细胞周期蛋白激酶抑制蛋白p27kipl在头颈肿瘤预后中的研究

细胞增殖是可调控的，恶性肿瘤的本质在于细胞周期调节失控，目前已发现细胞周期蛋白／细胞周期蛋白激酶抑制剂与细胞周期G1期调控有关，其中p27kipl负性调节细胞增殖，在G1期细胞增殖调节中发挥重要作用。目前研究发现p27kipl的表达与头颈部恶性肿瘤的发展、预后密切相关，是很有价值的预后预测指标。     

p27kip1基因转染及其对人舌癌细胞增殖的影响

目的:探讨人p27kip1基因对人舌鳞状细胞癌细胞增殖的影响。方法:从正常组织中克隆人p27kip1基因连接至pcDNA3真核表达载体上,应用脂质体将重组质粒转染舌癌Tca8113细胞,观察外源目的基因在靶细胞中的整合及表达、细胞的生长情况及细胞周期的变化。结果:成功克隆p27kip1cDNA并构建真核表达载体,将其导入Tca8113细胞中,经G418筛选得到稳定表达p27kip1基因的细胞株,其细胞的生长受到抑制,增殖下降。G0/G1期细胞百分数由34.973%增至66.064%,细胞出现了凋亡。结论:克隆并在体外转染Tca8113细胞获得了p27kip1的高表达,抑制舌癌细胞由G1期向S期过渡从而抑制了细胞增殖。     

S期激酶作用蛋白2的高表达与口腔鳞癌预后的关系

p27~(Kipl)是一种细胞周期素依赖性激酶抑制剂,属细胞周期负调控蛋白,其低表达与许多恶性肿瘤有关,被认为是癌症患者低生存率有力的预后标志物。S期激酶作用蛋白2(Skp2)是一种DNA复制必需的F-box蛋白,作用于周期素 A。研究表明,Skp2可特异地识别p27~(Kipl)并使其泛素化,体内外实验均证明p27~(Kipl)的泛素化和降解需要Skp2。故认为浸     

细胞周期调控蛋白P34cdc2与cyclin B1在头颈部鳞癌中的预测价值

头颈部鳞癌是一种较常见的恶性肿瘤。p34cdc2及cyclinB1是调控G2/M期的重要蛋白,可以促进G2/M期转换而加速细胞周期进程。关于p34cdc2及cyclinB1与头颈部鳞癌的发生发展及预后的研究目前已相当普遍。本文就它们在头颈部鳞癌中的预测价值进行综述。     

细胞周期调控蛋白P34cdc2与cyclin B1在头颈部鳞癌中的预测价值

头颈部鳞癌是一种较常见的恶性肿瘤。p34cdc2及cyclin B1是调控G2／M期的重要蛋白，可以促进G2／M期转换而加速细胞周期进程。关于p34cdc2及cyclin B1与头颈部鳞癌的发生发展及预后的研究目前已相当普遍。本文就它们在头颈部鳞癌中的预测价值进行综述。     

丁酸钠对人口腔鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖及p27Kip1蛋白表达的影响

目的 通过观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠对人口腔鳞状细胞癌Tca8113细胞的增殖影响及p27Kip1蛋白表达改变,探讨丁酸钠调控人口腔癌细胞增殖的分子机制.方法 人口腔鳞状细胞癌Tca8113细胞经不同浓度丁酸钠[0 mmol/L(空白对照组),2、4、6、8 mmol/L(4个实验组)]作用后,甲基噻唑基四唑(MTT)法观察细胞增殖情况,流式细胞仪分析细胞周期分布,免疫组化检测p27Kip1蛋白的表达.结果 丁酸钠能够呈时间剂量依赖性抑制Tca8113细胞的增殖,丁酸钠处理后的Tca8113细胞出现了凋亡形态变化;细胞周期阻滞于G0～G1期,丁酸钠2 mmol/L组G0～G1期达(63.2±2.4)%,4 mmol/L组G0～G1期达(77.2±3.8)%,空白对照组G0～G1期达(48.1±2.4)%,P＜0.05;p27Kip1蛋白表达水平明显上调.结论 丁酸钠能够抑制人口腔癌细胞的增殖,该作用可能与p27KiP1蛋白表达上调及G0～G1期细胞周期阻滞有关.     

细胞周期调控因子在舌鳞癌中的表达与意义

恶性肿瘤的细胞周期调控机制常发生异常。通过测定细胞周期的调控因子如细胞周期蛋白(cyclin)、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)和它们的抑制剂(CDKIs)可显示该组织中的细胞是否处于正常的细胞周期，因而对临床诊治具有辅助作用。我们检测舌鳞癌中p27、cyclin D1和CDK4的表达，探讨它们在临床应用中的意义。     

重组人乳铁蛋白对口腔癌细胞周期及周期因子表达影响的实验研究

目的：探讨重组人乳铁蛋白（Recombinate human lactoferrin,rhLF）对口腔癌Tea8113细胞周期及周期调控因子cyclinD1、p19和p27基因表达的影响。方法：分别采用流式细胞仪和RT—PCR方法分析细胞周期及周期调控因子cyclinD1,p19和p27的mRNA水平。结果：50μg／mL、100gg／mLrhLF作用Tca8113细胞后,细胞增殖减慢,G0／G1期细胞明显增多,与对照组相比差异具有统计学意义（P〈0．05）;Tca8113细胞的cyclinDlmRNA表达下降显著,50μg／mL和25μg／mL rhLF实验组与对照组相比差异具有统计学意义（P〈0．05）;p19和p27mRNA表达水平的变化不明显。结论：rhLF通过下调口腔癌细胞周期蛋白cyclinD1的表达来调控周期阻滞,为乳铁蛋白用于肿瘤的预防及治疗提供实验基础。     

p27在调节小鼠下颌牙槽骨生长发育中的作用

目的明确细胞周期依赖性激酶抑制剂p27在小鼠下颌骨发育形成过程中的作用和机制。方法通过影像学、组织化学染色、免疫组织化学染色等方法比较分析了2周龄p27基因敲除(p27-/-)小鼠与同窝野生型(WT)小鼠下颌牙槽骨的表型差异。取下颌骨提取蛋白,利用Western blot的方法检测了Sonic Hedgehog(Shh)信号通路相关分子表达的变化。结果与同窝2周龄WT小鼠相比,p27-/-小鼠下颌骨体积增大,矿化显著增强;下颌牙槽骨碱性磷酸酶(ALP)阳性面积和I型胶原(Col-Ⅰ)阳性面积的增加,表明p27-/-小鼠成骨细胞活性和功能显著增加。同时发现Shh信号通路相关蛋白Shh、Patched、Smoothened、Gli2的表达水平在p27-/-小鼠均显著上调。结论结果说明细胞周期依赖性激酶抑制剂p27能够通过抑制Shh信号通路,抑制细胞增殖,发挥负性调控小鼠颌骨生长发育的作用。本研究不仅揭示了p27在调控小鼠颌骨生长发育中的作用机制,而且为p27作为调节颌骨生长发育的新靶标提供了理论和实验依据。     

十字孢碱对口腔鳞状细胞癌CAL27细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨十字孢碱(staurosporine,ST)对人口腔鳞状细胞癌细胞株CAL27增殖和凋亡的影响及其机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度的ST对CAL27细胞增殖的抑制作用,DAPI荧光染色法观察不同浓度的ST对CAL27细胞凋亡的改变,流式细胞术检测不同浓度ST对CAL27细胞凋亡率和周期分布的影响;蛋白免疫印迹法检测不同浓度ST对CAL27细胞周期蛋白cyclin D1、Cdk4、Cdk6、p21表达的影响。结果 ST对CAL27细胞的增殖有明显抑制作用(P<0.05),抑制作用具有药物浓度依赖性。通过DAPT染色,ST能明显诱导细胞凋亡及凋亡形态改变。CAL27细胞出现Annexin V-FITC/PI流式细胞术观察发现与对照组相比,ST可诱导CAL27细胞凋亡率明显增加(P<0.05),并引起细胞周期阻滞于G2/M期(P<0.05)。蛋白免疫印迹法检测结果显示,经ST处理细胞后,cyclin D1、Cdk4和Cdk6蛋白表达明显降低,p21蛋白表达升高(P<0.05)。结论 ST可显著抑制口腔鳞状细胞癌CAL27细胞增殖并诱导其凋亡,其机制考虑是通过阻滞细胞周期于G2/M期,进而抑制肿瘤细胞生长并促进细胞凋亡。     

p53、p21、p27、p16在口腔鳞癌中的表达及与预后的关系

目的:研究细胞周期相关蛋白p53、p21、p27、p16在口腔鳞癌组织中的表达及其与预后的相关性,寻找预后判断的有效生物标志物。方法:用免疫组织化学的方法检测随访资料完整的110例口腔鳞癌患者术后石蜡切片中p53、p21、p27、p16的表达,通过目标蛋白阳性染色细胞比例和阳性细胞中蛋白的染色强度判定各蛋白的表达水平,应用SAS 9.0软件中的Kaplan-Meier分析p53、p21、p27、p16蛋白表达水平与口腔鳞癌预后的相关性,筛选和确定与口腔鳞癌预后相关的细胞周期蛋白。结果:110例口腔鳞癌标本蛋白检测和统计分析结果表明,p53、p27、p16蛋白的表达水平与口腔鳞癌术后生存时间并无显著的相关性;p21表达与口腔鳞癌的术后生存率呈显著的相关性(P<0.05)。结论:口腔鳞癌患者癌组织标本的p21表达水平与预后呈正相关,p21有望成为口腔鳞癌预后判断的候选生物标志物。     

口腔鳞状细胞癌和癌前病变中细胞周期相关蛋白p27表达的研究

目的研究口腔黏膜癌前病变和口腔鳞状细胞癌（OSCC）中细胞周期相关蛋白p27的表达。方法采用免疫组织化学方法，研究p27、p53、MDM2（murine double minute）和p21蛋白在正常口腔黏膜、口腔白斑、红斑及OSCC共115例中的表达情况，探讨其表达水平的改变与Ki-67及相关临床病理指标的关系。结果p27蛋白在癌前病变和OSCC组中的阳性率分别为79．55％和81．25％。OSCC组p27蛋白表达强阳性率为70．83％（34／48），显著高于癌前病变组的31．82％（14／44）（P〈0．001）。p27蛋白高表达组其平均Ki-67阳性细胞百分率显著高于p27蛋白低表达组（P〈0．001）。OSCC组中，p27蛋白表达强度与p53和（或）MDM2的状态相关（P=0．034）。结论细胞周期调控分子p27、p53、MDM2和p21蛋白功能异常是口腔黏膜上皮发生癌变的重要因素之一。在口腔黏膜癌前病变和OSCC中普遍存在着上述一种或多种周期调控分子的异常，且不同调控分子之间也存在着互相调节、互相制约的关系。     

细胞周期依赖性激酶抑制蛋白和激酶抑制蛋白及其与口腔疾病

细胞周期和程序性细胞死亡与口腔疾病的发生发展密切相关,细胞周期蛋白、细胞周期依赖性激酶（CDK）、细胞周期依赖性激酶抑制剂是与细胞周期调控有关的主要分子。细胞周期依赖性激酶抑制蛋白（CIP）和激酶抑制蛋白（KIP）由P21、P27和P57三种蛋白质构成,参与细胞周期和程序性细胞死亡调控,抑制多种CDK的活性。口腔疾病的大多数组织破坏是由病变刺激因素诱导宿主细胞增殖和程序性细胞死亡异常改变所引起的,而CIP和KIP表达降低或缺失则导致牙龈结合上皮组织明显增厚,白斑伴上皮异常增生,肿瘤细胞增殖失控;因此,CIP和KIP在调控牙龈上皮细胞增殖和维持牙周组织的正常功能活动中起着不可替代的作用,其表达水平和活性可作为预测口腔白斑恶变与否,肿瘤进展和预后的重要指标。本文就CIP和KIP的组成和功能,CIP和KIP与口腔疾病等研究进展作一综述。     

EGFRmAb抑制口腔鳞癌细胞增殖的研究

目的 研究表皮生长因子受体单克隆抗体(EGFRmAb)对口腔鳞癌细胞增殖的抑制作用及其作用机理。方法 对Tca8113舌鳞癌细胞系给予不同浓度的EGFRmAb处理，通过分析细胞生长曲线和克隆形成抑制率，观察EGFRmAb225对舌鳞癌细胞的增殖抑制作用，并通过分析细胞周期再分配及细胞周期相关蛋白p27kipl的表达，探讨其作用机制。结果 EGFRmAb可抑制舌鳞癌细胞的增殖和克隆形成，可以导致G1期细胞比例上升和S期细胞比例下降，并使p27kipl的表达上调。结论 EGFRmAb可以抑制舌鳞癌细胞的增殖，其机制与细胞的G1期阻滞有关。     

细胞周期相关蛋白在舌癌中的表达及正反义cyclinA基因转染舌癌细胞Tca8113的生物学效应

细胞周期蛋白 (cyclin)是调节细胞周期活动的重要蛋白质 ,在细胞的增殖 ,肿瘤的发生中具有重要作用。已证实哺乳动物的 cyclin有 8种 ,作为调节亚基与相应的 Cdk形成复合物并正调节 Cdk的活性。不同的 cyclin在不同的时相通过相应的 Cdk起到促进细胞完成周期的作用 ,其中 cyclin A/Cdk2是 S期和 G2 期所必需的。 cyclin的过度表达和错误调控均有可能导致恶性转化。现已证明 cyclin A为 S期的特征性细胞周期蛋白 ,它存在于细胞核中具有丝分裂作用。在 G2 → M期转换中与 cyclin B起协同作用。舌癌是常见的口腔颌面部恶性肿瘤 ,为了进一…     

粘液表皮样癌中热休克蛋白70和细胞周期调节蛋白p27表达与预后的研究

目的研究热休克蛋白70(heat shock proteins 70,HSP70)和细胞周期调节蛋白p27在粘液表皮样癌(mucoepidermoid carcinoma, MEC)中的表达及其与临床病理特征的关系和对预后的影响.方法应用免疫组化LSAB法检测44例MEC中HSP70和p27表达,选用10例多形性腺瘤(plemorphic adenomas, PAs)作对照.结果 HSP70在MEC中表达明显高于在PAs中(P＜0.05).p27在MEC中表达显著低于在PAs中(P＜0.01).在MEC和PAs中,HSP70和p27表达呈负相关(P＜0.05).在MEC中,HSP70表达与肿瘤组织学分级、临床分期、肿瘤大小呈正相关(P＜0.05),p27表达与组织分级、临床分期、肿瘤大小和淋巴结转移呈负相关(P＜0.05).多因素生存分析显示HSP70表达与不良预后显著相关.结论 HSP70可能是MEC独立的预后预测指标,p27对MEC预后预测有一定意义.     

P27蛋白表达异常与口腔鳞状细胞癌的相关研究

目前的研究表明,p27基因表现为抑癌基因的特点,P27蛋白的降解增加导致其表达下调,由此引起的细胞周期调控异常与口腔肿瘤发生有关.P27蛋白作为肿瘤的辅助诊断指标,抑制或减少其降解将有可能成为新的肿瘤基因治疗靶点.本文对口腔鳞状细胞癌中P27蛋白的降解及如何抑制其降解的临床应用前景进行综述.     

Lnc RNA KCNQ1OT1靶向miR-506-3p调控舌鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭和迁移的机制研究

目的探讨长链非编码RNA(Lnc RNA)KCNQ1OT1通过靶向调控miR-506-3p对舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinomas,TSCC)细胞增殖、侵袭和迁移作用机制。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测正常牙龈上皮细胞(human gingival epithelial cells,HGE)及TSCC细胞(CAL27、SCC9和SCC15细胞系)中KCNQ1OT1和miR-506-3p表达水平。以CAL27细胞为研究对象,构建KCNQ1OT1低表达或miR-506-3p高表达的CAL27细胞,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,蛋白印迹(Western blot)检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9和β-连环蛋白(β-catenin)表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证KCNQ1OT1与miR-506-3p调控关系。结果与HGE细胞比较,TSCC细胞系CAL27、SCC9和SCC15中KCNQ1OT1表达升高(P<0.05),miR-506-3p表达降低(P<0.05)。KCNQ1OT1低表达或miR-506-3p高表达后,CAL27细胞存活率、迁移和侵袭细胞数及CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表达降低(P<0.05)。KCNQ1OT1低表达还降低了CAL27细胞中β-catenin蛋白表达(P<0.05)。miR-506-3p低表达降低了KCNQ1OT1低表达对CAL27细胞存活率、迁移和侵袭细胞数及CyclinD1、MMP2、MMP9和β-catenin蛋白表达的影响(P<0.05)。结论KCNQ1OT1低表达可抑制TSCC细胞增殖、迁移和侵袭,其作用机制与上调miR-506-3p表达和抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。     

口腔癌诱导化疗中P27Kip1表达与细胞周期、凋亡关系的研究

目的研究口腔鳞癌诱导化疗中P27Kip1与细胞周期、凋亡之间的变化规律,探讨肿瘤细胞凋亡率、P27Kip1等作为癌细胞化疗敏感性指标的临床价值。方法40例N0期口腔鳞癌术前经皮下埋植泵进行诱导化疗,采用流式细胞术检测治疗前后P27Kip1蛋白表达、细胞周期和凋亡变化。按照统一制定的病例选择标准进行治疗前后对照实验。结果(1)诱导化疗治疗前后G0/G1期峰值、凋亡峰值AP、FIP27有显著性差异,治疗前后P27Kip1蛋白与瘤体细胞发生凋亡的变化密切相关。(2)不同疗效P27Kip1蛋白和细胞凋亡有不同表达,治疗有效者P27Kip1蛋白和凋亡率明显升高。结论P27Kip1蛋白表达与瘤体细胞凋亡有直接作用关系,p27Kip1是一种影响化疗药物作用的重要基因。     

成釉细胞瘤中细胞周期素D1及其抑制因子的表达

目的 研究细胞周期素D1(cyclin D1)、周期素依赖激酶抑制因子p16INK4、p21WAF1 mRNA和p27KIP1 蛋白在人成釉细胞瘤(ameloblastomas,ABs)中的表达及其临床生物学意义.方法 用原住杂交和免疫组化(SP法),分别检测ABs中cyclin D1、p16INK4、p21WAF1 mRNA和p27KIP1 蛋白的表达.结果 cyclin D1 mRNA阳性率为42.6%(23/54);p16INK4、p21WAF1 mRNA和p27KIP1 蛋白的阳性率分别为31.5%(17/54)、22.6%(12/53)、16.7%(9/54).伴随ABs的复发与恶变cyclin D1 mRNA阳性率逐渐上升,p16INK4、p21WAF1 mRNA和p27LIP1 蛋白阳性表达丢失.经Kendall相关性分析得出,cyclin D1 mRNA与p21WAF1 mPRNA、p27KIP1 蛋白之间在AB中rk分别为-0.213、-0.284,均P<0.05.结论 AB的发生发展可能与cyclin D1过表达及p16INK4、p21WAF1 mRNA、p27KIP1 蛋白丢失等多种因子共同调控有关.