日本血吸虫感染诱导产生的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞免疫抑制功能的观察

目的观察日本血吸虫感染小鼠CD4^＋CD25^＋T细胞的免疫抑制功能及特征。方法日本血吸虫尾蚴（10±2条）感染BALB/c小鼠,在感染后6周（急性期,10只）和13周（慢性期,10只）取脾脏,制成脾单个核细胞,用免疫磁珠分选出CD4^＋CD25^＋T细胞。体外实验,将急性期和慢性期来源的CD4^＋CD25^＋T细胞与CD4^＋CD25ˉT细胞共培养,^3H-TdR掺入法检测细胞增殖情况,ELISA检测细胞培养上清中的细胞因子。体内实验,将CD4^＋CD25^＋T细胞被动转移到日本血吸虫辐照致弱尾蚴免疫的小鼠体内,2周后剖杀取脾,用流式细胞仪检测脾组织中白细胞介素4＋（IL-4＋）、IL-10＋和干扰素γ＋（IFN-γ＋）CD4^＋T细胞比例,ELISA检测血清抗辐照致弱尾蚴抗原IgG1和IgG2a水平。结果体外实验显示,在血吸虫虫卵可溶性抗原（SEA）刺激下,与单纯CD4^＋CD25ˉT细胞培养组（脉冲指数即cpm值为7615±1058）相比,CD4^＋CD25^＋T细胞对CD4^＋CD25ˉT细胞增殖具明显的抑制作用（P〈0.01）,并且感染慢性期来源的CD4^＋CD25^＋T细胞抑制作用（cpm值为2336±490）强于急性期来源的CD4^＋CD25^＋T细胞（cpm值为4467±144）（P〈0.05）;并对IL-4、IFN-γ和IL-2等细胞因子分泌也具有抑制作用,其中急性期来源的CD4^＋CD25^＋T细胞对各细胞因子的抑制率分别为32.0%（P〈0.05）、66.3%（P〈0.01）和63.2%（P〈0.01）;慢性期来源的CD4^＋CD25^＋T细胞对各细胞因子的抑制率分别为28.4%（P〈0.05）、60.1%（P〈0.01）和58.3%（P〈0.01）。体内实验显示,在辐照致弱尾蚴诱导的免疫应答中,转移慢性期血吸虫感染小鼠的CD4^＋CD25^＋T细胞对IFN-γ和IgG2a抗体的产生明显抑制作用（P〈0.05）。结论日本血吸虫感染诱导的CD4^＋CD25^＋T细胞具明显免疫抑制作用,并呈现优势抑制Th1应答的特征。     

CD4+ T细胞亚群在血吸虫感染中的动态变化及功能研究进展

血吸虫病是一种主要以肝、肠虫卵肉芽肿和随之伴随的纤维化为主要特征的免疫病理性疾病。一般认为,CD4+ T细胞亚群在抗血吸虫感染及免疫调控过程中起着重要作用。其中辅助性T（T helper,Th）细胞1（Th1）、2（Th2）是主要的效应性CD4+ T细胞亚群,而调节性T（Regulatory T,Treg）细胞在血吸虫感染免疫病理机制中总体起免疫下调作用,新近发现的Th17细胞也积极参与抗血吸虫免疫反应。随着血吸虫感染的进展,这4种CD4+ T细胞亚群数量及功能呈现不同变化趋势,但均对血吸虫感染发生、发展及纤维化病理进程起重要的调控作用。此外,这些CD4+ T细胞亚群之间也存在复杂的相互调节（Cross?talk）。本文就血吸虫感染过程中Th1、Th2、Th17 和 Treg细胞亚群及其效应细胞因子的动态变化与功能的研究进展作一综述。     

胸腺基质淋巴细胞生成素对效应T细胞分化功能的影响

目的：探讨体外氧化型低密度脂蛋白（ ox-LDL）诱导人血管平滑肌细胞产生的胸腺基质淋巴细胞生成素（ TSLP）对效应T细胞分化功能的影响。方法分离并培养人血管平滑肌细胞、人树突状细胞（ DC）、初始CD4＋T细胞,随机分为4组,每组设5个样本。对照组、实验组人血管平滑肌细胞分别经PBS、ox-LDL处理后,取其上清液与DC、初始CD4＋T细胞共培养;TSLP中和抗体组、中和抗体对照组在实验组的基础上分别加入TSLP中和抗体、TSLP非特异性中和抗体与DC、初始CD4＋T细胞共培养。采用ELISA法检测各组细胞培养上清液中TSLP及Th17细胞因子IL-17、IL-22、TNF-α水平,流式细胞术检测Th17细胞构成比。结果与对照组比较,实验组培养上清液TSLP、IL-17、IL-22、TNF-α水平及Th17细胞构成比升高（ P均＜0．01）。与实验组、中和抗体对照组比较,TSLP中和抗体组TSLP、IL-17、IL-22、TNF-α水平及Th17细胞构成比降低（ P均＜0．01）。结论 Ox-LDL体外诱导人血管平滑肌细胞产生的TSLP可促进CD4＋T细胞向Th17细胞分化。     

日本血吸虫可溶性成虫抗原及虫卵抗原对CD4+ T 细胞分化的影响

目的 目的 观察并比较日本血吸虫可溶性成虫抗原 （SWA） 及虫卵抗原 （SEA） 在诱导CD4+ T细胞分化中的不同作用。 方法 方法 分别用SWA、 SEA免疫C57BL/6小鼠后分离脾细胞， 或用SWA、 SEA体外刺激正常小鼠来源的脾细胞后， 采用流式细胞术 （FCM） 检测脾细胞中产生IFN?γ及IL?4的细胞比例， 以及CD4+ T细胞中Th1、 Th2细胞亚群的比例。 结果 结果 SWA比SEA更能优势诱导CD4+ T细胞产生IFN?γ （P < 0.05），SEA比SWA更能优势诱导CD4+ T淋巴细胞产生IL?4 （P < 0.05）。结论 结论 SWA较SEA更能优势诱导Th1细胞分化， SEA较SWA更能优势诱导Th2细胞分化。     

日本血吸虫感染ICR小鼠后Tc1和Tc2细胞的动态观察及其功能分析

目的 目的 观察日本血吸虫感染ICR小鼠后不同时期T淋巴细胞中杀伤性T细胞 （Tc） 亚型Tc1和Tc2比例的动态变化, 并分析两者分别与Th1和Th2细胞比例变化的相关性。 方法 方法 分别取日本血吸虫感染0、 3、 5、 8、 13周的小鼠脾脏淋巴细胞, 采用流式细胞术检测各个时期Tc1、 Tc2和Th1、 Th2细胞亚群分别占T淋巴细胞的比例。 结果 结果 与0周对照比较, 感染3、 5、 8、 13周小鼠T淋巴细胞中Tc1细胞比例显著增高 （P均< 0.01）, 感染5、 8、 13周小鼠T淋巴细胞中Tc2细胞比例显著增高 （P均< 0.01）。比较Tc1和Tc2细胞比例在相同时间点的增速发现, 感染3周时Tc1细胞比例增高最显著, 而感染5周时Tc2细胞比例的增高最显著。感染各个时间点CD3+ T细胞中的Th1细胞比例与Tc1细胞比例平行增长, 且两者呈正相关（r = 0.978, P = 0.004）; CD3+ T细胞中的Th2细胞比例与Tc2细胞比例平行增长, 且两者呈正相关 （r = 0.974, P = 0.005）。体外可溶性成虫抗原 （SWA） 刺激脾细胞可优势增加T淋巴细胞中的Tc1细胞比例 （P < 0.01）, 而可溶性虫卵抗原 （SEA） 刺激脾细胞可优势增加T淋巴细胞中的Tc2细胞比例 （P < 0.01）。 结论 结论 日本血吸虫感染不同阶段, 小鼠T淋巴细胞中的Tc1 和Tc2细胞比例均显著升高, 并分别与Th1和Th2细胞比例呈正相关。在感染3周时主要以Tc1细胞比例升高为主, 而感染 5周时主要以Tc2细胞比例升高为主。SWA可优势诱导Tc1细胞, 而SEA可优势诱导Tc2细胞。     

ITP血小板特异性抗体和T淋巴细胞亚群及NK细胞变化的意义探讨

目的：检测特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者抗血小板膜糖蛋白（GPⅡb／Ⅲa、GPⅠb／Ⅸ）特异性抗体表达、T淋巴细胞亚群及NK细胞的变化,探讨相关因素在ITP发病机制中的作用。方法：应用改良血小板抗原单克隆抗体固相化检测技术（MAIPA）、流式细胞术分别检测52例ITP和24例正常对照组抗血小板膜糖蛋白（GPⅡb／Ⅲa、GPⅠb／Ⅸ）特异性抗体表达、T淋巴细胞亚群及NK细胞变化。结果：ITP组的血小板计数明显低于正常对照组（P〈0．05）;抗GPⅡb／Ⅲa及GPⅠb／Ⅸ抗体A值均高于正常对照组（P〈0．05）;相关分析表明ITP组血小板计数与两种特异性抗体水平均呈负相关关系;在T淋巴细胞亚群变化中,ITP组CD3^＋T淋巴细胞百分比、CD4^＋T淋巴细胞百分比及CD4^＋／CD8^＋的比值均明显低于正常对照组（P〈0．05）,CD8^＋T淋巴细胞百分比则显著高于正常对照组（P〈0．05）;NK细胞百分比明显低于正常对照组（P〈0．05）。结论：血小板特异性抗体及T淋巴细胞亚群的变化可较好地反映ITP这一病理过程,对提高诊断水平及指导临床有一定的实用价值。     

强直性脊柱炎患者外周血T细胞亚群的变化及意义

目的探讨强直性脊柱炎（AS）患者外周血中T细胞亚群的变化及其意义。方法采用流式细胞仪（FCM）检测外周血淋巴细胞表面CD3、CD4、CD8及其胞质内细胞因子IFN-γ和IL-4的表达。结果与正常对照组相比,As患者外周血Th细胞（CD;CD4＋）百分率无显著差异,Tc细胞（CD;CD;）明显升高（P〈0．05）;Th1细胞（CD3^＋CD4^＋IFN-γ^＋）百分率明显升高,Th2细胞（CD3^＋CD4^＋IL4^＋）无显著性差异;Te1细胞（CD3^＋CD8^＋IFN-γ^＋）百分率明显降低,T02细胞（CD3^＋CD8^＋IL4^＋）无显著性差异。结论AS患者外周血T细胞Th1／Th2、Tcl／Tc2亚群比例失衡,呈Th1、Tc2优势型。     

多糖佐剂FQ_2对日本血吸虫rBCG-Sj26GST疫苗增效作用及其机理的初步探讨

为探讨多糖佐剂FQ2 对血吸虫疫苗保护性免疫力的增效作用及其机理 ,采用 1 0 8CFU日本血吸虫重组BCG -Sj2 6GST疫苗分别与 5 %、1 0 %、2 0 %浓度的佐剂FQ2 混匀皮下接种BALB/c小鼠 ,同时设对照组。接种后第 8W以日本血吸虫尾蚴攻击感染 ,感染后 6W剖杀小鼠 ,计算减虫率 ,测定血清中特异抗体水平和胸腺T淋巴细胞及其亚群。结果实验组获得了 33 49% - 4 0 50 %的减虫率 ,与对照组相比 ,胸腺细胞总数、胸腺活性细胞率、CD8+ 细胞率、CD4 + 细胞率均显著升高 ,尤其是疫苗 +1 0 %佐剂 ,疫苗 +2 0 %佐剂组差别有非常显著意义 (P <0 0 1 )。而各实验组IgG抗体水平无统计学差别。提示多糖佐剂FQ2 对日本血吸虫rBCG -Sj2 6GST疫苗有一定的增效作用 ,其免疫机制可能以细胞免疫为主     

ICOSL敲基因小鼠日本血吸虫病模型的免疫应答及其免疫病理

目的 观察ICOSL敲基因（ICOSL knockout,ICOSL-KO）小鼠感染日本血吸虫后的免疫应答及其免疫病理反应。方法 建立ICOSL-KO小鼠及野生型C57BL/6J小鼠日本血吸虫病模型,收集感染前（0周）和感染后（4~20周）的小鼠脾淋巴细胞用SEA进行诱导培养72小时后,采用ELISA双抗夹心法检测培养上清中Th1（IFN-γ、IL-12）及Th2（IL-4、IL-10、IL-13）细胞因子表达水平。应用ELISA法检测同期血清中SEA特异性抗体IgG、及其亚类IgG1、IgG2a的表达水平。应用HE染色法观察小鼠肝脏虫卵肉芽肿病变。 结果 ICOSL-KO小鼠Th1细胞因子IFN-γ、IL-12表达明显高于野生型小鼠,而其Th2型细胞因子（IL-4、IL-10、IL-13）表达水平却显著低于野生型小鼠。ICOSL-KO小鼠血清SEA特异性抗体IgG及其亚类IgG1、IgG2a的水平显著低于野生型C57BL/6J小鼠的水平,其Th2分化指数与IgG1/IgG2a的比值亦低于野生型小鼠的水平,特别是在感染7、12、16周后具有显著性差异。且ICOSL-KO小鼠的肝脏虫卵肉芽肿病变显著小于野生型小鼠。结论 感染日本血吸虫的ICOSL-KO小鼠Th2免疫应答显著下调并导致肝虫卵肉芽肿病变减弱,表明ICOS–ICOSL 信号通路在血吸虫病免疫病理中具有重要作用。     

重组日本血吸虫超氧化物歧化酶融合蛋白对小鼠免疫保护作用的研究

目的 探讨重组日本血吸虫胞浆内超氧化物歧化酶（SOD）融合蛋白在抗血吸虫感染中的免疫保护作用。方法采用亲和层析方法制备纯化表达的重组SOD融合蛋白。用重组SOD融合蛋白加福氏佐剂,免疫C57BL／6J小鼠,4周后用（45±2）条日本血吸虫尾蚴攻击感染,45d后剖杀小鼠,计算减虫率和减卵率,组织切片观察小鼠肝脏的病理变化。结果实验组减虫率为35．63％,减卵率为31．17％。实验组小鼠肝脏虫卵肉芽肿数比对照组少,单个肉芽肿的平均直径比对照组小22．32％,血清抗SOD融合蛋白特异性抗体亚类IgG1、IgG2a、IgG2b水平明显高于对照组（P均〈0．05）。结论重组SOD分子能诱导一定水平的抗日本血吸虫感染免疫保护作用。     

日本血吸虫糖基诱导抗体类型与感染状态的关系研究

目的以日本血吸虫感染猪为模型,研究不同感染状态下针对糖基产生的抗体在宿主免疫应答中的作用。方法建立日本血吸虫感染猪模型,分别检测不同感染状态下猪血清中针对LNFPIII、N-糖苷水解酶F(PNGaseF)处理可溶性虫卵抗原(SEA)前后及过碘酸处理SEA前后的抗体水平。结果辐照致弱尾蚴单纯免疫组、正常尾蚴单纯感染组和免疫后予以感染的免疫攻击组的猪均针对LNFPIII产生了相应的IgM抗体应答。3组猪血清中针对PNGaseF处理SEA的特异性抗体IgG、IgM水平较未处理组略低,但抗体IgG和IgM水平差异均无统计学意义(P均0.05)。在单纯免疫组,猪血清中针对过碘酸处理SEA的特异性IgG、IgM、IgA抗体水平均较未处理组有所下降,差异有统计学意义(P均0.01),但辐照致弱日本血吸虫糖基成分所诱导的抗体水平均较低。在单纯感染组,猪血清中针对过碘酸处理SEA的抗体IgG、IgM水平在感染后第8周下降极为显著,抗体水平差异有统计学意义(P均0.01),其中糖基所诱导的抗体亚型以IgG1为主。此时,在虫负荷显著降低的免疫攻击组,日本血吸虫糖基成分能够显著增强IgG、IgM、IgA,特别是IgG2的表达。结论日本血吸虫糖基成分能够诱导宿主产生多种类型的抗体应答;且抗体亚型的表达与宿主的感染状态相关,即IgG1亚型的表达与日本血吸虫急性感染期的虫负荷和卵负荷一致;而具有免疫保护力的宿主能够针对日本血吸虫糖基成分产生IgG2应答。     

肠系膜淋巴结Th1、Th17细胞在小鼠结肠炎模型发病中作用的研究

背景:大量研究表明细胞因子网络在溃疡性结肠炎(UC)的发病和疾病进程中起关键作用,但相关研究主要集中于肠黏膜免疫细胞方面。目的:探讨肠系膜淋巴结Th1、Th17细胞在模拟人类UC的小鼠DSS结肠炎模型发病中的作用。方法:C57BL/6小鼠饮用5%DSS溶液7 d诱导实验性结肠炎,实验过程中每天评估疾病活动指数(DAI)。于第8 d处死小鼠,ELISA法测定结肠组织IL-1β含量;分离肠系膜淋巴结细胞,以CD3/CD28单抗诱导淋巴细胞活化并以ELISA法测定细胞培养上清液中的Th1、Th17细胞因子含量,流式细胞术检测肠系膜淋巴结F4/80+CD11b+巨噬细胞和CD4+T细胞内Th1、Th17细胞因子表达。结果:结肠炎模型组DAI随实验进程而逐渐增加,于第7 d达峰值。与正常对照组相比,模型组结肠组织IL-1β蛋白表达显著上调(P<0.05),肠系膜淋巴结巨噬细胞浸润增加(P<0.001),淋巴细胞IL-17A分泌水平显著增高(P<0.05),IFN-γ分泌水平亦呈增高趋势(P>0.05),CD4+T细胞内IL-17A、IFN-γ表达显著上调(P<0.05)。结论:肠系膜淋巴结Th1、Th17细胞过度激活可能通过释放效应细胞因子诱导巨噬细胞等浸润、活化,参与介导小鼠DSS结肠炎模型的肠黏膜炎症反应和病理损伤。     

香菇多糖抗小鼠急性弓形虫感染免疫机制的初步探讨

目的从香菇多糖对弓形虫感染小鼠Th1／Th2免疫应答建立的影响及二者平衡维持的角度探讨香菇多糖抗小鼠急性弓形虫感染的免疫机制。方法RH株弓形虫速殖子腹腔感染小鼠前及感染后进行香菇多糖处理,观察各组小鼠的存活率,同时用ELISA法动态检测小鼠脾细胞培养液中Th1／Th2免疫反应关键细胞因子IFN—γ／IL-4水平及血清中IgG2a／IgG1抗体的含量。结果与对照组相比香菇多糖可以明显提高两处理组小鼠的存活率,香菇多糖处理组（LTN组）第10d全部死亡,而香菇多糖预处理组（pre-6dLTN组）第13d存活率仍达18．4％;pe-6dLTN组及LTN组在感染后第3d建立Th1型免疫应答,IFN-7含量分别为186．28pg／ml及117．07pg／mi,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01）;IgG2a含量为0．332（A-490）及0．320（A-490）,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01）,且于第7d达峰值。同时Th2型免疫应答开始建立,IL-4含量分别为121．28pg／ml及94．47pg／ml,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01）;IgG1含量分别为0．382（A-490）及0．354（A-490）,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）,随后维持较高水平。结论香菇多糖能辅助小鼠建立Th1／Th2免疫应答,且能适时转化并维持二者平衡,避免因任何一种免疫反应过度表达而导致的免疫病理反应,从而增强小鼠抵抗弓形虫感染的能力。     

慢性阻塞性肺疾病患者外周血Th17、CD4＋Treg细胞的检测及意义

目的通过检测COPD患者外周血中Th17细胞、CD4。Treg细胞占CD4＋T细胞的比例及其比值、血浆中的弹性蛋白抗体水平,分析它们在c（）PD发病中可能的作用。方法采用流式细胞分析技术检测所有受试者外周血Thl7细胞及CD4＋Treg细胞占CD4＋T细胞的比例,酶联免疫吸附法检测血浆中弹性蛋白抗体水平。结果①c（）PD患者急性加重期组外周血Thl7细胞占CD4＋T细胞的比例,显著高于缓解期组和健康对照组,缓解期组显著高于健康非吸烟组,差异有统计学意义（P〈20．05）,缓解期组高于健康吸烟组,但两者相比较差异无统计学意义。与健康非吸烟组相比,COPD急性加重期组、缓解期组和健康吸烟组外周血CD4。Treg细胞占CD4＋T细胞的比例显著增高,差异有统计学意义（Pt〈o．05）,缓解期略高于急性加重期,高于健康吸烟对照组,但三者比较差异无统计学意义。急性加重期Thl7／CD4＋Treg的比值明显增高,与缓解期组、健康吸烟组和健康非吸烟组相比差异有统订学意义（P〈20．05）。②各组均检测到弹性蛋白抗体,COPD组、健康吸烟组的弹性蛋白抗体水平较健康非吸烟组增高,差异有统计学意义（P〈O．05）,但急性期组、缓解期组、健康吸烟组之间差异无统计学意义。③c（）PD急性加重期组、缓解期组Thl7与弹性蛋白抗体呈正相关（P〈20．05）。COPD缓解期组Th17与FEV．％pred和FEV,／FVC呈显著负相关（P〈O．08）。结论Thl7细胞、CD4＋Treg细胞及弹性蛋白抗体可能参与了COPD的发生和发展。Thl7细胞增高、CD4＋Treg细胞增高相对不足与COPD发病及发展密切相关。Thl7在COPD中的表达增高可能加重了肺组织的破坏,这提示它可能在COPD肺气肿弹性蛋白免疫学特异性表达中发挥重要作用。     

非重型再生障碍性贫血患者Th17/Treg比例及相关细胞因子白细胞介素-6、-17和转化生长因子β1水平的临床意义

目的 探讨非重型再生障碍性贫血（NSAA）患者外周血的Th17和调节性T（Treg）细胞比例异常变化及其与白细胞介素（IL）-6、IL-17、转化生长因子（TGF）-β1水平的相关性.方法 根据诊断标准收集NSAA患者78例,应用流式细胞术（FCM）检测其外周血Th17和Treg细胞比例,用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测IL-6、IL-17和TGF-β1水平,选取20例健康者为对照组,并比较其差异及其相关性.结果 NSAA患者的Th17细胞比例高于对照组（P＜0.01）,Treg细胞比例低于对照组（P＜0.01）,Th17/Treg比例明显高于对照组（P＜0.01）.NSAA组IL-6水平明显高于对照组（P＜0.01）,NSAA组IL-17水平与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）,NSAA组TGF-β1水平较对照组明显降低（P＜0.05）.Treg与Th17细胞无相关,Th17与IL-17水平有相关性.结论 Th17/Treg异常与非重型再生障碍性贫血发病有关.相关细胞因子TGF-β1、IL-6与Th17与Treg细胞比例的变化有关,可能是导致NSAA发生及发展的重要因素.     

哮喘小鼠HMGB1表达和中性粒细胞计数、IL-17水平的相关性研究

目的探讨哮喘小鼠肺组织中HMGB1表达和中性粒细胞计数、IL-17水平相关性的研究。方法采用OVA致敏和激发模式建立Th2优势哮喘小鼠模型;采用LPS联合OVA致敏和OVA激发模式建立Th17优势哮喘小鼠模型;将HMGB1拮抗剂rHMGB1-Abox经鼻滴人至Th17优势哮喘小鼠,建立HMGB1阻断的哮喘小鼠模型。实验设立正常对照组、Th2优势哮喘组、Th17优势哮喘组以及HMGB1阻断组,每组小鼠各10只,共40只。应用免疫组织化学SP法检测肺组织HMGB1的表达,收集肺泡灌洗液进行中性粒细胞计数,ELISA法检测肺组织匀浆中IL-17含量。采用SPSS13．0软件分析HMGB1表达和中性粒细胞数目、IL-17表达的相关性。结果Th17优势哮喘组小鼠HMGB1表达增强,并定位于气道上皮中。Th17优势哮喘组小鼠HMGB1表达、中性粒细胞计数和IL-17水平的表达与对照组、Th2优势哮喘组相比,均显著升高（P均〈0．01）;HMGB1阻断组小鼠HMGB1表达、中性粒细胞计数和IL-17水平与Th17优势哮喘组相比,均明显降低（P均〈0．05）。HMGB1表达与中性粒细胞计数呈正相关（r=0．82,P〈0．05）,HMGB1表达与IL-17水平呈正相关（r=0．74,P〈0．05）。结论Th17优势哮喘小鼠气道上皮HMGB1表达增强,并和中性粒细胞计数、IL-17水平呈正相关,HMGB1可能在调节哮喘Th17极化中发挥重要作用。     

系统性红斑狼疮患者外周血Th17的变化及与疾病活动性的关系

目的 研究系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血T辅助细胞17（Th17）的变化,并与病情活动性及脏器损害等临床资料进行相关性分析,探讨Th17在SLE发病中的作用.方法 选择20例SLE患者,根据SLEDAI评分及有无蛋白尿、肾功能损害等进行分组;同时选择类风湿关节炎（RA）患者和健康者为对照,采用流式细胞术检测Th17细胞的阳性表达百分率.结果 SLE患者外周血Th17阳性表达百分率高于健康对照组,而RA患者明显高于SLE组及健康对照组（P＜0.05）.Th17阳性表达百分率在SLE病情活动组较非活动组升高（P＜0.05）,在狼疮性肾炎（LN）患者中有肾功能损害者高于无肾功能损害者（P＜0.05）,且与24小时尿蛋白定量正相关（P＜0.05）,并与血小板计数及抗ds-DNA抗体滴度有相关性（P＜0.05）.结论 Th17可能参与SLE的发病过程,且与其病情活动性、肾脏损害程度及蛋白尿相关,亦影响SLE患者血小板及抗dsDNA抗体.     

慢性阻塞性肺疾病中MMP-9/TIMP-1与Th17/Treg作用与联系

目的 检测慢性阻塞性肺疾病（COPD）外周血中Th17、Treg细胞占CD4^＋T细胞的比例、Th 17/Treg比值和血浆中MMP-9、TIMP-1含量、MMP-9/TIMP-1比值,探讨其在发病中的作用和机制.方法 COPD急性加重组患者30例,COPD缓解组25例患者健康吸烟组20例患者,健康非吸烟组20例患者;采用流式细胞分析技术检测Th17、Treg细胞占CD4^＋T细胞的比例,ELISA法检测血浆中MMP-9、TIMP-1含量.结果 外周血Th17占CD4^＋T细胞的比例在：COPD急性期组高于缓解组、健康非吸烟组、健康吸烟组,差异有统计学意义（P＜0.05）,COPD缓解期组与健康吸烟组相比差异无统计学意义（P＞0.05）,与健康非吸烟组相比差异有统计学意义（P＜0.05）.外周血Treg占CD4＋T细胞比例在：各组间比较,差异无统计学意义（F=1.971,P＞0.05）;Th17/Treg比值的：COPD急性期组分别与COPD缓解期组、健康吸烟组、健康非吸烟组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）,COPD缓解期组与健康吸烟和健康非吸烟组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;血浆中MMP-9含量的在：COPD急性期组与COPD缓解期组、健康吸烟组、健康非吸烟组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）,COPD缓解期组与健康吸烟组、健康非吸烟组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,血浆中MMP-9/TIMP-1比值：COPD急性加重期组与其他三组相比均有统计学意义（P＜0.05）,COPD缓解期组与健康组相比,均有统计学意义（P＜0.05）.结论 Th17、Treg细胞、MMP-9、TIMP-1可能均参与了COPD的发生和发展.Th17、MMP-9增高可能促发COPD的发生和急性加重,并且两者存在一定相关性,并相互影响,加重COPD的自体免疫反应.     

刺槐素对小鼠Th17细胞的分化功能的影响及其机制的初步探讨

目的建立小鼠Thl7细胞的体外诱导及培养方法并探索刺槐素（Acacetin）对Th17细胞的分化、功能的影响及其机制的初步探索。方法分离、纯化BABL／c小鼠脾脏%细胞,用转化生长因子8、IL-6、IL-23等促进%细胞向Thl7细胞分化。培养的Th17细胞分为五组：正常组、模型对照组、Acacetin1μM组、Acacetin10μM组、Acacetin30pM组。流式细胞术检测Thl7细胞的比例,酶联免疫吸附试验检测IL-17A的表达,实时荧光定量聚合酶链反应检测IL-17AtuRNA及ROR-γtmRNA的表达。结果该培养方法可使Th17细胞的比例明显升高（P〈0．01）。与模型对照组相比,AcacetinlμM组、Acacetin10μM组、Acacetin30肛M组的Thl7细胞的比例呈剂量依赖性降低（P值均〈0．05）。IL-17A蛋白的表达也呈剂量依赖性降低（P值均〈0．05）,IL-17AmRNA和ROR-γtmRNA的表达与模型对照组比较明显降低（P〈0．05）,以Acacetin（30uM）组最明显（P〈0．01）。结论Acacetin在体外可以抑制小鼠脾脏%细胞向Thl7细胞的分化,并抑制IL-17AmRNA和IL-17A蛋白的表达,其机制可能与抑制细胞内孤儿受体ROR-γt的表达有关。