依托泊苷壳聚糖胶束的制备及壳聚糖促进依托泊苷肠吸收作用的研究

目的 制备依托泊苷壳聚糖胶束,并研究壳聚糖对依托泊苷肠吸收的促进作用。方法 用透析法制备依托泊苷壳聚糖胶束,建立依托泊苷HPLC含量测定方法,测定了其包封率与载药量;采用大鼠在体肠循环实验,研究不同剂量壳聚糖对依托泊苷全肠段和各个肠段吸收的影响。结果 壳聚糖胶束平均粒径为139.5 nm,多分散系数为0.569;依托泊苷标准曲线为A=8 436.8C-4 963.8,r=1.000 0,日内、日间精密度符合要求;包封率为（47.3±2.84）%,载药量为（1.10±1.27）%;随着壳聚糖浓度的增加,依托泊苷在全肠段的单位面积吸收量有不同程度的增加;壳聚糖对依托泊苷的吸收促进作用存在着肠道特异性,作用大小顺序：回肠 >空肠 >十二指肠。结论 在十二指肠、空肠和回肠,壳聚糖都不同程度促进了药物的吸收,且在空肠和回肠有显著性的影响。     

多潘立酮有机溶剂残留量的检测方法

目的 建立气相色谱法测定多潘立酮中二氯甲烷、氯仿、甲苯、二甲基甲酰胺的残留量的方法。方法 以1,2一二氯乙烷作为内标物,二甲亚砜作为溶剂,采用SE-54毛细管柱(30 m×0.53 mm×1.0μm);氢火焰离子化检测器(FID)温度240℃;柱温60℃;汽化室温度200℃;分流比10∶1;灵敏度10°;进样体积1.0μl。结果 定量测定的二氯甲烷、氯仿、甲苯、二甲基甲酰胺在定量限～150%范围内峰面积与进样浓度呈良好线性关系,相关系数均大于0.9990,回归方程分别为:A=0.0484C+0.01730,r=0.9993;A=0.0268C-0.00587,r=0.9992;A=0.3260C+0.00215,r=0.9997;A=0.0761C+0.00855,r=0.9992。平均回收率分别为102.7%、98.0%、98.9%、99.7%。结论 本法准确、快速,可作为该品种4个有机溶剂残留量的质量控制方法。     

啤酒花中黄酮类成分的含量分析

目的 建立啤酒花中总黄酮和黄腐酚含量测定方法,对来自不同产地和品种的29个啤酒花样品中的总黄酮和黄腐酚进行测定。方法 用芦丁-AlCl₃分光光度法测定总黄酮的含量;用HPLC-UV法测定黄腐酚的含量。色谱条件：色谱柱为Dikma Technologies Diamonsil C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相为乙腈-1%冰醋酸梯度洗脱,流速为1.0 ml/min;柱温为25℃;检测波长为370 nm。结果 总黄酮回归方程为A=30.345C+0.016 8,r=0.999 9;黄腐酚回归方程为A=55 446C+9 040.5,r=0.999 9,表明总黄酮在20.2~404.0 μg/ml,黄腐酚在2.152~43.040 μg/ml范围内,线性关系良好,两者精密度和重复性RSD均<2%,平均加样回收率分别为102.71%和100.21%。结论 不同种类的啤酒花之间,总黄酮和黄腐酚含量存在巨大差异,进口啤酒花优于国产。     

RP-HPLC法测定田七痛经胶囊中阿魏酸、藁本内酯、欧当归内酯A

目的 建立高效液相色谱法测定田七痛经胶囊中阿魏酸、藁本内酯、欧当归内酯A的方法。方法 选用Thermo Acclaim C₁₈色谱柱,Thermo SCIENTIFICSyncronis C₁₈色谱柱;检测波长为321、280 nm;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃结果 阿魏酸、藁本内酯、欧当归内酯A的质量浓度与峰面积分别在1.12～112.30、1.33～132.60、0.96～95.50 μg/mL呈良好的线性关系;回归方程分别为Y=46 335 540 X+44 186.71（r=0.998）,Y=14 514 060 X+8 715.27（r=0.999）,Y= 22 031 250 X+16 472.10（r=0.999）。结论 该方法准确,简便,灵敏,可作为田七痛经胶囊质量控制的方法。     

赖氨酸磷酸氢钙片中磷酸氢钙的含量测定

目的 建立赖氨酸磷酸氢钙片中磷酸氢钙的含量测定方法。方法 采用原子吸收分光光度法,在422.7 nm波长处测定样品吸光度,采用标准曲线法计算磷酸氢钙的含量。结果 磷酸氢钙在25.88~77.63 µg·mL^-1浓度范围内,与吸光度值呈良好的线性关系A=0.005 8C+0.038 2 (r=0.999 05),加标平均回收率为99.39% (RSD=1.2%, n=9)。结论 该方法专属性强,准确度好,简单易行,可用于赖氨酸磷酸氢钙片中磷酸氢钙的含量测定。     

载PROTAC分子白蛋白纳米粒的构建及对胶质瘤细胞NAD+代谢的抑制

目的 制备载蛋白降解靶向嵌合体（PROTAC）分子的白蛋白纳米粒并优化处方，考察纳米粒对胶质瘤细胞增殖活性及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD⁺）代谢的抑制。方法 以热驱动法制备载NPT-B2的白蛋白纳米粒并表征，建立NPT-B2的高效液相色谱（HPLC）检测方法，以CCK8法和蛋白免疫印迹法分别考察NPT-B2和白蛋白纳米粒（B2-BSA-NPs）对胶质瘤细胞的增值活性抑制作用，及肿瘤细胞限速酶-烟酰胺磷酸核糖转移酶（NAMPT）的降解。结果 HPLC方法线性良好，精密度、回收率符合测定要求。纳米粒粒径为55.48 nm、电位-12.9 mV，包封率94.74%，载药量8.61%。NPT-B2对胶质瘤细胞的IC₅₀为61.16 nmol/L，同时具有NAMPT降解作用。B2-BSA-NPs对胶质瘤细胞的IC₅₀为41.21 nmol/L，对NAMPT具有非常显著降解效果。结论 构建了载PROTAC分子的白蛋白纳米粒，优化处方提高药物包封率，改善PROTAC分子水溶性差的问题，纳米粒对胶质瘤细胞增殖活性及NAD⁺能量代谢有显著抑制作用。     

盐酸阿霉素聚乳酸纳米粒的制备及大鼠体内药动学研究

目的 优化盐酸阿霉素聚乳酸纳米粒（DOX-PLA-NPs）的制备工艺,并对其理化性质、体外释放及大鼠体内药动学进行研究。方法 采用改良的复乳-溶剂挥发法制备DOX-PLA-NPs,正交设计优化其处方工艺,对其纳米粒形态、粒径、Zeta电位、包封率与载药量进行测定。以DOX原药为对照组,考察DOX-PLA-NPs的体外释药特性及大鼠尾静脉给药后的体内药动学参数。结果 DOX-PLA-NPs外观圆整,平均粒径为（125.67±3.80） nm、Zeta电位为（-35.97±1.58） mV、包封率和载药量分别为（81.23±1.46）%,（10.29±0.63）%。体外释放结果显示,DOX经纳米粒包裹后,具明显的缓释作用。DOX原药和纳米粒的体内药动学过程均符合开放式二室模型,t_1/2β分别为（1.15±0.175） h、（6.43±2.12） h,CL分别为（174.76±47.22） h·L^-1、（30.68±11.86） h·L^-1,AUC_0→t分别为（6.01±1.61）μg·h·L^-1、（36.04±13.72）μg·h·L^-1。结论 制备的盐酸阿霉素聚乳酸纳米粒粒径较小、包封率较高,具明显的缓释作用,并能提高药物的生物利用度。     

季铵化壳聚糖胰岛素纳米粒的制备、处方优化及其初步药效学实验

目的 采用正交设计试验优化载胰岛素季铵化壳聚糖纳米粒的处方工艺,并初步考察其降糖效果。 方法 用离子交联法制备载胰岛素的季铵化壳聚糖纳米粒,用正交试验确定其最佳处方工艺。用透射电子显微镜观察纳米粒的表面形态;用粒径/Zeta电位仪测定纳米粒的粒径和Zeta电位;用高效液相色谱(HPLC)法测定纳米粒的包封率、载药量及体外释放情况。对糖尿病大鼠皮下注射给药,对其药效学进行初步考察。 结果 制得的纳米粒呈球形,分布均匀;平均粒径(63.26±1.88) nm;Zeta电位(33.1±0.3) mV;包封率(37.92±2.11)%;载药量(5.42±0.3)%;24 h累计释放率63.83%。皮下注射给药8 h,糖尿病大鼠血糖较单纯注射胰岛素组下降平缓,且药效持久。 结论 优化后的载胰岛素的季铵化壳聚糖纳米粒形态较好、粒径较小,为研究胰岛素的新型给药途径奠定了基础。     

高效液相色谱法测定新保肾片中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量

目的 建立新保肾片中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量测定方法,为生产质量提供保障。方法 采用高效液相色谱法测定,色谱柱为Lichrospher-C₁₈柱(250 mm ×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇:0.1%磷酸溶液(7030),流速为1.0 ml/min,柱温为35 ℃,检测波长为254 nm。结果 芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚分别在2.30~18.4 μg/ml(r=1.0)、2.930~23.44 μg/ml(r=1.0)、5.00~40.0 μg/ml(r=1.0)、14.870~118.96 μg/ml (r=0.999 8)、7.410~59.28 μg/ml(r=0.999 9)范围内有良好的线性关系,平均回收率分别为100.16%、102.91%、99.76%、100.32%、100.44%,RSD分别为1.58%、1.27%、1.67%、1.33%、1.03%(n=9)。结论 该方法准确易行,便于质量控制。     

复方首乌藤合剂的薄层鉴别和总黄酮的含量测定

目的 建立复方首乌藤合剂的质控方法。方法 采用薄层色谱法对合剂中的首乌藤、合欢皮和五味子进行定性鉴别。以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法测定总黄酮含量。结果 各供试品色谱中,在与对照品及对照药材色谱相应的位置上显相同颜色斑点,色谱清晰,附近无杂质斑点干扰。芦丁在9.12~27.36 μg/ml范围内与吸光度呈良好的线性关系,线性回归方程为A =0.034 55 C-0.110 34（r=0. 999 2）,平均加样回收率为101.0%（RSD=1.58%）。结论 该方法操作简便、快速、有效、灵敏、准确、重现性好、专属性强,可作为复方首乌藤合剂的质量控制方法。     

成骨细胞的功能与损伤和骨质疏松的防治

骨质疏松是一种全身性骨骼疾病,导致骨折风险增加。成人的骨量通过破骨细胞的骨吸收和成骨细胞的骨形成作用来维持动态平衡,治疗骨质疏松症的理想策略是抑制破骨细胞的骨吸收和/或增强成骨细胞的骨形成功能。目前针对保护成骨细胞及增强其功能的骨质疏松疗法相对较少。因此,本文针对成骨细胞相关功能蛋白、各种细胞损伤机制（内质网应激、氧化应激、机械过载、微小RNA和长链非编码RNA的影响等）及骨质疏松的治疗与预防作一综述,以期为针对增强成骨细胞功能的骨质疏松治疗策略提供新思路。     

Comparison of formation of thiolactones and active metabolites of prasugrel and clopidogrel in rats and dogs

1. Prasugrel and clopidogrel are antiplatelet prodrugs that are converted to their respective active metabolites through thiolactone intermediates. Prasugrel is rapidly hydrolysed by esterases to its thiolactone intermediate, while clopidogrel is oxidized by cytochrome P450 (CYP) isoforms to its thiolactone. The conversion of both thiolactones to the active metabolites is CYP mediated. This study compared the efficiency, in vivo, of the formation of prasugrel and clopidogrel thiolactones and their active metabolites.

2. The areas under the plasma concentration versus time curve (AUC) of the thiolactone intermediates in the portal vein plasma after an oral dose of prasugrel (1 mg kg^?1) and clopidogrel (0.77 mg kg^?1) were 15.8 ± 15.9 ng h ml^?1 and 0.113 ± 0.226 ng h ml^?1, respectively, in rats, and 454 ± 104 ng h ml^?1 and 23.3 ± 4.3 ng h ml^?1, respectively, in dogs, indicating efficient hydrolysis of prasugrel and little metabolism of clopidogrel to their thiolactones in the intestine.

3. The relative bioavailability of the active metabolites of prasugrel and clopidogrel calculated by the ratio of active metabolite AUC (prodrug oral administration/active metabolite intravenous administration) were 25% and 7%, respectively, in rats, and 25% and 10%, respectively, in dogs.

4. Single intraduodenal administration of prasugrel showed complete conversion of prasugrel, resulting in high concentrations of the thiolactone and active metabolite of prasugrel in rat portal vein plasma, which demonstrates that these products are generated in the intestine during the absorption process.

5. In conclusion, the extent of in vivo formation of the thiolactone and the active metabolite of prasugrel was greater than for clopidogrel’s thiolactone and active metabolite.

     

PTEN和DNA含量与非小细胞肺癌侵袭转移的关系探讨

目的 研究非小细胞肺癌(NSCLC)组织中抑癌基因PTEN的表达和DNA含量与NSCLC侵袭、转移的关系.方法 采用免疫组织化学SP方法检测PTEN在78例肺癌标本中的表达,并用流式细胞术检测30例肺癌标本中DNA含量.结果:肺癌标本中PTEN蛋白总缺失率为42.3%,有淋巴结转移组和无淋巴结转移组肺癌表达缺失率分别为52.1%和26.7%(P＜0.05),其表达缺失率随TNM分期增加而上升,分期越晚表达缺失率越高.PTEN缺失率高者生存时间短.DNA指数(DI)的分布范围在1.04～1.93.异倍体肿瘤24例,DI值随TNM分期增加而增加(P＜0.05),与淋巴结转移呈正相关.结论 肺癌组织中PTEN的表达与肺癌淋巴结转移有显著相关性,肺癌细胞DNA含量与肺癌TNM分期及淋巴结转移密切相关.检测PTEN蛋白表达和DNA含量将有助于判断肺癌的转移及预后.     

阿立哌唑与利培酮治疗自闭症谱系障碍与注意缺陷多动障碍共病患儿的疗效与安全性评价

目的：评价阿立哌唑与利培酮治疗自闭症谱系障碍（ASD）与注意缺陷多动障碍（ADHD）共病患儿的疗效与安全性。方法：选取在某院精神科治疗的ASD和ADHD共病患儿68例,根据随机数字表法将患儿分为阿立哌唑组（n=34）和利培酮组（n=34）。阿立哌唑组患儿接受起始剂量为5 mg·d^-1的阿立哌唑片口服治疗,最终剂量增加至15 mg·d^-1。利培酮组患儿接受起始剂量为1 mg·d^-1的利培酮片口服治疗,最终剂量增加至2 mg·d^-1;2组患儿均治疗12周。在基线（T₀）、治疗6周（T₁）与12周（T₂）时,采用注意缺陷/多动评定量表（ADHD-RS）评价患儿总体ADHD症状变化情况;采用康纳斯行为评定量表（CRSR）教师用量表多动因子（CRSR-I）评价患儿多动症的改善情况;采用CRSR不注意缺陷-冲动因子（CRSR-H）评价患儿注意力缺陷的改善情况;采用临床整体印象-严重程度量表（CGI-S）及儿童总体评估量表（C-GAS）评分评价患儿整体功能。对患儿的相关临床指标进行常规监测,比较2组患儿药物不良事件与安全性。结果：与T₀时比较,阿立哌唑组患儿T₁与T₂时,ADHD-RS、CRSR-I、CRSR-H与CGI-S评分均显著降低（均P<0.05）,C-GAS评分显著提高（P<0.05）。利培酮组患儿T₂时,ADHD-RS、CRSR-I、CRSR-H与CGI-S评分均显著降低（均P<0.05）,C-GAS评分显著提高（P<0.05）。2组患儿的ADHD症状显著改善,多动症状与不注意缺陷-冲动症状显著改善,患儿的整体功能也显著改善。2组患儿主要的不良事件是食欲增加、体质量增加与嗜睡,但均没有发生严重的不良事件。T₂时,利培酮组患儿催乳素水平显著提高（t=9.619,P<0.001）,其他临床指标没有显著性差异（均P>0.05）。结论：阿立哌唑和利培酮能够通过减少ASD和ADHD共病患儿的注意力涣散和多动症症状来改善患儿整体功能,具有较高的疗效、安全性,值得临床推广应用。     

Whole-body retention of mercury and selenium and histopathological and morphological studies of kidneys and liver of rats exposed repeatedly to mercuric chloride and sodium selenite

Distribution and retention of mercury and selenium was studied in rats exposed repeatedly to HgCl₂ injections (0.5 mg Hg/kg to the tail vein every other day) and intragastrically to Na₂SeO₃ (0.5 mg Se/kg every day), applying combined and separate administration of these metals for 2 weeks. Whole-body retention of mercury in the presence of selenium was augmented by 20% and that of selenium in the presence of mercury by 4% with respect to the administered dose. Combined administration of mercuric chloride and sodium selenite brought about damage to the epithelial cells of renal proximal convolutions and formation of protein casts in their lumen. These changes had the same pattern as those induced by administration of mercuric chloride alone, but the intensity was lower. Submicroscopic studies revealed that repeated combined administration of sodium selenite and mercuric chloride did not completely abolish the mercury-induced mitochondrial swelling and contributed to chromatin destruction in the hepatocyte nuclei.This work was supported by the Section of Medical Sciences of the Polish Academy of Sciences (Agreement 537/VI)     

阿立哌唑与利培酮治疗痴呆精神行为症状的疗效及安全性比较

目的观察阿立哌唑和利培酮治疗老年痴呆精神行为症状的疗效及安全性。方法采用随机对照研究,将具有精神行为症状的痴呆患者68例完全随机分为阿立哌唑组及利培酮组,各34例。阿立哌唑组患者服用阿立哌唑,起始剂量2．5mg／d,最大剂量不超过15mg／d;利培酮组患者口服利培酮,起始剂量0．5mg／d,最大剂量不超过3mg／d。疗程均为8周。治疗前和治疗第2、4、8周末采用痴呆病理分析评定量表（BEHAVE—AD）评定疗效,用副反应量表（TESS）评定不良反应,并于入组时和治疗第8周末分别检测2组患者空腹血糖、餐后2h血糖、TC、TG、LDL—C、HDL—C及体重。结果阿立哌唑组和利培酮组患者治疗2、4、8周后BEHAVE—AD评分均明显低于治疗前[阿立哌唑组：（14．8±4．2）、（10．2±3．6）、（6．8±2．8）分比（16．4±4．6）分;利培酮组：（15．2±3．9）、（11．8±3．8）、（7．2±3．0）分比（17．2±5．O）分,P〈0．05或P〈0．01]。2组患者间治疗前及治疗后BEHAVE—AD评分比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。2组不良反应发生率均为8．8％（3／34）,差异无统计学意义（P〉0．05）。利培酮组治疗8周末体重较治疗前增加明显[（71±6）kg比（66±6）kg,P〈0．05],TG及LDL—C升高[分别为（1．62±0．46）mmol／L比（0．96±0．29）mmol／L．（3．82±0．86）mmol／L比（3．08±0．74）mmol／L,而阿立哌唑组则改变不明显（均P〉0．05）。结论阿立哌唑治疗老年痴呆精神行为症状总体疗效、安全性与利培酮相当,但阿立哌唑对患者血糖、血脂及体重影响小于利培酮。     

军地药品招标模式利弊分析及对军队药品招标的启示

目的分析现阶段全军统筹药材网上集中采购和地方基本药物招标采购实施情况,探索建立具有军队特色的药品招标模式。方法通过文献收集、实地调研和资料分析等方法,对军队和地方省市药品招标模式利弊进行分析。结果全军统筹药材网上集中采购在运行中存在一定问题,各省市基本药物招标有一定借鉴价值。结论建议总部组织专家,建立统一规范的药品质量评分指标体系和相关落实措施。