鼻咽癌与EB病毒血清及组织学关系的研究

鼻咽癌(nasopharyngeal carc inom a,NPC)是鼻咽上皮来源的恶性肿瘤。它的病因是多方面的,目前仍不是非常清楚,20世纪70年代我国也开展了这方面的工作。现在各国的研究已从NPC患者EBV的血清学检查逐步进入分子生物学水平。有关NPC与EBV关系的研究主要有如下几方面。1 NPC与EBV的血清学研究NPC在世界各地发病率差异很大,高发区为中国的广东、广西、湖南、福建、江西五省。EBV在世界各地人群中却有普遍感染,90%以上人群在成年前都感染过EBV。曾毅等[1]应用免疫酶法测定正常人EBV壳抗原(VCA)的IgG抗体阳性率在3岁~5岁时已达100%。人感染了EBV后EB病毒感染的细胞可表达多种EBV特异性抗原,包括早期抗原(EA)、壳抗原(VCA)、膜抗原(MA)和核抗原(EBNA)等,NPC患者、其他肿瘤患者及正常人的血清中不同抗体的阳性率及滴度水平不同。姜勇男等[2]对比了NPC患者及正常人血清中EBV四种特异性IgG抗体,其中VCA-IgG,EBNA-IgG,EA-IgG的几何平均滴度NPC患者显著高于正常人,EA-IgG的阳性率NPC患者也显著高于正常人;MA-IgG、VCA-...     

EBV相关胃癌组织中ras基因突变的检测

目的 探讨EBV感染、ras基因突变在EBV相关胃癌(EBVaGC)发生发展中的作用.方法 应用PCR-RFLP技术,分别检测13例EBVaGCs、45例与之匹配的EBV阴性胃癌(EBVnGC)以及58例相应癌旁组织中H-ras 12位点,K-ras 12、13位点突变情况.结果 检测到2例H-ras 12位点突变,突变率为4.44%(2/58),均发生在EBVnGC组织.结论 胃癌组织 ras 基因突变率较低,ras基因突变与EBVaGC的发生无明显相关性.     

鼻咽癌组织LMP-1表达与外周血EBV-IgA/VCA的关系

目的 研究鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者 Epstein-Barr 病毒(EBV)感染及潜伏膜蛋白 1(1a-tent membrane protein-1,LMP-1)表达的情况.方法 采用免疫组化实验技术对 62 例鼻咽癌活检组织及 33 例慢性鼻咽炎组织中 LMP-1 的表达进行检测,同时采用免疫酶标法对这些患者外血 EBV 的 IgA/VCA 抗体进行检测.结果 外周血 EBV-IgA/VCA 检出总阳性率在 NPC 患者中为 90.32%(56/62),在慢性鼻咽炎患者中为 3.03%(1/33),两者之间差异具有显著性意义(P<0.05);LMP-1在NPC组织中表达的总阳性率为 59.68%(37/62),在慢性鼻咽炎组织中表达的阳性率为 6.06%(2/33),两者之间差异具有显著性意义(P<0.05);EBV-IgA/VCA与LMP-1共表达的患者占NPC 患者总数的 62.5%(35/56).结论 NPC 患者外周血 EBV-IgA/VCA 表达与肿瘤组织中 LMP-1 阳性表达具有明显相关性;鼻咽癌发病与 EBV 感染明确相关.     

EB病毒和鼻咽癌

鼻咽癌 (NPC)是中国南部高发肿瘤。EB病毒与NPC密切相关 ,表现在NPC患者血清通常含高滴度抗EBVIgA及EBV的核心抗原抗体。应用PCR在NPC组织和外周血液可检测到EBV及相应基因。本文就EBV与NPC的关系 ,与NPC相关的EBV的生物学特性和进展 ,EB病毒和细胞增殖分化方面的信号转导关系作一综述。     

EB病毒免疫学指标在鼻咽癌诊治中的应用及临床评价

EB病毒(EBV)与鼻咽癌(NPC)的关系,很早即为人们所注意,早在1966年Old即报导了NPC患者血清中存在着EB痫毒相关抗原的沉淀抗体。1975年Ware发现NPC患者血清中EB病毒壳抗原免疫球蛋白A(EB-VCA-IgA)抗体水平升高。近年来国内外学者从病毒学、免疫学、血清流行病学、分子生物学等方面对EBV与NPC的关系进行了广泛的研究,一致认为EBV与NPC密切相关,特别是我国学者所作的大规模多学科的调查研究工作,进一步证明这些免疫学指标在NPC的诊断、鉴别诊断、预后估计以及鼻咽癌普查等方面具有相当价值。在这些与NPC临床有关的EBV免疫学指标中、研究较多的有:①EBV壳抗原免疫球蛋白A及G     

EB病毒感染与胃癌的关系

Epstein-Barr病毒(Epstein-Barrvirus，EBV)最初是由Epstein和Barr从非洲Burkitt淋巴瘤培养中发现的，属人疱疹病毒4型，是一种癌基因DNA病毒。EBV在人群中感染非常普遍，世界上大多数人在幼儿期就可感染EBV，并终身携带。血清学、流行病学及分子生物学的研究表明，EBV与人类多种疾病密切相关，包括传染性单核细胞增多症、Burkitt淋巴瘤(BL)、鼻咽癌(NPC)、霍奇金病(HD)等，     

全血中EB病毒DNA定量检测在鼻咽癌患者预后中的临床意义

目的:鼻咽癌(NPC)患者全血中EB病毒DNA定量检测对鼻咽癌的治疗和预后评估价值进行探讨和分析。方法:选取83例鼻咽癌患者为研究对象,其中,初诊NPC患者为30例,NPC放疗组患者为20例。NPC伴转移组例数为13例,NPC治愈后复查患者为20例,对全血标本进行采集,加强实时荧光定量PCR方法的应用,对标本中EBV、DNA含量予以检测,计算各组EBV阳性率、平均拷贝数,并对NPC患病率与EBV感染率之间的关系进行深入分析,对比各组之间EBV、DNA拷贝数对数之间的差异。结果:初诊NPC组、NPC伴转移组、NPC放疗组、NPC治愈组患者的EBV、DNA的检出率分别为76.67%、100%、61.54%、25%,不同组间EBV、DNA的检出率对比,差异有统计学意义(P<0.05)。在统计学分析样本的PCR结果时,初诊NPC组、NPC伴转移组、NPC放疗组、NPC治愈组患者的EBV、DNA的平均拷贝数的对数值分别为4.56、4.97、2.06、1.35,不同组间患者全血中EBV、DNA拷贝数的对数值对比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:EBV、DNA检测可以对NPC予以有效诊断,而且可以对患者的治疗效果进行准确评估,给予预后一定的保障。     

EB病毒感染与hMLH1蛋白表达在子宫颈癌发病中的意义

目的:了解宫颈癌Epstein-Barr病毒(EBV)感染情况及错配修复基因hMLH1表达在宫颈癌发生、发展中的意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测临床资料较完整的72例子宫颈鳞癌和31例慢性宫颈炎组织EBV潜伏期膜蛋白(LMP1)与hMLH1蛋白表达,并分析二者的相关关系。结果:在宫颈炎及宫颈癌组EBV(LMP1)的表达率分别为90·3%(28/31)和69·4%(50/72),差异显著(P<0·05);hMLH1的表达率分别为61·3%(19/31)和58·3%(42/72),无显著差异(P>0·05);EBV感染组和非EBV感染组hMLH1的表达率分别为67·5%(54/80)和43·5%(10/23);差异显著(P<0·05);EBV(LMP1)和hMLH1的表达率与宫颈癌的分级、分期及淋巴结转移均无明显相关关系(P>0·05);与是否绝经无明显相关关系(P>0·05)。结论:宫颈炎和宫颈癌EBV感染率均较高,宫颈炎患者宫颈上皮EBV感染可能为致宫颈癌的高危因素,有待于进一步证实。EBV感染时hMLH表达率增高,提示EBV感染引起的宫颈细胞基因突变增多可能为EBV的致癌机制之一。     

Detection of Epstein-Barr virus DNA in plasma/serum: a useful serological indicator for diagnosis of nasopharyngeal carcinoma

Objective To compare the detection rates of Epstein-Barr virus (EBV) DNA in the serum/plasma between apparently healthy adults (AHAs) and nasopharyngeal carcinoma (NPC) patients in attempt to evaluate the efficiency of EBV DNA assay for serodiagnosis of NPC.Methods The plasma and serum were obtained from 58 AHAs and 66 untreated NPC patients. EBV DNA W-fragment was detected using nested ploymerase chain reaction (PCR). Immunoenzymatic assay for titration of IgA-VCA was also adopted. Results EBV DNA detection rate (84.85%) in the plasma/serum of 66 NPC patients was significantly higher than that (10.34%) in 58 AHAs. The sensitivity of plasma/serum EBV DNA assay (0.8485) was higher than that (0.8030) of titrating IgA-VCA (positive criterion≥1∶40) though the specificities of these two tests were the same (0.8966). The correct rate, predictive value of a positive test, and Odds ratio of dual positivity (0.8387, 0.9792 and 141.0, respectively) were higher than those of single positivity either to plasma/serum EBV assay (0.5242, 0.7333 and 1.1423, respectively) or to IgA-VCA≥1∶40 test (0.4839, 0.5385 and 1.0480, respectively). Conclusion The EBV DNA detection in the plasma/serum using nested PCR may be a useful indicator for serodiagnosis of NPC.     

鼻咽癌组织DNA聚合酶β基因突变与EBV感染相关

目的: 研究探讨鼻咽癌中DNA聚合酶β(DNA polymerase β, polβ)的变异情况及与EBV感染有无相关关系. 方法: 采用RT-PCR法(逆转录-DNA聚合酶链反应)、PCR-SSCP(聚合酶链-单链构象多态性分析)、DNA序列分析法对26例鼻咽癌组织及癌旁组织标本进行polβ基因突变研究. 用特异性EBV引物PCR扩增法检测EB病毒,分析出现EBV-PCR阳性与polβ突变及鼻咽癌发生之间的相关性. 结果: polβ-SSCP结果显示癌旁组织标本中polβ无突变;26例鼻咽癌组织标本中存在polβ基因变异的有8例,突变率为30.8%. polβ基因变异的鼻咽癌标本测序结果显示:核苷酸序列有多种形式的改变. 提取DNA用EBV引物进行扩增,26例鼻咽癌标本中出现阳性的有24例,阳性率为92.3%. 结论: 首次发现在鼻咽癌中存在多种形式的polβ突变,有polβ突变的病例均有EBV感染.     

Epstein-Barr病毒的异质性

Epstein-Barr病毒(EBV)与人类两种恶性肿瘤—Burkitt淋巴瘤(BL)和鼻咽癌(NPC)有关,这就激起了过去十年期间人们对本病毒的相当大的兴趣。病毒DNA常见于这类肿瘤的活检标本中,而且也存在于NPC的细胞核中。EBV的核抗原(EBNA)也可在肿瘤活检标本中表达。已证明EBV在体外可使人类淋巴细胞转化。再者,在某些由淋巴母细胞样细胞株诱发的淋巴增生性疾患以及棉冠狨和枭猴的淋巴瘤中均发现了EBV。尽管这些资料似可确立本病毒在体内以及在体外的致癌潜力,但它诱发人瘤的特异作用仍远未搞清。主要问题涉及这两种肿瘤的流行病学与EBV的感染相互联系。虽然最近有若干     

EB病毒LMP1与细胞信号转导

EB病毒(Epstein-Barr virus，EBV)是Epstein和Barr于1964年最先从非洲恶性淋巴瘤组织培养中发现的一种病毒，在分类学上将EBV归人疱疹病毒γ亚科嗜淋巴细胞病毒属的DNA病毒。全球广泛分布，据估计全球约有90％以上人群感染过EBV。已证明EB病毒能引起人类传染性单核细胞增多症(IM)，Burkitt’S淋巴瘤(BL)、鼻咽癌(NPC)、移植后淋巴瘤、何杰金氏病(HD)及外周T细胞淋巴瘤(PTL)等多种疾病。     

EB病毒DNA血浆浓度评估NPC患者放疗敏感性的研究

目的:探讨血浆EBV DNA含量对评估初诊鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者放疗敏感性的临床意义.方法:采用荧光定量Real-time PCR技术分析230例(早期176例,中晚期54例)初诊NPC患者放疗前及放疗后1周、3个月、6个月、9个月、12个月患者血浆EBV DNA拷贝量,结合影像学检查结果判断患者对放疗的敏感性.结果:放疗前早期患者血浆EBV DNA含量43.8％(77/176)＜4000 copies/mL,16.5％ (29/176)＜500 copies/mL.早期患者血浆EBV DNA中位浓度只有4324 (17403-276) copies/mL,拷贝量随复诊时间推移逐渐降低,治疗后12个月早期患者血浆EBV DNA含量57.4％ (101/176)＜4000 copies/mL,35.2％ (62/176)＜ 500 copies/mL,15.9％(28/176)的早期患者影像学和鼻咽镜检查发现肿瘤体积消失；中晚期患者血浆EBV DNA中位浓度高达28035 (42403-6752) copies/mL,治疗后12个月虽然也降低,但是33.3％ (18/54)中晚期患者出现复发,9个中晚期患者(16.7％,9/54)淋巴结转移.结论:早期患者血浆EBV DNA含量放疗1年后明显降低,能够有效反应NPC患者放疗敏感性.中晚期患者血浆EBV DNA含量减少缓慢,且部分患者出现复发或转移,NPC患者放疗敏感性差.     

嗅神经母细胞瘤与EB病毒感染的关系

目的 探讨Epstein-Barr病毒(EBV)在嗅神经母细胞瘤中的表达.方法 应用免疫组织化学方法(Envision法)检测11例嗅神经母细胞瘤EBV抗原的蛋白表达. 结果 嗅神经母细胞瘤EBV感染阳性率为45.5%(6/11),嗅神经母细胞瘤检出率明显高于鼻黏膜炎症者(P＜0.05);嗅神经母细胞瘤中的肿瘤细胞含有EBV潜伏感染期中高拷贝(EBV)含量丰富,阳性信号在强胞质、细胞膜表达. 结论 嗅神经母细胞瘤存在EBV的感染;嗅神经母细胞瘤发生可能与EBV潜伏人鼻黏膜感染有关.     

EBV相关胃癌组织中ras基因突变的检测

目的探讨EBV感染、ras基因突变在EBV相关胃癌（EBVaGC）发生发展中的作用。方法应用PCR-RFLP技术,分别检测13例EBVaGCs、45例与之匹配的EBV阴性胃癌（EBVnGC）以及58例相应癌旁组织中H-ras 12位点,K-ras 12、13位点突变情况。结果检测到2例H-ras 12位点突变,突变率为4.44%（2/58）,均发生在EBVnGC组织。结论胃癌组织ras基因突变率较低,ras基因突变与EBVaGC的发生无明显相关性。     

Epstein-Barr病毒特异性酶类及其抗体研究的进展

本文介绍我室过去10年对EBV特异性酶类及其抗体的研究进展。主要方向为:①EBV特异性DNase抗体(EDAb)血清流行病学及其在鼻咽癌(NPC)早期发现中的作用。②EDAb测定技术的进展。③NPC组织中的EBV-DNase及EBV-DNA多聚酶的研究。应用情况表明EDAb检测在NPC早期发现中具有较高的灵敏度及特异性。NPC组织中的EBV-DNase及EBV-DNA多聚酶的研究可能对NPC的病毒病因的研究有所助益。     

T调节细胞对EB病毒感染B细胞的影响

本文应用细胞培养、免疫酶标和放射免疫测定方法,探讨了鼻咽癌(NPC)病人、EB病毒壳抗原IeA(IgA/VCA)血清学阳性和阴性健康成人的外周血单个核细胞(PBMC),经PHA和ConA诱导产生的调节细胞对EB病毒(EBV)感染B细胞的影响。结果表明:PHA诱导细胞对EBV感染PBMC的EBV核抗原(EBNA)阳性细胞和~3H-TdR掺入量均有抑制作用,而ConA诱导细胞的作用则相反,具有促进作用。上述影响作用可分别被T_4或T_8单克隆抗体(McAb)所阻断,提示诱导细胞对EBV感染PBMC的促进或抑制作用主要与T_4或T_8细胞有关。     

EB病毒感染与乳腺癌发病的关系

①目的通过分析乳腺癌患者癌组织中EB病毒的感染状况,探讨EBV感染基因产物的表达及EBV感染与乳腺癌发生的关系。②方法原位杂交法检测180例乳腺癌患者癌组织及相应癌旁组织石蜡标本中EBV编码的小RNA(EBER1);免疫组化法检测EBV潜伏感染膜蛋白1(LMP1)。③结果180例乳腺癌患者癌组织标本中检测到17例EBER1表达,阳性率为9.4%;而相应癌旁组织中均未检测到EBV感染,二者差异有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌组织中均未检测到LMP1的表达。④结论部分乳腺癌的发生与EBV感染有一定程度的相关性。明确EBV感染在乳腺癌发病机制中的作用对于乳腺癌的早期诊断和治疗有重要作用。     

Epstein-Barr virus infection of sinonasal lymphoepithelial carcinoma in Guangzhou

Objectives To investigate the prevalence of sinonasal lymphoepithelial carcinoma (SNLEC) in Guangzhou, a high incidence area of nasopharyngeal carcinoma (NPC), and to dete ct whether it is associated with Epstein-Barr virus (EBV) infection. Methods Twenty confirmed SNLEC specimens were collected from all of the sinonasal carcin oma biopsies performed in the 8 years 1989-1996 at the Sun Yat-sen University o f Medical Sciences. EBV encoded early RNAs were detected by use of in-situ hyb ridization. A variety of antigens, including the EBV nuclear antigen 1, latent membrane protein 1, BZLF1 protein, diffuse early antigen, viral capsid antigen a nd membrane antigen, were detected using immunohistochemistry. Additionally, 36 NPC specimens were used for comparison. Results Twenty SNLECs were identified. Seventeen SNLECs were developed in the nasal cav ity, and 3 in the maxillary sinus. The mean age (46.25 y), male to female ratio (3∶1), histopathology and lymphoinfiltration of the 20 SNLECs were id entical with those of the 36 NPCs. Thirteen (65.0%) of the 20 SNLECs showed an expansive growth pattern, while 27 (75.0%) of the 36 NPCs showed an infiltrat ing or mixed growth pattern. The majority of cancer cells in all of the 20 SNLE Cs showed EBV encoded early RNAs. The EBV nuclear antigen 1 expression of SNLEC was less intensive than that of NPC. The expression rate of latent membrane pr otein 1 for SNLEC (3/20,15%) was lower than that for NPC (19/36, 52.8%). The e xpression rates of BZLF1 protein (2/20, 10.0%), diffuse early antigen (19/20, 9 5.0%), viral capsid antigen (15/20, 75.0%), and membrane antigen (13/20, 65.0 %) for SNLEC were higher than those (0/36, 0.0%; 31/36, 86.0%; 18/36, 50%; and 14/36, 38.9%) for NPC. Conclusions SNLEC is not uncommon in Guangzhou. This tumour is also consistently associated with EBV infection like NPC. As compared to NPC, the EBV harbored in SNLECs s eems to express the EBV nuclear antigen 1 weakly and has a lower expression rate of latent membrane protein 1 as well as higher expression rates of EBV lytic pr oducts.     

EBV特异性细胞毒淋巴细胞的体外诱导和对鼻咽癌细胞的杀伤活性

目的 探索体外诱导和扩增EBV特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)的方法,探讨其应用于鼻咽癌(NPC)治疗的可能性.方法 用EB病毒转化的B淋巴细胞系为抗原递呈细胞及抗原刺激剂,经照射灭活后刺激自体外周血单个核细胞(PBMC),产生EBV特异性CTL,以抗人CD3抗体OKT-3/同种异体PBMC法扩增.并检测其对NPC细胞的特异性杀伤.结果 在体外有效诱导和扩增了EBV特异性的CTL.扩增前CTL对自体BLCL的杀伤率为76%,对同种异体BLCL的杀伤率为13%,对自体肿瘤细胞的杀伤率为51%,对CNE鼻咽癌细胞的杀伤率为27%.扩增后的杀伤率分别为63%、25%、49%、33%.扩增后CTL对肿瘤杀伤力没有明显下降.结论 EBV特异性CTL能在体外有效地诱导,对NPC细胞有特异性的杀伤力,能在体外大量地扩增,且扩增后对肿瘤的杀伤力没有明显下降,有望成为NPC患者有效的过继免疫治疗方法.