骨关节炎关节软骨及游离体中胶原Ⅰ Ⅱ Ⅲ型的表达

目的　进一步了解与骨关节炎相关的关节软骨及游离体软骨细胞表型改变。方法　通过组化和免疫组化方法,观察纤维性胶原Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型在人正常和骨关节炎关节软骨及游离体中的表达。结果　在10例骨关节炎关节软骨标本中,有9例可在关节软骨的中层和深层的软骨细胞中显示强烈的Ⅱ、Ⅲ型胶原蛋白的阳性表达信号,而Ⅰ型胶原表达蛋白只在中下层及深层观察到,表达强度较Ⅲ型弱,表达区域部分与Ⅲ型重叠。在10例骨关节炎游离体标本中,均可在游离体内部软骨细胞及基质中显示强烈的Ⅲ型胶原蛋白阳性表达信号。相同标本中Ⅰ型胶原蛋白仅在游离体内部软骨细胞中有表达,表达的阳性信号相对较低,未见明显的Ⅱ型胶原表达。在正常关节软骨中,Ⅱ型胶原的表达的信号较弱,未见Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达信号。结论　在骨关节炎关节软骨及游离体中,一定区域内的软骨细胞表型发生了改变,表达合成了Ⅲ型胶原和Ⅰ型胶原,可能在骨关节炎发病机制中发挥重要作用。     

骨关节炎关节软骨及游离体中胶原ⅠⅡⅢ型的表达

目的 进一步了解与骨关节炎相关的关节软骨及游离体软骨细胞表型改变。方法 通过组化和免疫组化方法,观察纤维性胶原Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型在人正常和骨关节炎关节软骨及游离体中的表达。结果 在１０例骨关节炎关节软骨标本中,有９例可在关节软骨的中层和深层的软骨细胞中显示强烈的Ⅱ、Ⅲ型胶原蛋白 阳性表达信号,而Ⅰ型胶原表达蛋白只在中下层及深层观察到,表达强度较Ⅲ型弱,表达区域部分与Ⅲ型重叠。在１０例骨关节炎游离体标本中     

血管内皮生长因子对关节软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响

目的 观察血管内皮生长因子(VEGF)对关节软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响.方法 体外培养乳鼠关节软骨细胞,实验分为4组,加入不同因素干预.A组(对照组):不加处理因素;B组:10 ng/mlVEGF;C组:10 ng/ml白细胞介素(IL)-1β;D组:10 ng/ml VEGF+10 ng/ml IL-1β.采用实时荧光定量聚合酶链反应检测Ⅱ型胶原mRNA的表达,采用蛋白免疫印迹法检测Ⅱ型胶原蛋白的表达.采用单因素方差分析进行统计学处理.结果 各组软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA的相对表达量分别为:A组1.00±0.08,B组0.78±0.07,C组0.67±0.06,D组0.57±0.04,B、C及D组软骨细胞Ⅱ型胶原的mRNA表达量均显著低于A组(P均＜0.01),D组Ⅱ型胶原的mRNA表达水平明显低于B组及C组;与A组(0.95±0.21)比较,B组(0.7 1±.0.14)、C组(0.60±0.11)及D组(0.31±0.09)的Ⅱ型胶原蛋白表达量显著降低(P均＜0.01),D组软骨细胞Ⅱ型胶原的蛋白表达水平明显低于B组及C组(P均＜0.01).结论 在骨关节炎的发病过程中,VEGF可能通过抑制关节软骨细胞Ⅱ型胶原的表达发挥重要作用.     

伸膝制动骨关节炎动物模型软骨内胶原变化的观察

目的 对骨关节炎(OA)早期软骨内胶原变化进行动态观察，探时胶原变化与OA发病机制的关系。方法 采用兔膝关节伸直位制动OA模型，对制动10、20、30、40d的关节软骨进行透射电镜观察，Ⅱ型胶原原位杂交，I、Ⅱ、Ⅲ型胶原的免疫组织化学测定。结果 电镜观察显示OA关节软骨的破坏从切线层的细胶原纤维网开始，而切线层的细胶原纤维网不含细胞；原位杂交和免疫组织化学显示OA早期Ⅱ型胶原的表达和含量增加，而且增加主要发生在移行层和深层上部，二者染色灰度值随时间的变化是先递增，之后逐渐减少；OA关节软骨内有Ⅲ型胶原分泌，并呈增加趋势，但无I型胶原的分泌。结论 OA关节软骨的退变从切线层开始，切线层胶原破坏后难于修复可能是软骨退变重要原因。     

布洛芬抗兔血吸虫病肝纤维化的实验研究

目的:观察布洛芬抗兔血吸虫病肝纤维化时对兔肝组织Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Collagen Ⅲ)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)mRAN表达的影响。方法:建立兔血吸虫病肝纤维化模型。应用布洛芬治疗8周后处死全部实验兔,取其肝组织作冰冻切片,应用原位杂交技术检测CollagenⅠ、CollagenⅢ、MMP-1、TIMP-1 mRNA,并用计算机彩色病理图像分析系统进行图像分析。结果:布洛芬组与模型对照组相比,CollagenⅠ、CollagenⅢ、TlMP-1 mRNA表达减少,MMP-1 mRNA表达增加(P<0.05)。结论:布洛芬能抑制兔血吸虫病肝纤维化肝组织CollagenⅠ、CollagenⅢ、TIMP-1 mRNA表达,增加MMP-1 mRNA表达,促进胶原降解,减少胶原沉积。     

软骨寡聚基质蛋白在软骨破坏诊断中的意义

软骨细胞外基质丰要由大量的Ⅱ型胶原、蛋白多糖和水组成.正常情况下软骨基质合成与降解保持动态平衡,但在骨关节炎(OA)和类风湿关节炎(rheumatoid anhritis,RA)中基质合成与分解代谢活动失衡.     

复元胶囊对大鼠膝骨关节炎模型软骨细胞凋亡及增殖的影响

目的观察复元胶囊对实验性大鼠膝骨关节炎(OA)模型软骨细胞凋亡及细胞核增殖抗原(PCNA)mRNA表达的影响,探讨其治疗骨关节炎的作用机制。方法 48只雄性SD大鼠随机分成正常组、模型组、壮骨关节丸组、复元胶囊组,每组12只。除正常组外,其余各组采用Hulth法建立膝OA动物模型。4 w后,壮骨关节丸组、复元胶囊组分别给与壮骨关节丸、复元胶囊灌胃,而正常组、模型组给予生理盐水。8 w后,通过肉眼观察、Mankin's评分评价复元胶囊治疗OA疗效,透射电镜、原位末端标记法(TUNEL法)检测软骨细胞凋亡,硝酸还原酶法测定关节液中一氧化氮(NO)水平,RT-PCR法检测PCNA mRNA的表达。结果复元胶囊Mankin评分、软骨细胞凋亡指数及关节液中NO水平均低于模型组(P<0.05),而PCNA mRNA的表达高于模型组(P<0.01)。结论复元胶囊能抑制OA软骨细胞的凋亡,促进软骨细胞PCNA的表达,延缓OA软骨退变过程。     

透明质酸对白细胞介素-1β诱导软骨细胞基质增殖能力和表型的影响

目的 研究透明质酸对重组大鼠白细胞介素-1β(rrlL-1β)诱导体外骨关节炎(OA)软骨细胞的表型和增殖能力的影响,并探讨其作用机制.方法 体外分离、培养大鼠软骨细胞成功后.加入不同浓度的透明质酸(10、20、40 μg/ml),1 h后,以10ng/ml IL-1β刺激,培养24 h后,通过噻唑蓝(MTT)和流式细胞仪检测细胞增殖能力;以反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western-blotting检测Ⅰ、Ⅱ胶原及聚集蛋白聚糖的Mrna合成和蛋白表达.以Griess反应测定上清液中一氧化氮(NO)浓度,并通过诱导型一氧化氮合酶催化L-精氨酸和分子氧反应生成NO推算Inos的活力.结果 透明质酸可有效抑制IL-1β诱导OA软骨细胞Inos的活性和NO的产量.MTT和流式细胞仪检测显示透明质酸能恢复OA软骨细胞的增殖能力;RIT-PCR和Western-blotting检测显示透明质酸能提高OA软骨细胞Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖mRNA的表达和蛋白合成,抑制Ⅰ型胶原mRNA的表达和蛋白合成,且呈剂量依赖性.结论 透明质酸对软骨细胞正常表型的维持有保护作用,并能明显拮抗IL-1β对软骨细胞增殖的抑制,这可能与透明质酸降低NO的含量和iNOS的活性有关.     

过氧化物酶体增殖活化受体γ激动剂对呼吸机相关肺损伤大鼠肺胶原合成的影响及机制

目的探讨过氧化物酶体增殖活化受体(PPAR)γ激动剂[15-去氧-△~(12,14-)前列腺素(PG)J_2 (15d—PGJ_2)]对呼吸机相关肺损伤大鼠肺胶原合成的影响及机制。方法普通级雄性SD大鼠24只,随机分为3组(正常对照组、Ⅰ组、Ⅱ组),每组8只。Ⅰ和Ⅱ组呼吸机条件相同(VT16ml/kg,PEEP为5cmH_2O,吸呼比为2：1,FiO_2为1．0),其中药物干预组(Ⅱ组)通气前1h腹腔注射15d-PGJ_2(1mg/kg),分别通气4h。通气结束后测定肺组织湿/干重(W/D)、肺组织光镜病理、Ⅰ型前胶原肽(PINP)和Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)浓度、Ⅰ型和Ⅲ型前胶原mRNA表达、以及PPARγ和核因子(NF)-kB活性。结果①Ⅰ组肺组织W/ D显著高于正常对照组和Ⅱ组(P＜0．05)。肺组织W/D在正常对照组和Ⅱ组之间无显著差异。②Ⅰ组肺组织Ⅰ型前胶原mRNA表达显著高于正常对照组和Ⅱ组(P均＜0．05)。Ⅱ组与正常对照组肺组织Ⅰ型前胶原mRNA表达无显著差异。③与Ⅰ组比较,正常对照组和Ⅱ组Ⅲ型前胶原mRNA表达均显著降低(P均＜0．05)。与正常组比较,Ⅱ组Ⅲ型前胶原mRNA表达无显著改变。④与正常对照组比较,Ⅰ组和Ⅱ组NF-kB活性均显著增高(P均＜0．05)。Ⅰ组与Ⅱ组NF-kB活性比较,无显著差异。⑤Ⅰ组PPARγ活性显著低于正常对照组(P＜0．05)。与Ⅰ组比较,Ⅱ组PPAγ活性显著增高(P＜0．05)。结论15d- PGJ_2下调呼吸机相关肺损伤大鼠肺组织Ⅰ型和Ⅲ型前胶原mRNA表达,其机制可能与激活PPARγ有关。     

软肝缩脾丸对肝纤维化大鼠TIMP-1、2及工、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白表达的影响

目的观察软肝缩脾丸对纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白酶组织抑制因子-1、2(TIMP-1、TIMP-2)及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白表达的影响,从胶原降解的角度探索中药抗肝纤维化的可能机理.方法制备大鼠肝纤维化模型,并给予软肝缩脾丸治疗;用原位杂交和免疫组化的方法分别测定TIMP-1、TIMP-2及Ⅰ、Ⅲ型胶原的mRNA和蛋白表达.结果CC14模型组TIMP1、TIMP-2,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白水平明显高于治疗组.正常组大鼠肝组织无一例阳性.结论TIMP-1、TIMP-2与肝纤维化形成密切相关,软肝缩脾丸可以抑制纤维化肝脏TIMP-1、TIMP-2的表达,从而增强间质胶原酶的活性,促进Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解,产生抗肝纤维化作用.     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.