PREX1/RAC1分子轴对人胆管癌细胞恶性生物学特性的影响

目的:探讨PREX1/RAC1分子轴对人胆管癌细胞恶性生物学特性的影响。方法:Ualcan和GEPIA 1.0数据库预测PREX1、PREX2和RAC1在胆管癌中的表达差异和生存曲线。蛋白质印记（Western blotting）和荧光定量PCR（RT-qPCR）检测PREX1、PREX2、RAC1、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白和mRNA在胆管癌组织和细胞系中的表达水平。CCK-8试剂盒、BrdU试剂盒和克隆形成实验分别检测RBE细胞增殖、BrdU阳性细胞比例和克隆能力。采用划痕和Transwell分别检测RBE细胞迁移和侵袭。免疫荧光染色对E-cadherin和N-cadherin进行定位和定量。结果:Ualcan和GEPIA 1.0数据库预测发现,PREX1和RAC1在包括胆管癌在内的多种恶性肿瘤中异常高表达,且高表达的PREX1和RAC1预示着胆管癌患者有较好的生存率。此外,PREX1和RAC1在胆管癌组织和细胞系中高表达。PREX1能够上调RAC1的表达水平。过表达或敲低PREX1增高或降低RBE细胞增殖、克隆能力、迁移、侵袭和上皮间充质转化。结论:我们首次发现PREX1和RAC1在胆管癌样本中异常高表达,且PREX1/RAC1分子轴促进人胆管癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间充质转化。     

胶质瘤细胞能量代谢研究进展

恶性胶质瘤的一个重要的生物学异常表现是能量代谢的改变。从而使肿瘤细胞保持更强的增殖、侵袭及在不利环境中存活的能力。其能量代谢的特征是即使在有氧的条件下也主要采用糖酵解的方式产生能量．这一过程受一系列的基因调节,并促使肿瘤细胞表现出恶性特征。所以,针对恶性胶质瘤细胞能量代谢过程的治疗为胶质瘤的治疗提供了新的途径。本文就恶性胶质瘤细胞能量代谢的特征、调节、生物学改变及在治疗中的应用进行综述。     

Ebp1在肿瘤增殖和侵袭中的研究进展

肿瘤细胞的恶性增殖和浸润转移是影响肿瘤发展和治疗效果的重要因素,了解调控增殖和转移的影响因子及其分子机制对肿瘤早期的诊断和临床治疗意义重大。本文系统总结了增殖相关蛋白PA2G4（proliferation associated 2G4）家族成员Ebp1在多种肿瘤中的表达情况及其对细胞周期、细胞凋亡和分化、细胞迁移等方面的影响,并归纳了Ebp1影响肿瘤增殖和迁移的分子机制。Ebp在多种肿瘤中表达降低且与肿瘤的增殖和迁移呈负相关,并主要通过抑制周期相关蛋白的转录、调控影响肿瘤发展的信号通路。      

肿瘤细胞的低碳生活

细胞能量异常是肿瘤细胞的十大特征之一,正常细胞能量代谢主要通过线粒体氧化磷酸化释放二氧化碳,而肿瘤细胞能量代谢主要通过有氧糖酵解产生乳酸代替二氧化碳释放,这种能量代谢的特点使内环境中二氧化碳释放减少。因此,肿瘤细胞处于一种低碳生活状态,具有体细胞逐渐恶变的进程中获得特征性生长表型,在肿瘤细胞增殖、侵袭转移中发挥独特的生物学作用。本文就肿瘤细胞低碳生活与肿瘤细胞主要的特殊能量需求、基因突变、环境选择、酸抵抗、凋亡逃避和肿瘤干细胞特性维持等机制进行综述。      

缺氧诱导因子-1α在恶性肿瘤中的研究进展

肿瘤的发生、发展与细胞的过度增殖和凋亡的减少有关，肿瘤细胞无限制的增殖是其主要的特征，而细胞增殖需要大量耗氧，研究证实缺氧是实质性肿瘤物理微环境的基本特征之一。肿瘤的缺氧不仅是发生恶性转化的始动因素，还可以诱导肿瘤细胞对放疗及化疗的耐受性，促进肿瘤的浸润和转移等恶性生物学行为的发生，缺氧导致的一系列基因和蛋白的表达正是这些现象发生的根本原因。缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor 1 alpha，HIF-1α）在肿瘤的血管生成和能量代谢中起重要的调控作用。     

PRUNE2点突变影响前列腺癌DU145细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移

背景与目的：PRUNE2是成神经细胞瘤的一个特异性预后相关基因,在调节成神经细胞瘤的细胞分化、增殖和侵袭方面发挥着重要作用。PRUNE2低表达与前列腺癌的不良预后密切相关。探讨PRUNE2点突变对前列腺癌DU145细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。方法：通过构建PRUNE2基因野生型和突变型过表达的重组载体并将其转染到DU145细胞中构建相应稳转株。利用细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8,CCK-8）实验和克隆形成实验检测细胞恶性增殖能力,通过细胞凋亡实验检测细胞凋亡能力,采用transwell小室法检测细胞侵袭和迁移能力。采用蛋白质印迹法（Western blot）检测蛋白的表达水平,通过免疫荧光和免疫共沉淀实验检测蛋白之间的相互作用。结果：转染突变型PRUNE2 E370K基因的DU145细胞恶性增殖、侵袭和迁移能力均较对照组显著增强,细胞凋亡率显著降低,差异有统计学意义（P<0.05）。PRUNE2与RhoA之间可以相互结合,但是PRUNE2 E370K突变体与RhoA之间的相关作用明显减弱。同时,PRUNE2 E370K突变体促进Rho通路下游ROCK蛋白和FAK蛋白的表达,促进与细胞增殖相关的Bcl-2和cyclin D1蛋白的表达,同时抑制与侵袭、迁移相关抑制蛋白E-cadherin的表达。结论：前列腺癌DU145细胞中PRUNE2基因点突变可以促进细胞增殖、侵袭和迁移,并抑制细胞凋亡。     

星形胶质细胞上调基因1在恶性肿瘤中的研究

 近年研究表明,星形胶质细胞上调基因-1（AEG-1）几乎高表达于所有恶性实体瘤中并与不良预后密切相关,成为多种肿瘤的预后标志物。作为强碱性蛋白,AEG-1具有跨膜结构域和多重核定位信号,在包膜、胞质和胞核中均有表达。作为癌基因,AEG-1在肿瘤细胞增殖、凋亡、迁移、黏附、侵袭、肿瘤血管生成和化疗耐药等多种恶性生物学行为中发挥重要作用。AEG-1在肿瘤发生、发展中的关键作用使其可能成为肿瘤治疗的新靶点。     

盘状蛋白结构域受体1与肿瘤细胞信号通路关系的研究进展

摘 要：盘状蛋白结构域受体1（discoidin domain receptor 1,DDR1）是酪氨酸激酶受体(tyrosine kinase receptor,RTK)家族重要成员之一,胶原作为其受体可使其活化,并调节机体多种重要的生理及病理过程,如个体的正常发育、器官纤维化及肿瘤的侵袭和迁移等。最近的多项研究表明DDR1-胶原信号在多种肿瘤中起重要作用。胶原直接通过细胞表面受体与肿瘤细胞相互作用,磷酸化的DDR1对肿瘤细胞的存活及侵袭、迁移等生物学行为起着至关重要的作用。本综述将讨论DDR1在肿瘤细胞增殖、侵袭、细胞粘附中的作用并展望DDR1在肿瘤靶向治疗中的运用前景。     

α-烯醇酶与消化系统肿瘤的研究进展

α-烯醇酶(α-enolase,ENO1)是糖酵解过程中的关键酶之一,在能量代谢过程中发挥重要作用,可催化磷酸甘油向磷酸烯醇式丙酮酸的转化.最近研究发现,ENO1作为潜在的肿瘤分子标志物,可参与肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移等过程,有望成为肿瘤早期诊断、治疗及预后评估的重要分子靶标.本文对ENO1与消化系统肿瘤的研究进展做一综述.     

Nampt 在胶质瘤中的研究进展

尼克酰胺磷酸核糖转移酶（ Nicotinamide phosphoribosyl transferase ,Nampt）是哺乳动物细胞NAD补救合成途径的限速酶,涉及到细胞的能量代谢和增殖。近年来研究表明,Nampt与多种恶性肿瘤相关,它具有调节能量代谢和基因组不稳定性,促进肿瘤增殖和血管生成,促进肿瘤炎性反应和逃避免疫的功能。最新研究显示,Nampt在胶质瘤中高表达,并且与胶质瘤的增殖、迁移、侵袭和预后密切相关,可能为胶质瘤的研究和治疗提供新的靶点。     

PAK5通过上皮-间质转化促进人乳腺癌细胞侵袭

目的:探讨p21活化激酶-5（p21-activated kinase 5,PAK5）蛋白对乳腺肿瘤细胞侵袭转移的作用机制。方法:观察PAK5过表达对乳腺癌细胞形态的影响,人乳腺肿瘤细胞MCF-7通过慢病毒感染稳定表达Flag-PAK5。然后提取感染细胞的总蛋白进行蛋白免疫印迹检测上皮-间质转化（EMT）标志物上皮-钙黏蛋白（E-cadherin）,纤维连接蛋白（Fibronectin）和波形蛋白（vimentin）的表达。最后通过Transwell实验检测过表达PAK5对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响。结果:过表达PAK5蛋白能够使细胞形态由鹅卵石样像梭形变化,下调E-cadherin蛋白,促进乳腺癌细胞迁移和侵袭。结论:PAK5可能参与调节乳腺肿瘤细胞发生上皮－间质转化,促进乳腺肿瘤侵袭转移的发生。     

细胞分裂周期蛋白42在肿瘤中的作用及其分子机制研究进展

细胞分裂周期蛋白42（CDC42）是小G蛋白Rho家族的核心成员，在与GTP结合/活化状态和与GDP结合/失活状态之间循环切换，在复杂的细胞信号转导网络中，发挥开关作用，调控细胞的微丝骨架结构，与细胞的生长、迁移和黏附等重要生物学行为事件关系密切。已有研究发现，CDC42在肺癌、结直肠癌和乳腺癌等多种恶性肿瘤中明显上调表达，与肿瘤细胞的恶性演进密切相关，是肿瘤治疗的潜在靶点。围绕着CDC42在肿瘤细胞的分裂增殖、侵袭迁移，以及代谢中的作用及其分子机制，近年来取得了许多新的研究进展，是肿瘤学的热点研究领域之一，对此本文进行了系统综述。     

细胞分裂周期蛋白42在肿瘤中的作用及其分子机制研究进展

细胞分裂周期蛋白42（CDC42）是小G蛋白Rho家族的核心成员，在与GTP结合/活化状态和与GDP结合/失活状态之间循环切换，在复杂的细胞信号转导网络中，发挥开关作用，调控细胞的微丝骨架结构，与细胞的生长、迁移和黏附等重要生物学行为事件关系密切。已有研究发现，CDC42在肺癌、结直肠癌和乳腺癌等多种恶性肿瘤中明显上调表达，与肿瘤细胞的恶性演进密切相关，是肿瘤治疗的潜在靶点。围绕着CDC42在肿瘤细胞的分裂增殖、侵袭迁移，以及代谢中的作用及其分子机制，近年来取得了许多新的研究进展，是肿瘤学的热点研究领域之一，对此本文进行了系统综述。     

肿瘤细胞的糖酵解能量代谢机制

肿瘤细胞与正常分化细胞对比有着不同的能量代谢表型, 其多通过糖酵解途径消耗更多的葡萄糖, 并产生大量的乳酸, 却很少利用氧化磷酸化(OXPHOS)进行产能。但肿瘤细胞高糖酵解能量代谢表型的具体分子机制目前尚不完全明确。肿瘤细胞高糖酵解活性可能涉及到糖酵解酶和葡萄糖转运蛋白过表达、OXPHOS酶系和转运蛋白的低表达、线粒体含量减低及DNA对氧化应激的高敏性等机制。然而, 肿瘤细胞间遗传、生化和形态学上存在异质性, 其升高的糖酵解活性均有自己的不同机制。本文对肿瘤细胞高糖酵解活性的基因和生化调节机制进行具体分析, 并讨论肿瘤细胞降低的线粒体代谢和OXPHOS功能的机制。提示肿瘤细胞能量代谢的差异可作为高糖酵解肿瘤细胞的一个治疗靶向。      

miRNA对肿瘤生物学特性的影响

研究显示miRNA与肿瘤发生形成过程及其恶性生物学行为密切相关,作为一种调节分子可能参与了肿瘤的发生以及肿瘤细胞的增殖、分化、细胞凋亡、侵袭和转移及肿瘤耐药等的调节.miRNA靶标及其作用机制的深入研究可为解开肿瘤的发生发展机制及肿瘤治疗策略提供新的思路.     

Cofilin 1在肿瘤中的表达及意义

Cofilin 1（丝切蛋白1）是肌动蛋白相关蛋白,对肌动蛋白介导的细胞运动和骨架的改变起重要的调节作用。近年研究发现Cofilin 1的活化与肿瘤细胞的恶性侵袭性质有关。Cofilin 1的局部激活可以诱导片状伪足的形成,并影响肿瘤细胞运动的方向,从而增强肿瘤细胞的运动和迁移。最新研究成果显示,抑制或者增强Cofilin 1的活性可以减少肿瘤细胞的侵袭和迁移。Cofilin 1和p-Cofilin1在肿瘤细胞中的表达存在一个动态平衡,打破这个平衡可以直接抑制细胞的迁移和侵袭。本文对Cofilin 1的结构、功能、调控机制及平衡机制与肿瘤侵袭转移和上皮间质转化(EMT)以及肿瘤耐药性的关系作一综述。     

外泌体介导的Let-7a 通过下调MYC表达抑制三阴性乳腺癌细胞的恶性生物学行为

[摘要] 目的：探讨外泌体(EXO)传输Let-7a 调控MYC基因在三阴性乳腺癌（TNBC）细胞恶性生物学行为中的作用及其机制。方法：TNBC细胞MDA-MB-231 培养完成后,qPCR实验检测TNBC组织和细胞中MYC与Let-7a mRNA的表达水平,WB实验检测MYC与Let-7a 蛋白的表达水平。携Let-7a 重组慢病毒和敲除MYC的Crisper/Cas-9 系统分别转染MDA-MB-231 细胞,MTT、Transwell、划痕愈合实验检测MDA-MB-231 细胞增殖、侵袭和迁移能力。荧光素酶活性实验验证MYC和Let-7a 的作用靶点。分别在野生型和过表达Let-7a 的MDA-MB-231 细胞中分离EXO,并以透射电镜和WB实验鉴定。qPCR、WB、MTT、Transwell等实验检测两种EXO分别和MDA-MB-231 细胞共孵育后Let-7a 通过EXO影响MDA-MB-231 细胞的生物学功能。结果：Let-7a 与MYC在TNBC组织和细胞系中表达呈负相关（P<0.05）;MYC促进MDA-MB-231 细胞的增殖、迁移与侵袭,Let-7a 可以抑制MDA-MB-231 细胞的增殖、迁移与侵袭（均P<0.01）。Let-7a 通过作用于MYC基因的3''UTR 使其沉默,从而减少MYC蛋白的表达（P＜0.05）。Let-7a 由EXO包裹运输至肿瘤细胞,进而抑制MDA-MB-231 细胞的增殖、迁移与侵袭能力（P<0.05）。结论：EXO介导的Let-7a通过作用于MYC基因3’UTR区使得MYC基因沉默,从而抑制MDA-MB-231 细胞的增殖、迁移与侵袭。     

lncRNA DGCR5通过上调EGFR表达促进食管鳞状细胞癌TE1细胞的恶性生物学行为

目的：探讨长链非编码 RNA（long non-coding RNA，lncRNA）DiGeorge 综合征临界区基因 5（digeorge syndrome critical region gene 5，DGCR5）对食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）TE1细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法：采用qPCR检测ESCC细胞系 TE1、Yes-2、KYSE150 和 Eca9706 中 DGCR5 的表达水平。将siRNA-DGCR5（si-DGCR5）和阴性对照组（si-NC）质粒转染进TE1细胞，用CCK-8、划痕愈合、Transwell小室法分别检测TE1细胞增殖、迁移和侵袭能力。依据GEPIA数据库资料分析食管癌组织中 DGCR5 表达与细胞表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）的相关性，并用qPCR和Western blotting（WB）检测ESCC细胞系中EGFR mRNA和蛋白表达水平，进一步用WB实验检测转染 si-DGCR5 前后 TE1细胞中EGFR蛋白的表达水平。结果：DGCR5 在 ESCC 细胞系中均高表达（均 P<0.01），转染siDGCR5组TE1细胞中DGCR5的表达水平明显低于si-NC组（P<0.01）。敲低DGCR5后,TE1细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著低于si-NC组细胞（均 P<0.01）。GEPIA 数据库的分析显示，食管癌组织中 DGCR5 表达水平与 EGFR 的表达呈正相关（P<0.01）。敲低DGCR5后TE1细胞中EGFR蛋白表达水平明显下降（P<0.01）。结论：lncRNA DGCR5在ESCC细胞中呈高表达，可能通过上调EGFR表达来促进TE1细胞的增殖、侵袭和迁移等恶性生物学行为。     

过表达miR-145-5p 通过下调IGF1R抑制食管鳞状细胞TE-10 细胞的恶性生物学行为

目的：探究miR-145-5p 对食管鳞状细胞癌TE-10 细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）等恶性生物学行为的分子机制。方法：qPCR法检测miR-145-5p 在食管鳞状细胞癌细胞和正常食管上皮细胞中的表达水平。采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-145-5p 与胰岛素样生长因子1 受体（insulin-like growth factor 1 receptor，IGF1R）的靶向调控关系，Western blotting 检测IGF1R蛋白和EMT相关蛋白的表达，CCK-8 法和Transwell 检测miR-145-5p/IGF1R分子轴对TE-10 细胞增殖、侵袭、迁移的影响。结果：miR-145-5p 在3 株食管鳞状细胞癌细胞中低表达且在TE-10 细胞中表达最低（P<0.01 或P<0.05）。过表达miR-145-5p 可显著抑制TE-10 细胞的增殖、侵袭、迁移和EMT进程（P<0.01 或P<0.05）。双荧光素酶报告基因证实miR-145-5p 靶向下调IGF1R表达（P<0.01）。回复实验进一步证实，与单独过表达IGF1R相比，同时过表达miR-145-5p 和IGF1R能显著缓解IGF1R 对TE-10 细胞的增殖、侵袭、迁移和EMT 进程的促进作用（P<0.01 或P<0.05）。结论：过表达miR-145-5p 通过靶向下调IGF1R进而抑制了食管鳞状细胞癌TE-10 细胞的增殖、侵袭、迁移和EMT进程。