基于Dusp9介导的ASK1-JNKp38信号通路探讨当归芍药散对非酒精性脂肪肝模型小鼠的作用机制

目的:从Dusp9介导的肝脏ASK1-JNKp38信号通路角度探讨当归芍药散对非酒精性脂肪肝模型小鼠的作用机制.方法:雄性小鼠60只,随机分为正常组10只及造模组50只.造模组予高反式脂肪酸高果糖饲料复合高糖饮水诱导10周,正常组同期予正常饲料喂养.造模成功后将造模组小鼠随机分为模型组、ASK1抑制剂组和当归芍药散高、中、低剂量组,每组10只.当归芍药散各剂量组分别每日灌胃给予1.29、2.58、5.16 g/kg体质量的药液,ASK1抑制剂组每日灌胃给予30 mg/kg体质量ASK1抑制剂,正常组、模型组小鼠以等量饮用水灌胃,连续6周,此期间各组继续给予相应饲料及饮水.实验第16周末,各组小鼠腹腔注射麻醉后取肝组织,采用PCR检测肝组织Dusp9基因表达情况,免疫组化染色法检测肝组织Dusp9蛋白的表达,Western blot检测肝组织Dusp9、p-ASK1、p-JNK以及p-p38蛋白水平.结果:模型组小鼠肝组织Dusp9基因表达、蛋白表达均较正常组显著降低(P<0.01),p-ASK1、p-JNK、p-p38蛋白表达均较正常组显著升高(P<0.01).当归芍药散各剂量组小鼠肝组织Dusp9基因和蛋白表达均明显高于模型组(P<0.01,P<0.05),对蛋白表达的影响呈现剂量依赖性.当归芍药散各剂量组小鼠肝组织p-ASK1、p-JNK蛋白表达显著低于模型组(P<0.01),中、高剂量组p-p38蛋白表达明显低于模型组(P<0.01);高剂量组p-ASK1表达明显低于中、低剂量组(P<0.01);随着剂量升高,p-JNK表达逐渐降低,组间差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);高、中剂量组p-p38蛋白表达明显低于低剂量组(P<0.01).结论:当归芍药散可通过Dusp9介导的肝脏ASK1-JNKp38信号通路影响非酒精性脂肪肝小鼠模型,此通路可能是当归芍药散治疗非酒精性脂肪肝的主要作用机制.     

肿瘤相关巨噬细胞相关性miR-99a对子宫内膜癌细胞生长和侵袭的调控作用

背景与目的：肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophage，TAM）浸润与肿瘤进展密切相关，但作用机制尚不明确，因此，探索miR-99a对单核巨噬细胞极化的影响及其对子宫内膜癌（endometrial cancer，EC）细胞生长、侵袭的影响。方法：检测EC组织中巨噬唾液酸蛋白（macrosialin）CD68表达并分析其与临床病理学特征之间的关系；运用人EC细胞系HEC-1B、RL95-2培养上清液诱导人单核细胞U937向TAM（M2型巨噬细胞）分化；将人工合成的miR-99a模拟物片段转染至诱导后的巨噬细胞，转染后运用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）及流式细胞术检测巨噬细胞相关因子CD68、CD163以及巨噬细胞甘露糖受体（mcrophage mannose receptor）CD206表达量变化，并运用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测巨噬细胞分泌相关细胞因子IL-12、IL-4和IL-10分泌量变化；将转染miR-99a的诱导后巨噬细胞与EC细胞共培养，运用细胞计数试剂盒（cell counting kit-8，CCK-8）和transwell法检测其对EC细胞增殖和侵袭能力的影响，并初步分析其可能的作用机制。结果：EC组织CD68高表达并与肿瘤肌层浸润及血管生成呈正相关；肿瘤细胞培养上清液成功诱导单核细胞向M2型TAM极化。转染miR-99a后单核细胞组CD68及CD163表达较对照组下降（P＜0.01），而CD206表达差异无统计学意义（P＞0.05），流式细胞术进一步证实上述表达变化；ELISA结果发现，转染miR-99a诱导后巨噬细胞中IL-12分泌增多（P＜0.01），而IL-4、IL-10分泌减少（P＜0.01），提示巨噬细胞向M2型极化受抑制。将诱导后巨噬细胞与EC细胞共培养，共培养后EC细胞增殖侵袭能力较对照组增加，而转染miR-99a模拟片段至诱导后巨噬细胞能够抑制其对增殖（P＜0.01）及侵袭能力的促进作用（P＜0.05）。诱导后巨噬细胞中过表达miR-99a后细胞中mTOR及其通路受到抑制。结论：EC间质巨噬细胞浸润与肿瘤肌层浸润及血管新生相关，miR-99a能够逆转单核细胞向M2表型极化，并抑制EC细胞介导TAM的促EC细胞生长和侵袭作用，其作用可能通过调控mTOR通路产生。     

心衰并发永久性房颤患者两种抗栓治疗效果的比较

目的:对比分析充血性心力衰竭(CHF)并发永久性房颤(PAF)患者接受华法林和阿司匹林两种抗栓治疗的临床疗效及安全性。方法:选择102例CHF并发PAF患者,根据抗栓治疗方案分为:华法林组(46例)和阿司匹林组(56例)。比较两组患者的短暂性脑缺血发作(TIA)、脑梗死、外周动脉栓塞和颅内出血、胃肠道出血、泌尿系出血事件发生率的差异。结果:与阿司匹林组相比,华法林组的TIA(23.21%比13.04%)、脑梗死(28.57%比10.87%)、外周动脉栓塞(33.93%比17.39%)的发生率显著降低(P0.05或0.01);而两组患者颅内出血、胃肠道出血、泌尿系出血事件发生率无显著差异(P均0.05)。华法林组的猝死率发生率高于阿司匹林组,但无统计学差异(P0.05)。结论:华法林能降低充血性心衰并发永久性房颤患者缺血性事件的发生率,但不增加出血性事件发生率及猝死率。     

甘草水提物中miRNA对人免疫细胞基因表达的影响

微小RNA(micro RNA,miRNA)是一类在转录后水平调节基因表达的非编码小分子RNA,其调控基因表达、影响细胞活性的功能已为人们所重视。近年来miRNA的跨界调控成为新的研究方向,为人们更全面地认识和了解miRNA的功能提供了新的视角。植物miRNA由于通常经过了甲基化修饰,因此较为稳定,不易降解。前期研究表明,甘草干燥药材的水煎剂中存在着丰富的小分子RNA,这为了解甘草的作用机制提供了新的思路。在本研究中,利用从甘草水煎剂中提取的小分子RNA以及合成的miRNA模拟物(mimic)作用于分离自健康人的外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),然后利用RT-PCR对其模式识别受体(PRR)基因以及部分转录因子、信号分子和细胞因子的基因表达变化进行了分析。结果表明甘草miRNA对人免疫细胞的基因表达具有明显的调节作用,能够显著抑制T细胞分化相关基因的表达,以及炎症和凋亡相关基因的表达。这为进一步更全面地了解甘草的作用机制以及中药新药的研制带来了新的思路。     

三氧化物多聚体应用于活髓切断术的临床疗效研究

目的评价三氧化物多聚体(MTA)用于活髓切断术的临床效果。方法选取外伤冠折露髓的年轻恒前牙48颗,随机分为2组,每组24颗。氢氧化钙组用氢氧化钙盖髓,MTA组用MTA盖髓,追踪观察3年并进行临床评价。结果MTA组成功22颗,失败2颗,氢氧化钙组成功20颗,失败4颗,2组差异无统计学意义。结论MTA是一种较理想的直接盖髓剂。     

2019-nCoV重症患者气管切开防喷溅装置的设计与初步应用

目的 对2019-nCoV高传染性重症患者进行气管插管、气管切开等高危程序操作,是一线医务人员发生感染的重要危险因素,急需降低操作者的感染风险。方法 本团队发明一种手术防喷溅隔离装置,在操作者与患者之间建立可视化防喷溅隔离区域,术者可将手伸进隔离装置的操作口进行手术操作,在不影响正常手术程序的同时,降低了自身感染风险。结果 本装置经申请专利后已初步试用于临床,在7例重症新型冠状病毒肺炎患者的气管切开术中得以成功应用,目前已批量生产,发往武汉抗疫一线。结论 本隔离装置在救治2019-nCoV患者的临床应用中得到良好反馈,为抗击疫情的一线医务工作者提供了有效防护措施,降低了感染风险。     

中药牙粉对龈上菌斑的控制效果

目的 探讨中药牙粉对龈上菌斑的控制效果。方法 符合纳入标准的35例患者随机分为实验组和对照组,检查口内每颗牙齿的牙龈指数、菌斑指数,洁治、抛光,统一刷牙方法,实验组用中药牙粉刷牙,对照组用安慰剂牙粉刷牙,3、7d复查牙龈指数和菌斑指数,实验结果秩和检验。实验设计为随机双盲平行对照。结果 实验组与对照组3d牙龈指数和菌斑指数都明显下降,实验组菌斑指数下降幅度高于对照组。7d多数受试者牙龈指数和菌斑指数有轻度上升,但实验组菌斑指数上升幅度低于对照组,且实验组7d菌斑指数与对照组相比有统计学差异,显著低于对照组。结论 在牙周基础治疗后,使用中药牙粉配合有效刷牙,可提高控制龈上菌斑的效果、减缓菌斑堆积。