5b对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7ADR的耐药逆转作用

目的研究板蓝根活性单体-5b逆转乳腺癌耐药株MCF-7/ADR细胞的作用及逆转机理。方法选取人乳腺癌MCF-7细胞及耐药株MCF-7/ADR细胞作为主要研究细胞,在2种细胞中加入活性单体-5b,采用MTT法观察活性单体-5b对多药耐药(MDR)逆转作用;采用FCM法观察阿霉素对2种细胞的抑制浓度及倍数。结果当活性单体-5b的剂量低于150μmol/L时,其对2种细胞无毒性作用;活性单体-5b能提高MCF-7/ADR细胞的凋亡率;活性单体-5b能增加阿霉素在体内的积累。结论活性单体-5b对MCF-7/ADR细胞的MDR具有一定的逆转作用,是一种有效的乳腺癌化疗增敏剂。     

亚硒酸钠对人乳腺癌细胞MCF-7的作用研究

[目的]探讨不同浓度亚硒酸钠对人乳腺癌细胞MCF-7的作用.[方法]0、0.5、2、8、32μmol/LNa2SeO3处理人乳腺癌细胞24h后,用MTT比色法检测不同浓度亚硒酸钠对人乳腺癌细胞MCF-7的作用;DNA Ladder抽提试剂盒提取DNA后凝胶电泳法观察亚硒酸钠诱导人乳腺癌细胞凋亡的作用.[结果]随着亚硒酸钠浓度的增加,其对人乳腺癌细胞增殖的抑制作用增强.不同浓度的亚硒酸钠作用MCF-7人乳腺癌细胞24h后,各组均未出现典型的DNA梯状条带.[结论]亚硒酸钠对人乳腺癌细胞增殖具有抑制作用;尚未发现其诱导凋亡的作用.     

人乳腺癌多耐药细胞株中ALDH1,P-gp及CD44v6的表达研究

目的:比较人乳腺癌亲代敏感株MCF-7和多耐药细胞株MCF-7/A中ALDH1,P-gp及CD44v6的表达差异,探讨多耐药与侵袭转移作用机制。方法:以阿霉素低浓度加量持续诱导法,建立人乳腺癌多耐药细胞模型株MCF-7/A,用ALDEFLUOR分析法检测乳腺癌干细胞功能性标志物ALDH1阳性细胞在亲代敏感株MCF-7与多耐药细胞株MCF-7/A中所占比例,Transwell侵袭实验论证乳腺癌胞耐药是否伴随相应侵袭转移能力的改变,免疫细胞化学染色及荧光定量PCR分析亲代敏感株MCF-7与多耐药细胞株MCF-7/A中MDR1(P-gp)和CD44V6的表达变化。结果:耐药细胞株MCF-7/A较亲代敏感株ALDH1阳性细胞比例数明显增高;耐药细胞株MCF-7/A穿膜细胞数明显多于敏感细胞株MCF-7;耐药细胞株MCF-7/A中P-gp和CD44v6表达均明显高于亲代敏感细胞株。结论:乳腺癌的多耐药不仅包含获得性耐药细胞比例增加,同时伴有肿瘤干细胞的富集造成的内在性耐药增加,耐药的乳腺癌细胞伴有侵袭能力增强。     

姜黄素对HL60/ADR细胞多药耐药逆转作用的研究

目的:研究姜黄素对白血病耐药细胞HL60/ADR多药耐药的逆转作用.方法:用不同浓度姜黄素联合阿霉素处理HL60/ADR细胞,MTT法检测药物对细胞的生长抑制作用;流式细胞仪检测细胞内阿霉素的浓度及bcl-2表达水平.结果:HL60/ADR细胞经0.4,0.8μg/rml姜黄素作用24 h后,阿霉素的IC50分别为3.79、2.58 μg/ml,耐药逆转倍数为1.37、2.02,细胞内ADR浓度增加,bcl-2蛋白的表达下降.结论:姜黄素能部分逆转HL60/ADR细胞的多药耐药.     

五溴联苯醚对MCF-7细胞c-myc和p53 mRNA及蛋白表达的影响

[目的]观察五溴联苯醚(5-BDEs)对乳腺癌细胞MCF-7c-myc和p53 mRNA及蛋白表达的影响,以探讨5-BDEs雌激素活性的分子生物学作用机制.[方法]将MCF-7细胞在DMEM培养液中进行常规传代培养.采用MTT比色法观察5-BDEs对MCF-7细胞增殖的影响,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和免疫组化方法检测5-BDEs对c-myc原癌基因和p53抑癌基因表达的影响.[结果]与溶剂对照组相比,在1×(10-4～10-8)mol/L浓度范围内,5-BDEs与1×10-8mol/L雌二醇作用类似可显著促进MCF-7细胞增殖(P<0.05),并表现出良好的剂量-效应和时间-效应关系.RT-PCR及免疫组化结果显示,1×(10-4～10-8)mol/L的5-BDEs可促进MCF-7 c-myc和抑制p53 mRNA及蛋白表达.[结论]5-BDEs具有雌激素样生物活性,可促进雌激素反应性肿瘤细胞MCF-7增殖,这一效应主要是通过影响c-myc mRNA和蛋白质的表达而实现的.     

三羟异黄酮拮抗表皮生长因子促乳腺癌细胞增殖

目的通过体外细胞，观察三羟异黄酮(genistein)和表皮生长因子(EGF)对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响。方法用不同剂量genistein、不同剂量EGF、固定剂量genistein和EGF的混合液，作用于体外培养的雌激素受体阳性(ER^ )人乳腺癌细胞株MCF-7，作用不同时间后，用噻唑蓝(MTT)法测定细胞生长情况。结果genistein剂量超过25μmol／L以后对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞增殖均有抑制作用，而且随剂量增大和作用时间延长其抑制作用逐渐增强，其中50μmol／L为最适宜浓度，EGF剂量超过4．15nmol／L以后对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞增有明显的促进作用，而且随剂量增大和作用时间延长其作用逐渐增强，其中8．30nmol／LEGF联合作用于MCF-7细胞，则可显示出两者有交互作用，EGF对细胞的促增殖作用可以被genistein的作用逆转。结论genistein可抑制EGF诱导的人乳腺癌细胞株MCF-7细胞的增殖。     

E-钙黏蛋白与miR-200c在MCF-7/ADR及乳腺癌组织的表达研究

目的探讨乳腺癌耐药株中E-钙黏蛋白（E-cadherin）和miR-200c的表达,以及E-cadherin表达与新辅助化疗疗效的关系。方法应用定量RT-PCR方法检测人乳腺癌细胞株MCF-7和阿霉素耐药株MCF-7/ADR中E-cadherin、Twist1以及miR-200c表达,采用免疫组化法检测82例乳腺癌患者新辅助化疗前组织E-cadherin表达。结果与MCF-7相比,E-cadherin在MCF-7/ADR中表达明显降低（P=0.01）,Twist1在MCF-7/ADR中表达明显升高（P〈0.01）,miR-200c在MCF-7/ADR表达较MCF-7显著下降（P〈0.01）。结论 E-cadherin和miR-200c表达下调参与乳腺癌阿霉素耐药,可能是逆转乳腺癌耐药的潜在治疗靶点。     

枸橼酸芬太尼对人乳腺癌MCF-7细胞MMP-2及MMP-9表达的影响

目的:探讨枸橼酸芬太尼对人乳腺癌MCF-7细胞MMP-2和MMP-9表达的影响。方法:以MCF-7细胞为对象,分别加入0、0.000 1、0.01、1μmol/L的枸橼酸芬太尼干预48 h,RT-PCR检测MMP-2和MMP-9 mRNA的表达,Western blot检测MMP-2和MMP-9蛋白的表达。结果:MCF-7细胞MMP-2和MMP-9 mRNA的表达随着枸橼酸芬太尼浓度的增加而减少,0.01及1μmol/L枸橼酸芬太尼组与对照组差异有统计学意义(P<0.05)。枸橼酸芬太尼呈浓度依赖性抑制MCF-7细胞MMP-2、MMP-9蛋白的表达,各浓度实验组与对照组差异有统计学意义(P<0.01)。结论:芬太尼可抑制MCF-7细胞MMP-2及MMP-9的表达,该作用可能是芬太尼降低人乳腺癌MCF-7细胞侵袭能力的分子机制之一。     

靶向Survivin反义寡核苷酸逆转MCF-7乳腺癌细胞三苯氧胺耐药的研究

目的探讨Survivin基因在乳腺癌细胞获得性三苯氧胺(TAM)耐药性形成中的作用以及靶向Survivin mRNA逆转乳腺癌细胞TAM耐药性的可行性。方法建立TAM耐药细胞株(TAM-R),用靶向Survivin mRNA的反义寡核苷酸(ASODN)联合10~(-5)M TAM分别作用于MCF-7细胞和MCF-7/TAM-R细胞72 h后,采用MTT法、平板克隆形成实验、流式细胞仪、原位杂交法检测细胞活性、克隆形成率、凋亡率及Survivin mRNA表达的变化。结果 MCF-7/TAM-R组的Survivin mRNA表达明显高于MCF-7组;ASODN联合应用TAM能够逆转MCF-7/TAM-R细胞对TAM的耐药性,其细胞活性、克隆形成率以及凋亡抑制程度明显强于TAM组(P0.05);靶向Survivin的反义寡核苷酸能够抑制Survivin mRNA的表达。结论 MCF-7细胞可能通过上调Survivin基因来对抗长期TAM刺激所诱导的细胞凋亡,从而促进TAM耐药性的形成,靶向Survivin mRNA的反义寡核苷酸能够逆转MCF-7细胞对TAM的耐药。     

氯氰菊酯对人乳腺癌细胞MCF-7 Akt/NF-κB/caspase 9信号通路作用研究

目的 研究氯氰菊酯对人乳腺癌细胞MCF-7 Akt/NF-κB/caspase-9信号通路的影响,探讨氯氰菊酯对MCF-7的作用机制。方法 用0和1.0×10-6 mol·L-1浓度氯氰菊酯染毒MCF-7细胞24 h,应用Western Blot法测定p-Akt、p-NF-κB p65和caspase 9蛋白表达水平。结果 与0 mol·L-1对照组相比,1.0×10-6 mol·L-1氯氰菊酯染毒组作用细胞后,p-Akt蛋白表达量(对照组:0.12±0.0081,染毒组:0.19±0.0167)上调,差异有统计学意义(t=-5.777,P=0.004)、p-NF-κB p65蛋白表达量(对照组:0.32±0.0342,染毒组:0.57±0.0964)上调,差异有统计学意义(t=-4.249,P=0.013)。caspase-9蛋白表达量(对照组:0.52±0.0069,染毒组:0.45±0.02068)下调,差异有统计学意义(t=5.285,P=0.006)。结论 氰菊酯通过对MCF-7细胞Akt/NF-κB/caspase-9信号通路产生影响发挥拟雌激素作用。     

职业性噪声对工人听力的影响

目的：了解职业性噪声对工人听力的影响。方法：选择500名噪声作业工人及对其工作环境进行劳动卫生学调查，另将500名非噪声作业的人员设为对照组，分析2组研究对象听力水平的差异。结果：接触组的听损检出率为（22．4％），与对照组（4．2％）差异有显著性（x^2=71．81，P〈O．01）；听损检出率与噪声暴露水平和接噪工龄有关。结论：听损检出率随噪声暴露水平和接噪工龄的增加而增高。     

硒对乙醇致大鼠机体损伤的保护作用

目的 :探讨硒对乙醇致体内脂质过氧化的保护作用及机理。方法 :用 3g/kg体重的乙醇给大鼠灌胃 ,同时自由饮用含硒量为 0 .2 5 mg/L 的亚硒酸钠水溶液 ,饲养三个月。结果 :与单给乙醇组比较 ,乙醇 +Se组大鼠组织和血清 MDA含量显著降低 (P均 <0 .0 1) ,GSH- Px、SOD、CAT活性均升高 (P均 <0 .0 5 )。结论 :硒可能通过增加 GSH- Px、SOD、CAT活性从而抑制过量乙醇对机体的损伤     

医疗纠纷对护士心理影响的调查

[目的]了解医疗纠纷和医疗事故的发生情况以及在医疗纠纷发生时、处理中、处理后护士的心理活动变化情况。[方法]以方便抽样方法,对上海市和绍兴市六家医院的护士进行现况调查。[结果]不同学历的护士医疗纠纷的发生率差异有统计学意义（P﹤0.05）,不同工龄的护士医疗事故的发生率差异有统计学意义（P﹤0.05）,在医疗纠纷发生时、处理中、处理后护士心理变化则差异均无统计学意义（P﹥0.05）。[结论]护士学习相关的法律法规有利于提高护理质量,降低医疗纠纷和医疗事故。     

丙硫氧嘧啶干扰甲状腺功能的亚急性毒性研究

[目的]研究丙硫氧嘧啶(Propylthiouracil, PTU)干扰甲状腺功能的亚急性毒性状况,为PTU致甲状腺肿的组织发生学研究提供实验室基础数据.[方法]SD大鼠150只,随机分为15组,包括3、6、9、12、15、18、21d的试验组和同期对照组,对照组用玉米油灌胃,试验组用PTU的玉米油溶液灌胃,于每个实验期结束的d2麻醉后股动脉放血处死动物,取甲状腺、肝、肾、脾、胸腺,称重后进行组织病理学观察.[结果]试验组血清风TT、TT4浓度先降低再进入平缓期,TSH浓度是先升高再进入平缓期,甲状腺绝对重量和脏器系数均持续升高,和对照组相比.6d时差异有统计学意义(P<0.05).[结论]PTU 5mg/(kg. day)的剂量染毒大鼠21d,除干扰甲状腺功能,未见其他毒性反应,甲状腺在持续增生,功能尚未代偿.因此用该方法研究甲状腺的组织发生学是可行的.     

生物滤池对生活污水理化性状影响研究

目的 :了解二级生物滤池对生活污水理化性状的影响。方法 :于污水处理前及第一、第二个生物滤池处理后分别取水样 ,测定悬浮物、 CODcr (化学耗氧量 )、 BOD5(五日生化需氧量 )、氨氮等指标 ,观察处理前后浓度的变化情况。结果 :生活污水经第一个生物滤池处理后所测定的各项指标其浓度均有明显的下降 ,P值均 <0 .0 1。结论 :生活污水经过一级生物滤池处理就能达到较为理想的效果     

葡萄籽软胶囊对人体抗氧化作用的实验研究

[目的]探讨葡萄籽软胶囊对人体的抗氧化作用.[方法]将117例年龄在45～65岁之间的健康志愿者按血清丙二醛含量随机分为受试组和对照组,受试组连续服用受试物90d,测定血清中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性和安全性指标.[结果]试食后受试组丙二醛含量明显下降,自身前后比较差异有统计学意义(P<0.01),下降率为4.90%;超氧化物歧化酶活性明显升高,自身前后比较差异有统计学意义(P<0.001),升高率为12.44%;谷胱甘肽过氧化物酶自身前后及与对照组比较无明显变化.各项安全性指标试验前后均无明显改变.[结论]葡萄籽软胶囊对人体具有抗氧化作用.     

锌对幼儿体内钙水平影响的研究

目的：探讨补锌对幼儿体内钙水平的影响。方法：对370名1～3岁幼儿采用配对双盲分组的方法进行补锌补钙实验研究。结果：补锌对幼儿体内钙水平有显著的影响（P〈0．05）。补充锌剂能改善幼儿对钙的吸收。结论：锌可能与钙代谢有关。补钙时应同时补锌。     

紫菜粉对小鼠肠道排便功能的影响

目的研究不同紫菜粉含量的饲料的润肠通便、抑制肠道有害菌以及对粪便挥发性成分的影响。方法以小鼠为实验对象,随机分为空白组、低、高剂量3组,给予含不同紫菜粉的配合饲料30d,测小鼠体重、粪便持水量、粒数、重量、排首黑便时间、pH、大肠杆菌含量以及挥发性成分。结果在连续喂食30d后,紫菜组小鼠粪便持水量、排便粒数、重量都显著增加(P<0.05),首黑便时间缩短,其中以5%的喂食量效果较好。另外,粪便pH值随紫菜添加量的增加而升高,大肠杆菌的含量也呈浓度趋势减少,包括醇类、酚类、烃类、酮类等的挥发性臭气化合物含量下降,同样以5%的功效较好。结论动物实验表明紫菜粉中的膳食纤维具有通便、改善肠道功能和减少粪便臭味的作用。     

硝酸镧对小鼠学习记忆低剂量兴奋效应及其机制研究

[目的]观察硝酸镧对小鼠学习记忆的低剂量兴奋效应及其与cAMP反应元件结合蛋白(CREB)和Jun-氨基末端激酶(JNK)蛋白磷酸化水平的关系。[方法]以0.002、0.02、0.2、2、20 mg/kg硝酸镧染毒ICR小鼠4周,每天测定小鼠水迷宫的反应时间和错误次数;试验结束时,取小鼠大脑分离海马和皮质,采用western blot测定p-CREB和p-JNK的含量。[结果]小鼠水迷宫的反应时间在染毒第4周时随着剂量的升高,呈现逐渐缩短,然后又逐渐延长的趋势,0.2 mg/kg组的反应时间最短;而错误次数则出现相反的趋势,2 mg/kg组的错误次数最少。硝酸镧经口染毒小鼠4周,0.2 mg/kg剂量组小鼠海马的CREB(6.20±3.2)和JNK(4.11±2.92)磷酸化水平升高,与溶剂对照组相比,差异有显著性。硝酸镧染毒各剂量组小鼠的皮质CREB和JNK磷酸化与对照组相比差异无显著性。[结论]硝酸镧经口染毒引起小鼠海马CREB和JNK蛋白的磷酸化水平升高,这与小鼠的学习记忆能力的变化的趋势一致,提示低剂量硝酸镧可能通过引起学习相关蛋白磷酸化水平的升高而对小鼠的空间学习记忆产生促进作用。     

锌和锰拮抗二氧化硅细胞毒性作用的研究

[目的]研究葡萄糖酸锌和氯化锰单独及联合拮抗二氧化硅对肺泡巨噬细胞的毒性作用.[方法]采用肺灌洗法获得肺泡巨噬细胞(1×106/ml),与二氧化硅同时加入不同浓度的葡萄糖酸锌、氯化锰以及葡萄糖酸锌 氯化锰溶液,共同培养18h后检测巨噬细胞中谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶的活性和过氧化氢的含量.[结果]葡萄糖酸锌和氯化锰,以及两者合用都具有拮抗二氧化硅细胞毒性的作用,两者最佳组合是1.5μg/ml葡萄糖酸锌 0.25μg/ml氯化锰.[结论]本实验证实葡萄糖酸锌、氯化锰在体外可有效拮抗二氧化硅粉尘的细胞毒性作用,降低肺泡巨噬细胞的过氧化氢的含量以及升高谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶的活性,两者共同作用更为明显.并找到了最佳剂量组合.这一研究结果,对进一步探索矽肺防治新途径具有一定的理论意义和实际应用价值.