荧光酶免定量测定甲胎蛋白的临床评价

目的分析荧光酶免定量测定甲胎蛋白的临床价值。方法将混合的血清用TRFIA,FEIA和ELISA方法检测AFP,记录数据并分析精密度。其余45份血清分别用TRFIA,FEIA和ELISA方法检测AFP。选择高值血清,进行倍比稀释,重复测定3次,分析实际值的线性程度。结果 TRFIA与FEIA、ELISA的r值为0.937和0.978,差异无统计学意义(P>0.05)。TRFIA检测精密度优于FEIA,优于ELISA。TRFIA法检测线性范围为1.2-1200ng/ml,FEIA法为0.6-480ng/ml,ELISA法为5-200ng/ml。结论 TRFIA与FEIA、ELISA法均可用于临床实验室检测AFP。     

双抗原夹心法ELISA在肾综合征出血热诊断中的应用

目的建立一种敏感、特异的检测肾综合征出血热(HFRS)血清总抗体的双抗原夹心法ELISA。方法应用重组汉坦病毒(HV)NP抗原e1.3S作为包被抗原和e6-119-HRP作为酶标抗原建立双抗原夹心法ELISA,检测血清总抗体,并与间接免疫荧光法(IFA)相比较。结果共检测188份人血清和378份鼠血清标本,2种方法的总符合率为97.70%。以IFA为参照标准,双抗原夹心法ELISA的敏感性为97.54%,特异性为97.87%。结论双抗原夹心法ELISA检测HFRS血清总抗体具有很高的敏感性和特异性,适用于大规模的流行病学调查。     

应用金免疫层析技术检测猪瘟抗体的研究

用金标免疫层析技术测试30份标准阳性血清和18份标准阴性血清,结果阳性、阴性符合率100%。用该方法与ELISA试剂、dot—ELISA试剂及正向间接血凝进行比对试验检测血清样品205份,结果阳性率ELISA为86.8%,金标层析法为85.4%,dot—ELISAO 81.5%,正向间接血凝为58.5%,结果显示该方法特异性强,敏感性高,操作简单,使用方便。既可用血清,也可以用全血测猪瘟抗体,可广泛应用于猪场和个体养猪户现场检测。     

化学发光免疫分析法与酶联免疫法检测艾滋病抗体的对照研究

目的对照研究化学发光免疫分析法(CLIA)与酶联免疫法(ELISA)检测艾滋病(HIV)抗体的效果,以便探究CLIA检测HIV抗体的可行性。方法于2013年2月至2015年3月随机抽查我市3 542例艾滋病高危人员,采集血清,分别采用CLIA与ELISA法检测血清中的HIV抗体,并采用蛋白印迹检测法对检测结果进行确证。结果 ELISA法检测显示血清标本为阳性的56份,阳性率为1.58%,而CLIA检测阳性61份,阳性率为1.72%;3 542份血清标本中,11份标本ELISA法与CLIA法检测结果不一致;CLIA法的阳性预测值为96.72%,检测灵敏度为98.33%,特异度为99.94%;ELISA法的阳性预测值为96.43%,检测灵敏度为90.00%,特异度为99.94%;ELISA法与CLIA法在阳性预测值、检测灵敏度、特异度等指标上无显著的差异性(P>0.05)。结论 CLIA的灵敏度、特异度、准确性高,可用于HIV抗体检测。     

应用纯化重组外膜脂蛋白LipL32检测钩端螺旋体病抗体

目的 建立以纯化重组外膜脂蛋白LipL32为基础的钩端螺旋体(钩体)病抗体的检测方法 .方法 以摹因重组技术获取重组钩体外膜脂蛋白LipL32,以该蛋白为抗原,分别使用间接法和夹心法ELISA应用于不同人和鼠血清的检测,检测结果 与钩体显微镜凝集试验(MAT)进行比较,同时人血清的检测结果 还与进口试剂盒比较.结果 纯化的重组蛋白检测9例钩体确诊病例双份血清标本,三种ELISA法的检出率与MAT无明显差别.检测45份MAT阳性标本,间接法ELISA敏感性为71.11%(32/45),夹心法ELISA为80.00%(36/45),而进口 ELISA阳性13份,占28.89%(13/45),25份可疑占55.56%(25/45).特异性检测,MAT阴性血清69份,间接和夹心法ELISA特异度均为97.10%(67/69),其中检测门诊体检血清43份,间接和夹心法ELISA均为阴性,进口ELISA检测14份,也为阴性.检测非钩体发热病例血清标本16份,间接和夹心法ELISA共检出2份阳性,进口ELISA则是1份阳性,12份可疑.检测梅毒螺旋体质控阳性血清10份,四种方法 均为阴性.重组蛋白检测鼠血清标本274份,夹心法ELISA的敏感性为86.75%(131/151),特异性为99.19%(122/123),符合率为92.34%(253/274),与MAT检测结果 相符.结论 重组LipL32蛋白具有结合活性,可应用于钩体血清抗体的检测,其中夹心法ELISA对鼠血清钩体抗体的检测显示较好的敏感性和特异性,适用于钩体病现场血清流行病学大样本调查.     

检测血清幽门螺杆菌细胞空泡毒素抗体的间接ELISA法初步建立

目的:以重组细胞空泡毒素(VacA)蛋白为抗原初步建立检测血清VacA抗体间接ELISA法,为制备检测Hp毒株感染的试剂盒奠定基础.方法:Ni-NTA2 树脂纯化重组VacA蛋白,用重组蛋白免疫兔,Helico Blot试剂盒检测兔血清VacA抗体以鉴定其免疫原性.Western blot检测其抗原性.并以纯化的重组蛋白为抗原,建立检测血清VacA抗体间接ELISA法,以Helico blot试剂盒为标准,确定该方法的特异性与敏感性.结果:以重组蛋白为抗原建立的检测血清VacA抗体的间接ELISA法,敏感性与特异性分别是93.1%和92.5%.结论:以重组蛋白为抗原初步建立检测血清VacA抗体的间接ELISA法,敏感性、特异性高,为制备商品化的试剂盒奠定了基础.     

MEIA法测定HBV血清标志物的临床应用意义

目的通过与酶联免疫吸附试验(ELISA)的比较,了解微粒子酶免疫分析法(MEIA)对乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物的检测性能。方法分别用MEIA法和ELISA法对HBV感染者的血清标志物(HBsAg、HBeAg、抗HBc和抗HBe)进行检测。结果1140例患者血清HBV标志物检测,MEIA法阳性率为:HBsAg94.00%,HBeAg46.75%,抗HBc97.96%,抗HBe61.41%;ELISA法阳性率为:HBsAg91.89%,HBeAg36.14%,抗HBc93.26%,抗HBe18.11%;MEIA法阳性率高于ELISA法,其中对HBeAg和抗HBe的检测,两种方法差异有高度显著性(P<0.01)。与MEIA法比较,ELISA法检测HBsAg的相对灵敏度达97.46%,抗HBc为94.93%,HBeAg为73.41%,抗HBe最低,为41.73%。对一些低滴度的HBeAg/抗HBe的HBV感染者,ELISA法检测可出现假阴性。结论对于血清HBV标志物的检测,MEIA法和ELISA法均有较高的特异性,但MEIA法敏感性优于ELISA法。     

南定病毒标准血清制备及间接ELISA检测方法的建立

目的 制备南定病毒(NDiV)标准血清,建立ELISA检测方法,为在人群中监测南定病毒感染状况提供方法。 方法 用南定病毒感染3周龄SPF级BALB/c小鼠,分别在0、7、14 d以腹腔注射的方式免疫SPF级6~8周龄BALB/c小鼠,免疫血清用IFA法进行鉴定;南定病毒感染C6/36细胞,制备ELISA抗原,确定酶结合物、抗原和标准阳性血清的最佳工作浓度,建立南定病毒ELISA检测方法,进行敏感性、特异性、重复性和稳定性实验。 结果 制备南定病毒免疫血清,以IFA测定血清效价为1:320,与呼吸道合胞病毒、腺病毒均无交叉反应;建立了ELISA检测方法,确立了各种试剂的最佳工作浓度,其中酶结合物最佳工作浓度为1:10 000,抗原为2.3 μg/ml,阳性参考血清为1:200;ELISA检测灵敏度为1:3 200。板内特异抗原、正常抗原平均变异系数为4.56%和5.17%,板间为3.38%和6.64%。稳定性实验相对偏差均小于20%。 结论 本研究制备的南定病毒免疫血清可作为血清学检测方法中的标准质控血清;建立的ELISA方法重复性、稳定性好,敏感性和特异性强,可用于南定病毒血清抗体检测。     

微量酶联免疫吸附试验检测白喉毒素抗体的初步应用

本文报道了ELISA定量检测血清白喉毒素抗体的方法。经测定43名儿童血清ELISA滴度与锡克氏试验结果比较,锡克氏试验阳性与阴性血清的ELISA平均滴度分别为1:82.0及1:219.9,以ELISA滴度 ≥ 1:100及<1:100表示有或无免疫力,则与锡克氏试验的符合率为70%。我们对粗制毒素进行了纯化,用以作为抗原可进一步提高试验的敏感性。实验证明ELISA的特异性、敏感性和重复性均好,而且只需微量(10微升)血清,操作简便、为流行病学调查提供一个新的定量检测方法,可用以替代锡克氏试验。     

ELISA检测广东省各地鼠形动物SARS特异性抗体的初步研究

目的　了解广东省各地鼠形动物血清SARS冠状病毒特异性IgG抗体水平 ,为探讨鼠形动物尤其是家鼠类媒介生物 ,与SARS流行是否存在相关性提供参考。方法　在广东省各地与SARS相关或被认为可能相关的场所诱捕鼠形动物 ,留取血清 ,用葡萄球菌A蛋白 酶联免疫吸附实验 (SPA ELISA)及常规ELISA检测SARS冠状病毒特异性IgG抗体水平。 结果　在广东省各地共获取鼠形动物 (包括褐家鼠、黄胸鼠、小家鼠及臭 )血清 193份 ,用SPA ELISA检测 ,7份特异性抗体阳性 ,均为褐家鼠或黄胸鼠 ,阳性率 3 .6% ;其中 13 9份褐家鼠、黄胸鼠血清用常规ELISA重复检测 ,检出阳性 18份 ,阳性率 12 .9% ;SPA ELISA检测阳性者中 5份用常规法复检 ,4份仍为阳性 ;所有阳性者均来自广州、佛山、深圳 3地。结论　在广东省各地捕获的鼠形动物中 ,血清SARS冠状病毒特异性IgG抗体阳性者均为褐家鼠或黄胸鼠 ,阳性者的地域分布似乎与广东省SARS流行情况存在一定的相关性 ;SPA ELISA法检测Rats类家鼠血清SARS冠状病毒特异性IgG的敏感性可能低于常规ELISA法 ,而检测阳性者与SARS冠状病毒接触或感染的相关程度还需进一步的研究证明。     

巴楚县2001年新疆出血热疫情的血清学证实

目的：以血清流行病学方法调查新闻出血热（XHF）病人，易感人群和主要宿主动物中疾病的感染情况。方法：分别收集2001年4－6月新疆巴县临床诊断为XHF的病人血清，易感人群血清和主要宿主动物的血清，用研制的诊断试剂以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测XHF特异性IgG和IgM抗体；用抗原捕获ELISA检测XHF病毒抗原。结果：病人血清IgG抗体阳性率为39．62％（21／53）。IgM抗体阳性率为20．75％（11／53），抗原获ELISA有1份血清为XHF抗原阳性；易感人群血清IgG抗体阳性主为21．05％（4／19），IgM抗体检测和抗原捕获ELISA全部为阴性；羊血清IgG抗体阳性率为70％（56／80）。结论：血清流行病学研究证实该次疫情确系XHF、流行地区人畜均有较高水平的隐性感染。     

酶联免疫吸附试验在流行性乙型脑炎血清学诊断上的应用

用ELISA法检测225份临床疑似乙脑患者血清抗体并将该法与CF进行了比较。ELISA法阳性155份,阳性率为63.9%; CF阳性75份,阳性率为33.3%。ELISA法几何平均滴度为1:20.2; CF为1:1.2。两种检测方法的结果呈正相关(r=0.56, P<0.001)。此外还检测了乙型肝炎、脊髄灰质炎患者的阳性血清和乙脑非疫区的其他患者血清,均未发现阳性反应。结果表明ELISA法敏感、特异、简便,只需少量试剂,结果读取客观,且所用试剂、器材都容易获得。因此这一技术可用于实验室诊断,且适于乙脑的流行病学调查研究。     

麻疹实验室诊断中ELISA法和实时荧光定量RT-PCR法的比较

目的比较诊断早期麻疹病毒感染的两种实验室方法,即检测患者血清中特异性Ig M抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)以及检测病毒RNA的实时荧光定量RT-PCR法。方法收集麻疹疑似病例急性期静脉血和咽拭子,采用ELISA法检测血清中麻疹特异性Ig M抗体,实时荧光定量RT-PCR法检测咽拭子麻疹病毒RNA。结果 142例麻疹疑似病例中,血清ELISA法检测阳性率为30.99%(44/142),实时荧光定量RT-PCR法检测阳性率为69.72%(99/142),实时荧光定量RT-PCR法检测阳性率明显高于ELISA法检测阳性率(P0.001)。综合以上两种方法检测结果,实验室确诊病例总数为106例,总阳性率为74.65%(106/142),ELISA法灵敏度为41.51%(44/106),实时荧光定量RT-PCR法灵敏度为93.40%(99/106)。出疹后第1~3 d,ELISA法检测阳性率分别为23.81%、29.41%、44.83%;实时荧光定量RTPCR法检测阳性率分别为74.19%、70.77%、80.77%。结论实时荧光定量RT-PCR法灵敏度高于血清ELISA法,更适合于麻疹病毒感染早期的实验室诊断。     

探讨ELISA和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体的检测

目的:比较ELISA法和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体的检测。方法:用ELISA法与化学发光法对病人血清和标准物质进行以上三种抗体的检测,并对结果进行分析。结果:(1)化学发光法测定值较低的阳性标本,ELISA法测定有可能为阴性。(2)用化学发光法检测病人血清中HIV-1/HIV-2抗体为阴性标本的测定数据有一定程度的波动。(3)同一公司生产的以上三种抗体的标准物质,用ELISA均为阳性,可是用化学发光法仅丙肝抗体检测为阳性,而其它两种均为阴性。结论:基本证实了化学发光法比ELISA法敏感性高。     

3种登革热抗原检测方法的比较

目的比较3种检测方法——免疫胶体金包被法、ELISA检测法及PCR核酸检测法,测定登革热抗原的敏感性、特异性及其3种方法的优缺点。方法用免疫胶体金包被法和ELISA检测法及PCR核酸检测法,对来源于医院临床诊断的疑似登革热病例的血清进行抗原检测。结果 100份临床诊断疑似登革热病例的血清经过免疫胶体金包被法检测为阳性者再次用ELISA检测法及PCR核酸检测法测定抗原,检测后的阳性结果准确率均为100%,而100份免疫胶体金包被法检测为阴性的血清,用ELISA检测法及PCR核酸检测法测定抗原,结果出现了假阴性。结论通过比较免疫胶体金包被法、ELISA检测法及PCR核酸检测法检测登革热抗原,使用ELISA检测法及PCR核酸检测法测定登革热抗原的敏感性较强,准确度很高并具有可排除干扰因素的优点。     

麻疹实验室诊断中ELISA法和实时荧光定量RT-PCR法的比较研究

目的比较诊断早期麻疹病毒感染的两种实验室方法,即检测患者血清中特异性IgM抗体的酶联免疫吸附试验（ELISA）以及检测病毒RNA的实时荧光定量RT-PCR法。方法收集麻疹疑似病例急性期静脉血和咽拭子,采用ELISA法检测血清中麻疹特异性IgM抗体,实时荧光定量RT-PCR法检测咽拭子麻疹病毒RNA。结果142例麻疹疑似病例中,血清ELISA法检测阳性率为30.99%（44/142）,实时荧光定量RT-PCR法检测阳性率为69.72%（99/142）,实时荧光定量RT-PCR法检测阳性率明显高于ELISA法检测阳性率（P<0.001）。综合以上两种方法检测结果,实验室确诊病例总数为106例,总阳性率为74.65%（106/142）,ELISA法灵敏度为41.51%（44/106）,实时荧光定量RT-PCR法灵敏度为93.40%（99/106）。出疹后第1至第3天,ELISA法检测阳性率分别为 23.81%、29.41%、44.83%;实时荧光定量RT-PCR法检测阳性率分别为74.19%、70.77%、80.77%。结论实时荧光定量RT-PCR法灵敏度高于血清ELISA法,更适合于麻疹病毒感染早期的实验室诊断。     

TRFIA法与ELISA法检测乙肝病毒血清学标志物的比较

目的探讨时间分辨荧光免疫测定法(TRFIA)定量检测乙肝病毒血清学标志物(HBV-M)与酶联免疫吸附试验(ELISA)一步法定性检测HBV-M的关系及其临床意义。方法采用TRFIA和ELISA分别检测436份血清标本的HBV-M。结果对于稍高于临界值的血清,TRFIA检出率明显高于ELISA。结论 TRFIA检测HBV-M比ELISA敏感,能为乙肝的临床诊断、疗效观察提供动态数据,是一种比较理想的定量检测方法。     

新型冠状病毒肺炎病例的血清学检测结果初步分析

目的 了解新型冠状病毒肺炎确诊病例、无症状感染者、密切接触者和其他相关人员血清中IgM和IgG抗体产生情况。 方法 采集研究对象的全血并及时分离血清,采用ELISA和胶体金法对确诊病例和无症状感染者血清进行IgM和IgG抗体检测,采用ELISA对密切接触者和其他相关人员血清进行检测。 结果 用ELISA和胶体金法进行抗体检测,42例确诊病例的阳性情况为:采样日期从第二周起,不论是IgM还是IgG的阳性率均出现增长,第15~35 d组,阳性率最高,IgM抗体阳性率ELISA和胶体金法分别为72.7%与36.4%,IgG抗体阳性率分别为72.7%与90.9%。用ELISA检测,8例无症状感染者为IgM阳性5例(62.5%)和IgG阳性5例(62.5%)。密切接触者为IgM阳性1例(1.7%)和IgG阳性2例(3.4%)。其他相关人员为IgM阳性1例(2.0%)和IgG阳性2例(4.1%)。ELISA IgM、胶体金IgM、ELISA IgG以及胶体金IgG试验检测出阳性确诊病例的发病日期至采样日期的间隔时间中位数分别为16、14、12、13 d。ELISA与胶体金法比对,IgM抗体检测的Kappa值为0.614,IgG的Kappa值为0.716。 结论 新型冠状病毒肺炎确诊病例血清抗体阳性率从第二周起出现显著增长,不同类型人员阳性率差异有统计学意义,ELISA与胶体金法比较中高度一致。     

乙肝病毒血清标志物ECLIA法和ELISA法的比较分析

目的比较ELISA法和ECLIA法检测乙肝血清标志物的检测性能。方法用ELISA法(酶联免疫吸附法)和ECLIA(电化学发光法)对HBV血清标志物进行检测,并对强阳性标本进行稀释。结果对120例患者的血清进行HBV五项的检测,ELISA法和ECLIA法对HBs Ag、HBs Ab、HBe Ag三项标志物的检出率无显著性差异(P0.05),但对HBe Ab和HBc Ab的检测,电化学发光法检出率明显高于ELISA法(P0.05)。结论乙肝病毒血清标志物的检测,ECLIA法检测血清乙肝标志物的灵敏度和自动化程度均高于ELISA法,并可动态观察疗效和监测病情。     

金标快速法筛查献血者丙型肝炎抗体的应用评价

目的:对丙型肝炎抗体(抗HCV抗体)金标快速法试剂盒进行应用评价.方法:采用ELISA法和金标快速法平行检测200份献血者、50例已确诊的丙型肝炎患者和50例健康体检者血清中的抗HCV抗体并比较结果.结果:ELISA法和金标快速法检测200份献血者血清抗HCV抗体的阳性结果分别是22例和20例,有2例ELISA法阳性而金标法阴性;检测50例已确诊的丙肝患者血清抗HCV抗体的阳性检出率分别为100%和96%,两法对50例健康体检者的结果均为阴性.以ELISA法的结果为真值,金标快速法的敏感性为947%、特异性为100%、准确性为987%.结论:金标快速法适用于抗HCV抗体的流行病学调查、单份标本和急诊检验,但其敏感度低于ELISA法,如时间允许,最好选择ELISA法进行复检.