苦碟子注射液对大鼠肝微粒体CYP450酶5个亚型的体外抑制作用

目的研究苦碟子注射液对大鼠肝微粒体CYP450酶的体外抑制作用。方法制备大鼠肝微粒体。将苦碟子注射液分别与混合探针药物非那西丁、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、睾酮和氯唑沙宗共同孵育,UPLC-MS/MS法检测各探针药物的代谢物。结果在测定浓度范围内,苦碟子注射液对CYP2E1、CYP2C9和CYP2C19的活性抑制率小于50%;对CYP1A2、CYP3A4的IC_(50)值分别为12.68%、8.11%,远高于临床日用药浓度0.20%~0.80%。结论在正常剂量下,苦碟子注射液对大鼠CYP2E1、CYP2C9、CYP2C19几乎不显示抑制作用,对CYP1A2、CYP3A4几乎没有抑制作用。     

Cocktail法研究脉络宁注射液对大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性的影响

目的：研究脉络宁注射液对大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性的影响。方法：14只大鼠随机均分成临床等效剂量组和高剂量组,连续2周静脉给予脉络宁注射液（临床等效剂量纽,2mL／kg;高剂量组,4mL／kg）前后,均同时灌胃给予3个探针底物（茶碱,30mg／kg;氯唑沙宗,50rag／kg;氨苯砜,20mg/kg）,进行采血试验。用HPLC法同时测定大鼠体内各探针的血药浓度,DAS1．0软件计算药动学参数,并以配对t检验对各组大鼠前后两轮主要药动学参数进行差异性比较。结果：在1个给药疗程（14d）内,临床等效剂量组大鼠用药前后,3个探针的药动学参数均无显著性变化（P〉0．05）;高剂量组大鼠用药后,与用药前相比,茶碱的药动学参数没有显著变化（P〉0．05）;氨苯砜和氯唑沙宗的AUC0-24h均有升高趋势（P〈0．05）,给药后分别是给药前的1．44倍和1．28倍,同时氯唑沙宗的CL显著降低（P〈0．05）。结论：临床等效剂量脉络宁对大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性均无显著影响,而高剂量脉络宁对大鼠CYP2E1和CYP3A4均有弱抑制作用。     

黄葵胶囊对大鼠CYP450酶的影响

目的：研究黄葵胶囊对大鼠CYP1A2、CYP2E1、CYP3A4活性的影响。方法：14只大鼠随机均分成临床等效剂量组和高剂量组,连续2周灌胃给予黄葵胶囊（临床等效剂量组,0.75 g/kg;高剂量组,2 g/kg）前后,均同时灌胃给予3个探针底物（茶碱,30 mg/kg;氨苯砜,20 mg/kg;氯唑沙宗,50 mg/kg）,采血测定。用HPLC法同时测定大鼠体内各探针的血药浓度,DAS1.0软件计算药动学参数,并以配对t检验对两组大鼠前后两轮主要药动学参数进行差异性比较。结果：临床等效剂量组大鼠给药后,与给药前相比,茶碱、氨苯砜和氯唑沙宗的药动学参数无统计学变化（P〉0.05）;高剂量组大鼠给药后,氨苯砜的AUC0-24h与给药前相比,有降低趋势（P〈0.05）,是给药前的0.63倍;氯唑沙宗的AUC0-24h与给药前相比,有升高趋势（P〈0.05）,是给药前的1.75倍。结论：临床等效剂量黄葵胶囊对大鼠CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1活性均无显著影响;而高剂量黄葵胶囊对大鼠CYP3A4有弱诱导作用,对CYP2E1有弱抑制作用。     

酒精性肝损伤大鼠细胞色素P450 CYP2E1和细胞色素P450 CYP3A的代谢活性

目的观察酒精性肝损伤对大鼠细胞色素P450CYP3A(CYP3A)和细胞色素P450CYP2E1(CYP2E1)代谢活性的影响。方法采用ig给予白酒制备大鼠酒精性肝损伤模型,检测血清中谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性,采用HE染色法光镜下观测酒精对肝脏损伤程度。大鼠ip给予CYP3A探针药物咪达唑仑10mg·kg-1或ig给予CYP2E1探针药物氯唑沙宗50mg·kg-1后,采用高效液相色谱法测定不同时间点大鼠血浆中咪达唑仑和氯唑沙宗的血药浓度,并应用3P87软件计算其药代动力学参数,以考察CYP2E1和CYP3A的代谢活性的变化。大鼠ig给予氯唑沙宗80mg·kg-1后,热板方法测定大鼠添足次数和添足反射潜伏期。结果酒精性肝损伤可致大鼠肝小叶结构不清,肝索排列紊乱,肝细胞体积增大,呈弥漫性中度水变性,肝窦受压,大部分肝细胞胞浆内见大小不等的脂肪空泡;与正常对照组相比,酒精性肝损伤组大鼠GPT和GOT活性分别增加了16.0%和20.0%(P<0.05,P<0.01)。酒精性肝损伤致大鼠CYP2E1对探针药物氯唑沙宗的代谢活性增强,AUC,t1/2和cmax分别降低了38.0%,30.5%和35.0%(P<0.05);酒精肝损伤组大鼠氯唑沙宗镇痛效果明显降低;酒精性肝损伤致大鼠CYP3A对探针药物咪达唑仑的代谢活性增强,AUC,t1/2和cmax分别降低了122.6%,54.9%和56.9%(P<0.01,P<0.05)。结论酒精性肝损伤可使大鼠CYP2E1和CYP3A代谢活性增强。     

复方银杏叶胶囊对肝损伤大鼠CYP2E1、CYP3A4的影响

目的研究复方银杏叶胶囊(CGB)对酒精性肝损伤大鼠CYP2E1、CYP3A4活性的影响。方法正常组和酒精性肝损伤模型组均以CGB[(250 mg/(kg.d)]灌胃,分别在灌胃CGB前及灌胃1周后,灌胃探针药氯唑沙宗(50 mg/kg)及氨苯砜(20 mg/kg),于探针药灌后24 h内不同时间点采血,测定各探针药血药浓度。结果灌胃CGB前,模型组氯唑沙宗和氨苯砜的AUC0-24、Cmax均显著低于正常组(P<0.05或P<0.01)。灌胃CGB后,模型组氯唑沙宗和氨苯砜的AUC0-24、Cmax均较灌胃前显著升高(P<0.05或P<0.01);且氯唑沙宗的t1/2灌胃CGB后明显高于灌胃前(P<0.05)。结论 CGB能够明显抑制酒精性肝损伤大鼠CYP2E1、CYP3A4酶活性。     

振源胶囊对细胞色素P_(450)酶CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1的影响

目的:研究振源胶囊对细胞色素P450酶CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1的影响。方法:用Cocktail探针药物法,将Wistar大鼠随机分组,灌胃给予振源胶囊溶液,以生理盐水组为空白对照,诱导10d,于股动脉插管,注射给予3种探针药物咖啡因、氨苯砜、氯唑沙宗,通过高效液相色谱法检测各探针药物的代谢率来评价各组CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1亚型酶的活性;药动学计算采用DAS2.0软件完成。结果:给予振源胶囊的大鼠,咖啡因代谢加快,半衰期缩短;氨苯砜代谢减慢,半衰期延长;氯唑沙宗半衰期与空白对照组比较无显著差异(P>0.05)。结论:振源胶囊对大鼠CYP1A2有诱导作用,对CYP3A4有抑制作用,对CYP2E1的作用不明显。     

天然冰片对大鼠细胞色素P450四种亚型活性的影响

目的：用Cocktail探针药物法研究天然冰片对大鼠细胞色素P450四种亚型CYP1A2、CYP2C6/11、CYP2E1和CYP3A活性的影响。方法：将大鼠随机分为2组,给药组灌胃给予天然冰片-0.8%CMC-Na混悬液,剂量90mg/kg,对照组灌胃给予不含药物的0.8%CMC-Na溶液,每天1次,连续7d。于第8天,两组大鼠均尾静脉注射混合探针药物溶液（茶碱10mg/kg、甲苯磺丁脲2.5mg/kg、氯唑沙宗10mg/kg、氨苯砜5mg/kg）,眼内眦静脉采血,超高效液相色谱法检测各探针药物的血药浓度,采用WinNonlin 5.0.1计算药代动力学参数。结果：与对照组相比,天然冰片组中甲苯磺丁脲的t1/2、AUC0-t、AUC0-∞和MRT0-∞明显减小,两组之间的差异具有统计学意义（P〈0.05）;而两组之间茶碱、氯唑沙宗和氨苯砜的药代动力学参数则没有明显差异。结论：天然冰片对大鼠CYP2C6/11的活性具有诱导作用,对CYP1A2、CYP2E1和CYP3A活性无显著影响。     

苦参对大鼠细胞色素P4501A2体内代谢活性的影响

目的以咖啡因作为探针药物,研究苦参对大鼠细胞色素P450 1A2(CYP1A2)体内代谢活性的影响。方法将Wistar大鼠随机分为4组:空白对照组、苦参组(实验组)、苯巴比妥组(诱导剂阳性对照组)和西咪替丁组(抑制剂阳性对照组)。苦参组,灌胃给予苦参溶液100 mg.kg-1;空白对照组,灌胃给予与苦参组体积相同的生理盐水;苯巴比妥组,腹腔注射苯巴比妥注射液50 mg.kg-1;西咪替丁组,每日腹腔注射西咪替丁注射液50 mg.kg-1,各组均为每日1次,连续5 d。第6 d,各组大鼠均经尾静脉注射咖啡因溶液2.5 mg.kg-1,于给药前及给药后不同时间,眼内眦静脉取血0.8 mL,用高效液相色谱法,测定血浆中咖啡因的浓度。结果给予大鼠苦参5 d后,苦参组的咖啡因AUC、MRT、Cmax明显低于空白对照组和西咪替丁组(P<0.05),明显高于苯巴比妥组(P<0.05);而CL明显高于空白对照组和西咪替丁组(P<0.05)而明显低于苯巴比妥组(P<0.05)。结论苦参可明显诱导大鼠CYP1A2的体内代谢活性;但诱导强度低于苯巴比妥。     

刺五加注射液对大鼠肝微粒体四种CYP450亚型酶活性的影响

目的:研究刺五加注射液在大鼠体外肝微粒体中对CYP2C9、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A4活性的影响,为临床合理联合用药提供参考。方法:在大鼠体外肝微粒体中分别加入四种亚型酶的探针药物甲苯磺丁脲(TB)、右美沙芬(DM)、氯唑沙宗(CLZ)、睾酮(TS)和低、中、高剂量的刺五加注射液,温孵后用HPLC法测定各空白对照组和不同剂量刺五加注射液给药组中各探针药物代谢产物的浓度并比较代谢率的差异,以评价刺五加注射液对各亚型酶活性的影响;中剂量组活性显著降低的亚型酶进一步考察抑制作用的强弱(即IC50和Ki值)。结果:与空白对照组比较,刺五加注射液低、中、高剂量给药组对CYP3A4活性的影响均有统计学意义(P<0.01),抑制率分别为10.22%、19.00%、30.29%,其IC50和Ki值分别为3.96%和2.74%(V/V);低、中、高剂量给药组对CYP2D6活性的影响均无统计学差异(P>0.05);低剂量给药组对CYP2C9、CYP2E1活性的影响无统计学差异(P>0.05),中、高剂量给药组对两个亚型的抑制作用有统计学差异(P<0.05),但中剂量给药组抑制率均小于8.50%,高剂量给药组抑制率均小于12.00%。结论:刺五加注射液对大鼠体外肝微粒体CYP3A4有抑制作用,且符合混合型抑制模型;对CYP2C9、CYP2E1抑制作用较弱;对CYP2D6活性无影响。     

糖尿病模型大鼠肝脏CYP2E1酶活性的变化

采用四氧嘧啶诱发糖尿病大鼠模型,测定肝苯胺羟化酶及其他药酶活性,同时用氯唑沙宗探针间接评价CYP2E1的活性。结果表明,糖尿病大鼠苯胺羟化酶活性增加80%,伴有其他药酶活性增加。大鼠单次po氯唑沙宗50mg·kg^-1,糖尿病组氯唑沙宗的C_max和AUC分别减少37%和34%,6 羟氯唑沙宗的Tpeak缩短,羟化指数(OH-CZX与CZX的AUC比或浓度比)升高表明糖尿病大鼠可诱导CYP2E1活性。提示糖尿病患者服用经CYP2E1酶代谢的药物应慎重。     

Cocktail探针药物法评价灯盏花素对大鼠CYP450体内代谢活性的影响

目的用Cocktail探针药物法研究灯盏花素对大鼠CYP1A2、CYP2C9、CYP2E1和CYP2D6体内代谢活性的影响。方法将大鼠随机分为3组,空白对照组、低剂量组和高剂量组。低剂量组和高剂量组分别尾静脉给予灯盏花素粉针剂1.8,5.4 mg.kg-1.d-1,空白对照组给予生理盐水,共14 d。各组分别于第15 d注射Cocktail探针溶液,用HPLC检测各探针药物的血药浓度,用DAS2.0计算药代动力学参数,评价相应的CYP450亚型的体内代谢活性。结果高剂量组美托洛尔的AUC和t1/2显著高于空白对照组,CL显著低于空白对照组(P<0.05)。低剂量组美托洛尔虽然也有相同趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。各组咖啡因、氯唑沙宗和甲苯磺丁脲的主要药代动力学参数均无显著差异(P>0.05)。结论高剂量灯盏花素粉针剂可明显抑制大鼠CYP2D6的体内代谢活性,而对CYP1A2、CYP2E1和CYP2C9无显著性影响。     

混合探针法评价白香丹胶囊对大鼠体内CYP450酶活性的影响

目的：建立同时测定大鼠血浆中6种CYP450探针药物的方法,并采用Cocktail法研究白香丹胶囊对大鼠CYP450酶活性的影响。方法：选用茶碱（CYP1A2）、氯唑沙宗（CYP2E1）、甲苯磺丁脲（CYP2C6）、右美沙芬（CYP2D2）、奥美拉唑（CYP2D1）、咪达唑仑（CYP3A2）作为探针药物。大鼠随机分为对照组和给药组,给药组每天灌胃白香丹胶囊0.675 g·kg-1,对照组灌胃等量生理盐水,连续给药14 d。第15天均灌胃给予6个探针药物,于不同时间点眼眶取血,采用LC-MS/MS法测定各探针药物浓度,计算药动学参数并进行组间t检验。结果：与对照组相比,给药组茶碱（P<0.01）、氯唑沙宗（P<0.01）、甲苯磺丁脲（P<0.05）代谢显著加快;右美沙芬、奥美拉唑、咪达唑仑代谢无显著性差异。结论：白香丹胶囊对大鼠 CYP1A2有中强诱导作用,对CYP2E1、CYP2C6有弱诱导作用。     

稳心颗粒对大鼠细胞色素P450酶的影响

目的 用cocktail探针药物法评价稳心颗粒对大鼠体内CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP2E1和CYP3A4亚型酶活性的影响. 方法 雄性Wistar大鼠随机分为稳心颗粒高、低剂量组和空白对照组. 稳心颗粒高、低剂量组灌胃给予稳心颗粒,空白对照组灌胃给予0.9%氯化钠溶液,连续7 d. 第8天腹腔注射探针药物咖啡因、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、美托洛尔、氯唑沙宗和氨苯砜. 尾静脉取血,用高效液相色谱法检测血样,比较药动学参数变化. 结果高、低剂量稳心颗粒分别使咖啡因的AUC_(0-∞)增加1.635倍和 1.435倍,分别使氨苯砜的AUC_(0-∞)增加1.816倍和1.324倍. 高剂量稳心颗粒使奥美拉唑和氯唑沙宗的AUC_(0-∞)增加2.748倍和1.696倍. 结论 高剂量稳心颗粒对CYP2C19和CYP2E1活性有弱抑制作用,稳心颗粒对CYP1A2和CYP3A4的活性有弱抑制作用.     

新型Hsp90抑制剂——SNX-2112对大鼠肝药酶活性的影响

目的研究SNX-2112注射液对大鼠肝药酶活性的影响。方法大鼠分为苯巴比妥钠诱导组、CCl4抑制组、SNX-2112高、中、低(10、5、2.5mg·kg-1)剂量组、生理盐水对照组、空白溶媒组。用紫外分光光度法测定了SNX-2112注射液对大鼠肝脏系数、CYP450含量以及甲醛生成速率的影响。结果3种剂量SNX-2112对大鼠肝脏系数以及蛋白含量的影响都不明显,但均能抑制CYP450含量。从甲醛生成速率结果看,高、中两种剂量SNX-2112均能抑制大鼠氨基比林-N-脱甲基酶活性及红霉素-N-脱甲基酶活性,而低剂量对其影响不明显。结论SNX-2112注射液在高浓度对大鼠肝药酶CYP3A和CYP2E1亚型活性有抑制作用。     

木犀草素对大鼠CYP450酶活力和mRNA表达的影响

目的 研究木犀草素对大鼠细胞色素P450（CYP450）酶活力和mRNA表达的影响。方法 SD大鼠随机分为实验组和对照组,连续灌胃木犀草素或水14 d后,同时给予探针药非那西丁、安非他酮、氯唑沙宗和咪达唑仑,并用LC-MS测定给药后不同时间点的血药浓度,计算药动学参数并评估CYP1A2、CYP2B1、CYP2E1和CYP3A1酶活力变化。此外,实时荧光定量PCR （RT-PCR）测定CYP450的mRNA表达水平。结果 实验组大鼠非那西丁、安非他酮、咪达唑仑的药动学参数与对照组相比具有显著性差异,推测木犀草素能诱导大鼠CYP1A2、CYP2B1和CYP3A1活力,而氯唑沙宗的药动学参数2组间没有显著性差异。RT-PCR实验发现,木犀草素能显著上调大鼠CYP1A2、CYP2B1和CYP3A1的mRNA水平,对CYP2E1没有影响。结论 木犀草素会上调CYP1A2、CYP2B1和CYP3A1酶活力及mRNA表达水平。     

The influence of a newly developed quinolone: antofloxacin, on CYP activity in rats.

To investigate a newly developed quinolone antibiotics, the effect of antofloxacin hydrochloride on cytochrome P450 isoforms in rats was examined. A cocktail approach was adopted. Theophylline (CYP1A2), midazolam (CYP3A), chlorzoxazone (CYP2E1), dextromethorphan (CYP2D6), omeprazole (CYP2C19) and diclofenac (CYP2C9) were used as probes in the study, and own control was adopted. In Protocol 1, probes were given to rats simultaneously by co-administration with antofloxacin. The blood samples were obtained at designated time, and plasma concentrations of the six probes were determined by LC-MS. The pharmacokinetic parameters were calculated and compared in experimental groups in the absence and presence of antofloxacin. The result showed that the presence of antofloxacin resulted in a significant increase in theophylline values of AUC0-T and t1/2 (PAUC0-T = 0.0004 vs control Pt1/2 = 0.005 vs control), indicating that antofloxacin delayed the clearance of theophylline. In Protocol 2, the probes' pharmacokinetic parameters were compared in rats that received six probes before and after 14.5 days of consecutive administration of antofloxacin (15 mg x kg(-1), given orally, twice daily). The results suggested that the AUC0-T of chlorzoxazone was significantly decreased (P = 0.024), while that of dextromethorphan was significantly increased (P = 0.027). In conclusion, these results indicated that antofloxacin may inhibit the activity of CYP1A2, thus delaying the clearance of its substrates, and may have a slight inhibitory effect on CYP2D6 as well as an inductive effect on CYP2E1 following chronic administration.     

Cocktail探针法测定南沙参与藜芦配伍对大鼠CYP450亚酶活性的影响

目的利用Cocktail探针法,测定南沙参与藜芦配伍对大鼠CYP1A2、CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19酶活性的影响,从药物相互作用角度探寻二者配伍增毒相反的体内证据。方法将24只雄性Wistar大鼠随机分组,南沙参组、藜芦组、合用组分别灌胃南沙参煎液(13.5g.kg-1)、藜芦煎液(0.81g.kg-1)、合煎液(14.31g.kg-1),空白组灌胃生理盐水,连续给药7天,于第8天尾静脉注射混合探针药物后于不同时间点采集血样;血样经处理后利用HPLC同时测定不同时间点各探针药物的血药浓度,通过WinNolin5.2软件计算各探针药物的药动学参数,并进行组间比较,进而反映亚酶活性在各组之间的差异。结果与空白对照相比,藜芦组可降低甲苯磺丁脲的AUC(0～t),增加其Vz;南沙参组可降低咖啡因的AUC(0～∞),显著降低甲苯磺丁脲的AUC(0～t)、AUC(0～∞)并使其Vz,CL显著增加,对氨苯砜、奥美拉唑的各药动学参数无明显影响;与藜芦组相比,合用可增加氨苯砜的MRT(0～t),降低奥美拉唑的AUC(0～t),AUC(0～∞)并增加其CL;与南沙参组相比,合用可增加甲苯磺丁脲的AUC(0～t),降低其Vz,CL。结论与空白组相比,藜芦组对大鼠CYP2C9具有诱导作用,南沙参组对大鼠CYP1A2酶具有诱导作用,对CYP2C9酶具有显著诱导作用,对CYP3A4、CYP2C19无明显影响;与藜芦组相比,合用组对大鼠CYP3A4酶具有抑制作用,对CYP2C19酶具有诱导作用;与南沙参组相比,合用组对大鼠CYP2C19酶具有抑制作用。