冬凌草甲素通过线粒体途径诱导人胆囊癌GBC-SD细胞凋亡

目的 研究冬凌草甲素诱导人胆囊癌GBC-SD细胞的凋亡作用及其机制.方法 MTS法检测冬凌草甲素对GBC-SD细胞的生长抑制作用;瑞氏染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率、线粒体膜电位改变、caspase-3活性变化;Western blot检测caspase-9活化情况.结果 冬凌草甲素能显著抑制GBC-SD细胞增殖,呈时间剂量依赖性(P＜0.05).细胞形态学观察可见冬凌草甲素可诱导细胞发生凋亡.流式细胞仪检测结果显示28 μmol/L药物处理GBC-SD细胞24h后,细胞凋亡率为51.28％±2.65％.随着药物浓度增加,GBC-SD细胞线粒体膜电位逐渐下降而caspase-3活性逐渐增强,56μmol/L组caspase-3活性是对照组的11倍.Western blot分析结果显示caspase-9酶原被激活,且活化条带随药物浓度的增加而增强.结论 冬凌草甲素可能通过细胞线粒体膜电位下降激活caspase-3并最终诱导GBC-SD细胞凋亡.     

石花菜提取物对宫颈癌细胞凋亡及Caspase-3活性的影响

目的 探讨石花菜提取物对宫颈癌HeLa细胞凋亡及Caspase-3活性的影响.方法 不同浓度石花菜乙酸乙酯提取物与HeLa细胞孵育后,MTT法检测细胞活性,Hoechst检测细胞凋亡,以及比色法检测细胞内Caspase-3活性.结果 石花菜提取物以时间及剂量依赖性的方式抑制HeLa细胞的生长增殖,降低细胞活性.Hoechst33258染色可见石花菜提取物作用后细胞核出现固缩、边集等凋亡现象.经石花菜提取物孵育,细胞内Caspase-3活性也比对照组显著升高(P<0.05).结论 石花菜乙酸乙酯提取物可抑制宫颈癌HeLa细胞生长增殖,其机制可能是增强Caspase-3活性启动细胞凋亡,从而发挥其抗瘤作用.     

蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的研究蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法MTT法检测蛴螬石油醚提取物对体外培养的HeLa细胞株增殖抑制作用及细胞毒活性;末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸缺口末端标记(TdT-mediateddUTPnickendlabeling,TUNEL)法检测细胞凋亡;通过免疫细胞化学S-P法测定凋亡相关基因产物Bcl-2、Bax蛋白与凋亡相关蛋白caspase-8和caspase-3的表达情况。结果蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞的增殖抑制作用呈剂量依赖性和时间依赖性(P<0.01)。蛴螬石油醚提取物作用细胞后凋亡细胞数目随时间延长而增多;凋亡指数与药物处理呈时间依赖性和剂量依赖性。蛴螬石油醚提取物作用后Bcl-2蛋白表达均下降,Bax、caspase-8和caspase-3表达上升,4种蛋白表达各组间比较均差异显著(P<0.01)。结论蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞具有抑制增殖及诱导凋亡作用。蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞抑制增殖作用(50μg/mL作用48h之前)主要以诱导凋亡为主。蛴螬石油醚提取物诱导凋亡作用可能与下调Bcl-2表达,上调Bax、caspase-8和caspase-3表达有关。     

白藜芦醇抑制HeLa细胞增殖及其作用机制

目的研究白藜芦醇(Res)对宫颈癌HeLa细胞体外生长抑制作用及其机制。方法以17.5、35.0、70.0、140.0μmol/L Res分别处理HeLa细胞24、48与72 h,采用MTT法检测HeLa细胞存活率;应用70μmol/L的Res处理HeLa细胞24 h,采用Western Blot检测HeLa细胞中磷酸化真核细胞翻译起始因子4E(p-eIF4E)、磷酸化4E结合蛋白1(p-4E-BP1)和半胱氨酸蛋白酶蛋白3(caspase-3)的表达。结果不同浓度的Res作用不同时间后HeLa细胞增殖受到明显抑制,且呈时间和剂量依赖性,在相同时间内,随着Res浓度的增加,HeLa细胞的增殖抑制率明显升高(F=93.76~637.22,P<0.01);在同一浓度时,随着Res作用时间的延长,HeLa细胞的增殖抑制率也明显升高(F=8.79~29.99,P<0.01)。70μmol/L的Res作用HeLa细胞24 h后,HeLa细胞中p-eIF4E、p-4E-BP1蛋白表达较对照组减少(t=14.93、4.78,P<0.01),caspase-3蛋白表达较对照组增加(t=10.68,P<0.01)。结论 Res对宫颈癌HeLa细胞体外生长有明显抑制作用,其机制可能与抑制p-eIF4E、p-4E-BP1表达,并诱导caspase-3活化,从而增加HeLa细胞凋亡有关。     

As2O3诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡与细胞内端粒酶活性关系的研究

目的探讨As2O3对HeLa细胞的诱导凋亡作用及对HeLa细胞端粒酶活性的影响.方法采用不同浓度的As2O3作用于人宫颈癌HeLa细胞不同生长时间段(24、48、72 h)后,显微镜下观察细胞凋亡,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)测定细胞生长抑制情况,TRAP-ELISA方法测定细胞内端粒酶活性变化.结果2 μmol*L-1的As2O3处理HeLa细胞48 h后可降低细胞存活率,诱导细胞凋亡,细胞内端粒酶活性比对照组明显下降.随着As2O3 浓度增加、作用时间延长,作用效果越明显.结论As2O3诱导HeLa细胞凋亡可能与其抑制细胞内端粒酶活性有关.     

薤白总皂苷对人宫颈癌HeLa细胞增殖与凋亡作用的影响

目的观察薤白总皂苷对宫颈癌HeLa细胞增殖与凋亡作用的影响,并探讨其可能的作用机制。方法用不同浓度的薤白总皂苷(25、50、100、250、500、1000μg/ml)于不同作用时间(24、48、72 h)处理宫颈癌HeLa细胞后,采用MTT法检测不同浓度的薤白总皂苷在不同作用时间下对HeLa细胞增殖率的影响;用100和200μg/ml的薤白总皂苷处理宫颈癌HeLa细胞48 h后,Annexin V-FITC/PI染色测定细胞凋亡率,JC-1染色法测定细胞线粒体跨膜电位水平,Caspase试剂盒检测HeLa细胞中Caspase-9和Caspase-3的活性,荧光定量PCR测定Bcl-2和Bax mRNA表达,并计算Bcl-2与Bax的比值。结果薤白总皂苷对HeLa细胞的生长抑制作用呈明显的时间一剂量依赖性;薤白总皂苷(100和200μ/ml)处理能显著降低HeLa细胞线粒体膜电位,抑制HeILa细胞增殖,促进其凋亡(P<0.05,P<0.01);上调Bax mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA表达和Bcl-2与Bax的比值以及增强Caspase-9和Caspase-3的活性(P<0.05,P<0.01)。结论薤白总皂苷有显著的抑制HeLa细胞增殖和诱导凋亡作用,其作用机制可能与其降低HeLa细胞线粒体膜电位,上调Bax mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA表达和Bcl-2与Bax的比值以及增强Caspase-9和Caspase-3的活性有关。     

石花菜提取物诱导宫颈癌细胞凋亡的机制研究

研究石花菜提取物抑制宫颈癌HeLa细胞,并促进其凋亡的机制研究。方法：不同浓度石花菜乙酸乙酯提取物与HeLa细胞孵育后,MTT法检测细胞活性,Hoechst检测细胞凋亡,以及比色法检测细胞内Caspase-3活性。结果：石花菜提取物以时间及剂量依赖性的方式抑制HeLa细胞的生长增殖,降低细胞活性。Hoechst33258染色可见石花菜提取物作用后细胞核出现固缩、边集等凋亡现象。经石花菜提取物孵育,细胞内Caspase-3活性也比对照组显著升高（P<0.05）。结论：石花菜乙酸乙酯提取物可抑制宫颈癌HeLa细胞生长增殖,其机制可能是增强Caspase-3活性启动细胞凋亡,发挥其抗瘤作用。     

菠萝蛋白酶对宫颈癌细胞HeLa增殖及凋亡的影响

目的:探讨菠萝蛋白酶对人宫颈癌细胞HeLa增殖和凋亡的影响。方法:将人宫颈癌HeLa细胞用不同剂量的菠萝蛋白酶处理48h后,光学显微镜下观察其形态学变化;采用MTT法检测不同剂量菠萝蛋白酶作用不同时间(24h、48h、72h)后对HeLa细胞增殖的影响;然后采用FITC-annexin V/PI双染色法检测不同剂量处理组HeLa细胞的凋亡情况。结果:菠萝蛋白酶对HeLa细胞的生长抑制作用呈明显的时间、剂量依赖性;且随着剂量增加,能够诱导HeLa细胞发生凋亡,与对照组相比具有显著的统计学意义(P<0.05)。结论:菠萝蛋白酶能明显抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖,可能是通过诱导细胞凋亡的发生,从而发挥其抗肿瘤效应。     

冬凌草甲素诱导人脑胶质瘤U251细胞的凋亡及其机制

目的 研究冬凌草甲素对人脑胶质瘤U251细胞体外生长抑制及诱导凋亡的作用及其机制。方法 MTT法检测冬凌草甲素对U251细胞的生长抑制作用;倒置显微镜法和荧光显微镜Annexin V-FITC/PI双染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪Annexin V FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率;Realtime PCR法检测冬凌草甲素作用U251细胞后的bcl 2、bax及caspase-3基因表达水平的变化。结果 冬凌草甲素对U251细胞有明显的生长抑制作用（P<0.05）,呈明显的时间和浓度效应关系。冬凌草甲素作用U251细胞24h后出现明显的细胞凋亡形态学改变。随着冬凌草甲素作用浓度增加,凋亡和坏死细胞数均增加,浓度越高,诱导细胞凋亡的作用越明显（P均 <0.05）。随着冬凌草甲素作用时间延长,U251细胞的bax和caspase-3基因的表达逐渐增强,bcl-2基因的表达逐渐减弱（P均<0.05）。结论 冬凌草甲素能诱导人脑胶质瘤U251细胞凋亡,其凋亡机理可能与bax和caspase 3基因表达的上调,bcl-2基因表达的下调相关。     

越橘提取物抑制宫颈癌 HeLa 细胞增殖及诱导其凋亡的实验研究

目的 探讨越橘提取物抑制 HeLa 细胞增殖和诱导凋亡作用及其可能机制。方法 用浓度为 0、0.025、0.25、2.5、25 μg/mL 的越橘提取物处理 HeLa 细胞 24 h 后,采用四甲基偶氮唑盐 (MTT) 方法检测越橘提取物对 HeLa 细胞增殖的抑制作用,采用 Hoechst 33342/PI 染色和 DNA ladder 方法观察越橘提取物对 HeLa 细胞凋亡的诱导作用,并采用 Western blotting 法检测 caspase-3 和 caspase-8 蛋白表达。结果 0.025、0.25、2.5 和 25 μg/L 的越橘提取物对 HeLa 细胞增殖的抑制率分别为 22.81%、36.75%、42.62% 和 45.22%;0.25～25 μg/L 的越橘提取物处理组细胞呈现明显的凋亡改变;Western blotting 结果显示越橘提取物处理组细胞中 caspase-8 和 caspase-3 酶原蛋白激活,出现裂解片断。结论 越橘提取物可通过诱导 HeLa 细胞凋亡而抑制其增殖。     

Effects of Antisense Oligodeoxynucleotide to Follicle-stimulating Hormone Receptor on the Cell Proliferation and Apoptosis in Cells Derived from Human Ovarian Mucinous Cystadenocarcinoma in Vitro

The human ovarian mucinous cystadenocarcinoma (hOMC) cells were co-cultured with antisense oligodeoxynucleotide (antisense ODN), nonsense ODN, and follicle-stimulating hormone (FSH) at different concentrations for the purpose of observing the effects of antisense ODN to FSH receptor (FSHR) on the proliferation and apoptosis of cultured hOMC cells in vitro. The inhibitory rates of growth were measured by using MTT method on the 2nd, 4th, 6th, 8th and 10th days after the interference of antisense ODN, nonsense ODN, and FSH, respectively. The apoptotic rates and the cell cycles were determined by means of flow cytometry, the apoptosis indexes were detected by us-ing TUNEL, and the expression of caspase-3 was measured by using SP immunohistochemistry. Compared with that in the control group, the proliferative activity of hOMC cells was increased ob-viously in FSH groups (P<0.05 or P<0.01), decreased distinctly in antisense ODN groups (P<0.05 or P<0.01), and unchanged in nonsense ODN groups, respectively. Meanwhile, antisense ODN could significantly antagonize the FSH-promoted cell proliferative activity (P<0.01). Compared with those in the control group, the apoptotic rates and the expression of caspase-3 were dramatically increased in the mid- and high-dose antisense ODN groups (P<0.05 or P<0.01), while the number of cells in G1/G0 phase was significantly decreased and that in S phase distinctly increased (P<0.01). There was no change in nonsense ODN groups (P>0.05). It was suggested that FSH may improve the develop-ment of hOMC cells. However, antisense ODN could inhibit proliferative activity and the FSH-promoted proliferative activity in hOMC cells, at the same time, antisense ODN could inhibit hOMC cell growth by inducing apoptosis.     

Effect of Quercetin on Proliferation and Apoptosis of Human Nasopharyngeal Carcinoma HEN1 Cells

The effect of quercetin （Que） on proliferation and apoptosis of human nasopharyngeal carcinoma HEN1 cells was investigated. Inhibition rate of quercetin on HEN1 was assayed by MTT method, apoptosis by flow cytometry （FCM）, and the caspase-3 expression of each group by colorimetry set respectively. Quercetin inhibited HEN1 cells in in a dose-（r=0.709, P〈0.01） and time-dependent manner （r=0.703, P〈0.01）. The ratio of apoptotic and necrosis cells was increased in the cells treated with quercetin. Cell cycle was specificly arrested in G2/M phase. Apoptosis cusp was revealed by FCM. The activity of caspase-3 was significantly up-regulated in 5 groups treated with quecetin as compared with control group （P〈0.05）. It was concluded that the growth inhibition of quercetin was highly related to cell cycle arrest at the G2/M phase and induction of caspase-dependent apoptosis in human nasopharyngeal carcinoma HEN 1 cells.     

桦褐孔菌醇对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响

目的：研究桦褐孔菌醇（Inotodi01）体外诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用,并探讨其可能的作用机制。方法：以不同浓度的Inotodiol处理HeLa细胞24h、48h和72h,采用MTT法检测细胞增殖情况,透射电镜观察细胞超微结构变化,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫细胞化学法检测caspase-3蛋白的表达。结果：Inotodiol能抑制HeLa细胞的增殖,且呈时间-剂量依赖关系（P〈0．05,P〈0．01）;超微结构观察可见细胞体积缩小、核固缩、核内异染色质增多并边集、凋亡小体形成等典型的凋亡形态学改变;TUNEL法显示,经50μg/ml的lnotodiol处理48h,HeLa细胞发生凋亡;免疫细胞化学结果表明,与对照组相比,Inotodiol组HeLa细胞中caspase-3蛋白表达上调（P〈0．01）。结论：在一定浓度范围内,Inotodiol可在体外抑制HeLa细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与其上调easpase-3蛋白的表达有关。     

力达霉素抑制K562细胞增殖和诱导凋亡作用及其机制

目的: 研究力达霉素(LDM)对人慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,并探讨其机制。方法: 选取处于对数生长期的人CMLK562细胞,采用不同浓度(0.01、0.10和1.00nmol·L^-1)LDM处理48h,作为0.01、0.10和1.00nmol·L^-1LDM组,不加药物的正常细胞为对照组。台盼蓝染色观察各组K562细胞生长抑制率,MTT法检测细胞存活率,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双荧光染色法观察凋亡细胞的形态表现,AnnexinⅤ-FITC/PI双染结合流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞中caspase-3和caspase-8蛋白相对表达量。结果: 台盼蓝染色,LDM对K562细胞增殖有一定的抑制作用,各浓度LDM组细胞生长抑制率均高于对照组(P<0.05);MTT法检测,随LDM作用浓度的升高,细胞存活率下降,LDM对K562细胞作用的半数抑制浓度(IC₅₀)为(0.1±3.2)nmol·L^-1。AO/EB染色,荧光显微镜下观察到LDM能够引起细胞发生凋亡(胞质呈芽状突起,胞核碎裂成点状)。流式细胞术检测,各浓度LDM组K562细胞凋亡率均高于对照组(P<0.05)。Western blotting法检测,0.10和1.00nmol·L^-1LDM组K562细胞中caspase-8和caspase-3蛋白相对表达量明显高于对照组(P<0.01)。0.01nmol·L^-1LDM组K562细胞中caspase-8和caspase-3蛋白表达量与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。结论: LDM能够有效抑制K562细胞增殖,低浓度LDM可能通过上调细胞中caspase-8和caspase-3表达诱导K562细胞发生凋亡。     

双氢青蒿素对神经母细胞瘤细胞生长的抑制作用及其机制

目的: 探讨双氢青蒿素(DHA)对神经母细胞瘤细胞生长的抑制作用,阐明DHA抗神经母细胞瘤的作用机制。方法: 实验分为空白对照组和DHA组(DHA终浓度分别为0.05、0.50、5.00和50.00 μmol·L^-1)。采用MTT法检测DHA作用后SH-SY5Y细胞的增殖率,流式细胞术分析DHA作用后SH-SY5Y细胞周期的变化,ELISA和Western blotting法分析DHA作用后SH-SY5Y细胞中cyclin D1和caspase-3蛋白表达水平的变化。结果: 不同浓度DHA作用SH-SY5Y细胞24、48和72h时均可抑制细胞的生长,与空白对照组比较,0.50、5.00和50.00 μmol·L^-1 DHA组SH-SY5Y细胞增殖率明显下降(P<0.05或P<0.01);细胞生长的密度随药物浓度的升高而降低。与空白对照组比较,50.00 μmol·L^-1 DHA组SubG₁期细胞的百分比增加(P<0.05);G₀/G₁期细胞百分比先升高再降低,S期与G₂/M期细胞的百分比减少。与空白对照组比较,50.00 μmol·L^-1 DHA组SH-SY5Y细胞中cyclinD1蛋白表达水平降低(P<0.05);与空白对照组比较,50.00 μmol·L^-1DHA组caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论: DHA可能通过阻滞肿瘤细胞周期、促进肿瘤细胞凋亡而抑制神经母细胞瘤细胞的生长。     

表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂厄洛替尼联合山奈酚诱导卵巢癌细胞凋亡的协同机制

目的: 探讨厄洛替尼和山奈酚对表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR-TPK)的抑制作用,并阐明二者对卵巢癌细胞生长的协同抑制作用机制。 方法: 培养人卵巢癌SKOV-3细胞,将细胞分为空白组、山奈酚组和厄洛替尼组,将不同浓度山奈酚与厄洛替尼加入到EGFR-TPK和人卵巢癌SKOV-3细胞中, ELISA法检测EGFR-TPK的活性,采用Transwell小室法检测各组SKOV-3细胞侵袭转移能力,采用酶标仪检测各组SKOV-3细胞凋亡蛋白caspase-3活性,MTT法检测各组SKOV-3细胞的生长抑制率及山奈酚联合厄洛替尼对SKOV-3细胞的生长抑制作用。 结果: 山奈酚和厄洛替尼对EGFR-TPK的半数抑制浓度(IC₅₀)分别为(2.33±0.32)g·L^-1和(1.75±0.18)g·L^-1,二者比较差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组比较,山奈酚和厄洛替尼组穿膜细胞数减少(P<0.05或 P<0.01),SKOV-3细胞中凋亡蛋白 caspase-3活性明显增加(P<0.05或 P<0.01)。随着山奈酚和厄洛替尼浓度增加,SKOV-3细胞生长抑制率不断增加,与空白组比较差异均有统计学意义(P<0.05或 P<0.01)。 结论: 山奈酚联合厄洛替尼对人卵巢癌SKOV-3细胞具有协同抑制作用,并对SKOV-3细胞转移起到抑制作用。     

胃泌素／CCK－B受体环对多种肿瘤细胞生长和凋亡的影响

目的：探讨胃泌素／CCK－B受体环对肝癌、肺癌和乳腺癌细胞生长和凋亡的影响。方法用免疫细胞化学检测肺癌A549细胞、肝癌HepG2细胞及乳腺癌MCF－7细胞系中胃泌素和CCK－B受体的表达。再用CCK－B受体拮抗剂丙谷胺（5 mmol／L）处理细胞（实验组）,分别用MTT实验、流式细胞仪及分光光度法检测3种癌细胞的生长曲线、细胞凋亡及caspase－3的酶活性,对照组未用丙谷胺处理。结果肝癌HepG2细胞、肺癌A549细胞和乳腺癌MCF－7细胞中胃泌素和CCK－B受体的表达均为阳性;与对照组比较,实验组细胞的生长被显著抑制,caspase－3酶活性和凋亡细胞百分数显著升高,差异均有统计学意义（P＜0．05,P＜0．01）。结论胃泌素／CCK－B受体环参与肝癌、肺癌和乳腺癌细胞的生长和凋亡,阻断此环能抑制细胞的生长,促进细胞凋亡。     

顺铂对胶质瘤神经球的凋亡诱导作用及其机制

目的：研究顺铂对人脑胶质瘤SHG-44神经球的诱导凋亡作用,探讨其诱导凋亡的机制。方法：培养人脑胶质瘤SHG-44神经球,将其分为对照组和顺铂组,对照组细胞给予干细胞培养液,顺铂组细胞在对照组基础上给予10 mg•L^-1顺铂作用24、48和72 h后,MTT法检测SHG-44神经球生长抑制率;倒置显微镜观察2组细胞凋亡情况;ELISA法检测2组SHG-44神经球分泌Bax、Bcl-2和caspase-3蛋白水平。结果：与对照组比较,10 mg•L^-1 顺铂作用SHG-44神经球24、48和72 h时的细胞生长抑制率均明显升高（P<0.01）。倒置显微镜下,顺铂组神经球数量明显减少,并可见到明显的凋亡小体。与对照组比较,10 mg•L^-1 顺铂作用SHG-44神经球72 h,培养上清中Bax和Bcl-2分泌量均降低,caspase-3分泌量增加,Bax/Bcl-2比值明显升高（P<0.05或P<0.01）。结论：顺铂可以明显地抑制SHG-44神经球生长,其机制可能是通过上调Bax/Bcl-2比值,使促凋亡因素占优势,从而使神经球发生凋亡。     

薯蓣皂苷对人结肠癌细胞凋亡的作用及机制研究

目的:探究薯蓣皂苷（Dioscin）诱导人结肠癌HCT-116细胞、RKO细胞凋亡的作用及机制。方法:通过将体外培养的HCT-116细胞和RKO细胞分为对照组和不同浓度的药物组,采用CCK-8实验分析Dioscin对细胞增殖的抑制作用,可见分光光度法检测细胞LDH活性的变化;借助DNA含量检测法、Annexin V-FITC/PI双染法和流式细胞术检测细胞凋亡情况;DCFH-DA荧光探针法检测细胞活性氧簇（ROS）含量的变化;采用荧光探针法和可见分光光度法分别检测细胞超氧化物含量及细胞超氧化物歧化酶（SOD）活性的变化,Western 印迹法检测凋亡相关蛋白的表达情况。结果: 在24 h、48 h处理时间下,与对照组相比,HCT-116细胞Dioscin组（2、4、6、8、10 μmol/L）、RKO细胞Dioscin组（5、10、15、20、25 μmol/L）都明显抑制了结肠癌细胞的增殖活性（均P＜0.05）,且HCT-116、RKO细胞经Dioscin处理后,细胞膜破坏,细胞LDH释放量较对照组增多（P<0.05,P<0.01）;与对照组相比,Dioscin作用HCT-116、RKO细胞后,DNA含量暴露增多（P＜0.05,P＜0.001）,细胞凋亡率上调（P＜0.001,P＜0.01）,ROS水平升高（P<0.05,P<0.001）,超氧化物含量增多（均P<0.001）,SOD表达降低（P＜0.05,P＜0.001）;Western 印迹结果表明,与对照组相比,Dioscin可以抑制HCT-116、RKO细胞蛋白p-Akt（P<0.01,P<0.001）、Nrf2（均P<0.001）、Bcl-2（均P<0.001）的表达,促进蛋白cleaved Caspase-9（P<0.001,P<0.01）的表达。结论:薯蓣皂苷可能通过PI3K/Akt/Nrf2信号通路激活氧化应激反应,从而抑制结肠癌细胞生长,促进其凋亡。     

离辐射对小鼠EL-4淋巴瘤细胞caspase-3蛋白表达的影响

目的：观察电离辐射对caspase-3蛋白表达的影响。方法：采用体外传代培养的小鼠EL-4淋巴瘤细胞为实验材料；采用单克隆抗体免疫荧光标记，FACScan流式细胞仪(FCM)检测蛋白表达的变化；采用PI荧光标记及FCM测定细胞凋亡的变化；量效实验, 观察0.5、1.0、2.0、4.0及6.0 Gy X射线照射后24 h EL-4细胞caspase-3蛋白表达及细胞凋亡的变化；时效实验, 观察4.0 Gy照射后2、4、8、12、24、48及72 h EL-4细胞caspase-3蛋白表达的变化。结果：量效实验表明，0.5、2.0、4.0及6.0 Gy X射线照射后24 h EL-4细胞中caspase-3蛋白表达均明显增高，与假照射对照组比较，差异具有显著性 (P<0.05或P<0.01)。0.5、1.0及4.0 Gy 照射后24 h EL-4细胞凋亡明显增高，与假照射对照组比较，差异具有显著性 (P<0.05或P<0.01)。 时效实验表明，4.0 Gy照射后8、12及24 h EL-4细胞中caspase-3蛋白表达均明显增高, 与同时间点假照射对照组比较，差异具有显著性 (P<0.01或P<0.001)。结论：电离辐射可诱导EL-4细胞caspase-3蛋白表达增高。同时诱导EL-4细胞凋亡。