麻黄碱调控AMPK/NF-κB信号通路改善大鼠膝骨关节炎的实验研究

目的 探讨麻黄碱(Ephedrine)调控腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对大鼠膝骨关节炎(KOA)的影响。方法 建立KOA大鼠模型，将大鼠分为Sham组、KOA组、Ephedrine组(40.0 mg/kg)、Ephedrine(40.0 mg/kg)+Compound C组(0.2 mg/kg),药物分组干预后，分别检测大鼠膝关节宽度与疼痛阈值，番红O-固绿染色观察软骨组织病理变化并进行Mankin评分，ELISA法检测关节液TNF-α、IL-1β、COX-2水平，免疫组化检测软骨组织IL-1β、MMP-13蛋白表达，Western blot检测AMPK/NF-κB通路相关蛋白水平。结果 与Sham组比较，KOA组软骨组织损伤严重，膝关节宽度、Mankin评分、关节液TNF-α、IL-1β、COX-2水平及软骨组织IL-1β、MMP-13、p-NF-κB p65/NF-κB p65水平显著升高，疼痛阈值及软骨组织p-AMPK/AMPK水平显著降低(P<0.05);与KOA组比较，Ephedrine组软骨组织病理损伤减轻，膝关节宽度、Man...     

藏红花素调节Hippo-YAP信号通路抑制膝骨关节炎大鼠软骨细胞凋亡

目的 探讨藏红花素（crocin）调节Hippo/Yes相关蛋白（YAP）信号通路对膝骨关节炎（KOA）大鼠软骨细胞凋亡的影响。方法 SD大鼠分为CK组、Model组、低剂量crocin组（crocin-L组，10 mg/kg）、高剂量crocin组（crocin-H组，40 mg/kg）、塞来昔布组（CLCX组，10 mg/kg）、crocin-H+VTPF（YAP抑制剂）组（40 mg/kg+10 mg/kg)，每组12只。观察并记录大鼠热痛阈值、压痛阈值的变化；ELISA法检测大鼠血清中基质金属蛋白酶 (MMP）-3、MMP-13、白细胞介素（IL）-1β、IL-6水平；HE染色检测大鼠软骨组织病理变化并进行Mankin评分；TUNEL染色检测大鼠软骨细胞凋亡；免疫组化、Western blot检测Bcl2相关X蛋白（Bax）、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、p-YAP、YAP蛋白表达。结果 与CK组比较，Model组大鼠热痛阈值、压痛阈值、p-YAP蛋白表达降低，软骨组织病理损伤严重，MMP-3、MMP-13、IL-1β、IL-6水平、Mankin评分、软骨细胞凋亡率、Bax、Caspase-3、YAP蛋白表达升高（P＜0.05）；与Model组比较，crocin-L组、crocin-H组、CLCX组对应指标变化趋势与上述相反（P< 0.05）；VTPF减弱了高剂量crocin对KOA大鼠软骨细胞凋亡的抑制作用。结论 crocin可能通过激活Hippo/YAP信号通路抑制KOA大鼠软骨细胞凋亡。     

右归丸对膝骨性关节炎模型鼠基质金属蛋白酶及炎性因子表达的影响

目的观察右归丸对膝骨性关节炎大鼠血清基质金属蛋白酶和炎症因子含量的影响,探讨右归丸对膝骨性关节炎是否具有治疗作用。方法 SPF级SD大鼠60只,随机分为假手术组、模型组、右归丸低、中、高剂量组和硫酸氨基葡萄糖组,每组10只。采用改良Hulth法复制膝骨关节炎大鼠模型。造模6周后,假手术组和模型组灌服蒸馏水,其他4组灌服相应的药物,干预8周后,HE染色法观察大鼠膝关节软骨的形态变化及Mankin评分,ELISA法检测大鼠血清中MMP-1、MMP-3、MMP-13、TIMP-1、IL-1β、IL-6和TNF-α的含量。结果与假手术组比较,模型组大鼠关节软骨Mankin评分显著升高,血清MMP-1、MMP-3、MMP-13、IL-1β、IL-6、TNF-α含量升高(均P0.05);而其血清TIMP-1含量降低,差异有统计学意义(均P0.05)。与模型组比较,右归丸高剂量组和硫酸氨基葡萄糖组Mankin评分降低,同时,右归丸高剂量组和硫酸氨基葡萄糖组大鼠血清MMP-1、MMP-3、MMP-13、L-1β、IL-6、TNF-α含量均下降(均P0.05);而其TIMP-1升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论右归丸可能是通过抑制基质金属蛋白酶活性和炎症因子含量表达来延缓KOA软骨的退变。     

长期低温环境对大鼠膝骨关节炎进展的影响

目的探索低温环境对大鼠膝骨关节炎进展的影响。 方法2019年7月至2019年10月将20只8周龄雄性SD-大鼠根据体重大小编号,将所得编号通过随机数字表法随机分为对照组[n ＝10,饲养温度(25±2)℃]和低温组[n ＝10,饲养温度(15±2)℃],定期剪除两组大鼠双侧膝关节表面毛发。分别在饲养4周和12周后拍摄左膝关节侧位片观察大鼠膝关节影像学情况。饲养12周后,采用颈椎脱臼法处死大鼠,使用酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠膝关节关节液中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)与基质金属蛋白酶-13(MMP-13)蛋白表达;苏木精-伊红(HE)染色观察软骨组织情况,并结合Mankin’s评分进行对比;免疫组化检测软骨细胞MMP-13蛋白表达情况。IL-1β、TNF-α、VEGF、MMP-13蛋白表达与Mankin’s评分比较均采用独立样本t检验分析。 结果在低温环境下饲养4周后,SD-大鼠的膝关节影像学表现与对照组并无明显差异。在低温环境下饲养12周后,相对于对照组,膝关节侧位片显示低温组大鼠膝关节间隙明显变窄,关节面欠光滑,可见部分关节软骨面塌陷、关节周围骨赘形成;HE染色显示低温组大鼠膝关节软骨面塌陷,小血管侵入软骨层,表层和深层软骨细胞坏死,软骨细胞排列紊乱,两组大鼠的软骨Mankin’s评分差异具有统计学意义(t＝8.01,P<0.01);ELISA与免疫组化结果显示,低温组大鼠膝关节关节液中IL-1β、TNF-α、VEGF、MMP-13蛋白表达增加,差异具有统计学意义(t＝3.70、3.57、4.47、16.11,均为P<0.01)。 结论长期低温环境能够促进IL-1β、TNF-α、VEGF、MMP-13蛋白的表达增加,并最终造成关节软骨的丢失,促进骨关节炎的发生。     

5氟脲嘧啶关节腔注射治疗兔膝骨性关节炎的实验研究

[目的]评价5氟脲嘧啶（5-Fluorouracil，5Fu）关节腔注射治疗兔膝骨性关节炎（osteoarthritis，OA）的疗效。[方法]24只兔子制成骨关节炎模型随机分成OA组、5Fu组和对照组，OA组立即处死，5Fu组按5Fu2ms／kg关节腔注射，每周1次连续4次，对照组注射等量生理盐水，最后1次治疗后1周处死。观察3组滑膜组织的光镜、电镜改变及软骨的光镜、MMP-1免疫组化改变，比较软骨Mankin＇s评分及关节液中IL-1的浓度。[结果]5Fu组可见软骨破坏减轻，滑膜炎症明显抑制，Mankin’s评分明显改善（P〈0．01）；关节液IL-1浓度降低（P〈0．05），关节软骨中MMP-1表达减弱。[结论]5Fu关节腔内注射能抑制滑膜炎症，缓解软骨的破坏。     

阿仑膦酸钠对前交叉韧带切断大鼠关节软骨退变的影响

[目的]观察阿仑膦酸钠(alendronate,ALN)对前交叉韧带切断术(anterior cruciate ligament transaction,ACLT)后骨关节炎模型大鼠膝关节软骨和软骨下骨的影响.[方法]24只3个月龄雌性SD大鼠按体重随机分为假手术组(Sham,n=8)、手术组(ACLT+NS,n=8)及给药组(ACLT+ALN,n=8),术后ALN组给予阿仑膦酸钠20 μg·kg-1·2 d-1皮下注射,连续给药12周;ACLT组则给予等剂量无菌生理盐水.股骨远端软骨下骨骨密度和胫骨近端骨组织形态计量学分析,通过关节软骨Mankin评分和MMP-13免疫组化染色观察关节软骨的退变和软骨基质的降解程度.[结果](1)ACLT+NS组股骨内侧髁骨密度显著低于Sham组和ACLT+ALN组(P＜0.05);(2)ACLT+ALN组的胫骨近端骨量显著高于ACLT+NS组(P＜0.05);(3)ACLT+ALN组的关节软骨Mankin评分和MMP-13免疫组化染色平均积分光密度显著低于ACLT+Ns组(P＜0.05).[结论]阿仑膦酸钠20 μg·kg-1·2 d-1皮下注射12周可以预防ACLT大鼠关节软骨退变,其作用机制可能与下调MMP-13的表达和增加软骨下骨骨量有关.     

痹祺胶囊对兔骨性关节炎关节软骨破坏的干预作用

目的：探讨痹祺胶囊对骨性关节炎关节软骨破坏的干预作用。方法：6月龄新西兰大耳白兔25只,随机分为假手术组、模型组、痹祺胶囊低剂量组、痹祺胶囊中剂量组、痹祺胶囊高剂量组,每组各5只。使用ELISA方法测定血清MMP-3、TIMP-1及IL-6含量,HE染色进行关节软骨组织形态学观察。结果：组织形态学观察痹祺胶囊可改善骨性关节炎的软骨病理改变。中、高剂量痹祺胶囊组血清中的MMP-3、IL-6含量明显低于模型组（P〈0.05）,TIMP-1/MMP-3较模型组升高。结论：痹祺胶囊对骨性关节炎模型关节软骨破坏具有一定的保护作用,其机理可能与降低血清中MMP-3、IL-6含量,改善TIMP-1/MMP-3水平有关。     

仙灵骨葆延缓前交叉韧带切断后大鼠关节软骨退行性变的研究

目的 观察仙灵骨葆(xianlinggubao,XLGB)对前交叉韧带切断术(anterior cruciate ligament transection,ACLT)后骨关节炎大鼠模型膝关节软骨和软骨下骨的影响.方法 24只3月龄雌性SD大鼠按体重随机分为3组(n=8):假手术组(A组)、ACLT组(B组)和XLGB组(C组).B组和C组大鼠行右膝关节ACLT:A组同法打开关节腔暴露ACL后缝合.术后4 d C组开始持续XLGB灌胃250 mg/(kg·d),A、B组给予等剂量生理盐水.术后12周取材行大体观察,关节软骨Matin法评分,MMP-13免疫组织化学染色观察关节软骨的退行性变和软骨基质的降解程度,股骨远端软骨下骨骨密度和胫骨近端骨组织形态计量学分析.结果 术后12周大体观察A组无溃疡,C组较B组溃疡面小;C组关节软骨Mankin评分和MMP-13免疫组织化学染色积分光密度值低于B组,差异有统计学意义(P<0.05).B组股骨内侧髁骨密度低于A组和C组,差异有统计学意义(P<0.05):C组的胫骨近端骨量高于B组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 XLGB 250 mg/(kg·d)灌胃12周可以预防ACLT大鼠关节软骨退行性变,其作用机制可能与下调MMP-13的表达和增加软骨下骨骨量有关.     

紫云英苷对膝关节骨性关节炎大鼠JNK/p38MAPK信号通路的影响

目的 探究紫云英苷对膝关节骨性关节炎（KOA）大鼠的保护作用以及对JNK/p38MAPK信号通路的影响。方法 90只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、塞来昔布组（18 mg/kg）、紫云英苷低（25 mg/kg）、中（50 mg/kg）、高（100 mg/kg）剂量组,每组15只。改良Huith法建立KOA模型,术后灌胃6周。游标卡尺测量大鼠膝关节直径,足趾容积仪测量大鼠足趾容积;ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平;HE染色观察膝关节软骨组织病理变化;ELISA法检测软骨组织TGF-β1、MMP-3水平;Western Blot法检测p-JNK、JNK、p-p38MAPK、p38MAPK蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠软骨组织表面被破坏,组织层变薄,细胞数量减少且排列紊乱,潮线被大量破坏;膝关节直径与足趾容积明显变大（P＜0.05）;血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平以及软骨组织中TGF-β1、MMP-3水平,p-JNK/JNK、p-38MAPK/p38MAPK比值显著升高（P＜0.05）。与模型组比较,塞来昔布组与紫云英苷各剂量组软骨组织病变明显减轻;膝关节直径与足趾容积明显缩小（P＜0.05）;血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平以及软骨组织中TGF-β1、MMP-3水平,p-JNK/JNK、p-38MAPK/p38MAPK比值显著降低（P＜0.05）,且紫云英苷各剂量组间具有剂量效应（P＜0.05）;紫云英苷高剂量组与塞来昔布组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 紫云英苷可能通过抑制JNK/p38MAPK信号通路激活,减轻炎症反应,改善KOA大鼠膝关节软骨组织损伤。     

降钙素对OA大鼠关节软骨及软骨下骨的保护作用

[目的]研究降钙素(calcitonin,CT)对骨性关节炎(OA)模型大鼠关节软骨和软骨下骨的保护作用.[方法]采用前叉韧带切断(anterior cruciate ligament transection,ACLT)法制备大鼠OA模型,30只12周龄雌性SD大鼠,随机分成3组:假手术组(Sham, n=10)、手术组(ACLT+NS, n=10)和给药组(ACLT+CT, n=10).术后ACLT+CT组皮下注射鲑鱼降钙素10 IU·kg-1·d-1,连续12周;ACLT+NS组则给予等量生理盐水.术后12周处死动物取材,采用Mankin评分系统评分;用双能骨密度仪测量右侧股骨远端1/4骨密度和股骨内外侧髁软骨下骨的骨密度;右侧股骨髁脱钙后切片,行番红"O"染色和MMP-13免疫组化染色;右侧胫骨近端做硬组织切片,测量软骨下松质骨的骨组织形态计量学参数.[结果](1)Sham组和ACLT+CT组关节软骨Mankin评分结果显著低于ACLT+NS组.(2)ACLT+NS组软骨下骨骨密度、骨量(BV/TV,Tb.Th)均显著高于Sham组及ACLT+CT组.(3)ACLT+NS组关节软骨MMP-13表达显著高于Sham组及ACLT+CT.[结论]降钙素10 IU·kg-1·d-1皮下注射12周能够抑制OA大鼠关节软骨的退变,其作用机制可能与下调关节软骨中MMP-13的表达及抑制软骨下骨的增生硬化并改善其微观结构有关.     

右归丸对骨性关节炎模型大鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的分析右归丸对骨性关节炎大鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响。方法将64只成年SD大鼠利用随机数字表法分为4组,每组15只。正常组不做任何处理;模型组、右归丸组、抑制剂组采用经典的Hulth法建立膝骨性关节炎模型,造模6周后,右归丸组灌服20 g/(kg·d)的右归丸;抑制剂组腹腔注射100μg/(kg·d)的TGF-β1/Smads信号通路抑制剂SB431542,同时灌服20 g/(kg·d)的右归丸;模型组灌服等剂量的生理盐水,连续给药8周。末次给药24 h后取关节软骨组织,制作病理切片观察软骨病理改变,采用ELISA法检测软骨组织中肿瘤坏死因子α与白细胞介素1β水平,免疫组化染色观察软骨组织中Ⅱ型胶原蛋白与基质金属蛋白酶13(MMP-13)阳性表达,采用RT-PCR法检测软骨组织中TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达,采用Western blot检测软骨组织中TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达。结果与模型组比较,抑制剂组软骨组织Mankin评分降低(P0.05),软骨组织中肿瘤坏死因子α与白细胞介素1β水平降低(P0.05),Ⅱ型胶原蛋白阳性表达升高(P0.05),MMP-13阳性表达降低(P0.05),TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达升高(P0.05),TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达升高(P0.05)。与抑制剂组比较,右归丸组软骨组织Mankin评分降低(P0.05),软骨组织中肿瘤坏死因子α与白细胞介素1β水平降低(P0.05),Ⅱ型胶原蛋白阳性表达升高(P0.05),MMP-13阳性表达降低(P0.05),TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达升高(P0.05),TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达升高(P0.05)。结论右归丸对骨性关节炎大鼠软骨组织具有保护作用,其作用机制可能与TGF-β1/Smads信号通路有关。     

右归丸通过PI3K/Akt/mTOR信号通路对膝骨关节炎模型鼠软骨组织保护作用的研究

目的研究右归丸对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型大鼠磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidyl inositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)信号通路的影响。方法采用改良Hulth法制备大鼠KOA模型,模型制备成功6周后用右归丸进行干预,灌胃2个月后取材。HE法观察各组大鼠软骨组织病理形态改变并进行Mankin评分,实时荧光定量PCR法检测各组大鼠软骨组织白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)和基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的表达变化,Western blot法检测各组大鼠软骨组织磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidyl inositol 3-kinase,PI3K)、磷酸化的蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,pAkt)、磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin,pmTOR)和Beclin1的蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠软骨组织Makin评分明显升高,软骨组织IL-1β、MMP-3和MMP-13的基因表达均明显升高,软骨组织PI3K、pAkt和pmTOR的蛋白表达均明显升高(P0. 01);而模型组大鼠软骨组织Beclin1的蛋白表达明显降低(P0. 01);模型组关节软骨边缘严重破坏,软骨细胞排列紊乱。与模型组相比,右归丸组大鼠软骨组织Makin评分明显降低,软骨组织IL-1β、MMP-3和MMP-13的基因表达均明显降低,软骨组织PI3K、pAkt和pmTOR的蛋白表达均明显降低,Beclin1的蛋白表达明显升高(P0. 05或P0. 01),其软骨结构趋于正常,软骨细胞分布偶见不均,关节软骨表面欠光滑。结论右归丸可能是通过抑制IL-1β、MMP-3、MMP-13、PI3K、p Akt、pmTOR的表达和增强Beclin1的表达来达到治疗KOA的目的。     

仙灵骨葆对兔膝骨性关节炎治疗作用的研究

[目的]研究仙灵骨葆(xianlinggubao, XLGB)对兔骨性关节炎关节软骨及软骨下骨的保护作用.[方法]30只3个月龄雄性日本大耳白兔,随机分为对照组(Sham)、盐水组(ACLT+NS)和仙灵骨葆组(ACLT+XLGB),每组各10只.盐水组和仙灵骨葆组行右膝关节前交叉韧带切断术(anterior cruciate ligament transaction, ACLT)造成膝骨性关节炎模型.术后仙灵骨葆组125 mg/(kg*d)灌胃;盐水组则给予等剂量生理盐水.6周后处死动物,取股骨测量骨密度,之后脱钙制片,行HE染色、Mankin评分及BMP-2、MMP-13免疫组化染色;取右膝胫骨近端包埋,制成硬组织切片,用于骨组织形态计量学测量.[结果](1)Mankin评分:仙灵骨葆组显著低于盐水组.(2)股骨远端骨密度及胫骨近端软骨下骨骨量:仙灵骨葆组均显著高于盐水组.(3)免疫组化:仙灵骨葆组MMP-13的表达显著低于盐水组,BMP-2的表达显著高于盐水组.[结论]仙灵骨葆125 mg/(kg*d)灌胃能够部分阻止骨关节炎兔关节软骨的退变,其作用机制可能与下调MMP-13的表达,上调BMP-2的表达,同时增加软骨下骨骨量,改善其微观结构有关.     

Caspase-1表达和软骨细胞凋亡在骨关节炎的意义

目的观察骨关节炎（osteoarthritis,OA）关节软骨标本的Caspase-1表达和软骨细胞凋亡的程度,初步探讨两者的相关性和与OA病变程度的关系。方法选取2007年3月至2007年11月进行关节置换的OA患者的关节软骨标本26例作为OA组,男8例,女18例;髋20例,膝6例;年龄52～81岁,平均60岁。选取截肢的正常关节软骨标本10例作为对照组,男7例,女3例;年龄16～45岁,平均40岁;均排除结构性破坏。按改良Mankin病理评分进行分级,将标本分成正常软骨组0～1分（A组）即对照组;OA软骨轻度退变组2～5分（B组）、OA软骨中度退变组6～9分（C组）和OA软骨重度退变组10～14分（D组）,B～D组即OA组。分别采用HE染色和番红O/固绿染色后,采用免疫组化和TUNEL检测法,检测软骨细胞中Caspase-1的表达和凋亡细胞阳性率。结果 （1）对照组Caspase-1表达低于OA组;Caspase-1的表达与Mankin评分呈正相关;（2）对照组的凋亡细胞阳性率低于OA组的凋亡细胞阳性率;软骨凋亡细胞阳性率与Mankin病理评分呈正相关;（3）A～D组Caspase-1的表达和凋亡细胞阳性率不存在相关性。结论 （1）Caspase-1与OA发生发展有关,能反应OA软骨的病变进展程度;（2）软骨细胞凋亡是OA的可能发病机理,其凋亡率可能影响OA病程进展。     

由IL-10/JAK2/STAT3通路探讨养血柔筋方对兔膝骨关节炎软骨损伤的研究

目的 由白细胞介素(IL)-10/Janus激酶(JAK2)/信号传导与转录激活因子3(STAT3)通路探讨养血柔筋方对兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)软骨损伤的影响及机制。方法 将新西兰雄兔分为空白组、KOA模型组、养血柔筋方组(50 mg/kg)、塞来昔布组(24 mg/kg)、JAK2激活剂组(50 mg/kg养血柔筋方+0.11 mg/kg AG490),每组6只。通过木瓜蛋白酶诱导KOA兔模型，造模成功后给予相应治疗。运用HE染色观察软骨组织病理变化，Mankin评分进行定量评分；透射电镜观察软骨组织的超微结构；ELISA测量血清IL-1β、IL-6含量；免疫组织化学检测软骨组织基质金属蛋白酶13(MMP13)、转化生长因子-β₁(TGF-β₁)、Ⅱ型胶原蛋白(COl-Ⅱ)蛋白表达；Western Blot检测软骨组织IL-10/JAK2/STAT3通路蛋白表达。结果 与空白组比较，KOA模型组中软骨组织病变严重，Mankin评分、IL-1β和IL-6含量、MMP13、p-JAK2和p-STAT3蛋白...     

SH关节腔内注射治疗兔膝关节炎的实验研究

[目的]探讨透明质酸钠（sodium hyaluronate，SH）关节腔内注射治疗膝骨性关节炎（OA）的效果。[方法]24只兔子建立骨关节炎动物模型，随机分OA组、SH组、对照组，观察3组软骨、滑膜细胞病理切片及软骨MMP-1免疫组化，进行软骨Mankin＇s评分，以及检测血液和关节液的IL-1含量的效果。[结果]SH组可见软骨破坏减轻，滑膜纤维增生减少，Mankin＇s评分有明显改善（P〈0．05）；血、膝关节滑液IL-1浓度降低（P〈0．05），但关节软骨中MMP表达仍然活跃。[结论]SH能减少滑液中炎性介质IL-1的分泌，从而减轻滑膜炎症，缓解对软骨细胞的破坏，延缓OA进展，但仍阻止不了OA进展。     

大蒜素对兔膝骨关节炎作用的实验研究

[目的]探讨大蒜素对兔膝骨关节炎的作用。[方法]将30只家兔随机分为空白对照组、模型对照组和大蒜素组,每组10只;除空白对照组外其余2组按改良Hulth法建立模型,术后开始灌服药物,大蒜素组(大蒜素,128 mg/kg/d)、空白对照组和模型对照组(等量生理盐水20 ml),连用8周。术后8周处死所有家兔取右膝股骨髁大体观察;苏木精-伊红(HE)和番红O(SA-O)染色对股骨髁关节软骨行Mankin评分;采用q RTPCR法检测股骨内侧髁负重区软骨组织interleukin-1β(白细胞介素-1β,IL-1β)、matrix metalloproteinase-3(基质金属蛋白酶-3,MMP-3)和tissue inhibitor of metalloproteases-1(基质金属蛋白酶组织抑制因子-1,TIMP-1)的m RNA相对表达量。[结果]三组之间比较,空白对照组的Mankin评分最低,IL-1β、MMP-3和TIMP-1 m RNA表达量最低,模型对照组和大蒜素组,分别与空白对照组比较,上述指标差异均有统计学意义(P<0.05);与模型对照组比较,大蒜素组Mankin评分降低,IL-1β、MMP-3、TIMP-1 m RNA表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]大蒜素能够改善兔膝骨关节炎Mankin评分并能够下调股骨髁关节软骨中IL-1βm RNA、MMP-3m RNA表达,上调TIMP-1 m RNA表达量。     

降钙素在体内体外实验中对兔关节炎关节软骨退变及软骨下骨骨代谢的影响

[目的]研究降钙素(calcitonin, CT)对骨性关节炎关节软骨退变和软骨下骨骨代谢的影响.[方法]30只3个月龄雌性日本大耳白兔随机分为三组,其中两组行右膝关节前交叉韧带切断术(anterior cruciate ligament transaction,ACLT),分为ACLT+CT组和ACLT+NS组,第3组为Sham组.ACLT+CT给予每日1次皮下注射降钙素5 IU/(kg·d),持续8周,ACLT+NS组给予同样剂量生理盐水.术后8周后处死所有动物.取股骨髁制成切片行MMP-13和Ⅱ型胶原免疫组化染色.取胫骨近端制成硬组织切片行骨形态计量学检测.体外实验中,取兔膝关节软骨,经消化、培养,将第3代软骨细胞分三组:向IL-1β组加入人重组IL-1β(10 ng/ml). IL-1β+CT组加入人重组IL-1β (10 ng/ml)2 d后,再向培养液中加入CT(50 ng/ml).正常组不加任何诱导剂和干扰剂培养.然后行MMP-13、Ⅱ型胶原免疫组化检测和Realtime RT-PCR法检测.[结果]Sham组和ACLT+CT组软骨下骨骨小梁相对体积和厚度等均显著高于ACLT+NS组.Sham组和ACLT+CT组的Ⅱ型胶原的光密度值均显著高于ACLT+NS组,而MMP-13的光密度值显著低于ACLT+NS组(P<0.05).正常组和IL-1β+CT组的Ⅱ型胶原光密度值均显著高于IL-1β组而MMP-13的光密度值都显著低于IL-1β组(P<0.05).在正常组和IL-1β+CT组中Ⅱ型胶原的mRNA含量均显著高于IL-1β组而MMP-13的mRNA含量均显著低于IL-1β组(P<0.05).[结论]降钙素5 IU/(kg·d)皮下注射能够增加ACLT兔膝关节软骨Ⅱ型胶原的分泌和抑制MMP-13的表达,并可能通过调节软骨下骨的骨代谢和微结构来保护关节软骨; CT(50 ng/ml)能增加体外培养的含有IL-1β(10 ng/ml)的软骨细胞中Ⅱ型胶原的含量和抑制MMP-13分泌.     

跳骨片抑制大鼠膝骨关节炎Wnt/β-catenin信号转导通路介导炎症反应的机制研究

目的探讨跳骨片对大鼠膝骨关节炎(OA)Wnt/β-catenin信号转导通路介导炎症反应的机制。方法将30只8周龄雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、跳骨片组,每组10只。空白组不予任何处理,模型组、跳骨片组均采用改良Hulth法建立OA动物模型。建模成功后跳骨片组每天予跳骨片0.32 g/kg灌胃,空白组和模型组每天予等量生理盐水灌胃,干预12周后分别取3组大鼠双侧膝关节股骨髁、关节软骨和滑膜,将股骨髁常规固定、脱钙、包埋及切片,对切片分别进行苏木精-伊红(HE)、甲苯胺蓝染色,光镜下观察关节软骨组织形态学变化;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测滑膜中白细胞介素(IL)-1β、基质金属蛋白酶(MMP)-13、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;蛋白质免疫印迹检测关节软骨β-catenin、Wnt-4蛋白表达。结果模型组滑膜中,IL-1β表达量明显高于空白组和跳骨片组(P0.01),MMP-13表达量高于空白组和跳骨片组(P0.05),TNF-α表达量明显高于空白组(P0.01)、高于跳骨片组(P0.05);模型组关节软骨中,β-catenin蛋白表达量明显高于空白组和跳骨片组(P0.01),Wnt-4蛋白表达量高于空白组和跳骨片组(P0.05)。HE染色显示跳骨片组软骨破坏程度低于模型组,甲苯胺蓝染色显示跳骨片组软骨细胞蛋白多糖含量高于模型组(P0.01)。结论跳骨片能抑制关节软骨Wnt/β-catenin信号转导通路,降低滑膜中IL-1β、MMP-13、TNF-α表达,抑制炎症反应介导的软骨基质降解,延缓关节软骨退变。