钙敏感受体活性改变对大鼠泌尿系草酸钙结石形成的影响

目的探讨钙敏感受体（CaSR）活性改变对草酸钙结石形成的影响。方法在实验期间给予乙二醇和氯化铵诱导雄性SD大鼠产生泌尿系草酸钙结石。在造模期间给予不同剂量的CaSR抑制剂（NPS-2390）。实验结束时检测各组大鼠血尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、血磷、血钙、血镁、PTH的含量、24h尿量、尿pH值、尿钙、镁、尿草酸的分泌量,显微镜下观察肾组织切片中草酸钙结晶沉积及病理变化情况及肾脏中CaSR表达情况。从而评价CaSR活性的改变对泌尿系结石形成的影响。结果成石对照组大鼠血BUN、Cr、尿草酸、尿钙较空白组明显升高并且有大量结晶形成,表明建模成功。CaSR抑制剂组较成石对照组甲状旁腺激素（PTH）的分泌增加并且血Ca2＋升高尿钙升高。肾组织病理学检查显示CaSR抑制组的肾脏组织中的草酸钙结晶较成石对照组明显增加,组织病理损伤也较重。结论肾脏中及甲状旁腺中CaSR的表达下降可以导致草酸钙结晶的形成增加。     

大鼠肾草酸钙结石模型制备效果的比较研究

目的 验证大鼠肾草酸钙结石模型制备方法,为癸壬化石丸治疗肾结石的药理作用及机制研究选择有效的大鼠肾草酸钙结石模型.方法 按文献报道的四种大鼠肾草酸钙结石模型制备方法,将SD大鼠分为A、B、C、D四组,A组采用1％乙二醇+2％氯化铵溶液进行灌胃,B组采用1％乙二醇+2％氯化铵+10％葡萄糖进行灌胃,C组采用1％乙二醇+10％葡萄糖酸钙进行灌胃,D组采用1％乙二醇+2％氯化铵+10％葡萄糖酸钙进行灌胃,28 d后检查尿常规、尿生化、血生化和肾脏标本的病理切片后比较肾草酸钙结石模型制备效果.结果 四种方法制备大鼠肾草酸钙结石模型,造模效果D组＞A组＞B组＞C组.结论 采用1％乙二醇+2％氯化铵+10％葡萄糖酸钙所形成大鼠肾草酸钙结石模型效果较好.     

肾结石大鼠肾组织bikunin mRNA的表达

目的 :研究bikunin在实验性肾草酸钙结石大鼠肾组织的表达及意义。方法 :采用乙二醇和氯化铵诱导大鼠肾草酸钙结石模型形成 ,检测各组大鼠肾功能、肾组织Ca2 + 含量和草酸钙晶体沉积、尿生化指标 ,并用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测bikuninmRNA在肾组织的表达情况。结果 :模型组大鼠的血清Cr、BUN、肾Ca2 + 含量、2 4h尿Ca2 + 、草酸 (Ox)分泌量和肾组织bikuninmRNA的表达均明显高于正常组 (P <0 .0 5 )。结论 :高草酸尿和草酸钙结晶的沉积能促使大鼠肾脏通过合成更多的bikunin来抑制大鼠肾组织草酸钙晶体的形成。     

N-乙酰半胱氨酸抑制大鼠肾草酸钙结石形成机制的研究

目的：探讨N一乙酰半胱氨酸（NAc）对大鼠肾草酸钙结石形成的影响及机制,为临床预防尿路结石提供理论依据。方法：将30只健康清洁成年雄性Wistar大鼠先在相同环境下适应性喂养1周,然后随机分为3组：A组（空白对照组）、B组（单纯诱石组）、C组（诱石＋NAC干预组）。A组饮去离子水,B组饮1％乙二醇的去离子水,C组饮1％乙二醇去离子水,并给予NAC100mg／（kg·d）灌胃。第4周处死大鼠,取出双肾,左肾纵向剖开,用10％甲醛固定,HE染色石蜡切片,在100、400倍光镜下观察肾组织草酸钙结晶沉积情况,并进行分级及评分。右肾皮质制成10％的匀浆,检测丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）。全部实验数据通过SPSS17．0统计软件分析处理。结果：①肾脏结晶沉积情况分级及评分结果：与B组相比,C组的肾脏结晶沉积评分明显降低（P〈0．05）。②MDA检测结果：与B组相比,C组的MDA含量降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。③SOD检测结果：与B组相比,C组的SOD含量增高,差异有统计学意义（P〈0．05）。④A、B、C三组肾组织结晶等级评分与s0D含量的相关系数为-0．499（P〈0．01）,结晶评分与MDA含量的相关系数为0．592（P〈0．01）。结论：NAc可以通过其抗氧化作用抑制大鼠肾草酸钙结石的形成。     

无肾功能损伤大鼠肾草酸钙结石模型的筛选

目的 用最小的肾脏功能损伤筛选制作短时、经济和成石效果好的大鼠肾草酸钙结石模型.方法 将雄性SD大鼠90只随机分为两组.实验1采用1.0％氯化铵和不同浓度乙二醇(EC,0.1％、0.2％、0.4％、0.8％)处理.实验2单用不同浓度EG(0.1％、0.2％、0.4％、0.8％)处理.7～21 d后处死大鼠,测体质量、血、尿肌酐和尿草酸盐含量.苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织病理改变及肾成石.结果 实验1中,不同浓度EG+ 1.0％氯化铵处理7d后,大鼠尿草酸盐排泄量均高于对照组(P＜0.05).用0.4％或0.8％ EG+ 1.0％氯化铵处理14d后,大鼠肌酐清除率均低于对照组(P＜0.01);光镜观察,肾皮质、髓质和肾乳头等处出现草酸钙结晶体,肾组织炎性损伤加重.实验2中,用0.4％或0.8％ EG处理7d后,尿草酸盐排泄量高于对照组(P＜0.01),但肌酐清除率变化差异无统计学意义(P＞0.05).光镜观察,肾皮质及间质未出现明显水肿,可观察到少量结石结晶但无炎性细胞浸润.结论 单用EG处理大鼠可以在没有严重肾损伤的情况下构造短时、经济和成石效果好的大鼠肾草酸钙结石模型.     

苄丙酮香豆素对实验性大鼠肾草酸钙结石形成的影响

目的：探讨Vit．K拮抗剂苄丙酮香豆素(商品名华法令)对大鼠肾草酸钙结石形成的影响。方法：采用乙二醇饮水和氯化铵灌胃作成石剂，30只Wistar大鼠随机分为对照组(A组)、成石组(B组)、华法令组(C组)。饲养4周后，检测大鼠肾组织钙含量和草酸钙晶体形成、24h尿钙、尿草酸含量及血生化指标。结果：成石组和华法令组肾组织中钙、镁含量，24h尿草酸及尿钙、镁排泄量差异无显著性意义；镜下观察发现：华法令组大鼠肾脏草酸钙结晶形成多于成石组，但组间比较差异无显著性意义。结论：苄丙酮香豆素对大鼠肾草酸钙结石的形成无显著影响。     

碘海醇对实验性大鼠草酸钙结石形成的影响

目的探讨造影剂碘海醇对大鼠草酸钙结石形成的影响。方法将40只Wister大鼠随机分为成4组：空白对照组（A）、单纯诱石组（B）、单纯碘海醇组（C）、诱石＋碘海醇组（D）。用乙二醇法诱导建立大鼠草酸钙结石模型,C、D组尾静脉注射碘海醇。实验第4周末检测肾组织中丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活力,镜下观察肾内草酸钙晶体沉积情况。结果A、B、C、D4组肾脏组织MDA含量（nmol／mg蛋白）分别为2．74±0．48、4．51±1．47、6．92±2．18、8．87±2．31,SOD活力（U／mg蛋白）分别195．21±11．01、170．24±13．59、140．86±25．91、121．54±25．50,各组间差异有统计学意义（P〈0．05）。B、D组结晶等级评分高于A组,D组结晶等级评分高于B组（P〈1．05）。培论碘海醇促进了大鼠肾小管内草酸结晶量的增加,其机制与碘海醇诱导的肾小管上皮氧化应激损伤有关。     

月见草油抑制草酸钙结晶形成的实验研究

目的了解月见草油在草酸钙结石形成中的作用,为临床治疗提供新的方法与思路。方法雄性SD大鼠60只,随机分为4组,各组15只。C组和D组以月见草油（含γ-亚麻酸9.2%）或葵花籽油（含亚油酸70%）10g/kg灌胃4周后,用诱石剂1%乙二醇（EG）加2%氯化氨喂饮,同时继续以月见草油或葵花籽油灌胃4周,8周后检测各组大鼠肾功能、24h血尿生化指标和肾草酸钙结晶情况;仅饲普通饲料（A组,空白组）和普通饲料加1%乙二醇（EG）加2%氯化氨喂饮（B组,成石组）大鼠作为对照。结果月见草油组肾组织水肿较轻,肾内草酸钙结晶数及肾成石率低于成石组（P〈0.05）,尿枸橼酸较成石组高（P〈0.01）,24h尿钙、尿草酸排泄均低于成石组（P〈0.01）,血尿素氮（P〈0.01）、血肌酐（P〈0.05）低于成石组。结论γ-亚麻酸能有效改善肾功能,减少尿钙及草酸的排泄,抑制实验鼠肾草酸钙结晶形成,在尿石症防治方面可能有一定应用价值。     

药用醋膏预防大鼠泌尿系结石形成及其机制的初步研究

目的:通过应用药用醋膏喂养泌尿系结石模型大鼠,观察大鼠肾组织病理变化及测定肾组织草酸和钙离子含量,观察醋酸预防泌尿系结石的效果,进一步探讨其机制。方法:将适宜体重的健康Wister大鼠随机分为空白组、1%乙二醇+2%氯化铵诱石液造模对照组、30g/100ml高剂量醋膏+1%乙二醇+2%氯化铵诱石液组、10g/100ml低剂量醋膏+1%乙二醇+2%氯化铵诱石液组,喂养28天后处死,取肾组织HE染色,观察草酸钙结晶面积分布情况,测定各组大鼠肾组织中草酸与钙离子含量。结果:空白组与其它三组比较,肾组织草酸钙结晶面积分布及草酸和钙离子含量差异均有统计学意义(均P0.05);造模对照组与高剂量醋膏组比较,肾组织草酸钙结晶面积分布及草酸和钙离子含量差异均有统计学意义(P0.05),而与低剂量醋膏组比较,肾组织结晶面积分布及草酸和钙离子含量差异均无统计学意义(P0.05);高剂量醋膏组与低剂量醋膏组比较,肾组织草酸和钙离子含量差异有统计学意义(P0.05),肾组织草酸钙结晶面积分布差异无统计学意义(P0.05)。结论:在正常食用剂量范围内,高剂量醋膏对大鼠泌尿系结石的形成有预防作用,可降低肾组织中草酸及钙离子含量。     

中药泽泻中提取的化合物对尿草酸钙结石形成的影响

目的 通过乙二醇与氯化铵诱导的大白鼠肾草酸钙结石模型观察从中药泽泻中提取的三种化合物对尿草酸钙结石形成的影响,并探讨其抑制尿草酸钙结石形成的有效成分.方法 中药泽泻饮片,经药理学方法得到化合物Ⅰ、化合物Ⅱ、化合物Ⅲ.50只Wistar雄性健康大白鼠,随机分为5组,A组:正常空白对照组;B组:草酸钙结石成石组;C组:化合物Ⅰ实验组,在给予诱石剂的同时,每只大鼠每天灌胃化合物Ⅰ 1 ml,其他各实验组以此类推;D组:化合物Ⅱ实验组;E组:化合物Ⅲ实验组.各组在相同条件下饲养4周后,用代谢笼收集大鼠的24 h尿液检测24 h尿草酸(OX),Ca2+含量,断颈处死大鼠检测肾组织Ca2+含量,偏光显微镜下观察肾组织Von-Kossa's染色切片中草酸钙结晶大小,形态分布和肾小管损害程度.结果 C组24 h尿Ca2+(61.49±2.06)含量高于B组(37.23±1.84),差异有统计学意义(P<0.05);肾Ca2+(10.35±6.45)含量明显低于B组(49.20±9.63),差异有统计学意义(P<0.01);切片可见少量草酸钙晶体沉积和肾小管轻度扩张.结论 从中药泽泻中提取的化合物I能显著降低肾组织Ca2+含量和增加草酸钙结石大白鼠24 h尿Ca2+的分泌量,明显降低草酸钙晶体在肾脏的沉积和减轻肾小管的损害程度,因而化合物Ⅰ是泽泻抑制尿草酸钙结石形成的重要成分.     

筛选乙二醇法复制大鼠肾结石模型最佳剂量的比较研究

目的：探讨乙二醇法复制大鼠肾结石模型的最佳剂量，建立乙二醇法复制规范化大鼠肾结石模型的方法。方法：采用不同浓度的乙二醇（1％、1．25％、1．5％、2％）分别与1％氯化铵溶液制作大鼠肾结石模型，实验用药第4周处死大鼠，用7150全自动生化仪测定血与尿Ca^2＋、Mg^2＋、P^3＋、UA含量，用变色酸比色法测定肾组织中草酸含量；无菌取肾组织，常规石蜡包埋、组织切片、比染色、偏光显微镜观察肾组织病理改变及大鼠肾成石情况。结果：在不同浓度的乙二醇4个剂量组中，血与尿Ca^2＋、Mg^2＋、P^3＋、UA，肾组织中草酸含量以及肾成石情况不以乙二醇浓度而增加，以1．25％乙二醇合1％氯化铵对大鼠肾成石作用为优。结论：1．25％乙二醇合1％氯化铵是复制肾结石模型的最佳剂量组，可以作为乙二醇法复制的规范化的大鼠肾结石模型。     

三叶因子1在大鼠草酸钙结石模型肾组织中的表达及其意义

目的 探讨三叶因子1(TFF1)在大鼠草酸钙结石模型肾组织中的表达及其与肾脏草酸钙结石形成机制的关系.方法 分别以1％的乙二醇溶液自由饮用和2％的NH4Cl溶液2 mL/d灌胃2周和4周;用偏光显微镜观察结石结晶形成情况;采用免疫组织化学染色法分别检测成石2周(n=20)、成石4周(n=20)和正常组(n=20)大鼠肾组织TFF1蛋白的表达.结果 TFF1免疫反应阳性物质主要位于肾小球、肾小管,与正常组比较,成石2周肾组织TFF1平均灰度值略下降(P＞0.05),成石4周平均灰度值明显降低(P＜0.05).结论 乙二醇诱导的大鼠草酸钙结石模型肾组织中TFF1低表达,伴随结石结晶数量和密度的增加,TFF1表达降低.TFF1在肾组织中的表达与乙二醇和NH4Cl干预的时限呈负相关;TFF1可能在肾草酸钙结石的形成中起抑制作用.     

西梅汁预防大鼠草酸钙肾结石的实验研究

目的 研究西梅汁对乙二醇诱导的大鼠草酸钙肾结石形成的影响及其量效关系.方法 40只wistar大鼠随机分为8组:A空白对照组、B单纯乙二醇诱石组、C～E为西梅汁干预组[分别灌喂西梅汁2、4、8 mL· (kg·d)-1],每组8只.除空白对照组外,余皆用含1％乙二醇去离子水作为大鼠的唯一饮用水源并自由饮用,以诱导生成草酸钙肾结石.分别于实验前日和实验第4周末,检测大鼠尿钙、镁、草酸及枸橼酸浓度;血钙、镁、肌酐和尿素氮浓度;肾脏组织丙二醛(MDA)含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性;偏光显微镜观察HE染色肾脏组织草酸钙结晶形成情况;TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡,以此分析西梅汁及西梅干预防肾结石的量效关系.结果 所用三种剂量的西梅汁均能明显减轻乙二醇所致的各项血尿生化指标和肾小管上皮细胞凋亡指数的改变,大幅增加尿镁浓度,明显减少乙二醇诱导的大鼠草酸钙肾结石的生成,且效果呈剂量依赖性.结论 所用的三种剂量的西梅汁均可明显干预乙二醇诱导的大鼠草酸钙肾结石的生成,且呈正相关的量效关系.     

Prophylaxis of calcium oxalate stones by Herniaria hirsuta on experimentally induced nephrolithiasis in rats

OBJECTIVE: To evaluate the prophylactic potential of a herbal decoction from Herniaria hirsuta, a medicinal plant widely used in Morocco to treat kidney stones, by assessing the effect of oral administration in experimentally induced calcium oxalate (CaOx) nephrolithiasis in rats. MATERIAL AND METHODS: Two groups of six rats each were rendered nephrolithic by treating with ethylene glycol 0.75% and ammonium chloride 1% for 3 days, and then ethylene glycol only for 3 weeks. Maintained on ethylene glycol, one group of rats was also given 1 mL/day of the plant decoction, while the others received 1 mL of water instead for 2 weeks. Urine samples (24 h) were collected individually at 1, 3, 7, and 14 days for physicochemical analysis. On completing the treatment the kidneys were collected and analysed by light microscopy. RESULTS: The water intake and diuresis decreased in the treated rats; there was no significant difference in urinary pH between the groups. Urinary chemistry was apparently unaffected by the plant extract, except for the magnesium content, which was higher in treated rats. Crystalluria was characterized by the excretion of large CaOx monohydrate and dihydrate crystals in untreated, but smaller crystals in treated rats. The histology showed large deposits of CaOx crystals in all parts of the kidney in untreated rats but with almost no deposits in those of treated rats. CONCLUSION: H. hirsuta has an impressive prophylactic effect on CaOx stones in nephrolithic rats; the effect did not seem to be mediated by biochemical or diuretic changes.     

Decreased renal expression of the putative calcium oxalate inhibitor Tamm-Horsfall protein in the ethylene glycol rat model of calcium oxalate urolithiasis

PURPOSE: Tamm-Horsfall protein is believed to inhibit calcium oxalate crystallization, aggregation or adhesion to the renal epithelium. We determined whether ethylene glycol induced urolithiasis changes the expression of renal and urinary Tamm-Horsfall protein. For comparison the expression of another calcium oxalate inhibitor, osteopontin, was also analyzed. MATERIALS AND METHODS: Male rats were treated with 0.75% ethylene glycol plus an AIN-76 diet (Dyets, Bethlehem Pennsylvania) (ethylene glycol group) or standard rat chow and water (control group) for up to 8 weeks (6 per group for 8 weeks and 3 per group for 3 days to 6 weeks). Kidneys and urine (8 weeks only) were harvested and analyzed by Northern and Western blot analysis, and immunohistochemistry. RESULTS: Tamm-Horsfall protein message and protein (membrane bound form) were decreased, while those of osteopontin were increased in the kidneys of rats treated with ethylene glycol for 8 weeks. As judged by immunochemistry Tamm-Horsfall protein and osteopontin were consistently present in a few tubules in rats in the ethylene glycol and control groups, respectively. In urine expression of the free form of Tamm-Horsfall protein (approximately 75 kDa.) was decreased but detectable in ethylene glycol treated rats. Although readily detected in tissue, osteopontin was not detected in the urine of control or ethylene glycol treated rats. In the time course experiment Tamm-Horsfall protein did not decrease until 4 weeks, when calcium oxalate crystals were detectable in the kidneys of treated rats. In contrast, osteopontin was increased, although inconsistently, beginning at 3 days. CONCLUSIONS: Unlike other calcium oxalate inhibitors, such as osteopontin, renal message and protein for Tamm-Horsfall protein was decreased in ethylene glycol treated rats. Tamm-Horsfall protein expression did not decrease until aggregates of crystals had been deposited in the kidneys, while osteopontin expression began to increase almost immediately. Comparisons of the data on kidneys and urine obtained by RNA or protein blot analysis and immunochemistry underscore the need to examine tissue and urine by multiple techniques to obtain the most accurate assessment of how protein expression is changed by a given treatment.