同位素稀释液相色谱串联质谱法测定血清总胆固醇

目的建立同位素稀释液相色谱串联质谱（LC／MS／MS）测定血清总胆固醇的方法。方法血清样品中加入[3，4-^13 C2]-胆固醇作内标，用氢氧化钠水解血清胆固醇酯为胆固醇，用三氧化铬—硫酸氧化胆固醇为胆甾-4-烯-3，6-二酮，用LC／MS／MS分析胆固醇氧化产物，采用大气压化学电离源，用多反应监测（MRM）模式和选择离子监测（SIR）模式检测，用修正标准曲线法对血清样品进行定量。结果两种检测模式的峰面积比与胆固醇浓度的线性相关系数均大于0．9999。MRM模式测定血清总胆固醇的平均批内变异系数（CV）为0．95％（范围0．92％～0．99％），平均总CV为0．86％（0．82％～0．89％）；SIR模式平均批内CV为0．64％（0．54％～0．77％），平均总CV为0．69％（0．62％～0．81％）。测定国际或国家标准物质结果与靶值的平均偏差在MRM模式下为0．23％（0．14％～1．00％），SIR模式为0．24％（0．07％～1．27％）。结论成功建立了LC／MS／MS测定血清总胆固醇的方法，方法特异、精密、简便，可望用作血清胆固醇测定的参考方法。     

国产胆固醇酶法试剂盒的应用评价

目的采用国产酶法进行胆固醇测定。方法用2,4二氯酚(2,4DCP)、4氨基安替比林(4AAP)为色原系统进行胆固醇测定分析。对缓冲液的种类、pH及浓度进行实验选择,探讨胆酸钠、TritonX100对反应的影响。结果国产酶法平均回收率为99.13%,批内CV=0.96%～2.13%,批间CV=1.17%～2.63%,线性范围0.3～15.6mmol/L。结论国产酶法与Abell参考法相关性比较,试剂用量少、成本低,精确性和灵敏度均较高,具有多种检测功能。     

酶法测定镁离子的方法学研究

目的建立一个适合临床实验室作为常规应用的镁的酶法测定。方法对文献报告的四种镁的酶法测定的方法作了比较，选择HK—G6pDH法并对其作了某些改进，使其适合自动分析。结果本法的线性范围为0．05～3．40mmol／L：精密度：低值和高值标本的批内CV分别为2．23％和1．45％；总CV分别为3．34％和2．18％；准确度：低值质控品的测定偏差为-4．08％，中值质控品的测定偏差为1．00％和-1．05％。高值质控品的测定偏差为2．98％和0．00％；本法（y）与Xylidyl Blue法（x）比较，相关良好，回归方程y=0．9769x＋0．0066。γ^2=0．9886。结论本法的各项技术指标均较好，加之本法的特异性较好，体系温和．适合临床实验室作为常规应用。     

酶法测定镁离子的方法学研究

目的建立一个适合临床实验室作为常规应用的镁的酶法测定。方法对文献报告的四种镁的酶法测定的方法作了比较，选择HK—G6pDH法并对其作了某些改进，使其适合自动分析。结果本法的线性范围为0．05～3．40mmol／L：精密度：低值和高值标本的批内CV分别为2．23％和1．45％；总CV分别为3．34％和2．18％；准确度：低值质控品的测定偏差为-4．08％，中值质控品的测定偏差为1．00％和-1．05％。高值质控品的测定偏差为2．98％和0．00％；本法（y）与Xylidyl Blue法（x）比较，相关良好，回归方程y=0．9769x＋0．0066。γ^2=0．9886。结论本法的各项技术指标均较好，加之本法的特异性较好，体系温和．适合临床实验室作为常规应用。     

酶偶联法测定肌酐与苦味酸法的比较

目的：评价肌酐酶－氧化酶偶联法测定肌酐（以下简称酶法）。方法：同时用ROCHE公司和LABO公司的两种酶法试剂盒测定肌酐并与苦味酸法进行比较。结果：LABO酶法测定肌酐的线性范围为25μmol/L-2210μmol/L，ROCHE为49μmol/L－4420μmol/L，苦味酸法为92μmol/L－520μmol/L。LABO试剂的批内CV＜0．54％，批间CV＜2．06％，回收率为95％；ROCHE试剂的批内CV＜0．88％，批间CV＜2．30％，回收率为99％；苦味酸法批内CV＜1．13％，批间CV＜3．23％，回收率为93％。溶血、黄疸对两种酶法测定肌酐的干扰率＜4％；抗坏血酸对苦味酸法产生正干扰，当其＞0．625g/L时，干扰率≥11．2％，抗坏血酸≥1．25g/L时，对ROCHE试剂测定结果的干扰率≥5．58％；药物头孢曲松钠≥1．00g/L时，对苦味酸法产生正干扰，干扰率≥7．11％，对其它两种试剂无干扰。结论：酶法测定肌酐优于苦味酸法，可作为临床常规测定方法。同时，临床实验室需根据自己的实际情况选择合适的酶法试剂盒。     

酶法糖化血红蛋白试剂盒方法学比对评价

目的评估一种酶法测定糖化血红蛋白（HbAlc）试剂盒的性能。方法酶法测定HbAlc,评价的方法学指标为试剂盒的线性范围、不精密度、抗干扰性、回收率,并分别与免疫法和高效液相（HPLC）法进行相关及偏倚分析。结果该试剂盒的检测在4．3-12．9％呈线性;不精密度测定低、中、高值批内及批间CV在0．89％～1．43％之间,总CV在1．77-2．16％;HbAlc标准为5．5％和10．5％其回收率分别为99．0％、102．1％;干扰实验：维生素C〈500mg／L、胆红素〈400mg／L、溶血素〈5000mg／L、乳糜〈2％时,对结果无明显干扰（干扰率（±5％）。酶法HbAlc与免疫法和HPLC法的测定结果比较其回归方程分别是：Y=1．0417X-0．7187和Y=0．9881X-0．0944,相关系数均为r=0．99,P〈0．05,检验方法之间具有显著的统计学意义,经验证酶法测定HbAlc与免疫法和高效液相法的偏倚都在允许范围内。结论酶法HbAlc试剂盒在不精密度、抗干扰性、线性范围均符合临床要求,与常规方法比较相关良好偏差较小,可完全满足临床对HbAlc检测需求。     

血清尿素丙酮酸氧化酶测定新方法的研究及应用

目的建立一种血清尿素测定的新方法和临床应用。方法应用脲酶、丙酮酸氧化酶、丙酮酸激酶与色原系统2，4-二氯苯酚、4-氨基安替比林，进行血清尿素浓度的酶法测定。结果磷酸盐缓冲液最适浓度为50mmol、pH7．2，最大吸收峰为510nm，线性范围为0～42mmol／L，显色稳定。精密度：批内（n=20）CV为1．89％～3．21％，批间（n=20）CV为1．96％～3．45％，回收率为96．2％～104．2％，平均回收率为99．5％。与酶偶联速率法比较，相关系数r=0．995，回归方程Y=1．023x＋0．38，两法高度相关，正常参考值范围为儿童组2．20～8．50mmol／L，少年组2．60～8．60mmol／L，成人组2．85％～8．95mmol／L。结论本法具有高度的特异性和准确性，其操作简便、灵敏快速、标本用量少、结果稳定，适用于全自动、半自动生化分析仪，更适用于中小医院，有较大的推广使用价值。     

超微量酶法检测血清总胆固醇的实验探讨

目的 用超微量血清在微孔板内进行酶法检洲总胆固醇(TC)，分析其线性范围、准确度、精密度、回收率，并与日立7600型全自动生化分析仪进行测定比较，以探讨超微量酶法检测总胆固醇结果的可靠性。方法 采用超微量酶法，酶标生化多功能分析仪比色测定。结果 本法的线性范围达15.1mmol／L，批内变异系数(CV)为1．29％～2．45％，日间变异系数(CV)为1．95％～2．67％，回收率为99％～105％，平均102．8％，与全自动生化分析仪比较具有良好的相关性,y=1．112x-0.339，r=0．9839。结论 本法操作简单，血清、试剂用量少，检测快速，准确性及重复性好，结果可靠，利于微量检测血清总胆固醇的推广应用。     

高效液相色谱法和酶法检测糖化血红蛋白结果的比对分析

目的：为了实现实验室间糖化血红蛋白（HbA1c）结果的互认;为了流行病学调查的研究,探讨高效液相色谱法（HPLC）和酶法测 HbA1c 结果的一致性。方法参考 NCCLS 文件,使用 HPLC 的全自动糖化血红蛋白仪为比较方法,Bayer ADVIA 2400全自动生化分析仪采用酶法测定 HbA1c 作为实验方法,对检测结果进行比对分析。结果 HPLC 法线性范围为5．10％～11．55％,酶法线性范围为3．5％～14．5％。按测定值高低分为三组, HPLC 法的批内变异系数（CV）分别为3．28％、3．55％、2．79％,批间 CV 分别为3．31％、3．67％、2．84％。酶法的批内 CV 分别为2．66％、2．67％、2．34％,酶法的批间 CV 分别2．89％、3．01％、2．40％。以 HPLC 法结果为参比,酶法结果偏低,差异有统计学意义（P ＜0．01）。Y ＝1．0074X -0．0929,r 2＝0．9962,两者相关性较好。结论酶法与HPLC 法具有良好的相关性,酶法精密度更高,线性范围更宽。适用于各种类型的生化分析仪,适用于流行病学的研究,方便快捷,具有很大的市场前景。     

胆固醇脱氢酶测定血清胆固醇方法的建立

目的 评价胆固醇脱氢酶测定法在临床应用的可行性。方法 胆固醇酯在胆固醇酯酶的作用下，水解为游离胆固醇，后者被胆固醇脱氢酶还原为胆烷-4-烯-3-酮，同时B—NAD^ 还原为β-NADH H^ 。联胺能清除其反应产物胆烷-4-烯-3-酮，使反应完全。结果 回收率为99．9％和100．1％，在1．1～20．28mmol／L内为线性；批内CV为0．29％～0．39％，批间CV为0．42％～0．45％；乳酸脱氢酶无影响；与化学比色法(X1)和胆固醇氧化酶法(X2)比较，回归方程分别为Y=0．992X1—0．006，r=0．997；Y=0．989X2-0．048，r=0．999。结论 本法结果准确、可靠、易自动化。     

改良血清单胺氧化酶测定法及临床应用

目的建立一种新的血清单胺氧化酶（MAO）测定法，以提高检测MAO活力的特异性和准确性。方法用3-甲基-N-乙基（β-羟乙基）苯胺（MEHA）为色原系统进行患者血清MAO活力测定。结果对缓冲液最适浓度、pH和种类的选择非常重要，可提高灵敏度，线性范围为0～250U／L，正常值范围为30U／L内，回收率为92．4％～102．6％，精密度：批内CV=2．5％～4．0％，批间CV：3．3％～4．5％。与二硝基苯肼比色法比较，相关性良好（r=0．986）。结论本法具有高度的特异性和准确性，操作简便，灵敏快速，标本用量少，结果稳定，对肝硬化的诊断有非常重要的作用。     

酶法测定糖化血清蛋白浓度

目的：了解酶法测定糖化血清蛋白（GSP）的实验特点。方法：采用酶法测定GSP，并对其方法学进行初步研究及评价。结果：线性41．0－1829．0μmol/L，达正常值8倍；平均回收率98．2％；精密度：批内CV0．99％－1．89％，批间CV2．23％－3．41％；该法（Y）和NBT法（X）比较：Y＝0．395X＋20．7，r=0.953;干扰影响小。结论：该法线性宽，精密度好，所受干扰小，是理想的GSP测定方法。     

水基质校准液在胆固醇测定中的质量评价

目的评价水基质胆固醇校准液在胆固醇测定中的质量可靠性。方法取不等量的结晶胆固醇加入到含有去氧胆酸钠的生理盐水中（150g去氧胆酸钠溶解于1L0．9％的生理盐水），然后应用于胆固醇氧化酶法测定。结果去氧胆酸钠不干扰测定，本法使用结晶胆固醇作校准品，由去氧胆酸钠溶解于生理盐水中，与罗氏公司（下称罗氏）、日本第一化学株式会社（下称一化）的血清基质的胆固醇校准品比较，具有良好的相关性（与罗氏相关性：n—0．9864，a1=0．9912；与一化相关性：r2=0．9796，a2=1．032）。此溶液10d内测定的日间差异很小（1．00g／L时CV为2．9％；2．00g／L时CV为2．5％；4．00g／L时CV为1．8％），浓度高达8．00g／L时仍保持良好的线性，溶液的黏度相似于血清，该溶液贮于室温1年仍保持稳定。结论以去氧胆酸钠作溶解剂的水基质胆固醇校准品具有良好的稳定性，适用于酶法测定胆固醇含量。     

化学发光法检测血清甲胎蛋白的方法学评价

目的对化学发光免疫分析法（CUA）测定甲胎蛋白（AFP）进行方法学评价。方法用CLIA测定178例血清的AFP值，同时也用酶联免疫吸附试验（ELISA）对AFP进行测定。结果CLIA测定AFP的灵敏度为1．3ng／mL，低、中、高浓度的批内CV分别为4．2％、2．3％、1．6％；批间CV分别为4．8％、3．2％、2．5％。回收率为96％～104％，理论值与实测值的回归方程为Y=0．1427＋0．9992X，相关系数r=0．9900（P〈0．001）。ROC曲线显示CLIA测定的敏感性和特异性均在90％以上，曲线下面积为0．992，显著高于ELISA法（P〈0．01）。结论CLIA是目前测定AFP较好的方法，适用于临床对AFP进行检测，可对原发性肝癌进行明确诊断。     

磁酶免法非峰值波长测定泌乳素的可行性探讨

目的 探讨磁分离酶免法采用非峰值波长来测定血清泌乳素。方法 由于550nm峰值吸光度（PA）容易超出仪器测量范围，峰值吸光度全部改用492nm非峰值吸光度（OA）乘以5倍进行转换。结果 PMOA观测值为4．42—4．45．AP1．8测得的准曲线拟合度偏差标为-14．3—15．5％。APO测得的准曲线拟合度偏差为-6．3％～3．7％，批内CV2．8％～4．9％，批间CV4．2％-7．0％，平均回收率98．9％，与荧光酶免法（FEIA）线性相关良好（r=0．994）。结论 磁酶免法非峰值波长测定PRL的精密度和准确度均能满足临床的要求。     

电极法与酶法测定血清总二氧化碳的实验对比

目的评价电极法与酶法测定血清中总二氧化碳（TCO2）的可靠性及临床应用，为临床方法的选择和实验结果的评价提供理论依据。方法依据美国国家临床实验室标准委员会（NC—CLS）有关文件对酶法与电极法测定血清中TCO2进行相关性比较以及对两种测定方法的线性、精密度进行评价。结果酶法与电极法相关性比较，相关系数r=0．9811，预期相对偏差在15mmol／L时为-1．30％，在25mmol／L时为0．94％，在50mmol／L时为2．62％。酶法与电极法线性范围较宽，线性回归方程分别为Y=0．9814X-1．4247和Y=0．9871X-0．6005，相关系数均为r=0．9997。两种方法的精密度均很好，酶法与电极法批内及总不精密度（用CV表示）均小于5．3％。结论酶法与电极法测定血清中的TCO2的相关性、线性、精密度均很好，具有可比性，均适用于临床实验室检测，各实验室可根据自己的条件选择不同的检测方法。     

液体单试剂酶法测定血清碳酸氢根

目的建立一种稳定的单试剂酶法测定血清碳酸氢根（HCO3^-）。方法利用自配单试剂建立了两点法的检测方法，可满足全自动和手工测定，用Bayer 1650生化仪对本方法进行方法学评价。结果本法的线性范围可达50mmol／L，批内变异系数（CV）为2．48％，批间CV为3．24％，平均回收率102．8％，与血气分析仪（X）相关良好，Y=1．019X-0．745，r=0．9903，黄疸、脂血、溶血标本对结果几乎无影响，健康人静脉血HCO3^-浓度为21．5～32．3mmol／L。结论本法操作简便、反应特异、灵敏准确、试剂较稳定，适用临床检测。     

高压液相层析法与酶法检测糖化血红蛋白的比较

目的对高压液相层析（HPLC）法与酶法检测糖化血红蛋白进行方法学比较。方法高压液相层析法和酶法测定糖化血红蛋白进行线性范围、精密度、相关性的分析：以探讨酶法检测糖化血红蛋白结果的准确性和可靠性。结果高效液相色谱法（HPLC法）与酶法的线性范围分别为4．4～16．7％和1．8～15．2％,批内、批间的变异系数（Cy）均〈10％。酶法测定糖化血红蛋白的结果与高压液相层析法测定结果差异无统计学意义（P〉0．05）;回归方程Y=0．17＋0．9948X（y=0．9948）。结论酶法与HPLC法相比,呈良好的相关性．并有更高的精密度．可以作为HPLC的替代方法用于糖化血红蛋白的检测。     

血清钠的酶学检测

使用日立7170生化仪，对德国宝灵曼公司的酶法测Na 试剂盒进行一系列检测，此酶法是根据依赖Na 激活于β-半乳糖苷酶活性，推算Na 的含量。经实验表明，此方法反应较灵敏，Na 为140mmol／L的吸光度变化为0．13△A／min（已减试剂空白）。批内批间CV分别为1．35％和2．4％，酶法与火焰光度法及离子选择电极法比较相关良好，相关系数均大于0．95，t检验P＞0．05，无显著性差异。线性范围较宽在75～200mmol／L内，高浓度胆红素、三酸甘油酯、NH4 对此法无影响。此法试剂在10℃仪器内可稳定2w以上。     

直接清除法测定高密度脂蛋白胆固醇研究探讨

目的建立一种测定高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的直接清除方法。方法血清中乳糜微粒、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白在试剂Ⅰ中反应促进剂作用下形成可溶性复合物,表层游离的胆固醇在胆固醇氧化酶（CHOD）、过氧化物酶（POD）等作用下被消除。在试剂Ⅱ中特殊选择性表面活性刺作用下,高密度脂蛋白颗粒释放的胆固醇在CHOD、胆固醇酯酶（CHER）、POD、4-氨基安替比林（4-AAP）等作用下发生颜色反应,HDL-C的浓度与呈色的深浅呈正比,应用美国临床实验室标准化委员会评估方案对该法进行评价。结果该法的线性可达5mmol／L（r=0．9982）,批内变异系数（CV）为1．8％～2．6％,批间CV为2．4％～3．4％,回收率为98．9％～102．4％。在胆红素小于400μmol／L、三酰甘油小于12 mmol／L、血红蛋白小于10g／L的情况下,对测定结果无显著影响,与日本第一化学药品株式会社试剂相关性良好。结论该方法设计合理,灵敏度高,操作简便,线性、精密度好,抗干扰能力强,符合临床使用要求,是一种值得广泛推广应用的方法。