葛根异黄酮联合VitD3对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织构造的影响

目的观察葛根异黄酮(TIP)联合VitD_3对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织构造的影响,探讨其联合作用是否产生协同效应。方法将3月龄健康雌性SD大鼠随机分为OVX组和Sham组,运用去除大鼠双侧卵巢的方法构建绝经后骨质疏松动物模型,手术后3个月进行重新分组,分别为:Sham组、OVX组、OVX+TIP组、OVX+TIP+VitD_3组,每组6只,连续给药2个月。给药结束后采集动物血清以及胫骨、股骨组织标本,检测血清E_2,同时运用病理图像分析系统对骨组织构造进行观察和检测。结果 OVX大鼠血清E_2较Sham组显著降低,给药TIP后大鼠血清E_2回升,但OVX+TIP组、OVX+TIP+VitD_3组血清E_2差异不显著(P0.05)。OVX大鼠胫骨、股骨骨小梁体积百分率、骨小梁厚度较Sham组显著降低(P0.01),骨小梁间距较Sham组显著增大(P0.01)。OVX+TIP组胫骨、股骨骨小梁体积百分率、骨小梁厚度较OVX组显著升高(P0.05),骨小梁间距较OVX组显著减小(P0.05),但是OVX+TIP组胫骨、股骨形态计量学静态指标与Sham组差异显著(P0.05),OVX+TIP+Vit D3组胫骨、股骨形态计量学静态指标与Sham组无显著差异(P0.05)。结论葛根异黄酮与Vit D3联合给药对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织的修复作用优于葛根异黄酮单独给药。     

ACEI对去卵巢骨质疏松大鼠激肽释放酶-激肽系统及骨丢失的影响

目的探究血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibitor,ACEI)卡托普利对去卵巢(OVX)骨质疏松大鼠骨丢失及激肽释放酶-激肽(kallikrein-kinin system,KKS)系统的影响。方法去卵巢法制备绝经骨质疏松大鼠模型,分为OVX组、ACEI组[6 mg/(kg·d)卡托普利]、阳性对照雌激素组[0.05 mg/(kg·d)己烯雌酚],另不去卵巢为Sham组。给药8周后,全自动生化分析仪检测血清钙(Ca)、Ⅰ型前胶原N-端肽(PINP)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)及Ⅰ型胶原交联C端肽β序列(β-CTX)水平,微型计算机断层摄影术(micro CT)法检测骨密度及微结构,TRAP法观察骨组织破骨细胞数量,Western blot法检测骨组织中骨形态发生蛋白2(BMP2)、Runt相关转录因子2(Runx2)、组织激肽释放酶(KLK)、缓激肽受体1(B1R)及缓激肽(BK)蛋白表达。结果相较于Sham组,OVX组大鼠骨密度、骨小梁数量及厚度、骨体积分数、SMI、PINP、ALP、OCN水平、BMP2、Runx2蛋白表达均降低(P均0.05),骨小梁分离度、TRAP、β-CTX水平、破骨细胞数量、KLK、B1R及BK蛋白水平均增加(P均0.05)。相较于OVX组,ACEI组、阳性组大鼠骨密度、骨小梁数量及厚度、骨体积分数、SMI、PINP、ALP、OCN水平、BMP2、Runx2蛋白表达均增加,骨小梁分离度、TRAP、β-CTX水平、破骨细胞数量、KLK、B1R及BK蛋白水平降低(P0.05)。结论 ACEI可抑制KKS系统,降低破骨细胞活性减少骨吸收,增强成骨细胞活性增加骨形成,提高骨密度,改善骨微结构,进而改善OVX大鼠骨质疏松症状。     

青年去势及老龄雌性大鼠骨质疏松模型比较及其临床护理意义

目的 建立青年去势及老龄雌性大鼠骨质琉松模型,探讨两种雌性大鼠骨质疏松模型骨组织微观结构、骨矿及骨负荷改变情况及潜在机制,为女性骨质疏松的临床护理干预寻找相应的理论依据.方法 32只1月龄雌性SpragueDawley(SD)大鼠,同等条件下饲养,饲养至4个月按体重随机分成青年去势及假手术对照组大鼠16只、老龄雌性及对照组大鼠16只,进行去势及老龄骨质疏松造模.比较青年去势组(Ovariecromized rats,8只,OVX组)和老龄骨质疏松组(Senile Female Osteoporotic Rats,8只,SF组)大鼠骨质改变情况.结果 OVX组大鼠去卵巢8周出现骨质疏松改变,SF组大鼠22月龄自然衰老出现骨质疏松改变.OVX组骨小梁宽度显著大于SF组(P<0.05);两组模型之间腰椎及股骨密度差异不显著(均P>0.05),但OVX组股骨最大负荷显著高于SF组(P<0.01);OVX组骨钙水平显著高于SF组(P<0.01).但两组血钙水平差异不显著(P>0.05).结论 4月龄大鼠去卵巢8周以及自然饲养22月龄雌性大鼠可分别作为女性绝经后及老年女性骨质疏松的模型.老龄骨质疏松模型在骨微观结构、骨生物力学特性、骨矿水平含量方面的负性改变更甚于青年去势模型,提示对女性骨质疏松症患者的护理干预措施应侧重于不同年龄阶段及骨代谢特点进行.     

卵巢切除后大鼠骨小梁重建过程的电镜观察

目的：建立大鼠卵巢切除后骨质疏松模型，观察在卵巢切除诱发骨质疏松条件下骨小梁重建的电镜变化，分析骨小梁节点数减少而游离末端数增加的原因。方法：3月龄雌性Wistar大鼠36只，分4、8、12周组，每组分OVX(卵巢切除组)和SHAM(假手术组)两小组。用扫描电镜、透射电镜对胫骨近干骺端骨小梁的微结构进行观察。结果：①骨小梁骨重建活动分布于骨小梁微构筑各个部位，但以St、Nd-St区最显著；②OVX后骨小梁穿孔、断裂多见于水平骨小梁，骨小梁网状结构4周时完整，第8周和第12周后逐渐被破坏，12周最严重；OVX后骨小梁表面的胶原纤维逐渐变得杂乱、稀薄。结论：OVX后St、Nd-St区骨重建最活跃，这可能是骨质疏松时骨小梁节点数减少而游离末端数增加的原因。     

番茄红素联合跑台运动对去卵巢大鼠骨质疏松模型的影响

目的通过观察番茄红素和跑台运动对去卵巢大鼠骨代谢指标的影响,探究番茄红素联合运动对去势大鼠骨代谢的作用机制。方法 6月龄雌性Wistar大鼠,按体质量随机分为6组:假手术组(Sham组)、去卵巢组(OVX组)、去卵巢+运动组(OVX+E组)、去卵巢+番茄红素组(OVX+L组)、去卵巢+运动+番茄红素组(OVX+E+L组)、去卵巢+阿伦磷酸钠组(OVX+AL组)。在12周后取材进行相关指标测试。结果 (1)单纯性的跑台运动能降低去势大鼠脂肪量,提高骨小梁数目的同时提高骨形成标志物骨钙素(osteocalcin,OC)水平,促进骨形成。(2)单纯性的番茄红素疗法能提高去势大鼠的子宫重量、血清甲状腺激素水平,提高相对骨体积、骨小梁厚度和骨内膜骨形成率,增强骨密度的同时降低骨代谢标志物Ⅰ型胶原氨基末端交联肽(NTx)水平,抑制骨吸收。(3)运动和药物交互作用能降低去势大鼠的脂肪百分比,提高血清雌二醇水平,降低尿8-OHd G和尿脱氧吡啶酚(DPD)水平。改善去势大鼠骨小梁结构参数,提高骨外膜骨形成率、骨强度和抗性变能力,改善全身骨密度。结论 (1)适度的跑台运动可以防止去势大鼠骨丢失,改善去势大鼠骨健康。(2)12周的番茄红素对去势大鼠骨代谢的治疗作用与阿仑膦酸钠效果类似,提高骨强度,降低体内氧化还原反应、加强抗氧化系统功能,维持骨代谢平衡。(3)番茄红素和运动表现出良好的协同作用,对去势大鼠骨重建具有积极的作用。     

雌激素对去卵巢大鼠松质骨中骨保护素mRNA表达的影响

目的 :通过去卵巢大鼠予雌激素后 ,腰椎内OPGmRNA的表达进一步探讨雌激素防治骨质疏松的分子机制。方法 :雌性 3月龄SD大鼠 3 6只 ,随机均分为卵巢切除 +雌激素 (倍美力 )预防组 (EP) ,骨质疏松组 (卵巢切除OVX)及正常对照组 (SHAM ) 3组。术后 12周处死大鼠 ,取第 3腰椎椎体 ,异硫氰酸胍一步法提取总RNA ,嵌套式反转录聚合酶链反应 (NRT PCR)扩增待检测各组OPGmRNA的表达。同时取第 4腰椎椎体 ,行骨组织形态计量学检测。结果 12例腰椎骨组织中 ,EP组 10例OPGmRNA呈阳性表达 (阳性率 83 .3 % ) ,OVX组 2例呈阳性表达 (阳性率 16.7% ) ,而SHAM组 12例均呈阳性表达。统计学处理 :EP组与OVX组有高度显著性差异 (P <0 .0 1) ,EP组与SHAM组无显著性差异 (P >0 .0 5 )。骨组织形态计量学检测 ,OVX组骨体积、骨小梁数目均比SHAM组显著减少 ,而骨小梁间隔显著增大。与OVX组比较 ,EP组骨体积、骨小梁厚度增加 ,骨小梁间隔稍有减小 ,无统计学意义。EP对骨小梁数目无明显影响。结论 :雌激素通过增强松质骨中OPGmRNA的表达 ,抑制破骨细胞性骨吸收 ,从而对去卵巢大鼠的骨质疏松有明显的预防作用。     

雄激素防治去卵巢大鼠骨质疏松的实验研究

目的 运用骨生物力学、Micro CT分析及三维结构重建的方法,从"骨密度检测-形态性观察-功能学测试"角度出发,观察雄激素对去卵巢大鼠骨密度、骨微结构及骨力学性能的影响.方法 30只6月龄雌性SD大鼠随机分为去势组(OVX)、治疗组(T)和假手术组(Sham),每组10只.治疗组大鼠去势后用睾丸酮水溶液灌胃给药,3个月后取材.取大鼠L3椎体及右股骨行生物力学测试,取左股骨远端干骺部行Micro CT分析及三维结构重建.结果 T组大鼠腰椎和股骨远端骨密度值(BMD)升高,骨小梁体积(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)值升高,骨小梁间隙(Tb.Sp)值降低,而骨小梁数目(Tb.N)值无明显改变,腰椎各生物力学参数值升高,而股骨力学性能无明显提高,大鼠体重、子宫重量及股骨中点皮质骨厚度无明显的改变.结论 雄激素可部分改善OVX大鼠骨小梁微观结构,防止骨量丢失,提高松质骨的力学性能,而对皮质骨和子宫无明显影响.     

利塞膦酸钠联合脉冲电磁场治疗去势大鼠骨质疏松的 实验研究

目的观察利塞膦酸钠联合脉冲电磁场对去势大鼠骨质疏松的疗效。方法将32只雌性SD大鼠(250±20)g随机分成4组:正常生长组(Sham)、去卵巢模型组(OVX)、利塞膦酸钠治疗组(RIS)和利塞膦酸钠联合骨质疏松治疗仪治疗组(RIS+PEMFs),每组8只。后三组大鼠行双侧卵巢切除术。去势后12 w RIS组给予0.1 mg·kg-1·d-1利塞膦酸钠灌胃治疗,RIS+PEMFs组给予0.1 mg·kg-1·d-1利塞膦酸钠灌胃和1h·d-1脉冲电磁场治疗,Sham、OVX组每天给予等量生理盐水灌胃。去势后12 w、灌胃治疗4 w、8 w、12 w后四组大鼠均用双能X线吸收法骨密度仪测量全身骨密度(BMD),治疗12 w后进行血生化检测、骨CT值测量和骨组织形态学观察。结果去势后12w后三组BMD与Sham组比较均显著降低(P0.01),大鼠骨质疏松模型确立;灌胃治疗12 w后,RIS、RIS+PEMFs两组较OVX组BMD(P0.01)、骨CT值(P0.01)均较高,且RIS+PEMFs组BMD、骨CT值均比RIS组高(P0.01);RIS组血清Ca、ALP浓度均较RIS+PEMFs、Sham组高(P0.05),且RIS+PEMFs组血清ALP浓度较Sham组相比差异无统计学意义(P0.05);股骨颈病理形态学观察中RIS+PEMFs组的骨小梁形态较完整,较接近Sham组水平。结论去势后12 w可建立大鼠骨质疏松模型;利塞膦酸钠对去势所致骨质疏松大鼠有治疗作用,其与脉冲电磁场联合的治疗效果更为显著。     

血清中骨质疏松相关蛋白分子标志物的筛选研究

目的：通过蛋白芯片筛选血清中反映早期绝经后骨质疏松症发生、发展的标志性分子。方法3月龄雌性SD大鼠20只，随机分为卵巢切除（ovariectomized, OVX）组和假手术（sham operation, Sham）组，每组10只，分别进行卵巢去势手术和假手术处理。术后2、4、6、8周对两组大鼠进行活体显微CT扫描，测量股骨远端骨密度及相关松质骨形态计量学动态参数；同时经内眦静脉取血，利用蛋白芯片检测血清中不同蛋白因子的含量。结果显微CT检测结果显示OVX组大鼠骨密度（BMD）、相对骨体积（BV/TV）、骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁数目（Tb.N）从第4周开始下降，骨小梁分离度（Tb.Sp）开始上升， Sham组未见明显变化；到第8周各指标在OVX组与Sham组之间差异有统计学意义（P＜0.05）。蛋白芯片检测结果显示OVX组中干扰素?γ（IFN?γ）、β神经生长因子（b?NGF）分别从术后4周和6周后开始升高，同Sham组比较均至第8周具有明显差异（P＜0.05）。结论 IFN?γ和b?NGF水平在绝经后骨质疏松早期开始增高，可考虑作为诊断早期绝经后骨质疏松症发生的新型蛋白分子。     

冬凌草甲素对卵巢切除大鼠骨量丢失的作用及机制

目的探讨冬凌草甲素(ORI)对卵巢切除(OVX)大鼠骨质疏松模型骨组织病理学改变、骨微结构影响及其作用机制。方法选取由徐州医科大学动物实验室提供的8周龄雌性SD大鼠30只, 参照随机化数字表分假手术(Sham)组、卵巢切除+溶剂(Veh)(OVX+Veh)组、卵巢切除+冬凌草甲素(OVX+ORI)组。OVX+ORI组予0.1%冬凌草甲素2 mg/kg腹腔注射, OVX+Veh组予相同体积的灭菌注射用水, 均为每周2次, 持续12周。获取各组大鼠血浆、骨组织标本。骨组织染色切片观察病理改变。微型计算机断层扫描成像行骨微结构扫描和骨密度测定。聚合酶链反应法检测骨组织中骨保护素-核因子-κB受体活化因子-核因子-κB受体活化因子配体(OPG-RANKL-RANK)信号通路和Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-Catenin)信号通路相关蛋白信使RNA相对水平。蛋白质印迹法检测获得信号通路相关蛋白表达情况。酶联免疫吸附试验方法检测血浆中骨代谢指标。两组间均数比较采用独立样本t检验。结果与OVX+Veh组比较, OVX+ORI组骨小梁断裂明显减少, 完整性改善。RANKL表达量、骨硬化蛋白表达量、...     

跖骨感染骨外露的显微外科治疗

[目的]回顾总结跖骨骨感染骨外露的显微外科治疗方法。[方法]自1995年～2005年采用显微外科技术治疗214例跖骨骨外露骨感染患者。[结果]全部病例获得随访1～10年，平均随访3年，14例游离植皮术后皮肤成活良好，199例术后皮瓣全部成活，1例腓肠神经营养血管皮瓣移位修复术出现远端部分皮肤坏死，后经换药处理后，伤口自然愈合。皮瓣移植术后质地良好，无溃疡复发。患足均可负重走路。[结论]应用显微外科技术治疗跖骨骨感染骨外露可获得较好的疗效。     

重组合异种骨植骨修复骨囊肿所致骨缺损

2001年10月～2003年9月，笔者共收治28例骨囊肿患者，均采用病灶刮除，瘤腔灭活和重组合异种骨植骨治疗，获得满意疗效，体会如下。     

Genetic regulation of bone mass: from bone density to bone strength

Osteoporosis is a common disease characterized in adults by diminished bone density. Bone is an organ that evolves and grows throughout life, and establishing optimal bone density in childhood and adolescence serves to buffer bone loss later in life. Bone density, a measurable entity, is the clinical substitute for bone strength, or the ability to defend against fracture. Chronic diseases may adversely affect optimal peak bone density. Bone density is under genetic control, as revealed by three lines of investigations. These include (1) the finding of quantitative trait loci for bone density, (2) the finding that specific mutations in genes that are important in the development of osteoblast or osteoclast lineages alter bone density, and (3) the linkeage of known polymorphisms for genes involved in mineral homeostasis to bone density and/or fracture. Future therapeutics for improving peak bone density or delaying bone loss later in life may take advantage of the genetic nature of bone density development.This work was presented in part at the IPNA Seventh Symposium on Growth and Development in Children with Chronic Kidney Disease: The Molecular Basis of Skeletal Growth, 1–3 April 2004, Heidelberg, Germany     

从骨免疫学到骨微生物学：肠道微生物如何调节骨骼

肠道微生物群被称为人体的第二个基因库,在维持人体平衡中起主要作用。不良饮食习惯、抗生素滥用、病理状态和生活环境改变会对肠道菌群产生负面影响,以引起多种疾病。最新研究发现肠道微生物群与骨质疏松症之间有着密切的联系,同时引入了一个新术语"骨微生物学",该研究领域旨在弥合骨骼生理学、胃肠病学、免疫学和微生物学之间的差距。本文简要介绍了肠道菌群通过免疫系统、新陈代谢和内分泌环境以及其他因素影响骨代谢的潜在机制,通过研究肠道菌群与骨骼健康之间的关系,不仅对于维持骨骼健康和最大程度地减少骨质疏松症很重要,而且对于肠道微生物群是否可作为骨质疏松症新型治疗靶标以及是否可用作骨折预测的生物标志物方面具有重要意义。     

复合人工骨修复骨良性病变切除后骨缺损

目的探讨骨良性病变切除后骨缺损的修复方法，并对其疗效进行评估。方法总结1999年1月-2003年10月我科应用混合自体骨松质的异体脱蛋白骨松质复合自体红骨髓治疗骨良性病变切除后骨缺损28例。年龄12—61岁，平均20，5岁。结果除2例因死亡失访外，其余26例均取得满意随访，平均骨愈合时间为4．2个月。骨腔大小或植骨量不同，骨愈合时间不同。骨腔越大，植骨越多，骨愈合时间越长。本组病例未见明显排斥反应及并发感染。随访至今，无一例复发。结论利用这种复合人工骨修复骨良性病变切除后骨缺损的方法可行性好，安全性高，自体损伤小，便于推广，可用于骨缺损的修复。     

Development of bone canaliculi during bone repair

We recently found that silver impregnation staining with protargol (silver protein), that is, a modified Bodian method, is useful for histologically identifying the details of bone canaliculi structure, using thin sections of decalcified bone tissues. With this staining method, we conducted the present study to assess the development of bone canaliculi during the process of intramembranous ossification using a fracture-like stimulation model of the rat femur. After making a drill-hole in the cortex of the rat femur, decalcified thin sections were obtained after 3, 5, 7, and 14 days by the standard paraffin-embedding procedure. Silver staining for bone canaliculi was performed using our previously reported technique. The results showed that woven bone covered the fracture surface of the cortex after 5 days, then immature lamellar bone attached to the woven bone after 7 days, and finally the lamellar bone matured and became thick with appositional growth after 14 days. The osteocytes in the woven bone appeared at an early stage of bone repair and developed a few canaliculi that were short and irregularly distributed in the osteoid matrix, while the osteocytes in the lamellar bone at a late stage formed many bone canaliculi that were long and regularly distributed in mature bone matrix. Therefore, we concluded that woven bone osteocytes may be necessary for induction of the lamellar bone osteocytes followed by active appositional growth of the lamellar bone at the early stage of bone repair, and also that both bone tissues could be clearly distinguished from one another based on the pattern of development of bone canaliculi by the osteocytes, as seen with the use of our sensitive staining method.     

Spinal fusions: bone and bone substitutes

Vertebral arthrodesis is one of the most commonly performed, yet incompletely understood, procedures in spinal surgery. Despite major progress in internal fixation techniques, the high rate of non-unions indicates that physiologic, biologic and molecular events that are crucial to this process are not well known. This article will analyze the general biology of bone regeneration, and particularly discuss the properties and use of various bone graft materials and graft substitutes. Received: 9 August 2000/Accepted: 11 August 2000     

Assessment of bone density and bone loss

Osteoporosis International - Dual-energy X-ray absorptiometry has become the standard for the evaluation of osteoporosis. It is useful both for identifying those people who are going to be at risk...