日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30的模拟抗原在成虫、虫卵的定位观察

应用免疫组化和免疫电镜技术观察了日本血吸虫单克隆ａｎｔｉ－ａｎｔｉ－ｉｄＮＰ３０的模拟抗原在成虫、虫卵的分布和定位。单克隆ａｎｔｉ－ｉｄＮＰ４１作为第一抗体。实验结果表明，ＮＰ３０的模拟抗原定位于成虫的体膜、消化管上皮、子宫内膜上皮及虫卵的卵膜。提示ＮＰ３０的模拟抗原具有其共同抗原的特性，ＮＰ３０具有作为抗病疫苗候选分子的潜能     

用单克隆抗独特型抗体NP30检测血吸虫病短程抗体的研究

为证实用日本血吸虫单克隆抗独特型抗体ＮＰ３０制备的抗体检测试剂盒考核治疗效果的价值,采用双“抗原”夹心酶联免疫吸附试验,用ＮＰ３０替代抗原,检测血吸虫病抗体。结果：该试剂盒对急性感染者的检出率为１００％,慢性轻度感染者的检出率为６１％,特异性为１００％。急性感染和慢性感染的Ｙｏｕｄｅｎ指数（ｒ）分别为１．０和０．６１,慢性感染者与经典抗体检测法ＳＥＡ／ＥＬＩＳＡ（０．６０）的ｒ无差别。用此试剂盒检测血吸虫病治疗后１ａ的血清,阴转率达１００％,明显优于经典抗体检测法（４３．６％）。结论：ＮＰ３０检测的抗血吸虫抗体属短程抗体,该试剂盒具有与循环抗原检测相同的考核疗效价值。     

抗日本血吸虫单克隆抗体制备及其靶抗原性质的研究

为建立两株抗日本血吸虫单克隆抗—ＣＡ－７、ＣＡ－８，（均为ＩｇＭ型）。用单抗ＤＯＴ－ＥＬＩＳＡ方法可检测出血吸虫感染兔血清中的靶抗原。ＣＡ－７的靶抗原存在于虫卵、尾蚴中；ＣＡ－８的靶抗原存在于虫卵、尾蚴和成虫中。用亲和层析的方法分离纯化了这两株单抗的靶抗原。实验结果表明ＣＡ－７和ＣＡ－８的靶抗原是中性糖含量分别为２３．３％和１４．７％，Ｍｒ为２２０×１０３和２００×１０３的糖蛋白。这两种抗原经高碘酸氧化后，都丧失与单抗结合的能力；但经蛋白酶消化后，仍保留抗原活性，表明与单抗ＣＡ－７、ＣＡ－８结合的位点均在糖蛋白的糖链上。ＣＡ－７靶抗原经碱水解去除Ｏ－糖链后，丧失与ＣＡ－７单抗结合的能力；ＣＡ－８靶抗原经碱水解后仍保留抗原活性，说明ＣＡ－７靶抗原决定簇位于Ｏ－糖链上，ＣＡ－８靶抗原决定簇位于Ｎ－糖链上。     

日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30引起小鼠足垫反应的实验研究

目的：探讨日本血吸虫单克隆抗独特型抗体ＮＰ３０引起小鼠足垫反应的实验条件。方法３对个因素２个小平（尾蚴感染数１０条／鼠和５０条／鼠,ＮＰ３０注射剂量１μｇ／鼠和１０μｇ／鼠,感染后４周和７周）应用正交设计进行小鼠足垫试验,于ＮＰ３０注射后不同时间观察足垫肿胀情况。结果正交设计结果的方差分析表明,ＮＰ３０在注射后１２ｈ的结果有显著性差异。结果ＮＰ３０引起的足垫肿胀为迟发型变态反应。     

肾综合症出血热肾组织中病毒感染及病毒抗原的来源和意义

目的：明确肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）肾组织中病毒感染及抗原的来源和意义。方法：应用免疫组化和原位分子杂交技术，分别对西安、沈阳、上海、江西和广州地区收集的３０例ＨＦＲＳ尸检肾组织进行了研究；结果：２８例进行病毒抗原检测，有２６例阳性（２６／２８／３０）；２８例进行病毒ＲＮＡ检测，２６例阳性（２６／２８／３０）。西安及沈阳病例，病毒抗原和ＲＮＡ阳性部位主要是肾小管上皮细胞。上海及江西病例，病毒抗原定位于肾间质血管内皮，血管壁和肾小管上皮；而病毒ＲＮＡ主要定位于肾间质血管和血管内皮，少数病例伴肾小管上皮细胞阳性；１例上海病例肾小管上皮细胞胞核病毒ＲＮＡ阳性。广州病例，病毒抗原主要定位于肾血管平滑肌细胞；在３例西安病例和６例上海病例肾脏远曲小管和集合管上皮细胞中检测到ＮＰ和ＨＡ抗原阳性的胞浆内病毒包涵体（ＣＩＢ）。在病变严重的肾小管和间质血管部位可同时检测到ＩｇＧ，ＩｇＭ和Ｃ３阳性；少数病例肾小球也有不连续阳性，但较前两者弱。结论：ＨＦＲＳ病毒可感染肾脏中肾小管上皮和血管内皮，并在肾小管上皮细胞产生包涵体，不同地区病例肾脏中病毒感染的部位不同，可能与不同地区病例所感染的病毒毒株或血清型不同有关。病毒感染所诱发的Ⅱ     

不同胆囊病变树突状细胞浸润的免疫组化研究

应用免疫组化对胆囊不同病变内Ｓ－１００树突状细胞浸润与肿瘤相关分子的表达相互关系进行对比研究。包括胆囊癌症病人切除标本３０例，结石２０例，慢性炎症２０例。用单克隆抗Ｐ５３蛋白、抗增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ），抗癌胚抗原（ＣＥＡ）及多克隆抗Ｓ－１００蛋白抗体，ＬＳＡＢ法检查上述病变标本，结果发现癌症病人的Ｐ５３蛋白生为４６．７％（１４／３０），ＰＣＮＡ为８６．７％（２６／３０），ＣＥＡ为３０．０％（９     

直接免疫细胞化学法检测红细胞内血红蛋白及其在血红蛋白病诊断中的应用

目的：建立直接免疫细胞化学法检测红细胞内血红蛋白类型，以鉴别胎儿有核红细胞，开展从母血分离胎儿细胞进行遗传病无创性产前诊断研究。方法：用荧光素标记的ａｎｔｉ－ＨｂＡ，ａｎｔｉ－α－ｇｌｏｂｉｎ，ａｎｔｉ－ＨｂＥ，ａｎｔｉ－β－ｇｌｏｂｉｎ和ａｎｔｉ－γ－ｇｌｏｂｉｎ抗体特异性检测正常成人外周血、Ｈｂ－Ｂａｒｔ′ｓ水肿死胎儿心脏血、血红蛋白Ｅ杂合子患者和β＾。地中海贫血纯合子患者外周血的细胞涂片，在     

卵巢恶性上皮性肿瘤中HLA-DR表达及树突细胞浸润的意义

目的：探讨卵巢癌中ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达和树突细胞浸泣的情况及其意义。方法：用免疫组化Ｓ－Ｐ法对卵巢恶性上皮性肿瘤（４８例）、良性上皮性肿瘤（３０例）及正常卵巢（３０例）的ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达及树突细胞浸润情况进行对照研究。结果：正常卵巢组织中ＨＬＡ－ＤＲ阴性,卵巢恶性上皮性肿瘤中ＨＬＡ－ＤＲ表达阳性率为５２．０８％（Ｐ〈０．０１）;ＨＬＡ－ＤＲ表达率与肿瘤分化程度相关（Ｐ〈０．０１）,且与预后相关     

重组汉坦病毒核壳蛋白的制备及其单克隆抗体的研制

将ＰＣＲ扩增的ＨＴＶ７６－１１８ＲＮＡ小片段的ｃＤＮＡ克隆插入到载体ｐＤＳ５６／ＲＢＳⅡ－（Ｏ）－６Ｈｉｓ中,通过ＩＰＴＧ诱导表达以及镍螯合层析纯化重组ＮＰ,经过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、免疫转印和ＥＬＩＳＡ方法分析其蛋白特性,证实该重组ＮＰ与毒粒ＮＰ相同,均为４９．６ｋｕ,能与肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）患者血清产生特异性反应。以此重组ＮＰ作为抗原制备抗ＮＰ单克隆抗体,获得两株持续稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用抗ＮＰＭｃＡｂ建立检测ＩｇＭ抗体的ＥＬＩＳＡ捕获法。证实纯化重组ＮＰ作为抗原,避免了组织培养病毒的感染性和非特异性以及难以标准化的缺点。所建立的ＥＬＩＳＡ捕获法检测ＨＦＲＳ患者血清中ＩｇＭ抗体的方法特异性强、敏感性高,可作为ＨＦＲＳ的早期诊断试剂     

抗日本血吸虫单克隆抗体制备及其靶抗原性质的研究

为建立两株抗日本血吸虫单克隆抗体－ＣＡ－７、ＣＡ－８，（均为ＩｇＭ型）。用单抗ＤＯＴ－ＥＬＩＳＡ方法可检测出血吸虫感染兔血清中的靶抗原。ＣＡ－７的靶抗原存在于虫卵、尾蚴中；ＣＡ－８的靶抗原存在于虫卵、尾蚴和成虫中。用亲和导析的方法分离纯化了这两株单抗的靶抗原，实验结果表明ＣＡ－７和ＣＡ－８的靶抗原是中性糖含量分别为２３．３％和１４．７％，Ｍｒ为２２０×１０＾３和２００×１０＾３的糖蛋白，这两种抗原     

日本血吸虫循环免疫复合物中抗原的鉴定

用低浓度ＰＥＧ（ＭＷ６０００）提取的日本血吸虫感染兔血清中循环免疫复合物（ＣＩＣ）直接免疫家兔，制备ＣＩＣ兔血清。采用酶联免疫印迹技术（ＥＩＴＢ）分析鉴定日本血吸虫ＣＩＣ中抗原成份。结果表明，ＣＩＣ中成虫及其排泄分泌物源性抗原成份有１７种，虫卵源性抗原成份有５种。且ＩＦＡＴ方法分析ＣＩＣ中抗原成份定位于成虫表膜及肠腔上皮。     

日本血吸虫循环免疫复合物中抗原的鉴定

用低浓度ＰＥＧ（ＭＷ６０００）提取的日本血吸虫感染兔血清中循环免疫复合物（ＣＩＣ）直接免疫家兔，制备抗ＣＩＣ兔血清。采用酶联免疫印迹技术（ＥＩＴＢ）分析鉴定日本血吸虫ＣＩＣ中抗原成份。结果表明，ＣＩＣ中成虫及其排泄分泌物源性抗原成份有１７种，虫卵源性抗原成份有５种。用ＩＦＡＴ方法分析ＣＩＣ中抗原成份定位于成虫表膜及肠腔上皮。     

乳猪心钠素单克隆抗体的研究

以乳猪ＡＮＰ作为免疫原，通过杂交瘤技术建立了３株稳定分泌特异ＡＮＰ单克隆抗体的细胞株，对其所分泌单抗的生物学特性进行了鉴定，单抗滴度为（１～６）×１０－７，两种为ＩｇＧ１型，一种为ＩｇＧ２ａ型，所分泌的单抗能识别不同的抗原表位。     

重组汉坦病毒核壳蛋白的制备及其单克隆抗体的研制

将ＰＣＲ扩增的ＨＴＶ７６－１１８ＲＮＡ小片段的ｃＤＮＡ克隆插入到ｐＤＳ ５６／ＲＢＳⅡ－（Ｏ）－６Ｈｉｓ中,通过ＩＰＴＧ诱导表达以及镍螯合层析纯化重组ＮＰ,经过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ,免疫转印和ＥＬＩＳＡ方法分析其蛋白特征,证实该重组ＮＰ与毒粒ＮＰ相同,均为４９．６ｋｕ,能与肾综合征血热（ＨＦＲＳ）患者血清产生特异性反应,以此重组ＮＰ作为抗原制备抗ＮＰ单克隆抗体,获得两株持续稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细     

乳腺派杰氏病的组化及免疫组化研究

应用免疫组化方法研究１５例乳腺派杰氏病，用单克隆抗角蛋白及上皮膜抗原抗体进行检测，结果示所有病例派杰氏细胞均表达角蛋白，上皮膜抗原。其表型与乳内的管内癌或浸润性导管癌一致。观察结果表明，派杰氏细胞来源于其下的乳癌，但不能排除某些病例可能原发于表皮。     

HLA－DR抗原在大肠良、恶性病变中的表达

应用免疫组化ＳＰ法现在ＨＬＡ－ＤＲ抗原在５４例大肠良、恶性病变中的表达情况。结果显示正常大肠粘膜上皮、增生性息肉及息肉状腺瘤上皮均无ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达，而腺癌中出现ＨＬＡ－ＤＲ的异常表达（阳性率为５０％），且表达率与淋巴结转移有关（Ｐ＜０．０１），与癌组织分化程度无关（Ｐ＞０．０１）．结果说明ＨＬＡ－ＤＲ抗原的异常表达可作为反映大肠粘膜上皮恶变的一项指标，对评估大肠癌的预后也有一定的参考价值。     

风心病房颤患者围术期血浆心钠素变化的研究

为了解风心病房颤患者手术前后静脉、动脉、左心房和右心房血浆心钠素的变化及相关因素。方法：采放射免疫法测定３０例风心病合并房颤患者及３０例风心病无房颤患者的血浆心钠素，并同时应用Ｓｗａｎ－Ｇａｎｚ导管及左心房测压管测定心功能及各部位压力。结论心房颤动是刺激ＰＡＮＰ分泌的重要因素，ｐＡＮＰ测定是判断心功能的重要指标之一。     

华支睾吸虫颗粒蛋白在虫体及宿主中的表达

目的探讨华支睾吸虫颗粒蛋白(CsGRN)在虫体和宿主中的表达。方法使用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测华支睾吸虫成虫、囊蚴和虫卵及猫的肝脏、胆管组织和全血CsGRN基因mRNA表达水平;免疫组化检测CsGRN在成虫及宿主猫、人和实验感染的Balb/c小鼠肝脏中的定位。结果 CsGRN基因mRNA在虫体的各阶段都有表达,在感染的猫肝和胆管组织中高表达;CsGRN主要定位在成虫的睾丸、外膜和虫卵,在宿主人、猫和小鼠中主要分布在胆管上皮和肝细胞。结论 CsGRN可能参与虫体的生长发育,它作为分泌排泄抗原之一可能损害肝胆管组织,有进一步研究价值。     

去上皮细胞对离体气管平滑肌反应性的作用

在离体实验中，观察了用机械和抗原抗体反应的方法去除卵蛋白致敏豚鼠气管上皮细胞标本，对收缩物质、抗原攻击和电场刺激的反应性。结果：去上皮标本对多种收缩物质的敏感性较未去上皮组明显升高，ＥＣ５０减少６～３０倍，去上皮标本对电场刺激和抗原攻击所引起的收缩反应幅度较对照组增大１．５～２．０倍。提示，气管上皮细胞对气管平滑肌功能，尤其是对其过敏性支气管平滑肌收缩具有重要调解作用。     

扬子鳄胃生长抑素免疫反应纤维和细胞的分布

用免疫组织化学ＡＢＣ法，对扬子鳄胃壁内生长抑素免疫反应（ＳＳ－ＩＲ）纤维和细胞进行了定性和定位分析，结果显示：ＳＳ－ＩＲ纤维大体呈两种类型：即少量的细长神经纤维和较多的膨体状神经纤维，主要分布在固有层，肌层及小血管周围，在腺上皮和肌层中可见单个散在分布的ＳＳ－ＩＲ阳性细胞，胞体大小不等，形态不一，提示：作为低等脊椎动物两栖爬行类－扬子鳄，其内脏中也存在有与高等脊椎动物内脏相同的特异性抗原。