半乳糖化脂质体在小鼠体内肝靶向性评价

 目的以阿霉素为模型药物,研究半乳糖化脂质体在小鼠体内的肝靶向性和肝实质细胞靶向性。方法以新型半乳糖化胆固醇,(5-胆甾烯-3β-氧基)4-氧代-4-[2-乳糖酰胺基乙氨基]丁酸酯(CHS-ED-LA)为肝靶向辅料,采用硫酸铵梯度法制备阿霉素普通脂质体和半乳糖化脂质体。小鼠尾静脉注射阿霉素溶液、普通脂质体及半乳糖化脂质体(10 mg·kg^-1),采用荧光分光光度法测定阿霉素在小鼠体内各组织及肝细胞中的含量。用靶向效率(Te)评价阿霉素半乳糖化脂质体的肝靶向性。结果阿霉素脂质体包封率>95%,平均粒径约80 nm。与阿霉素溶液组比较,阿霉素普通脂质体及阿霉素半乳糖化脂质体组的体内循环时间明显延长,而在心和肾两组织中的量显著降低。普通脂质体和CHS-ED-LA分别占脂质总量2%,5%,10%的半乳糖化脂质体的阿霉素肝靶向效率(T_e)(%)分别为15.41,18.21,32.16,50.07,肝实质细胞与非实质细胞的分布比分别为52∶48,58∶42,78∶22,88∶12。结论半乳糖化脂质体可显著提高阿霉素的肝靶向性及肝实质细胞靶向性。     

西瑞香素在大鼠体内组织分布研究

 目的研究西瑞香素在大鼠体内的组织分布。方法健康SD大鼠,单剂量腹腔注射西瑞香素12 mg·kg-1,并于给药后5,45,120 min后采集大鼠全血和心、肝、脾、肺、肾、胃、小肠、脑组织,利用HPLC测定血浆和各组织中西瑞香素的浓度。结果大鼠腹腔注射西瑞香素12 mg·kg-1后,在胃、脾脏中浓度较高,其他组织和血浆中较低。结论研究西瑞香素的组织分布特征可为该药的进一步研究开发和临床应用提供重要的参考依据。     

乳糖化羧甲基壳聚糖包覆苦参碱脂质体在大鼠体内组织分布研究

 目的研究乳糖化羧甲基壳聚糖包覆的苦参碱脂质体的制备方法并考察其在大鼠体内的组织分布。方法采用逆相蒸发-短时超声法制备苦参碱脂质体。合成乳糖化羧甲基壳聚糖并用其包覆苦参碱脂质体。采用反相高效液相色谱法测定大鼠组织中的苦参碱浓度。结果包覆后脂质体的平均粒径无明显变化,Zeta电位由负转正,包封率为51.0%,渗漏率略有降低,包覆前后的脂质体的体外释放均符合Higuchi方程。乳糖化羧甲基壳聚糖包覆的苦参碱脂质体的肝脏AUC值相对于苦参碱脂质体和苦参碱溶液具有显著性差异(P<0.05),包覆后的苦参碱脂质体相对摄取率为肺脏>肝脏>脾脏。乳糖化羧甲基壳聚糖包覆的苦参碱脂质体、苦参碱脂质体和苦参碱溶液肝脏靶向效率分别为28.85%,20.93%和13.31%。结论与苦参碱溶液和普通脂质体相比,乳糖化羧甲基壳聚糖包覆的苦参碱脂质体可以提高肝靶向性。     

半乳糖化的波棱芴酮脂质体对四氯化碳致肝损伤小鼠的保护作用

目的:以半乳糖基修饰的脂质(LAC)为肝靶向材料,制备载波棱芴酮肝靶向脂质体,考察其与波棱芴酮脂质体对CCl4致肝损伤小鼠保护作用的疗效差异。方法:采用薄膜分散法制备波棱芴酮半乳糖化脂质体、波棱芴酮脂质体,并对半乳糖化的波棱芴酮脂质体进行质量评价。体内药效实验,小鼠随机分为空白组、模型组、波棱芴酮单体组、波棱芴酮脂质体组、波棱芴酮半乳糖化脂质体组。每日给小鼠尾静脉注射生理盐水或单体、波棱芴酮脂质体、波棱芴酮半乳糖化脂质体1次,给药剂量20 mg/kg,共7天。实验末期,腹腔注射CCl_4建立小鼠急性肝损伤模型。肝脏称重,计算肝脏系数,并测定各组小鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等指标,HE染色对肝组织进行组织病理学检查。结果:制备的波棱芴酮半乳糖化脂质体平均粒径(128.9±1.8)nm,分散系数为0.172±0.006,给药剂量为20mg/kg的体内药效结果表明,与波棱芴酮脂质体组相比,半乳糖化的波棱芴酮脂质体组显著降低CCl_4致急性肝损伤模型小鼠肝脏系数和血清ALT、AST水平,肝组织病理形态损伤减轻,肝脏SOD和GSH-Px活性升高,减少肝组织匀浆中MDA的含量。结论:经半乳糖基修饰的脂质体能够提高药物在肝脏的聚集,增强CCl_4致化学性肝损伤小鼠的保护作用。     

不同剂量西瑞香素及其代谢产物在大鼠尿中的排泄

目的： 研究不同剂量西瑞香素及其葡萄糖醛酸化代谢产物在大鼠尿中的排泄动力学。 方法： 将西瑞香素制成混悬液,按50,100,200 mg·kg^-1给大鼠灌胃,于灌胃后不同时间收集尿液,用β-葡糖醛酸苷酶溶液处理尿液。采用高效液相色谱法测定尿液中西瑞香素及其葡萄糖醛酸化代谢产物的浓度。 结果： 50,100,200 mg·kg^-13种给药剂量时,累积经尿液排泄的原形药物量为（23.13±2.36）,（41.74±2.02）和（80.01±3.21）μg,累积经尿液排泄的葡萄糖醛酸结合形药物为（37.51±4.51）,（61.17±3.90）和（131.25±13.85）μg。 结论： 西瑞香素在大鼠尿液中葡萄糖醛酸化代谢产物的排泄量大于原形排泄量,原形及其葡萄糖醛酸化代谢产物的排泄呈现明显的剂量依赖性特征。     

LC-MS/MS同时测定大鼠血浆中瑞香素、西瑞香素和瑞香新素及其药代动力学研究

建立同时测定大鼠灌胃祖师麻提取物后血浆中瑞香素、西瑞香素和瑞香新素的HPLC-MS/MS分析方法,并用于计算3个成分在大鼠体内的药代动力学参数。试验采用6只SD大鼠,口服给予祖师麻提取物(瑞香素、西瑞香素和瑞香新素的给药量分别是88.40,3.24,4.28 mg·kg~(-1)),以五味子醇甲为内标,用LC-MS/MS测定给药后血浆中药物浓度,绘制血药浓度-时间曲线,并用Kinetica 4.4软件计算相关药代动力学参数。试验结果显示,瑞香素、西瑞香素和瑞香新素的线性范围均为5~1 000μg·L~(-1),方法学考察符合要求。日内、日间变异系数(RSD)均小于15%,精密度和准确度符合生物样品分析要求。瑞香素、西瑞香素和瑞香新素口服给药后的T_(max)分别为4,2.92,2 h;C_(max)分别为858.96,178.00,36.67μg·L~(-1);AUC_(0-t)分别为10 566.4,905.89,355.11μg·L~(-1)·h;半衰期t1/2分别为5.19,3.50,4.95 h;平均驻留时间MRT分别为9.43,6.95,8.27 h。因此,该研究建立的LC-MS/MS分析方法准确灵敏,适于对SD大鼠口服祖师麻提取物后的瑞香素、西瑞香素和瑞香新素的药代动力学研究。     

藏药绿萝花相关单体对3T3-L1细胞内PPARs蛋白表达的影响

目的研究藏药绿萝花中12种单体化合物[水杨酸、去甲基丁香色原酮、银锻苷、十五烷酸、伞形酮、西瑞香素、结香酸、结香苷C、(3S)-1,2,3,4-四氢-β-咔啉-3-羧酸、gardenrd A、西瑞香素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、西瑞香素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷]对过氧化物酶体增殖因子活化受体(PPARs)蛋白表达水平的影响。方法采用高胰岛素诱导建立3T3-L1胰岛素抵抗细胞模型,以降低细胞中PPARs水平,并给予12种绿萝花单体化合物低、高剂量(40、80μmol·L-1)进行干预;采用蛋白质免疫印迹(Western Blot)法检测模型细胞PPAR-α/β/γ蛋白表达情况。结果与正常组比较,模型组3T3-L1胰岛素抵抗细胞中的PPAR-α/β/γ蛋白表达水平均显著降低(P 0.01)。与模型组比较,西瑞香素、结香苷C、gardenrd A、西瑞香素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖、西瑞香素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷高剂量组的PPAR-α蛋白表达显著升高(P 0.05,P 0.01);去甲丁香色原酮低剂量组、西瑞香素高剂量组及西瑞香素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷高、低剂量组的PPAR-β蛋白表达水平显著提高(P 0.05,P 0.01);十五烷酸高剂量组、gardenrd A高剂量组、西瑞香素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷高剂量组及西瑞香素高、低剂量组的PPAR-γ蛋白表达水平显著提高(P 0.05,P 0.01)。结论藏药绿萝花中的单体化合物西瑞香素、西瑞香素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、gardenrd A能够三重/双重激活3T3-L1胰岛素抵抗细胞内的PPARs蛋白表达水平,为潜在的PPARs激动剂。     

化浊解毒方对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠糖脂代谢及肝脏脂素-2表达水平的影响

目的探讨化浊解毒方对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠糖脂代谢及肝脏中脂素-2(Lipin-2)表达水平的影响。方法选择健康雄性SD大鼠40只,自适应喂养1周后,随机选择正常喂养的8只SD大鼠作为空白对照组,其余SD大鼠以高脂饲料联合链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病胰岛素抵抗模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、化浊解毒方低剂量组、化浊解毒方中剂量组、化浊解毒方高剂量组,每组8只。化浊解毒方低、中、高剂量组分别给予化浊解毒颗粒生药1.5 g/(kg·d)、3.0 g/(kg·d)、6.0 g/(kg·d)灌胃,空白对照组和模型组给予同体积的生理盐水灌胃,均持续4周。灌胃结束后,取各组大鼠空腹血检测血糖(FPG)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感性指数(HOMA-ISI);处死大鼠,采用Western blot法检测各组大鼠肝脏组织中Lipin-2蛋白相对表达量,采用HE染色法观察肝脏组织形态学变化。结果模型组FPG、TG、TC、FINS、HOMA-IR及肝脏组织中Lipin-2蛋白相对表达量均明显高于空白对照组(P均0.05),HOMA-ISI明显低于空白对照组(P0.05);化浊解毒方各组FPG、TG、TC、FINS、HOMA-IR及肝脏组织中Lipin-2蛋白相对表达量均明显低于模型组(P均0.05),HOMA-ISI均明显高于模型组(P均0.05)。化浊解毒方各组肝组织病理改变较模型组改善明显,且中、高剂量组改善更明显。结论化浊解毒方能显著改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗状态和糖脂代谢异常,机制可能与降低肝脏中Lipin-2表达有关。     

西瑞香素体外抑制破骨细胞分化和促进成骨细胞增殖的活性研究

目的:研究西瑞香素对破骨细胞分化及成骨细胞增殖作用的影响。方法:以依普黄酮(10~(-8)mol/L)作为阳性对照,采用1α,25-(OH)2Vit D3诱导乳兔骨髓细胞获得破骨细胞,通过TRAP活力测定、TRAP+细胞计数和骨吸收陷窝面积检测西瑞香素对破骨细胞分化及骨吸收活性的影响;并采用MTT法测定西瑞香素对MC3T3-E1Subclone14成骨细胞增殖作用的影响。结果:不同浓度的西瑞香素均对破骨细胞分化及骨吸收活性均具有抑制作用,其中10~(-5)mol/L剂量组的抑制作用最为显著;西瑞香素对成骨细胞增殖具有促进作用,其中10-5mol/L剂量组的促进作用最为显著。结论:西瑞香素能抑制破骨细胞活性和促进成骨细胞增殖。     

大黄素对非酒精性脂肪性肝炎模型大鼠作用及对脂联素、脂联素受体的影响

目的探讨大黄素对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)模型大鼠的治疗作用及对脂联素、脂联素受体的影响。方法雄性SD大鼠40只,随机分为空白组,模型组,大黄素高(40 mg·kg^-1)、低剂量(20 mg·kg^-1)组。空白组予普通饲料,其余各组予高脂饲料建模,时间共10周。造模后,处死动物,取材。观察各组大鼠体质量、肝湿重、肝指数,化学发光法检测大黄素对NASH模型大鼠谷丙转氨酶(glutamic pyruvic transaminase,ALT)、谷草转氨酶(millet straw transaminase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、谷氨酰转肽酶(glutamyl transpeptidase,GGT)、甘油三酯(triglycerides,TG)、胆固醇(cholesterol,TC)的影响,制作石蜡切片行苏木素-伊红染色(HE),油红O染色检测大黄素对NASH大鼠肝组织炎症损伤、脂肪变的影响,Western-blot检测各组大鼠肝脏内脂联素(adiponectin,ADPN)、脂联素受体2(adiponectin receptor-2,AdipoR2)蛋白表达,荧光定量PCR检测各组大鼠肝脏内ADPN,AdipoR2 mRNA表达。结果与模型组相比,大黄素能有效改善NASH模型大鼠肝脏脂质沉积,减轻炎症细胞浸润,减轻大鼠体质量,肝指数;大黄素高剂量组ALT、AST、ALP、GGT、TG、TC均有不同程度下降(P<0.05);相对模型组,大黄素高剂量组大鼠肝组织ADPN,AdipoR2蛋白,mRNA水平升高(P<0.05)。结论大黄素能通过上调NASH模型大鼠ADPN,AdipoR2表达,有效改善肝功能、血脂,改善NASH大鼠肝组织脂肪变程度,减轻肝脏炎症。     

苦参素固体脂质纳米粒的药动学和体内分布

 目的研究苦参素固体脂质体纳米粒(SLN)的动物体内行为,探讨苦参素SLN作为肝靶向给药系统的可行性。方法采用“乳化蒸发-低温凝固”法制备苦参素SLN,平均粒径104nm,表面电位-32.6mV,包封率为81.0%。将苦参素SLN悬液与苦参素水溶液分别大鼠尾静脉注射100mg·kg^-1,于不同时间尾静脉取血,测定血中苦参素浓度,提取药动学参数。将苦参素SLN悬液与苦参素水溶液小鼠尾静脉注射100mg·kg^-1,于不同时间取血、心、肝、脾、肺、肾,测定各组织中药物浓度,计算靶向指数、靶向效率及相对靶向效率等参数。结果大鼠尾静脉注射苦参素水溶液和苦参素SLN悬液100mg·kg^-1后,药动学结果显示,体内过程符合二室开放模型,与苦参素水溶液相比,苦参素SLN的t_1/2β延长5.5倍,AUC增加了3.9倍。小鼠尾静脉注射苦参素水溶液和苦参素SLN悬液100mg·kg^-1后,体内分布结果显示:苦参素SLN给药后在肝和血中的分布较水溶液有明显提高,30min时药物在肝中的浓度是水溶液的12倍,相对靶向效率为360%。结论SLN明显改变了苦参素的药动学行为,使消除变慢,生物利用度增加。苦参素SLN具有明显趋肝性,可靶向于肝,延长药物在血和肝中的滞留时间。     

人参茎叶总皂苷脂质体与水溶液在大鼠体内的血药浓度及药代动力学参数对比分析

该试验探讨人参茎叶总皂苷脂质体与水溶液在大鼠体内的血药浓度及药代动力学参数对比差异。通过大鼠静脉注射人参茎叶总皂苷水溶液和脂质体后,用高效液相色谱法检测血浆不同时间点的9种主要人参皂苷单体Rg_1,Re,Rf,Rb_1,Rg_2,Rc,Rb_2,Rb_3,Rd的血药浓度,通过3p97软件拟合数据。大鼠静脉给药后,血浆中可测得9种目标皂苷。水溶液的达峰时间一般在0.05~0.083 3h;脂质体的达峰时间一般在0.5 h之后。经软件拟合后,人参皂苷Rg_1,Re,Rf,Rg_2,Rc,Rd,Rb_3的水溶液均为二室模型,脂质体为一室模型;人参皂苷Rb_1的水溶液和脂质体为三室模型;Rb_2的水溶液为三室模型,脂质体为一室模型。9种皂苷脂质体的药-时曲线下面积(AUC)均大于水溶液的曲线下面积,而且脂质体在体内停留时间较长,清除率较水溶液的清除率慢,半衰期一般也较水溶液长。研究结果显示通过静脉注射给药方式,对2种剂型的药动学参数进行对比,人参茎叶总皂苷脂质体与水溶液在大鼠体内的药动学显著不同,脂质体使药物在体内的浓度维持较长时间,降低了药物体内消除速度,提高药物疗效。人参茎叶总皂苷脂质体与传统剂型相比,提高了药物的缓释长效,为今后研发人参皂苷新剂型起到了重要意义。     

藏药郎庆阿塔对肝纤维化大鼠胶原代谢的影响

目的:观察藏药郎庆阿塔对肝纤维化大鼠胶原代谢的影响。方法:采用复合因素(皮下注射40%CCl4/橄榄油溶液+高脂低蛋白复合饲料喂养+给予5%乙醇饮水)构建大鼠肝纤维化模型,造模6周后,于第7周开始分组给药,设置正常对照组、模型组、阳性药组[复方鳖甲软肝片(0.55 g.kg-1]、郎庆阿塔高、中、低剂量组(按生药量计为11.4,5.7,2.85 g.kg-1),分别ig给药7周。实验末期,取肝组织,HE染色观察肝脏组织的病理学变化,Masson染色观察肝组织内纤维化程度,免疫组化法检测肝组织中金属蛋白酶组织抑制因子I(TIMP-I)的表达水平,荧光定量PCR(RTFQ PCR)法测定药物对肝纤维化大鼠肝组织中I型胶原蛋白(CoL-I)mRNA表达的影响。结果:郎庆阿塔高、中剂量对肝纤维化大鼠肝纤维组织增生、肝组织炎症活动度均有显著的改善作用(P<0.05),免疫组化结果表明,郎庆阿塔能明显降低肝纤维化大鼠肝组织中TIMP-I的表达水平(P<0.01),高剂量组阳性率(4.80±0.92)与模型组(8.60±1.52)相比显著下降;此外,郎庆阿塔还能剂量依赖性地降低CoL-I mRNA表达水平,其中高剂量组与模型组相比较有显著性差异(P<0.01)。结论:郎庆阿塔能明显改善肝纤维组织增生,降低肝组织中TIMP-I和CoL-I mRNA的表达,发挥其抗肝纤维化作用。     

羟基喜树碱包衣纳米脂质体的制备及在小鼠体内组织分布的研究

 目的研究羟基喜树碱(HCPT)氯化壳聚糖(CS-HCl)包衣纳米脂质体(nanoliposomes)的制备方法,并考察其在小鼠体内的组织分布。方法采用薄膜分散法制备HCPT脂质体,用CS-HCl包衣后乳匀,得到CS-HCl包衣的HCPT纳米脂质体(平均粒径<100 nm)。除去游离HCPT后,测定其包封率(EE%)、平均粒径、粒径分布及Zeta电位。以5 mg·kg^-1羟基喜树碱的剂量小鼠尾静脉注射HCPT注射液、普通HCPT脂质体、HCPT纳米脂质体、包衣HCPT纳米脂质体,测定血浆及肝、脾组织中的血药浓度。结果包衣HCPT纳米脂质体的EE%为(61.2±1.20)%,平均粒径为(91.9±8.78)nm,Zeta电位为(55.1±1.04)mV(n=3)。包衣HCPT纳米脂质体在血液中AUC_0～48为HCPT纳米脂质体的1.3倍,为普通HCPT脂质体的4.7倍,为注射液的25.4倍。AUC_plasma/AUC_RES表明,包衣HCPT纳米脂质体为HCPT纳米脂质体的1.4倍,为普通脂质体的8.7倍,为注射液的3.4倍。结论该包衣HCPT纳米脂质体具有大小均匀,带有较大正电荷,能显著延长药物在血液循环中的时间,减少RES对脂质体的吞噬作用等特点。     

护肝片对四氯化碳致大鼠慢性肝损伤肝阴虚证的保护作用

目的:研究护肝片对四氯化碳(CCl4)致大鼠慢性肝损伤肝阴虚证的保护作用。方法:将42只Wistar大鼠分为5组:溶剂对照组(n=10)、模型组(n=8)、一贯煎组(相当于生药6.75 g·kg~(-1),n=8)、护肝片高、低剂量组(0.81,0.27 g·kg~(-1),n=8),除溶剂对照组外,其余各组均皮下注射40%CCl4花生油溶液,每次3 m L·kg~(-1),每周2次,连续5周,第6周改为每周注射1次,第5,6周同时灌胃给予温热中药(相当于生药18 g·kg~(-1)),每日1次,造模共6周,建立慢性肝损伤肝阴虚证的大鼠模型。第6周后开始给予相应的药物灌胃治疗,每日1次,连续2周至第8周末。末次给药后处死动物,采集大鼠血清和肝组织标本,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、醛固酮(ALD)、白蛋白(ALB);肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA);肝组织羟脯氨酸(Hyp);HE染色法对肝组织病理学形态检查;Western blot方法检测肝组织中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NADPH oxidase,NOX)NOX2的蛋白表达。结果:与溶剂对照组比较,模型组大鼠血清ALT,ALD和肝组织Hyp,MDA显著升高(P0.01),血清ALB和肝组织SOD显著降低(P0.01)。与模型组比较,护肝片高、低剂量组均能显著降低大鼠血清ALT水平和肝组织MDA,Hyp的含量(P0.01,P0.05);护肝片高剂量组显著降低血清ALD水平(P0.05),升高血清中ALB含量(P0.05)和肝组织中SOD活性(P0.05),降低肝组织中NOX2的蛋白表达(P0.05)。病理结果显示护肝片高、低剂量组明显减轻慢性肝损伤且一定程度降低纤维化水平。结论:护肝片能保肝降酶,对慢性肝损伤有明显的保护作用。     

蒿鳖养阴软坚方对四氯化碳复合因素所致肝纤维化的预防作用

目的:探讨蒿鳖养阴软坚方对CCl4复合因素所致大鼠肝纤维化的预防作用及可能的作用机制.方法:将大鼠随机分为正常对照组,模型组,蒿鳖养阴软坚方高、中、低剂量组(8.20,2.59,0.82 g·kg-1),复方鳖甲软肝片组(0.54 g·kg-1),秋水仙碱组(1×10-4g·kg-1).第1次sc CCl45 mL·kg-1,从第2次开始每隔3 d sc 40％CCl4花生油3 mL· kg-1至第12次;模型组和治疗组隔日ig 30％乙醇(1 mL/只),各治疗组每日给药1次,正常组和模型组均给予相应体积的蒸馏水,每周6d(停药1d),共6周.观测肝组织形态和胶原蛋白,测定血清肝功能丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST);放免法测定血清透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、Ⅲ型前胶原(PCIII),层黏连蛋白(LN)水平;紫外-可见分光光度法测定血清丙二醛(MDA)水平;检测肝组织中羟脯氨酸,胶原蛋白及白蛋白含量.结果:模型组大鼠肝组织内肝细胞广泛变性及坏死,大量炎性细胞浸润,类假小叶形成,大量胶原纤维形成;蒿鳖养阴软坚方高剂量组的肝脏病理变化程度较模型组明显减轻且无类假小叶形成;模型组的ALT,AST,HA及PCIII含量均高于正常对照组(P＜0.01,P＜0.05);各蒿鳖养阴软坚方给药组ALT,AST,HA及PCIII高剂量组显著低于模型组(P＜0.05);MDA及胶原蛋白的含量均低于模型组(P＜0.01),各蒿鳖养阴软坚方给药组白蛋白均高于模型组(P＜0.01).结论:蒿鳖养阴软坚方对四氯化碳复合因素诱导的大鼠肝纤维化有预防作用;其作用机制可能与抗脂质过氧化损伤,抗炎,抑制胶原蛋白的合成等有关.     

绞股蓝多糖对四氯化碳所致大鼠肝损伤的保护作用

目的:研究绞股蓝多糖对四氯化碳诱导大鼠肝损伤的保护作用。方法:大鼠以50%CCl4花生油溶液按1 mL·kg-1ig,连续4周建立实验性肝损伤模型。随机分为4组:模型对照组、联苯双酯组、绞股蓝多糖低、高剂量组,并设正常对照组。ig绞股蓝多糖40,80 g·kg-1,联苯双酯40 mg·kg-1,正常对照组及模型组ig给予等量生理盐水,连续ig 30 d。末次给药24 h后取材,检测大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的含量,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定肝组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达,Western blot法测定肝组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)/Bcl-2相关X蛋白(Bax)凋亡相关蛋白的表达,并观察肝组织病理学变化。结果:与模型组比较,绞股蓝多糖低、高剂量给药组有效降低肝损伤大鼠血清中AST(85.28±4.09,72.49±3.62)U.L-1,ALT(75.31±3.95),(58.26±4.83)U.L-1水平(P<0.05),下调组织中iNOS mRNA的表达(P<0.05)。治疗后大鼠肝组织中Bcl-2/Bax蛋白水平均有所升高(P<0.05),并减轻肝损伤病情。结论:绞股蓝多糖对CCl4诱导的大鼠肝损伤具有一定保护作用,其机制可能与其抑制细胞毒作用以及抗凋亡途径有关。     

非那甾胺醇质体的体外经皮渗透研究

 目的考察醇质体作为非那甾胺经皮给药载体的渗透特性。方法分别采用注入法和薄膜分散法制备非那甾胺醇质体(ethosomes)和脂质体;用透射电镜观察所得醇质体和脂质体的形态;采用改良的TK-6A型Franz扩散池,用人皮进行体外经皮渗透实验;以HPLC测定一定时间点接受室中药物浓度,求算累积渗透量及稳态透皮速率,并测定药物在表皮层和真皮层中的滞留量。结果非那甾胺醇质体经皮渗透速率(134μg·cm^-2·h^-1)是其水饱和溶液的74倍,是脂质体的32倍,是30%乙醇溶液的26倍。24h时药物在皮肤中滞留量大小顺序为醇质体>30%乙醇溶液>脂质体>水饱和液。结论醇质体能显著促进脂溶性药物非那甾胺的经皮渗透,增加药物在皮肤中的蓄积,有望成为一类新型的皮肤给药制剂。