中国肺炎克雷伯菌碳青霉烯类抗生素耐药现状和流行病学分析

目的研究中国肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性及碳青霉烯酶在肺炎克雷伯菌中的分布。方法采用琼脂稀释法进行药敏实验;用PCR扩增和测序检测携带碳青霉烯酶基因的菌株;通过改良霍奇试验(MHT)和亚胺培南/EDTA双纸片协同试验(DDST)进行产碳青霉烯酶表型检测;利用PFGE及MLST对产酶菌株做流行病学分析。结果与结论产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的亚胺培南MIC处于较低水平;KPC-2和IMP-4为本研究发现的主要酶型;肺炎克雷伯菌IMP的遗传背景较为复杂。     

儿科产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌感染现状及耐药性分析

目的 探讨儿科产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌感染现状及耐药性.方法 对肺炎克雷伯菌感染的住院患儿进行调查,统计肺炎克雷伯菌感染情况,并对150株肺炎克雷伯菌行金属β-内酰胺酶表型筛选出产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌.结果 从标本中共分离到肺炎克雷伯菌150株,其中产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌64株,占42.6％.64株产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌中,痰标本占绝大部分.肺炎克雷伯菌对酶复合制剂和氨基糖苷类药物耐药较低.结论 呼吸系统感染患儿中肺炎克雷伯菌检出率高,治疗中应严格掌握抗菌药物应用指征,并动态监测其耐药性,防止肺炎克雷伯菌的暴发感染.     

下呼吸道标本肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的检测及耐药分析

目的探讨下呼吸道标本肺炎克雷伯菌产头抱菌素酶（Ampc酶）和超广谱6-内酰胺酶（ESBLs）的情况及耐药分析。方法采用纸片扩散确证法检测ESBLs,酶提取物三维试验方法检测AmpC酶。并检测肺炎克雷伯菌对15种抗生素的耐药率。结果120株肺炎克雷伯菌中检出产酶菌株69株。检出率57．5％,其中单产ESBLs38株,单产AmpC酶17株．同时产ESBLs和AmpC酶14株,检出率分别为31．7％、14．2％和11．7％。肺炎克雷伯菌产酶菌株对15种抗生素的耐药率均高于平均水平（除亚胺培南）。结论我院下呼吸道标本肺炎克雷伯菌对抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs,对产酶菌株临床经验用药首选碳青霉烯类抗生素。     

肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌产KPC酶的检测研究

目的了解肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌产KPC酶的情况和耐药关系。方法收集2007年3月至2008年10月临床分离的肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌681株,采用KB纸片法进行药敏试验,以亚胺培南,美罗培南,厄他培南为检测药物,筛选出碳青霉烯类耐药菌株,采用改良的Hodge试验、聚合酶链反应（PCR）扩增检测细菌产KPC酶及基因分型。结果在491大肠埃希菌株和190肺炎克雷伯菌株中,对碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌6株,肺炎克雷伯杆菌6株。进行Hodge试验,12株菌全部阴性,聚合酶链反应（PCR）扩增没出现目的基因片段。结论在12株对碳青霉烯类抗生素耐药的细菌中未发现产KPC酶的菌株。据国内的同类研究报道,目前我国主要以产KPC-2酶为主,而且产KPC酶存在地域性差异,课题研究显示本区域暂时没发现产KPC酶的菌株,有待进一步监测研究。     

替加环素和多黏菌素对产KPC酶肺炎克雷伯菌的抗菌效应研究

目的 评价替加环素、多黏菌素对产KPC酶肺炎克雷伯菌的体外抗菌效应研究,指导临床正确选择并合理使用抗菌药物。方法 收集2012—2016年期间分离自温州医科大学附属第三医院临床样本中对碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌109株,采用Vitek-2 compact和Vitek MS进行菌种鉴定及药敏试验;采用聚合酶链反应(PCR)法检测菌株的KPC酶耐药基因并采用琼脂稀释法药敏试验分别检测替加环素、多黏菌素等药物的单药最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)值。结果 所分离的109株均为产KPC-2肺炎克雷伯菌,经过Vitek-2 compact和KB法试验可知109株肺炎克雷伯菌对阿米卡星的耐药率为82.57%,对亚胺培南、美罗培南等其他药物的耐药率均为100%。琼脂稀释法药敏结果显示109株肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南耐药率均为100%;对阿米卡星耐药率为89%;对替加环素的敏感率为65.1%,29.4%中介;对多黏菌素的敏感率为100%。结论 产KPC-2型肺炎克雷伯菌对多黏菌素和替加环素较为敏感,可作为临床用药参考。     

产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的耐药机制及治疗进展

<正>产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(KPC)的增多已成为国内外医院抗感染治疗的主要问题。KPC对大多数临床使用的抗生素产生耐药性,包括现有的β内酰胺酶类、氟喹诺酮类、氨基糖苷类等。KPC感染治疗的研究很少,主要局限于案例和病例报告。1 KPC酶流行情况及分类特点目前产KPC酶的细菌已经在全球范围内广泛播散,自2001年在美国北卡罗来纳州肺炎克雷伯菌中发现由质粒介导的碳青霉烯类酶KPC-1[1]到2004年纽约州质粒介导的     

关于肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶特性及耐药趋势分析

目的:分析肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶特性与耐药趋势。方法:选取2016年1月~2016年4月期间,某院分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌183株,分别采用VITEK-2Compact全自动细菌分析仪与K-B纸片法,对菌株对于药物的敏感性进行检测,通过改良Hodge试验,检测其是否产生碳青霉烯酶,采用EDTA抑制试验方法,检测其是否产出金属酶。结果:临床分离出的肺炎克雷伯菌中CRKP的比例为2015年0.2%,2016年3.7%,耐药性呈显著上升趋势(P0.05),且药敏结果显示,肺炎克雷伯菌除了对碳青霉烯类药物有较高的耐药性之外,对氨曲南、头孢曲松以及环丙沙星等抗菌类药物均有多重耐药性;改良Hodge试验结果显示,183株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌中有180株呈阳性。结论:2015年~2016年间,分离的CRKP比例呈逐年上升趋势,且对多种抗菌药物均有耐药性,而产出的KPC-2型碳青霉烯酶,是导致分离菌株对碳青霉烯类抗菌药物耐药性的主要原因。     

我院临床标本中肺炎克雷伯菌分布及耐药性分析

目的了解近2年来肺炎克雷伯菌标本的来源构成及耐药情况,以指导临床合理用药。方法对2008年1月至2009年12月间的各类临床标本进行分离培养,用天地人微生物分析系统生化试验卡鉴定,并用天地人微生物分析系统相配套的药敏试验卡进行药敏试验。结果共分离肺炎克雷伯菌213株;主要来源于痰标本（54.46%）;连续2年对美洛培南无耐药株,耐药率低的其次是阿米卡星（8.45%）、哌拉西林/他唑巴坦（12.21%）;对氨苄西林耐药率为100%。肺炎克雷伯菌ESBLs阳性率为22.54%,产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药率远远高于非产ESBLs的菌株。结论美洛培南是治疗产ES-BLs肺炎克雷伯菌的首选药物。应采取相应的措施控制肺炎克雷伯菌导致的医院感染流行及产ESBLs菌株的产生。     

基因芯片技术检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌中ESBLs和AmpC酶基因

目的检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌产生的ESBLs和AmpC酶的基因。方法在对ESBLs和AmpC酶表型检测的基础上,利用基因芯片和PCR技术研究大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌产生ESBLs和AmpC酶的基因,并对部分ESBLs和AmpC酶的基因扩增产物进行序列分析。结果大肠埃希菌和产酸克雷伯菌以单产ESBLs为主,肺炎克雷伯菌则以同时产生ESBLs和AmpC酶为主。大肠埃希菌产生的ESBLs(除TEM型外)主要是CTX-M-9组型,占63.5%。肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌产生的ESBLs分别以SHV型和CTX-M-3组型为主,分别占70.4%和89.8%。肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌的AmpC酶均为DHA-1型酶的基因,大肠埃希菌的AmpC酶主要编码CMY-2型AmpC酶。结论基因芯片技术可同时检测多种耐药基因,是ESBLs和AmpC酶基因检测的新途径。     

痰热清注射液对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的体外联合杀菌活性研究

目的研究痰热清注射液联合亚胺培南对产KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的体外联合杀菌活性,探索临床治疗该耐药细菌所致感染的新方案。方法微量肉汤稀释法测定痰热清注射液和亚胺培南对20株产KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的最低抑菌浓度,棋盘稀释法测定其对痰热清注射液与亚胺培南的体外联合敏感试验,通过计算分级抑菌浓度指数,判断联合效果。根据联合药敏试验结果,选取其中的2株细菌进行体外联合杀菌试验研究。结果 20株产KPC-2型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌对亚胺培南的耐药率为100%,其MIC范围为4~256 mg/L,对痰热清注射液的MIC值为15.6~500μl/ml。联合药敏试验结果显示,55%(11/20)的菌株对该两药组合呈协同作用,35%(7/20)的菌株呈相加作用,10%(2/20)的菌株为无关作用,所有菌株联合皆未产生拮抗作用。随后的联合杀菌试验亦证实上述联合药敏试验结果。结论痰热清注射液联合亚胺培南可用于治疗产KPC-2型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌所致感染。     

质粒介导的KPC-2型碳青霉烯酶水平传播机制的探讨

目的了解河南省人民医院耐美罗培南肺炎克雷伯菌和日勾维肠杆菌是否携带KPC型碳青霉烯酶基因,探讨blaKPC基因的水平传播机制。方法采用琼脂稀释法进行药物敏感性试验,PCR检测KPC编码基因,质粒电转化试验分析blaKPC基因能否水平传播,质粒酶切电泳图谱判断质粒的相似性。结果两株耐美罗培南肺炎克雷伯菌和日勾维肠杆菌均检测出KPC型碳青霉烯酶基因,测序比对结果显示为KPC-2型碳青霉烯酶,其编码基因blaKPC-2位于质粒上,并且可以在细菌之间进行水平传播。结论质粒介导的KPC-2型碳青霉烯酶是我院肠杆菌科细菌耐药性水平传播的机制之一。     

ESBL的检测、分型及产ESBL菌药敏分析

彩和双纸片试验,等电聚焦电泳及微量稀释法对临床标本中分离出的肺炎克雷伯氏菌,大肠埃杀氏菌中的产ＥＳＢＬ。菌的流行及产ＥＳＢＬ菌对１２种抗菌药物敏感情况进行。１９９８年３月－１９９８年１０月共分离出肺炎克雷伯氏菌２１６株,大肠埃工菌３１８株,从中筛选出产ＥＳＢＬ菌７７株,其中肺炎克雷伯氏菌５９株（２７．３％）,大肠埃希氏菌１８析。产ＥＳＢＬ菌所产β－内酰胺酶以ＰＩ７．６的酶为主,其次是ＰＩ８．２的酶     

改良碳青霉烯灭活试验在检测肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶中的应用评价

目的评估改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)和EDTA改良碳青霉烯灭活试验(eCIM)在中国产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(CPKP)中的应用价值。方法分别用mCIM和eCIM筛查中国271株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)中产酶阳性菌株,并以碳青霉烯酶基因聚合酶链反应(PCR)及测序结果为标准计算灵敏度和特异度。结果 271株非重复CRKP菌株中碳青霉烯酶基因阳性菌有209株,未检测出耐药基因的菌株有62株。mCIM检测到209株基因阳性菌株中208株为阳性菌株,62株基因阴性菌均为阴性; eCIM检测出的阳性菌株有58株,阴性菌株有150株。mCIM检测敏感度为99. 5%,特异度为100. 0%; eCIM检测敏感度为100. 0%,特异度为99. 3%。其中有1株产IMP-4型碳青霉烯酶菌株的mCIM结果为阴性,1株产KPC-2型碳青霉烯酶菌株的mCIM和eCIM都为阳性。结论 mCIM和eCIM在肺炎克雷伯菌中检测碳青霉烯酶有很好的敏感度和特异度,值得推广使用。     

产AmpC酶的克雷伯菌药敏结果分析及质粒介导的AmpC和ESBLs耐药基因检测

目的 了解克雷伯菌的耐药性及产AmpC菌株同时产ESBLs药敏的变化。方法 采用Vitek60型和Vitek32型、纸片扩散法（KB法）测定42株产AmpC酶同时产ESBLs克雷伯菌的药敏结果，并与24株产AmpC酶但不产ESBLs克雷伯菌和138株不产AmpC酶但产ESBLs的克雷伯菌药敏结果对比分析；采用PCR分析产AmpC酶但不产ESBLs肺炎克雷伯菌的AmpC基因型。结果 产AmpC不管是否产ESBLs的克雷伯菌对亚胺培南敏感，对其他抗生素均有不同程度的耐药；单纯产ESBLs时，第四代头孢菌素如头孢吡肟对其活性较好，但产AmpC酶同时产ESBLs时，令头孢吡肟几乎失去活性。肺炎克雷伯菌产AmpC酶但不产ESBLs的20株菌中7株检出blaDan基因，占35％，1株检出blaMIR基因，占5％。另外同时产AmpC酶和ESBLs的20株肺炎克雷伯菌中100％检出blaTEM基因，90％检出blacTX-M-1。基因，100%检出blaSHV基因，85％检出blaDHA基因，15％检出blaMIR基因，90％检出不同的氨基糖苷类修饰酶基因。结论 克雷伯菌产AmpC酶和同时产ESBLs的耐药性比单纯产AmpC酶的耐药性更高、更显著；肺炎克雷伯菌产AmpC酶的主要基因型为DHA，对同时存在2～6种不同类型耐药基因的克雷伯菌，碳青霉烯类药物亚胺培南的体外活性最好。     

碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌IMP型金属β-内酞胺酶研究

目的:探讨肺炎克雷伯菌产金属酶的临床分离情况并对产金属酶菌株进行耐药性分析,为临床合理选用抗菌药物提供依据.方法:收集2009年1月-2009年10月天津医科大学总医院142株临床分离肺炎克雷伯菌,通过改良Hodge试验、改良三维试验检测其碳青霉烯酶,乙二胺四乙酸(EDTA)协同试验检测金属酶,PCR法扩增金属酶基因,用纸片法和VITEK2-Compact全自动微生物分析仪进行药物敏感性试验.结果:142株肺炎克雷伯菌中,通过改良Hodge试验、改良三维试验检测出2株产碳青霉烯酶菌株,这2株菌通过EDTA协同试验检测为阳性,提示这2株菌产金属酶经PCR证实为产IMP型金属酶,MIC方法显示2株产金属酶的菌株对氨曲南敏感,而对青霉素类、头孢菌素类耐药,k-B法检测显示碳青霉烯类抗菌药物耐药.结论:天津地区已出现产金属酶肺炎克雷伯菌,该酶是引起肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类抗生素的主要原因.     

耐亚胺培南的肺炎克雷伯菌中碳青霉烯酶的表达情况

目的 检测临床分离的耐亚胺培南肺炎克雷伯菌临床分布、耐药情况及碳青霉烯酶的表达情况,为临床合理使用抗生素提供依据。方法 收集徐州3家三级医院微生物室培养出的非重复肺炎克雷伯菌,并根据药敏结果筛选对亚胺培南耐药的菌株,对耐药菌株采用改良Hodge实验检测碳青霉烯酶、IPM/EDTA组合纸片法检测金属酶表现型,采用PCR实验检测耐药菌株中blaKPC-2,blaCTX-M-15,blaVIM-1,blaIMP-4,blaNDM-1和blaOXA-48的表达情况。结果 共收集107株非重复肺炎克雷伯菌,其中26株耐亚胺培南,耐亚胺培南菌株均为多重耐药菌株,对常见抗菌药物均为耐药;表现型结果26株耐亚胺培南菌株有23株改良Hodge实验阳性,阳性率为88.5%;6株组合纸片法阳性,阳性率为23.1%;PCR扩增具有碳青霉烯酶活性的相关基因：26株均检测到KPC-2酶基因,25株检测到CTX-M-15酶基因,8株检测到IMP-4酶基因,1株检测到NDM-1酶基因,1株检测到VIM-1酶基因,暂未扩增出OXA-48酶基因。结论 本地区肺炎克雷伯菌耐亚胺培南形势严峻,产生β-内酰胺酶为其主要的耐药机制,KPC-2、CTX-M-15产生率较高,占主导地位,已经存在产NDM-1菌株,相关部门应注意预防其流行和传播。     

碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌IMP型金属β-内酰胺酶研究

目的:探讨肺炎克雷伯菌产金属酶的临床分离情况并对产金属酶菌株进行耐药性分析,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法:收集2009年1月—2009年10月天津医科大学总医院142株临床分离肺炎克雷伯菌,通过改良Hodge试验、改良三维试验检测其碳青霉烯酶,乙二胺四乙酸(EDTA)协同试验检测金属酶,PCR法扩增金属酶基因,用纸片法和VITEK2-Compact全自动微生物分析仪进行药物敏感性试验。结果:142株肺炎克雷伯菌中,通过改良Hodge试验、改良三维试验检测出2株产碳青霉烯酶菌株,这2株菌通过EDTA协同试验检测为阳性,提示这2株菌产金属酶经PCR证实为产IMP型金属酶,MIC方法显示2株产金属酶的菌株对氨曲南敏感,而对青霉素类、头孢菌素类耐药,κ-B法检测显示碳青霉烯类抗菌药物耐药。结论:天津地区已出现产金属酶肺炎克雷伯菌,该酶是引起肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类抗生素的主要原因。     

探析ICU病房产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌的临床监测及耐药性研究

目的探析ICU病房产超广谱β超内酰胺酶肺炎克雷伯菌的临床监测及耐药性研究,为合理用药提供判定依据。方法对我院2012年10月至2014年10月ICU病房产科患者的尿标本和痰标本进行检测,将检测出的283株肺炎克雷伯菌进行分离(阳性菌株104株,阴性菌株179株),对其中82株产超广谱β产内酰胺酶肺炎克雷伯菌进行观察,分析总结耐药性情况。结果经观察发现,82株产超广谱β产内酰胺酶肺炎克雷伯菌中,呈阳性35株,阳性检测率为33.65%;呈阴性47例,阴性率为26.26%。ESBLs相对非ESBLs对多数常规抗菌药有明显的耐药性。结论产超广谱β超内酰胺酶肺炎克雷伯菌较非产超广谱β产内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药率明显要高,所以在检测时要准确判断菌株种类及性质,选择耐药性较低的药物。     

老年病医院产AmpC酶及ESBLs酶肺炎克雷伯菌检测结果分析

目的对老年病医院产AmpC酶及ESBLs酶肺炎克雷伯菌检测结果进行分析指导临床合理用药。方法采用NCCLS推荐的纸片扩散法(K-B),根据NCCLS2002年颁布的判断标准分析结果。结果251株肺炎克雷伯菌,检出产ESBLs和高产AmpC酶154株,检出率61.4%,其中单产ESBLs143株,单产AmpC酶8株,同时产AmpC酶和ESBLs3株。单产AmpC酶的肺炎克雷伯菌对头孢菌素,酶抑制剂的抗菌药物都耐药,对碳青霉希类、头孢吡肟敏感。结论产酶株对多种抗菌药物耐药,对碳青霉希类敏感性最好。     

产 ESBLs 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析及分布

目的：了解医院临床分离的产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的临床分布特点及耐药状况,为临床合理用药提供参考依据。方法收集2014年医院临床分离的925株大肠埃希菌和363株肺炎克雷伯菌。使用法国生物－梅里埃 ATB 细菌鉴定系统,应用药敏测试仪及配套微生物检测试剂进行细菌鉴定和药敏试验。结果925株大肠埃希菌中分离出产 ESBLs 菌657株（占71．0％）;363株肺炎克雷伯菌中分离出产 ESBLs 菌150株（占41．32％）。产 ESBLs 大肠埃希菌来自尿标本266株（占40．49％）,产 ESBLs 肺炎克雷伯菌来自痰标本89株（占59．33％）。产 ESBLs 株的耐药率均普遍高于 ESBLs 阴性株;与产 ESBLs 肺炎克雷伯菌相比,产 ESBLs 大肠埃希菌对氟喹诺酮类抗生素耐药率较高;且二者对青霉素类、一到三代头孢菌素类抗生素耐药率均较高,而对厄它培南、亚胺培南、美罗培南等药高度敏感。结论某院产 ESBLs 大肠埃希菌主要引起泌尿道感染,产 ESBLs 肺炎克雷伯菌主要引起呼吸道感染。临床应高度重视产 ESBLs 菌的检测和药敏试验,根据药敏结果合理选择抗生素,减缓细菌耐药的发生,尤其要控制 ESBLs 菌的产生和爆发流行。