋亡诱导作用。方法采用ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术(ATP-TCA)及AnnexinV凋亡检测技术比较吡柔比星和阿霉素对人乳腺癌细胞株MCF-7的体外生长抑制及细胞凋亡诱导作用。结果吡柔比星对MCF-7细胞株生长抑制作用明显高于阿霉素,其IC50仅相当于阿霉素的1/3-1/6,差异具有显著意义(P0.01);吡柔比星和阿霉素对MCF-7细胞抑制作用均有剂量依赖性,并均能在低浓度下诱导MCF-7细胞凋亡,吡柔比星处理组的细胞凋亡比例高于阿霉素组(P0.01)。结论吡柔比星较阿霉素对乳腺癌细胞MCF-7具有更好的体外生长抑制和诱导细胞凋亡作用。     

Effects of deoxycholate on human colon cancer cells: apoptosis or proliferation

BACKGROUND: Deoxycholic acid has long been attributed as a tumour promoter in the colon. It exerts its growth-related actions in a phorbol ester-like manner, by stimulating protein kinase C. The aim of this study was to investigate the effect of deoxycholic acid on proliferation and apoptosis in the colon, by exposing colon cancer cells to it in increasing concentrations. METHODS: Human colon cancer cells (Caco-2 and HT-29) were treated with deoxycholate or its two structural isomers, 3-beta-12-alpha-dihydroxy-5-beta-cholan-24-oic acid and 3-alpha-12-beta-dihydroxy-5-beta-cholan-24-oic acid. Proliferation was evaluated by cell counting, and apoptosis by estimating percentage cell survival and assessment of nuclear morphology. RESULTS: Within the concentration range of up to 20 microM, deoxycholate stimulated growth of both human colon cancer cell lines. Its growth-promoting effect was abolished after inhibition of protein kinase C. At concentrations above 100 microM, deoxycholate induced apoptosis in both cell lines. Epimers of deoxycholate were significantly less potent in stimulating growth. CONCLUSION: Low-dose deoxycholate stimulates colon cancer cell proliferation while > 100 micromol L(-1) of this secondary bile acid induces apoptosis in colon cancer cells. Deoxycholate might promote the likelihood of malignant transformation by increasing epithelial cell turnover in the colon.     

外源性子宫珠蛋白基因对宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨人子宫珠蛋白（UG）基因对宫颈癌Hela细胞系细胞增殖及凋亡的影响。方法构建真核细胞表达载体pcDNA3．1-UG（＋），以脂质体介导法稳定转染体外培养的人宫颈癌Hela细胞，同时转染空载体pcDNA3．1质粒，以未转染细胞为对照，转染成功后分别命名为pcDNA3．1-UG（＋）／Hela组、pcDNA3．1／Hela组、Hela组。应用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）、Western blot方法分析目的基因表达，并采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法和流式细胞术检测细胞增殖和细胞凋亡。结果pcDNA3，1-UG（＋）／Hela组UGmRNA及UG蛋白出现明显的高表达，与对照组细胞相比差异有统计学意义（P〈0．05）；pcDNA3．1UG（＋）／Hela组细胞生长速度明显慢于未转染Hela细胞，其细胞凋亡率与未转染Hela细胞相比差异也有统计学意义；然而pcDNA3．1／Hela组细胞生长速度和凋亡率均无明显变化。结论转染UG基因能诱导Hela细胞凋亡及抑制Hela细胞生长。     

β1整合素表达下调对人结肠癌细胞增殖和化疗敏感性影响

目的 观察β1整合素表达下调对人结肠癌HT-29细胞增殖和化疗敏感性的影响.方法 采用反义寡核苷酸（ASODN）技术转染HT-29细胞,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测β1整合素表达下调情况.MTT法检测HT-29细胞相对存活率.给予梯度浓度氟尿嘧啶（5-FU）,计算IC50.结果 实验组β1整合素条带吸光度积分（IAD）值/β-actin条带IAD值的比值及HT-29细胞的存活率与对照组相比显著降低（F=1 630.08,q=72.40,P〈0.01;t=4.37,P〈0.05）.5-FU＋ASODN组HT-29细胞对5-FU的IC50与5-FU组比较显著下降（t′=37.71,P〈0.05）.结论 β1整合素表达下调可抑制结肠癌细胞增殖,增强结肠癌细胞对化疗药物敏感性.     

甘露糖结合凝集素对甲状腺癌细胞p53及Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨甘露糖结合凝集素（MBL）对甲状腺癌细胞株p53及凋亡基因Bcl-2基因表达的影响。方法将0、1mg／L的重组人甘露糖结合凝集素（RhMBL）（对照组、实验组）分别作用于两种甲状腺癌细胞株（甲状腺乳头状癌细胞和甲状腺滤泡状癌细胞）,利用蛋白印记（WesternBlot）检测p53、Bcl-2的表达。结果重组人甘露糖结合凝集素作用于甲状腺癌细胞株后,可使p53及Bcl-2蛋白相对表达量下调。（1）甲状腺乳头状癌细胞：p53蛋白对照组的表达量为1．51±0．29、实验组为0．74±O．07,两组比较差异有统计学意义（t=7．63,P=0．040）;Bcl-2蛋白对照组的表达量为1．20±0．07,实验组为0．59±0．04,两组比较差异有统计学意义（t=6．28,P=0．001）。（2）甲状腺滤泡状癌细胞：p53蛋白对照组的表达量为0．88±O．14,实验组为0．35±0．08,两组比较差异有统计学意义（t=3．29,P=0．003）;Bcl-2蛋白对照组的表达量为1．07±0．11,实验组为0．33±0．06,两组比较差异有统计学意义（t=5．73,P=0．000）。结论MBL在其诱导甲状腺癌细胞凋亡、抑制其增殖的的过程中,Bcl-2和p53可能发挥着一定的作用。     

RhoA基因转染对QZG肝细胞生物学行为的影响及其机制的研究

目的探讨RhoA基因转染QZG肝细胞系后细胞骨架和体外侵袭能力的变化。方法构建持续激活型的RhoA真核表达载体,以脂质体介导转染肝细胞系QZG,用RT-PCR检测RhoA mRNA表达水平,观察细胞骨架的变化和体外侵袭能力。结果RT-PCR表明稳定转染细胞株中有RhoA mRNA高表达,而且在荧光显微镜下可见到细胞株绿色荧光,细胞形态和骨架发生变化。Boyden小室体外侵袭试验中实验组比空白对照组侵袭能力增加41.4%（P=0.006）。结论RhoA影响细胞的骨架变化和侵袭能力,在肝癌发生和发展中发挥重要作用。