不同底物应用于CIM法检测鲍曼不动杆菌的可行性

目的评价美罗培南(MPN)、亚胺培南(IPN)和厄他培南(ETP)3种不同药敏纸片作为底物应用于碳青霉烯酶表型检测法(CIM)检测产碳青霉烯酶的鲍曼不动杆菌的可行性。方法选择邢台市第三医院2015年1-12月和河北医科大学第二医院2015年5-6月从临床标本分离所得的非重复鲍曼不动杆菌88株,经LB培养基复苏,在血培养基35℃,5%CO2过夜培养后,准备A、B、C三组EP管,用10μL接种环挑取满环细菌分别加入A、B、C 3管中,混匀后再分别加入10μg美洛培南、亚胺培南、厄他培南药敏片,检测鲍曼不动杆菌的碳青霉烯酶,并以经典PCR方法检测耐药基因OXA-23为金标准,比较3种药敏片作为底物的CIM法检测产OXA-23型碳青霉烯酶的鲍曼不动杆菌的效果。结果 88株鲍曼不动杆菌有57株显示OXA-23基因阳性,IMP、VIM、KPC、OXA-48基因均为阴性。57株OXA-23基因阳性的菌株中美罗培南、亚胺培南、厄他培南的检出率分别为93.0%(53/57)、77.2%(44/57)、73.7%(42/57),亚胺培南和厄他培南阴性菌株经过加入3倍菌量再次实验,检出率分别为89.5%(51/57)和87.7%(50/57)。31株OXA-23基因阴性的菌株中,美罗培南CIM试验2株阳性,亚胺培南和厄他培南检测均有1株阳性。3种药敏片的CIM试验和金标准OXA-23基因比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论应用美罗培南、亚胺培南和厄他培南为底物的CIM法检测产OXA-23型碳青霉烯酶的鲍曼不动杆菌都是很好的检测方法,但是亚胺培南和厄他培南需要加大3倍菌量。     

亚胺培南耐药型鲍曼不动杆菌的耐药机制与分子流行病学研究

目的：了解亚胺培南耐药型鲍曼不动杆菌分子流行病学特点,研究鲍曼不动杆菌的耐药机制。方法：收集我院亚胺培南耐药型鲍曼不动杆菌（imipenem resistant acinetobacter baumannii, IRAB）共17株,E-test进行药敏试验,PFGE技术分析耐药菌株同源性,改良Hodge试验筛选产碳青霉烯类耐药菌株,PCR扩增bla基因并进行基因序列的测序和分析。结果：17株亚胺培南耐药型鲍曼不动杆菌分别来自病人痰液、伤口、血液标本,药敏检测发现17株菌具有多重耐药性,PFGE分析表明17株菌可分为A、B、C、D4个克隆型,其中A型包括A1和A2两个亚型,改良Hodge试验和PCR基因扩增证实17株菌均含OXA-23型基因。结论：产OXA-23型碳青霉烯酶是本研究中鲍曼不动杆菌对亚胺培南等碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制之一。     

亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及耐药基因型分析

目的 调查重庆医科大学附属第一医院临床分离的亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性特点及碳青霉烯酶基因型和16S rRNA甲基化酶分析.方法 收集2009年11月至2010年2月临床分离出耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌菌株54株,经Vitek-2 Compact进行细菌鉴定、药敏实验及最小抑菌浓度(MIC)值测定;基因扩增仪(PCR)扩增碳青霉烯酶、16S rRNA甲基化酶耐药基因及其克隆测序.结果 54株耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌均为多重耐药表型,全部都携带OXA-66基因,其中53株携带有OXA-23基因,全部53株菌都检测到OXA-23基因上游插入序列ISAbal,41株菌检测到16S rRNA甲基化酶armA基因阳性.结论 产OXA-23型碳青霉烯酶是鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药的最主要原因,其上游插入序列ISAbal 在耐药中起重要作用.     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌耐药机制探析

目的通过对菌株的检验来对鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药机制进行探讨.方法在临床中要先对耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌进行分离,细菌鉴定采用法国梅里埃ATB半自动细菌鉴定仪,药敏选用KB纸片法与药敏上机板条相结合,三维试验检测ESBLs和AmpC酶,PCR检验方法检测耐药基因,PCR阳性产物进行基因测序.结果通过与基因库的比对可以发现,所选的6株鲍曼不动杆菌大多数是多重耐药菌株,在三维试验中,此类菌株均产生了ESBLs,有4株菌株产生了AmpC酶.在6株鲍曼不动杆菌的耐药基因型检测中发现有4株AmpC酶阳性,6株均为TEM阳性,4株为PER阳性,4株为OXA-24、VIM、IMP和VEB型等均为阴性,6株OXA-23型均阳性.结论耐亚胺培南鲍曼不动杆菌有OXA-23型碳青霉烯酶基因,OXA-23型碳青霉烯酶是主要耐药机制.     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因分析

目的研究我院耐亚胺培南鲍曼不动杆菌（IRAB）的耐药性与碳青霉烯酶基因型。方法收集我院耐亚胺培南鲍曼不动杆菌35株,K—B法和E—test法测定对常用抗茵药物的敏感性,采用改良Hodge试验和乙二胺四乙酸（EDTA）协同试验检测耐亚胺培南不动杆菌产碳青霉烯酶和金属β-内酰胺酶情况,聚合酶链反应（PcR）检测其碳青霉烯酶基因OXA-23、OXA-24、OXA-58、IMP、VIM。结果35株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类、部分氨基糖苷类、喹诺酮类及磺胺类抗菌药物均有很高耐药率（〉70％）,仅对阿米卡星、头孢哌酮／舒巴坦和多粘菌素B有较高的敏感性（〉70％）,35株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌均产碳青霉烯酶,未检测到金属β-内酰胺酶,全部检测到OXA-23型基因,未检测到OXA-24、OXA-58、IMP、VIM型基因。结论耐亚胺培南鲍曼不动杆菌耐药相当严重;产OXA-23型碳青霉烯酶是我院鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药的主要原因。     

Carba NP试验检测多重耐药革兰阴性杆菌产碳青霉烯酶效果分析

目的评估Carba NP试验检测多重耐药革兰阴性杆菌产碳青霉烯酶的效果。方法收集我院2010-2013年59株多重耐药革兰阴性杆菌,采用VITEK-2全自动细菌鉴定药敏系统进行种属鉴定并检测菌株对碳青霉烯类药物的敏感性,用Carba NP试验检测菌株产碳青霉烯酶表型,用PCR法确定碳青霉烯酶基因型,并对PCR产物进行DNA测序分析。结果 59株多重耐药革兰阴性杆菌对亚胺培南、美洛培南、厄他培南耐药率分别为62.71%、61.02%和64.41%。Carba NP试验确定33株产碳青霉烯酶菌株,分别为A类酶12株、B类酶21株,PCR法检出多种碳青霉烯酶基因,包括KPC(12株)、IMP(7株)、NDM(12株)、VIM(3株)。与PCR法比较,Carba NP试验敏感性和特异性分别为97.06%、100%。结论 Carba NP试验能简单快速地检测多重耐药革兰阴性杆菌产生的碳青霉烯酶,结果与金标准的PCR法有高度一致性,值得在临床检验中推广使用。     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶检测及同源性分析

目的 了解临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌(IRAB)碳青霉烯酶的基因型及同源性.方法 采用MicroScan WalkAway-40微生物分析仪进行菌株鉴定和药敏试验,聚合酶链反应(PCR)检测OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58组碳青霉烯酶基因型,肠杆菌科重复序列PCR(ERIC-PCR)检测耐药基因阳性菌株的同源性.结果 64株IRAB均为多重耐药菌株,其中10株(15.6%)为泛耐药菌株,51株(79.7%)blaOXA-23阳性,4株(6.3%)blaOXA-58阳性,57株(89.1%)blaOXA-66/blaOXA-51组阳性.ERIC-PCR结果 显示blaOXA-23阳性菌株中47株为同一基因谱.结论 产OXA-23型碳青霉烯酶是我院鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药的重要机制,菌株间可能存在克隆传播.     

2 308份血培养的病原菌谱及耐药性分析

目的 总结南华大学第一附属医院2年来血标本的培养结果及药敏状况, 以指导临床合理使用抗生素.方法 采用BACTEC 9050 全自动血培养仪及Vitek鉴定板和梅里埃公司药敏卡对血培养阳性标本进行菌种鉴定和药物敏感试验.结果 2 308份血标本中, 检出细菌286株, 检出率为12.4%, 其中革兰阳性菌177株, 革兰阴性菌105株, 真菌4株.革兰阳性球菌对万古霉素、米诺环素、利福平较为敏感, 而革兰阴性杆菌对美洛培南、亚胺培南、阿米卡星的敏感性较高.结论 革兰阳性球菌为本地区引起菌血症的主要病原菌, 条件致病菌表皮葡萄球菌占优势.药敏结果提示检出菌耐药性强且广谱耐药.     

产碳青霉烯酶铜绿假单胞菌的耐药基因检测及药敏分析

目的:研究临床分离铜绿假单胞菌产碳青霉烯酶的主要基因型和药敏分布。方法:收集2020年11月～2022年1月芜湖市中医医院住院患者微生物送检标本,培养分离铜绿假单胞菌,采用最低抑菌浓度(MIC)法检测药敏结果,胶体金及PCR法检测耐药表型及基因。结果:临床分离铜绿假单胞菌共46株,科室分布构成占比以重症医学科为主(32.6%),其次为呼吸内科(21.7%);其中碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌(CRPA)分布以重症医学科构成占比最高(44.4%)。46株铜绿假单胞菌对替卡西林/克拉维酸、左氧氟沙星、阿米卡星、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、黏菌素耐药率分别为26.1%、30.4%、2.2%、19.6%、13.0%、19.6%、4.3%。9株CRPA对替卡西林/克拉维酸、左氧氟沙星、阿米卡星、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、黏菌素耐药率分别为66.7%、66.7%、11.1%、55.6%、66.7%、100.0%、0%。碳青霉烯酶阳性铜绿假单胞菌基因型主要为新德里金属β内酰胺酶(NDM)型、其次为亚胺培南酶(IMP)型。结论:铜绿假单胞菌产碳青霉烯酶主要为NDM型,且耐药广泛,临床和院感应加强检测...     

MALDI-TOFMS快速检测阳性血培养中肠杆菌目细菌碳青霉烯酶活性的评价

目的评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOFMS）直接检测阳性血培养瓶中肠杆菌目细菌碳青霉烯酶活性的可行性。方法收集2012年1月至2018年12月分离自温州市中医院各临床科室的46株肠杆菌目细菌和3株质控菌分别模拟血培养检测,用MALDI-TOFMS直接对阳性血培养液做细菌鉴定及亚胺培南水解试验,从而判断碳青霉烯酶的活性。另收集临床26例阳性血培养标本对该方法进行验证。结果25株产碳青霉烯酶肠杆菌目细菌（CPE）显示300m/z和489m/z处的质谱峰均消失,21株非产碳青霉烯酶肠杆菌目细菌（NCPE）的两处质谱峰依然存在。质谱检测46株细菌的碳青霉烯酶结果对比基因表型高度一致（Kappa=1）,对血培养液直接鉴定的细菌种水平鉴定率为96.0%。26例临床血培养样本方法验证结果显示,9例耐碳青霉烯酶类肠杆菌目细菌和17例碳青霉烯类药物敏感菌株均被正确识别,灵敏度、特异度均为1.00。结论MALDI-TOFMS碳青霉烯酶测定法是一种直接从血液培养瓶中检测碳青霉烯酶活性的可行、快速的方法,有助于临床更快地调整经验性抗菌药物治疗和实施感染控制措施。     

血培养中产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希杆菌与肺炎克雷伯杆菌临床分布及耐药性分析

目的分析血培养中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希杆菌及肺炎克雷伯杆菌临床分布及耐药性。方法 2012年10月—2015年9月武汉大学人民医院送检血培养阳性的标本中分离大肠埃希杆菌和肺炎克雷伯杆菌,均采用BACTEC-FX BD全自动血培养仪进行血培养,阳性标本用BD全自动微生物鉴定/药敏仪Phoenix-100进行鉴定,应用WHONET5.5软件进行抗生素耐药性分析。结果临床血培养标本共检出肠杆菌科921株,包括大肠埃希杆菌487株(52.88%)及肺炎克雷伯杆菌184株(19.98%),其中产ESBLs大肠埃希杆菌314株(64.48%)和肺炎克雷伯杆菌184株(32.61%)。产ESBLs大肠杆菌及肺炎克雷伯杆菌对青霉素类、头孢类、喹诺酮类、红霉素类等抗菌药表现出高的耐药性(62.1%~100%),阿米卡星(5.2%)及派拉西林/他唑巴坦(10.3%)表现出有良好的抗菌作用,美洛培南(0.9%)、亚胺培南(0)碳青酶希类等抗菌药效果最好。血培养中产ESBLs菌株对各种抗菌药(除美罗培南与亚胺培南)的耐药率明显高于不产ESBLs菌株,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血培养中产ESBLs大肠埃希杆菌与肺炎克雷伯杆菌对各类抗菌药物呈现不同程度耐药,并具多重耐药特点,碳青霉烯类亚胺培南和美罗培南仍是最敏感抗产ESBLs菌的药物,阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦亦保持了良好的抗菌活性。应加强产ESBLs菌株的监测及耐药性分析,以指导临床合理用药,并对控制产ESBLs菌株的播散以及耐药基因的传播具有重要意义。     

血培养标本病原菌种类及耐药性分析

目的了解血培养阳性致病菌菌谱以及药敏情况,为抗生素合理使用提供理论依据。方法采用美国BD公司BACTEC9120型全自动血培养仪及其配套成人树脂需氧瓶和含溶血素厌氧瓶、儿童树脂需氧瓶培养,所有菌株按照常规操作流程进行鉴定。药敏实验采用K-B纸片扩散法,细菌菌谱及耐药性分析用WHONET 5.5软件。结果 1 290例血液培养标本中共分离出28种109株病原菌,阳性检出率为8.4%。革兰阳性球菌中未发现万古霉素耐药菌株。革兰阴性杆菌中,各菌属对抗菌药物均有一定的耐药率;均未发现亚胺培南和美罗培南耐药株。结论血液培养病原菌菌谱较广,以革兰阳性球菌为主,革兰阴性杆菌次之,且耐药情况普遍存在,应及时对血液细菌进行耐药性监测并指导临床合理使用抗生素。     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶的检测

目的了解徐州地区三级医院鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶的流行情况。方法收集徐州地区三级医院临床分离的对亚胺培南耐药的非重复鲍曼不动杆菌株97株,予VITEK-32型全自动微生物分析系统鉴定,予PCR方法检测金属酶耐药基因及OXA型碳青霉烯酶基因。结果经PCR方法检测所有受试菌未检测到金属酶基因blaIMP、blaVIM、blaSIM和OXA-24碳青霉烯基因,其中85株检测OXA-23型碳青霉烯酶基因,检出率为87.6%(85/97株)。结论徐州地区三级医院鲍曼不动杆菌产OXA-23型碳青霉烯酶可能是导致其对碳青霉烯类抗生素耐药的重要原因。     

鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药性及耐药基因型分析

目的:了解南京地区鲍曼不动杆菌耐药特点及分析碳青霉烯酶、金属β-内酰胺酶基因型。方法:K-B法测定临床分离的73株鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美洛培南的耐药性;PCR检测碳青霉烯酶(OXA)、金属β-内酰胺酶(IMP和VIM)耐药基因,并对OXA基因进行测序。结果:73株鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美洛培南耐药率均为10.9%;8株耐药菌中3株是IMP型,2株是VIM型,4株是OXA型,其中有1株菌含有OXA及IMP两种基因型。4例OXA型标本经测序,在Genbank中进行同源性比对,均为OXA-23亚型。结论:目前南京地区鲍曼不动杆菌的耐药性与其携带OXA-23、IMP和VIM基因相关。     

12株产β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的耐药基因检测

目的 研究革兰阴性杆茵产β-内酰胺酶的基因型.方法 收集北京大学人民医院12株革兰阴性杆菌,用VITEK-2系统进行鉴定和药敏检测,对多种β内酰胺酶基因进行聚合酶链反应(PCR)扩增.耐药基因与pGEM-3zf载体连接转化至大肠埃希茼DH5d,筛选、鉴定阳性克隆后进行序列分析.结果 12株菌检测出CTX-M型、TEM型、SHV型、OXA型、PER型和IMP型耐药基因,其中1株鲍曼不动杆茵同时携带OXA型和PER型耐药基因.2株大肠埃希茵的耐药基因分别在CTX-M-14的基础上发生了1个位点的突变.结论 细菌携带一种或多种耐药基因导致多重耐药,基因突变可导致新的基因型产生.鲍曼不动杆菌产金属碳青霉烯酶或丝氨酸碳青霉烯酶对亚胺培南耐药.     

陕西省某监测点2017—2020年细菌耐药监测

目的 分析西安某医院2017—2020年血培养标本病原菌的分布及其耐药性,为临床合理用药提供依据。方法 血培养瓶使用BacT/ALERT 3D全自动细菌培养仪,VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统和VITEK MS质谱仪用于细菌及真菌的鉴定。采用VITEK 2 Compact和纸片扩散法（K-B法）检测抗菌药物敏感性。采用WHONET 5.6软件对药敏结果进行分析。结果 4年来血培养标本病原菌共1 782株,其中革兰阳性菌900株、革兰阴性菌725株、念珠菌157株。占比前五位的细菌分别是：凝固酶阴性葡萄球菌528株（29.6%）、大肠埃希菌311株（17.5%）、肺炎克雷伯菌181株（10.2%）、金黄色葡萄球菌112株（6.3%）、屎肠球菌81株（4.6%）。革兰阴性菌中居前三位的分别是大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌。大肠埃希菌对亚胺培南的耐药率从2017年的0上升至2.7%;肺炎克雷伯菌对亚胺培南的耐药率由9.3%上升至24.2%;鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率由33.5%上升至72.7%;铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率由5.4%上升至7.7%,对左旋氧氟沙星和阿米卡星的耐药率均在5%以下。革兰阳性细菌中居前三位的分别是凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌。葡萄球菌和屎肠球菌对青霉素、红霉素和喹诺酮类药物耐药率较高,葡萄球菌未见对万古霉素耐药菌株,1株屎肠球菌对万古霉素耐药。结论 血培养阳性菌株分布广泛,革兰阳性菌以葡萄球菌为主,革兰阴性菌中以肠杆菌为主,革兰阴性菌对碳青霉烯类药物耐药率显著升高。     

产β-ESBLs大肠艾希氏菌和肺炎克雷伯病原菌的耐药性分析

目的:对产β-ESBLs大肠艾希氏菌和肺炎克雷伯病原菌的耐药性进行统计分析,为临床合理使用抗菌药物提供重要参考依据。方法:采集本院2014年1-12月6931份临床送检标本,对病原菌进行分离培养、鉴定。药敏试验采用K-B法,耐药性分析采用WHONET-5系统。结果:6931份标本中分离出阳性标本2724份。在2724份阳性标本中,分离出大肠埃希菌309株,肺炎克雷伯菌147株;其中产β-ESBLs阳性大肠艾希氏菌234株,分离率75.73%,产β-ESBLs阳性肺炎克雷伯菌71株,分离率48.30%。234株产β-ESBLs阳性大肠艾希氏菌中耐碳青霉烯类抗菌药物的大肠艾希氏菌有20株,占8.75%;71例产β-ESBLs阳性肺炎克雷伯菌中耐碳青霉烯类抗菌药物有10例,占14.08%。两种细菌对碳青霉烯类药物亚胺培南和美洛培南及酶抑制剂哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率均较低。结论:2014年本院产β-ESBLs大肠艾希氏菌和肺炎克雷伯病原菌分离率较高,出现较高耐药率和多重耐药现象,必须加强对β-ESBLs细菌的耐药性监测,及时准确地为临床提供药敏试验结果,促使临床合理使用抗菌药物,预防产β-ESBLs细菌在院内暴发或流行。     

两种不同药敏实验在血液细菌检验中的对照研究

目的 探讨直接药敏试验的应用价值.方法 选取送检的血培养阳性标本236份进行直接药敏试验与常规药敏试验比较.结果 236例标本经常规法鉴定出G-杆菌154株,G+球菌82株;直接法鉴定出G-杆菌137株,G+球菌61株.两种方法菌种鉴定总一致率为83.90％.其中G-杆菌一致率为88.96％;G+球菌一致率为77.27％.G-杆菌直接药敏试验标准符合率为85.56％;G+球菌直接药敏试验的标准符合率为83.95％.两种药敏试验结果总符合率为84.80％,一致性极高(P＜0.05).结论 血培养直接药敏试验与常规法药敏结果符合率较高,对血培养进行直接药敏试验能够缩短向临床报告初步药敏结果的时间,快速指导抗生素的选用.     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因研究

目的了解本地区耐亚胺培南鲍曼不动杆菌(IRAB)的耐药特征以及D类和B类碳青霉烯酶基因的流行状况。方法收集广东省2家三甲医院临床分离的耐亚胺培南鲍曼不动杆菌70株,采用K-B纸片法进行药敏试验;设计合成D类和B类碳青霉烯酶的引物序列进行PCR扩增和测序分析;热不对称PCR法检测侧翼序列。结果 70株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌对13种抗生素的耐药率都在84.29%以上,共有3株鲍曼不动杆菌检出OXA-58-like,60株检出OXA-51-like,23株检出OXA-23-like,4株检出OXA-24-like,另有1株检出了NDM-1基因;NDM-1上游存在ISAba125插入序列。结论鲍曼不动杆菌耐药情况严重,本地区鲍曼不动杆菌D类碳青霉烯酶基因的分布以OXA-23-like为主,同时检测出B类碳青霉烯酶NDM-1,需密切监测。     

血培养中常见致病菌种类及耐药性研究

目的：分析2014全年哈尔滨市第一医院血培养阳性标本中主要致病菌种类及耐药性情况,指导临床医生合理有效地使用抗生素。方法：采用美国 BD 公司 BACTEC9120全自动血液培养仪进行培养,湖南天地人全自动细菌鉴定／药敏系统对血培养阳性标本进行细菌鉴定及药敏试验,采用 WHONET5．6软件统计分析结果。结果：123株血培养阳性标本中革兰阳性菌46株,占37．4％,革兰阴性菌70株,占56．9％,真菌7株,占5．7％。产 ESBLs 的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别占63％和50％。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢类耐药性较高,而对亚胺培南、美罗培南耐药率较低。金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌对青霉素、红霉素耐药率较高,未发现对万古霉素耐药的菌株。结论：血培养致病菌主要致病菌耐药情况严重,应加强早期检测和耐药性分析,指导临床医生准确使用抗菌药,防止抗生素的滥用及耐药菌株的产生。