内皮素受体拮抗剂对肝硬变、门静脉高压症大鼠内皮素受体mRNA表达的影响

目的：探讨内皮素受体拮抗剂对四氯化碳诱导产生的肝硬变、门静脉高压症大鼠内皮素受体mRNA表达的影响。方法：32只雄性SD大鼠,随机分成4组,每组8只。四氯化碳组、正常对照组、内皮素A受体拮抗剂(ETRA)治疗组、内皮素B受体拮抗剂(ETRB)治疗组,后2组在四氯化碳灌胃的基础上2次／d(间隔10h)分别皮下注射BQ-123(12．5μg／kg)和BQ-788(15μg／ks);RT-PCR测定大鼠肝组织ETRA mRNA及ETRB mRNA表达水平。结果：内皮素A、B受体拮抗剂治疗组ETRA mRNA表达与四氯化碳组比较差异无统计学意义;而ETRB mRNA表达2组间比较,差异有统计学意义。结论：内皮素受体拮抗剂能够部分调节四氯化碳诱导的肝硬变、门静脉高压症大鼠肝组织内皮素受体mRNA表达水平。     

参虫胶囊对实验性糖尿病大鼠视网膜组织内皮素-1和血清丙二醛的影响

目的：观察参虫胶囊对糖尿病大鼠视网膜组织内皮素-1（ET-1）和血清丙二醛（MDA）含量的影响.方法：制备糖尿病大鼠模型,随机分为模型组、中药组和西药组,中药组、西药组分别以参虫胶囊、导升明灌服,模型组不用任何药物.测定糖尿病大鼠视网膜组织ET-1和血清MDA含量,以正常大鼠作空白对照.结果：正常组大鼠视网膜ET-1及血清MDA含量最低,中药组次之,模型组最高.各组均有显著性差异（P＜0.01）.结论：参虫胶囊能够降低糖尿病大鼠视网膜组织ET-1和血清MDA含量.     

糖尿病大鼠视网膜病变中促血管生成因子的表达及意义

目的：检测血管内皮生长因子(VEGF)和基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)及其受体CXCR-4在糖尿病大鼠视网膜病变(DR)组织中的表达,探讨其在DR发病机制中的作用。 方法：以链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型。随机分为1月病程组(M1)、3月病程组(M3)和5月病程组(M5)。分别进行透射电镜观察视网膜微血管。视网膜消化铺片后行VEGF和SDF-1α/CXCR-4免疫组织化学检测。半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹分别检测VEGF,SDF-1α和CXCR-4 mRNA和蛋白在大鼠视网膜中的表达。结果：血管透射电镜观察：正常对照未见异常改变,M1开始出现异常改变,M5最明显。随着病程的延长,免疫组织化学示视网膜中VEGF,SDF-1α和CXCR-4表达水平逐渐增高,与正常对照组相比,造模后M1就有明显增高,M5差异有统计学意义（P<0.05）。RT-PCR示VEGF,SDF-1α和CXCR-4 mRNA的表达造模后M1就有明显增高,M5差异有统计学意义（P<0.05）。Western印迹示VEGF,SDF-1α和CXCR-4的蛋白表达造模后M1无明显改变,M3升高（P<0.05）,M5时升高最明显（P<0.05）。 结论：DR时VEGF,SDF-1α和CXCR-4在视网膜中的表达水平随糖尿病病程延长逐步增高,是DR的重要因素。     

兔症状性脑血管痉挛期基底动脉ETRA,ETRB和eNOS基因表达的变化

目的：：通过检测兔症状性脑血管痉挛模型基底动脉内皮素受体(ETRA,ETRB)和 eNOS mRNA的表达及其变化,探讨ETRA,ETRB和 eNOS在症状性脑血管痉挛(DCVS)引发脑血管损伤机制中的作用。方法：采用 Endo 法建立兔 DCVS模型,将双侧颈总动脉结扎2周后存活的32只兔随机分为两组,即枕大池注生理盐水组(C 组,8只)和注自体血组(D组,24只),后者以枕大池注自体血后观察的时间点分为3个亚组,即枕大池注自体血后第4天组(D4组)、第7天组(D7组)、第14天组(D14组),各亚组 8只。评估各组神经功能、基底动脉痉挛程度及形态学变化,采用 RT-PCR 法测基底动脉中 ETRA,ETRB 和eNOS mRNA表达变化。结果：(1)神经功能评估、基底动脉痉挛的形态学变化及痉挛程度均较好的拟合 DCVS 的发生和变化。(2)C组兔脑基底动脉可见 ETRA,ETRB和 eNOS mRNA表达;与C组比较,ETRA mRNA在 D4组、D7组、D14组均有升高(P>0.05);与C组比较,ETRB mRNA在D4组即有升高(P<0.05),D7组达高峰(P<0.01);与C组比较,D7组 eNOS mRNA的表达减少更为明显(P<0.05)。结论：本实验建立的兔DCVS模型能较满意地模拟临床 SAH 后脑基底动脉的病理变化,兔基底动脉血管壁 ETRA,ETRB,eNOS mRNA表达的变化及其演变时程与痉挛血管病理改变程度密切相关。     

一氧化氮合酶在糖尿病大鼠视网膜中表达模式的研究

目的 研究一氧化氮合酶(NOS)在8周糖尿病大鼠视网膜的表达,探讨其与一氧化氮在糖尿病视网膜病变(DR)中可能的分子作用机制.方法 采用限制片段差异显示PCR(RFDD-PCR)技术建立正常和8周糖尿病大鼠视网膜基因表达谱,经生物信息学分析两者差异,初步确定NOS三种亚型-eNOS、nNOS和iNOS为DR相关基因,并以半定量RT-PCR和免疫组化方法进行验证.结果 RFDD-PCR结果显示,糖尿病组eNOS和nNOS表达下调,iNOS表达上调.RT-PCR结果显示,糖尿病组eNOS和nNOS表达比正常组明显降低(eNOS:0.23±0.03,0.32±0.03,P＜0.05;0.25±0.02,0.36±0.02,P＜0.05),iNOS比正常组明显增高(0.27±0.02,0.20±0.03,P＜0.05).免疫组化结果显示,正常组eNOS、nNOS和iNOS阳性细胞均见于内核层(INL)和节细胞层(GCL),eNOS阳性细胞也分布于血管内皮层;糖尿病组eNOS和nNOS阳性细胞较正常组明显减少(eNOS:14.33±3.19,22.13±3.60,P＜0.05;nNOS:21.87±3.62,34.40±7.09,P＜0.05),iNOS较正常组明显增多(17.60±2.58,11.73±2.70,P＜0.05).结论 eNOS、nNOS和iNOS表达变化与DR发生发展有关.     

血糖控制不佳2型糖尿病视网膜病变患者外周血VEGF、HIF-1α和ET-1水平及其临床意义

目的 探讨血糖控制不佳的2型糖尿病视网膜病变（DR）患者外周血中血管内皮生长因子（VEGF）、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和内皮素-1（ET-1）水平与视网膜病变的关系。方法 选取2012年1月— 2018年2月在首都医科大学附属复兴医院住院并符合WHO 2型糖尿病（T2DM）诊断标准的T2DM患者195例为研究对象,分为3组：血糖控制较好且无DR的患者62例作为观察1组,血糖控制较好的DR患者 65例作为观察2组,以及血糖控制不佳的DR患者68例作为观察3组。选择同期健康体检者64例为正常对照组。检测所有受试者的动态血糖和VEGF、HIF-1α和ET-1,考察VEGF、HIF-1α和ET-1与动态血糖的关系。结果 与正常对照组比较,3个观察组的空腹血糖（FBG）、餐后2?h血糖（2?hPBG）、血糖水平标准差（SDBG）、日内血糖平均波动幅度（MAGE）、日间血糖平均绝对差（MODD）、日内血糖波动次数（NGE）、VEGF、HIF-1α和ET-1均提高（P?<0.05）,与观察1组比较,观察2和3组的SDBG、MAGE、MODD、NGE、VEGF、HIF-1α和ET-1均提高（P?<0.05）,与观察2组比较,观察3组的SDBG、MAGE、MODD、NGE、VEGF、HIF-1α和ET-1均提高（P?<0.05）,观察1、2组的FBG、2 hPBG差异无统计学意义（P?>0.05）,观察3组的FBG、2 hPBG均高于观察1、2组（P?<0.05）。VEGF、HIF-1α和ET-1与SDBG、MAGE、MODD和NGE均呈正相关（P?<0.05）。结论 按T2DM发病、DR发生及伴随DR的血糖控制不佳的顺序,VEGF、HIF-1α和ET-1表达逐渐升高,可能参与血糖控制不佳的DR的发生、发展过程。     

慢性寒冷应激对高血压大鼠血浆及脑组织中ET-1和CGRP表达的影响

目的观察慢性寒冷应激对肾血管性高血压大鼠（RHR）血浆及脑组织中内皮素-1（ET-1）和降钙素基因相关肽（CGRP）表达的影响,并探讨内皮素-1（ET-1）和降钙素基因相关肽（CGRP）与高血压脑卒中发生之间的关系。方法将造模成功后的RHR与对照组大鼠（正常血压）各分为慢性寒冷应激组与非应激组,在慢性寒冷应激8周后处死大鼠,ELISA法检测血浆中ET-1和CGRP的表达,免疫组化法检测脑组织中ET-1和CGRP的表达。结果与RHR非应激组比较,RHR应激组大鼠血液及脑组织中ET-1的表达明显升高,CGRP表达明显下降,差异均有显著性(P<0.05);与对照非应激组比较,对照应激组大鼠血液及脑组织中ET-1的表达明显升高,CGRP表达也明显升高,差异均有显著性(P<0.05)。结论慢性寒冷应激能打破RHR体内ET-1与CGRP的平衡,这可能是寒冷应激促使脑卒中发生的病理生理学机制之一。     

正常人及大鼠心脏内皮素转换酶的分布

目的:了解正常人和大鼠心脏各部分内皮素转换酶(Endothelin-conveerting en-zyme,ECE)的分布。方法:采用半定量RT-PCR法检测ECE mRNA表达,同时根据外源性的巨内皮素-1转变为内皮素-1的量判定ECE活性。结果:正常人心脏各部位心肌均存在ECE,ECEmRNA表达和活性的分布特点一致:心房显著高于心室,左、右心房间及左、右心室和室间隔间无显著性差异。大鼠的ECE mRNA表达和活性分布规律与人相似。结论:正常人和大鼠心脏各组分均存在ECE,且两者的分布规律相似。     

2型糖尿病视网膜病变患者血浆内皮素β2-微球蛋白的测定及其意义

目的探讨2型糖尿病(diabetes mellitus,type2,T2DM)视网膜病变患者血浆内皮素(endothelin-1,ET-1)及β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)含量测定的临床价值.方法用放射免疫分析法测定92例T2 DM患者(其中有视网膜病变DR 49例,无视网膜病变DM 43例)及38例健康对照组ET-1及β2-MG含量.结果 T2 DM视网膜病变患者的血浆ET-1及β2-MG含量均明显高于对照组(P<0.01),DR组与DM组比较差异也有极显著性(P<0.01).结论 ET-1及β2-MG联检对T2DM视网膜病变的早期诊断和病情分析有重要临床价值.     

蕨麻正丁醇提取物对大鼠心肌缺血再灌注损伤内皮素-1的影响

目的探讨蕨麻(Pa)正丁醇提取物对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法 Wistar大鼠60只随机分为6组:对照组(C组)、缺血组(I组)、缺血再灌注1 h组(R1h组)、缺血再灌注2 h组(R2h组)、蕨麻正丁醇提取物+缺血再灌注1 h组(Pa+R1h组)和蕨麻正丁醇提取物+缺血再灌注2 h组(Pa+R2h组)。放射免疫法测量各组血清内皮素-1(ET-1)水平;反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、蛋白质印迹(Western Blot)检测各组心肌组织中ET-1mRNA和蛋白的表达。结果与C组比较,I组的血清ET-1水平、心肌ET-1蛋白水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。R1h组、R2h组的血清ET-1水平、心肌ET-1 mRNA和蛋白表达均高于C组和I组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pa+R1h组和Pa+R2h组的血清ET-1水平、心肌ET-1 mRNA和蛋白表达与R1h组、R2h组比较明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ET-1在大鼠心肌缺血再灌注损伤过程中表达上调,蕨麻正丁醇提取物可降低ET-1的表达。     

Correlation between Pulmonary Endothelin Receptors and Alveolar-arterial Oxygen Gradient in Rats with Hepatopulmonary Syndrome

Hepatopul monary syndrome(HPS)is a clini-cal complex of intrapul monary dilatation(IPVD),gas exchange abnormalities and hypoxemia in thesetting of chronic liver diseases and(or)portal hy-pertension.The incidence of HPSin cirrhosis is a-bout5%-29%,and the mortality is41%[1].The major change of HPSis pul monary angiotelec-tasis and shunt,and the mechanism is still un-clear.The relationship between alveolar-arterialoxygen gradient(A-aDO2)and the expression ofpul monary endothelin-1receptor …     

Pathophysiology of the endothelin system - lessons from genetically manipulated animal models

Shortly after discovery of ET-1 in 1988, the entire endothelin system was characterized. The endothelin system consists of the three peptides ET-1, ET-2 and ET-3, their G-protein-coupled receptors endothelin receptor A and B (ETRA and ETRB) and the two endothelin-converting enzymes (ECE-1 and ECE-2). Genetically modified animal models are an important tool in biomedical research. Here we describe the key findings obtained from genetically modified animal models either over-expressing compounds of the ET system or lacking these compounds (knockout mice). Results from the different transgenic and knockout models disclose that the ET system plays a major role in embryonic development. Two ET system-dependent neural crest-driven developmental pathways become obvious: one of them being an ET-1/ETAR axis, responsible for cardio-renal function and development as well as cranial development; the other seems to be an ET-3/ETBR mediated signalling pathway. Mutations within this axis are associated with disruptions in epidermal melanocytes and enteric neurons. These findings led to the discovery of similar findings in humans with Hirschsprung disease. In adult life the ET system is most important in the cardiovascular system and plays a role in fibrotic remodelling of the heart, lung and kidney as well as in the regulation of water and salt excretion.     

内皮素受体拮抗剂对肝硬变门静脉高压症大鼠门静脉压及ET-1 mRNA表达的影响

目的 :探讨内皮素受体拮抗剂在肝硬变门静脉高压症大鼠降压中的作用。方法 :32只雄性SD大鼠 ,随机分成 4组 ,每组 8只。其中模型对照组、BQ 12 3组、BQ 788组制备CCl4诱导的肝硬变模型 ,后 2组于造模成功后每d 2次分别皮下注射BQ 12 3(12 .5 μg/kg)和BQ 788(15 μg/kg) ;正常对照组 (NL) ,普通饲养 ,不做任何处理。采用生理八导仪测定门静脉压力 (PVP) ;RT PCR测定大鼠肝组织ET 1mRNA表达水平。结果 :BQ 12 3组 ,BQ 788组的PVP及肝组织ET 1mRNA表达量均较模型对照组显著降低 (P均 <0 .0 5 ) ,与正常对照组比较差异无统计学意义 ;模型对照组、BQ 12 3组、BQ 788组PVP与其ET 1mRNA的表达水平明显相关 (r分别 0 .94 4 ,0 .837和 0 .85 5 ;P均 <0 .0 5 )。结论 :应用内皮素受体拮抗剂能显著降低肝硬变门静脉高压症大鼠的PVP。     

糖尿病大鼠病程早期视网膜蛋白激酶C对NO通路的影响

目的探讨蛋白激酶C(PKC)和一氧化氮合酶(NOS)在糖尿病早期视网膜功能改变中的作用,观察早期糖尿病大鼠视网膜内PKC对NOS表达及NO含量的影响。方法2周糖尿病大鼠玻璃体腔注射PKC抑制剂后用ELISA法测定PKC活性,用半定量RT-PCR法测定NOS mRNA表达量,间接法测定NO含量。结果糖尿病模型建立2周后视网膜内PKC活性、nNOSmRNA及NO含量均明显高于正常组(P<0·01),i NOS mRNA稍高但差异无统计学意义(P>0·05)。注射PKC抑制剂后12h、24h时nNOS mRNA含量明显降低(P<0·05),24h时NO含量亦降低P<0·01。结论PKC抑制剂可降低糖尿病早期视网膜nNOS的异常高表达。PKC影响nNOS表达可能是视网膜神经细胞功能紊乱和血管通透性增高的机制之一。     

内皮素-1及其受体A在子宫肌瘤中的表达及其意义

目的检测子宫肌瘤组织中内皮素-1（ET-1）及其受体A（ETA）的表达，探讨ET-1及ETA在子宫肌瘤的发生、发展中的作用。方法应用免疫组织化学SABC法检测30例子宫肌瘤组织中Er-1及ETA的表达，并与邻近的正常子宫肌组织进行比较。结果ET-1和ETA在子宫肌瘤组织和正常子宫肌组织中均有程度不同的表达。其阳性颗粒均定位于细胞浆中，其中ETA在子宫肌瘤组织中的表达以＋＋、＋＋＋为主，占73．3％；在正常子宫肌组织中的表达以＋以下为主，占66．7％，两者比较差异有显著性（P〈0．05）。在子宫肌瘤组织中，ETA的表达在分泌期强于增生期，差异有显著性（P〈0．05）；ET-1在子宫肌瘤组织中的阳性表达占83．3％，正常子宫肌组织中的阳性表达为73．3％，两者比较差异无显著性（P〉0．05）。结论（1）子宫肌瘤组织及正常子宫肌组织均具有分泌ET-1和ETA的功能。（2）ETA在子宫肌瘤细胞中呈高表达，提示ETA的高表达与子宫肌瘤的发生有关。（3）ETA在子宫肌瘤组织中分泌期高于增生期，提示孕激素可能促进ETA的合成。     

充血性心力衰竭患者外周血中内皮素受体基因的表达及意义

目的 研究内皮素受体基因(ETA、ETB)在充血性心力衰竭(简称心衰)患者外周血中的表达,探讨其临床意义,并建立外周血ETA、ETB基因的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测方法.方法 在48例心衰患者和25例健康对照组中分别采用放免法测定血浆内皮素(ET-1)水平,应用RT-PCR技术检测外周血中ET受体基因表达水...     

黄芪注射液对早期糖尿病肾病患者血小板功能和血浆内皮素的影响

目的 :了解黄芪注射液对早期糖尿病肾病的治疗作用。方法 :早期糖尿病肾病患者 136例 ,随机分为常规治疗 (R1)组 5 0例和黄芪治疗 (R2 )组 86例 ,治疗疗程 3周 ,用放射免疫法和酶联免疫吸附方法分别测定糖尿病肾病患者药物治疗前后血内皮素 - 1(ET - 1) 2 4h尿白蛋白排泄率 (uAER)和血小板颗粒膜蛋白 (GMP - 140 ) ,6酮前列环素 (6Keto -PGFla)及血栓素B2 .(TXB2 ) ;并选择 2 6例健康人为对照 (N组 )。结果 :糖尿病肾病患者血浆ET - 1、GMP- 140、TXB2 水平显著高于正常人。而 6 -Keto -PGFla则低于正常人。R1组治疗后血ET - 1水平降低 ,GMP - 140、TXB2 和uAER显著降低。结论 :糖尿病肾病的发生和发展可能与血浆内皮素水平改变和血小板功能的改变有关 ,黄芪可改善早期糖尿病肾病患者血小板功能和血浆内皮素水平     

牛磺酸营养干预下缺氧大鼠视网膜中葡萄糖转运蛋白1的表达

目的 观察高原缺氧条件下大鼠视网膜中葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)的变化,探讨牛磺酸对视网膜缺氧适应的影响.方法 96只SD大鼠随机分为6组,对照组(C)、牛磺酸组(T)、4 500 m缺氧组(45H)、4 500 m缺氧 牛磺酸组(45HT)、5 500 m缺氧组(55H)和5 500 m缺氧 牛磺酸组(55HT),分别以基础饲料和添加了2.4%牛磺酸的饲料喂养1周,营养干预后C组、T组继续在平原饲养,45H组、45HT组和55H组、55HT组放入低压氧舱分别模拟4 500 m和5 500 m高度的高原缺氧条件.在处理0、1、2、3 d后取视网膜,提取总RNA和总蛋白,应用RT-PCR和Western blot方法检测视网膜GLUT-1 mRNA和蛋白表达.结果 缺氧第1天视网膜中GLUT-1 mRNA与蛋白的表达显著降低(P＜0.05).缺氧第2天 mRNA与蛋白的表达开始回升,第3天 mRNA的表达恢复正常水平,蛋白的表达高于对照,牛磺酸处理后表达量均比对应的缺氧组高.结论 高原缺氧条件下,牛磺酸能通过上调GLUT-1的表达促进视网膜缺氧适应性调节机制的建立.     

内皮素受体拮抗剂对糖尿病大鼠视网膜VEGF的作用

目的观察内皮素受体拮抗剂对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子(VEGF)升高的抑制作用。方法31只成年雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、糖尿病非治疗组和糖尿病治疗组(予内皮素受体拮抗剂)。分组饲养24周后取材,ELISA法检测视网膜组织内VEGF水平。结果糖尿病治疗组VEGF水平明显低于糖尿病非治疗组组,经统计学分析,具有非常显著性差异(P<0.01)。结论一定浓度的内皮素受体拮抗剂能降低糖尿病大鼠视网膜内VEGF水平,对糖尿病视网膜病变的发生可能有一定的预防作用。