高压氧干预对大鼠肾缺血再灌注损伤肾组织低氧诱导因子-1αmRNA表达的影响

目的研究肾缺血再灌注损伤(IRI)时肾组织低氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA表达的变化,探讨高压氧(HBO)对肾IRI的作用及其机制。 方法42只Wistar大鼠分为对照组、肾IRI组和HBO治疗组,对照组6只,其余2组各18只,建立大鼠肾IRI模型。肾IRI组和HBO治疗组分别于再灌注后1,3,5 h（每个时间点6只）采血测定肾功能,荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测肾组织HIF-1α mRNA的表达,同时用电镜观察组织超微结构的变化。 结果①随着再灌注时间的延长,血清Cr的水平逐渐增高,显著高于对照组(P<0.05);HBO治疗后血清Cr水平显著降低(P<0.05)。②肾IRI组在再灌注1 h时肾组织HIF-1α mRNA表达量明显低于正常水平,3 h时明显高于对照组(P<0.05),5 h时基本恢复至正常水平(P&rt;0.05);与肾IRI组相比,HBO治疗组再灌注后1 h和3 h时HIF-1α mRNA表达量明显增加(P<0.05),5 h时显著减少(P<0.05)。③随着时间的延长,肾IRI组肾小管上皮细胞内质网扩张、线粒体肿胀等损伤逐渐加重;HBO治疗后肾损伤的程度明显减轻,线粒体基本恢复正常,再灌注1 h和3 h时肾损伤减轻的程度明显优于再灌注5 h时。 结论HIF-1αmRNA参与了肾IRI的病理生理过程。HBO通过提前启动和上调HIF-1α mRNA的表达,明显减轻了肾IRI,保护了肾功能。HBO早期干预更有利于肾IRI的治疗。     

高压氧辅助治疗对脑卒中后抑郁患者血清细胞因子及抑郁状态的影响及其临床意义

目的探讨高压氧(HBO)治疗对脑卒中后抑郁(PSD)患者血清细胞因子［肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）］和抑郁状态的影响及其临床意义。 方法将60例PSD患者随机分为高压氧治疗组(HBO组)30例和常规治疗组(常规组)30例,常规组仅给予临床常规治疗,HBO组在常规治疗的基础上加用HBO治疗。应用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测HBO组和常规组治疗前、后血清TNF-α及IL-1β的水平。于治疗前与治疗30 d后,采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、中国卒中量表(CSS)、改良Barthel指数（MBI）评定2组的疗效。 结果治疗前,脑卒中后重度抑郁患者的血清TNF-α、IL-1β水平显著高于轻、中度抑郁的患者(P<0.01),中度抑郁患者血清TNF-α、IL-1β水平与轻度抑郁患者比较,差异有统计学意义(P<0.01)。HBO组血清TNF-α及IL-1β的水平与常规组比较,差异无统计学意义(P&rt;0.05)。治疗30 d后,HBO组和常规组血清TNF-α及IL-1β浓度均有下降(P<0.05),且HBO组低于常规组(P<0.01);HBO组和常规组HAMD、CSS、MBI评分较治疗前均显著下降(P<0.01),且HBO组各项评分明显优于常规组(P<0.05)。 结论细胞因子TNF-α、IL-1β参与了PSD的发生和发展,细胞因子的血清水平可在一定程度上反映PSD的严重程度;HBO辅助治疗能够明显降低PSD患者血清TNF-α和IL-1β的水平,显著改善患者的抑郁状态。HBO可能通过减轻脑梗死急性期继发的炎性损伤发挥治疗作用。     

己酮可可碱对大鼠肾缺血-再灌注损伤的保护作用及其机制

目的 探讨己酮可可碱(PTX)预处理对大鼠肾缺血-再灌注损伤(IRJ)的保护作用及其具体保护机制.方法 75只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(SO组)、缺血.再灌注组(IRI组)、FTX治疗组(PTX组).每组25只.SO组:单纯剖腹术,游离双侧肾蒂血管后不作结扎,等待45 min后关闭腹腔.通过无损伤动脉夹阻断双肾血流45 min建立大鼠的肾IRI模型.FTX组术前0.5 h予FTX 20rng/kg静脉注射,术中PTX 6 mg/(kg·h)微泵维持.SO组、IRI组术前0.5 h予等量生理盐水静脉注射及微泵维持.3组分别于缺血前、缺血-再灌注即刻、再灌注后1 h、4 h、24 h 5个时间点监测肾功能、肾脏病理及肾组织匀浆的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞问黏附分子-1(ICAM-1)变化情况.采用单因素方差分析,组间两两比较采用q检验,并对部分数据行相关性分析.结果 肾IRI后,表现为肾小管上皮细胞不同程度的肿胀、变性、坏死,炎性细胞浸润,给予PTX预处理后肾脏病理改变明显减轻,炎性细胞浸润减少.与SO组相比,IRI组在再灌注后各时间点血清肌酐水平,肾小管损伤评分,.肾组织匀浆的TNF-α水平、ICAM-1水平显著升高(P<0.01),肾组织匀浆的SOD水平显著下降(P<0.01);与IRI组相比,FTX组在相应时间点的血清肌酐水平、肾小管损伤评分显著下降(P<0.05);在再灌注即刻、1 h、4 h、24 h肾组织匀浆的TNF-α水平明显下降(P<0.05),肾组织匀浆的MDA、ICAM-1水平在再灌注后4 h,24 h显著下降(P<0.01),肾组织匀浆的SOD水平在再灌注后4 h、24 h显著升高(P<0.05).相关性分析显示,TNF-α与MDA、SOD、ICAM-1之间的相关系数分别为0.801、-0.895、0.838,(P<0.01)结论 FTX对肾IRI有保护作用,该作用可能与FTX直接抑制肾组织中TNF-α的表达有关,从而减轻了氧化应激、抑制了ICAM-1的表达,减轻炎性细胞肾内浸润而发挥保护作用.     

芹菜素对脑缺血再灌注大鼠神经功能恢复的影响及其作用机制分析

目的观察芹菜素对局灶性脑缺血再灌注大鼠神经功能的影响,并探讨其相关作用机制。 方法将90只大鼠随机分为假手术组、模型组及芹菜素组。采用线栓法将模型组和芹菜素组大鼠制成左侧大脑中动脉缺血再灌注（1.5 h）模型,假手术组大鼠在制模过程中不阻断大脑中动脉血流。芹菜素组大鼠于再灌注同时及其后每24 h腹腔注射芹菜素液,假手术组及模型组大鼠则在相同时间点注射等体积生理盐水。于再灌注第24,48,72小时及第7天时参照Zea longa法评定大鼠神经功能缺损程度,同时采用光镜、电镜观察各组大鼠脑组织病理形态学改变,选用ELISA法测定脑组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）含量。 结果模型组大鼠神经功能缺损症状于脑缺血再灌注第7天时明显改善,芹菜素组大鼠神经功能缺损症状于脑缺血再灌注第72小时时即有显著提高。与假手术组比较,模型组、芹菜素组TNF-α和IL-1β含量均显著增高（P<0.01）,芹菜素组TNF-α、IL-1β含量在脑缺血再灌注第48和72小时时均较模型组显著降低（P<0.05）。进一步分析后发现,大鼠神经功能缺损评分均与IL-1β含量、TNF-α含量呈正相关。模型组大鼠脑皮质和海马细胞肿胀、细胞间质水肿,有空泡形成,神经细胞均有核固缩、碎裂、溶解表现。芹菜素组大鼠脑组织神经细胞轻度肿胀,细胞间质、毛细血管壁轻微水肿,神经细胞有明显核固缩、碎裂、溶解表现。 结论芹菜素能促进局部脑缺血再灌注大鼠神经功能恢复,其作用机制可能与下调TNF-α和IL-1β水平有关。     

头部亚低温干预对大鼠缺血脑组织保护作用的实验研究

目的研究脑缺血后即时亚低温干预对脑缺血损伤的影响。 方法将48只SD大鼠随机分为假手术组（8只）、常温（37～38℃）脑缺血组（8只）和亚低温（33～34℃）脑缺血组（32只）,后者又根据亚低温持续作用时间细分为4个亚组（n=8）。将常温脑缺血组和亚低温脑缺血组大鼠制成全脑缺血20 min、再灌注240 min模型。亚低温脑缺血组大鼠于脑缺血20 min时给予亚低温治疗,4个亚组亚低温持续作用时间分别为30,60,120,240 min。于脑缺血再灌注240 min后检查上述各组大鼠脑组织中一氧化氮（NO）代谢产物亚硝酸盐（NO2）、内皮素-1（ET1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β含量;同时对各组大鼠血液中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）及肌酸激酶脑型同工酶（CK-BB）水平进行检测。 结果常温脑缺血组大鼠脑组织中ET1、NO2、TNF-α和IL-1β水平均明显高于假手术组（P<0.01）;亚低温持续作用30 min对脑缺血组织中ET1、NO2、TNF-α和IL-1β含量无明显影响（P&rt;0.05）;亚低温持续作用60～240 min可显著降低脑缺血组织中ET1、NO2、TNF-α和IL-1β水平（P<0.05或0.01）。常温脑缺血组大鼠血液中LDH、AST、CK和CK-BB水平均明显高于假手术组（P<0.01）;亚低温持续作用60～240 min可显著减少脑缺血大鼠血液中LDH、AST、CK和CK-BB含量（P<0.05或0.01）。 结论脑缺血后即时亚低温干预能明显减轻脑缺血损伤,亚低温持续作用时间以超过1 h为宜。     

早期高压氧治疗对急性脊髓损伤大鼠诱导型一氧化氮合酶的影响及疗效评价

目的探讨早期高压氧（HBO）治疗对急性脊髓损伤大鼠诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性表达变化的影响及疗效评价。 方法选取70只健康SD大鼠按随机数字表法分为对照组、假手术组、SCI组、HBO 2 h组、HBO 4 h组、HBO 6 h组和HBO 8 h组,每组10例。将SCI组、HBO 2 h组、HBO 4 h组、HBO 6 h组和HBO 8 h组大鼠均采用改良的Allen法制成T8～T9急性脊髓损伤模型（打击后大鼠尾部痉挛摆动、双侧下肢瘫痪,诱发电位测定值明显异于对照组,表明制模成功）;假手术组只进行硬膜囊暴露手术但不打击损伤脊髓;对照组不做任何处理。对照组、假手术组和SCI组仅饲养不做高压氧处理;HBO 2 h组、HBO 4 h组、HBO 6 h组和HBO 8 h组分别在制模成功后2、4、6和8 h始置于动物实验纯氧舱内行高压氧治疗,每日1次,连续7 d。分别于制模成功时和高压氧治疗完成时2个时间点,采用Gale等建立的联合行为评分(CBS)法对各个损伤组大鼠后肢功能进行神经学评定,使用神经肌电图机检测运动诱发电位（MEP）评价大鼠肢体功能。在HBO治疗结束后24 h内处死所有大鼠取材,取材后用重氮比色法测定iNOS表达量,用硝酸还原酶法测定一氧化氮（NO）含量。将所得数据进行统计学分析比较。 结果SCI组、HBO 2 h组和HBO 4 h组在实验期间各死亡1只,余67只大鼠纳入结果分析。①治疗结束后,脊髓损伤的大鼠脊髓组织中iNOS检测显示, SCI组iNOS测定值为（0.64±0.13）U/L,表达量最高;iNOS表达量逐渐明显降低,以HBO 8 h组最为明显（P<0.05）,HBO 8 h组iNOS值为（0.36±0.10）U/L,表达量最低,且与其它各组间差异有统计学意义（P<0.05）;但脊髓损伤各组大鼠的iNOS值仍高于假手术组的（0.33±0.07）U/L和对照组的0 U/L,且组间差异均有统计学意义（P<0.05）。②HBO治疗结束后,对照组、假手术组和SCI组大鼠血清中NO的测定量分别为（6.52±4.17）、（48.36±8.49）和（105.68±13.12）mmol/L;经HBO治疗后大鼠NO生成量明显降低,以HBO 8 h组最为明显,HBO 2 h组、HBO 4 h组、HBO 6 h组和HBO 8 h组大鼠血清NO的测定量分别为（89.25±12.82）、（66.53±17.91）、（41.33±15.59）和（33.14±11.21）mmol/L,均低于SCI组（P<0.05）;且与假手术组比较,组间差异亦均有统计学意义（P<0.05）。③与对照组及其它HBO治疗组比较,HBO治疗各组大鼠的CBS评分百分比均有提高（P<0.05）,运动功能逐渐恢复良好,以HBO 8 h组最为明显,且组间差异均有统计学意义（P<0.05）。④除对照组和假手术组外,其余各组脊髓损伤大鼠治疗前、后MEP检测的潜伏期和波幅组间比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论大鼠急性脊髓损伤后8 h开始高压氧治疗与损伤后2、4和6 h开始高压氧治疗相比,在减少iNOS的合成和促进运动功能恢复方面有更明显的作用。     

高压氧联合细胞周期特异性药物对结肠腺癌Lovo细胞的杀伤作用

目的探讨高压氧(HBO)联合细胞周期特异性药物氟尿嘧啶对结肠腺癌Lovo细胞的杀伤作用。 方法0.20 MPa HBO暴露后联合应用不同浓度氟尿嘧啶处理结肠腺癌Lovo细胞。流式细胞仪检测细胞周期,四甲基偶氮唑盐（MTT）法观察其对结肠腺癌细胞增殖的抑制作用。 结果①HBO暴露后Lovo细胞S期细胞积聚较对照组明显增多（P<0.01）,HBO暴露后24 h组Lovo细胞S期积聚明显高于HBO暴露后12 h组和48 h组（P<0.01）;②0.20 MPa HBO暴露后24 h联合应用低浓度氟尿嘧啶（≤8 μM）作用Lovo细胞12 h后,HBO联合氟尿嘧啶组癌细胞增殖的抑制程度与氟尿嘧啶组比较,差异有统计学意义(P<0.05);药物作用48 h后,HBO联合氟尿嘧啶组与氟尿嘧啶组比较,差异有统计学意义 (P<0.01);③中浓度和高浓度（16、32和64 μM）的氟尿嘧啶作用于Lovo细胞12 h,HBO联合氟尿嘧啶组与氟尿嘧啶组之间差异无统计学意义 (P&rt;0.05);药物作用48 h后,HBO联合氟尿嘧啶组与氟尿嘧啶组比较差异有统计学意义 (P<0.05)。 结论0.20 MPa HBO暴露可提高细胞周期特异性药物氟尿嘧啶对Lovo细胞的杀伤作用,尤其增强低浓度氟尿嘧啶对结肠腺癌细胞的杀伤作用。     

肾缺血再灌注损伤时血清及肾组织中促炎症细胞因子的变化与意义

目的:探讨促炎症细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在大鼠肾缺血-再灌注损伤(IRI)中的变化和意义。方法:采用夹闭大鼠肾动静脉的方法复制大鼠IRI模型,采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定肾缺血及再灌注1 h、4 h和24 h时血清和肾组织中IL-6、IL-8和TNF-α含量,并对肾系数、血清尿素氮、肌酐等指标进行检测。结果:单纯缺血组和再灌注4 h、24 h组'肾组织中IL-6水平明显低于假手术组(P<0.05),血清中IL-6水平仅在缺血组低于假手术组;血清与肾组织中的IL-6含量在不同时间内其变化呈直线正相关(r=0.89,P<0.(J5)。肾组织中IL-8、TNF-α水平在单纯缺血和再灌注早期(1 h、4 h组)明显高于假手术组(P<0.01.0.05),随再灌注时间延长两者逐渐下降至对照组水平;血清IL-8在单纯缺血和再灌注1 h组明显低于假手术组(P<0.01),随再灌注时间延长,逐渐接近对照组水平。血清SUN、Scr水平和肾系数在IRI各组均高于对照组。结论:IL-8、TNF-α可能参与了早期肾IRI过程,IL-6在肾IRI中可能起一定保护作用。     

高压氧干预对急性有机磷中毒大鼠脑组织中缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的观察急性有机磷中毒大鼠脑组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的变化，探讨高压氧（HBO）对急性有机磷中毒脑损伤的作用及其机制。 方法健康雄性SD大鼠60只，按随机数字表法分为健康对照组、中毒组、常规治疗组和HBO治疗组，健康对照组6只大鼠，其余每组18只，建立大鼠急性有机磷中毒脑损伤模型，均造模成功。常规治疗组给予长托宁和氯解磷定治疗1次，HBO治疗组在给予常规治疗后即行HBO治疗1次。中毒组、常规治疗组和HBO治疗组分别于造模成功后1、3和7h（每个时间点6只）下腔静脉采血检测丙二醛（MDA）的含量，荧光定量PCR检测脑组织HIF-1α mRNA的表达，免疫组织化学法检测脑组织HIF-1α蛋白的表达，同时行HE染色观察脑组织病理改变。 结果①HE染色显示，治疗后HBO治疗组的脑组织病理损伤形态学表现较中毒组有所减轻；②与健康对照组比较，中毒组常规治疗组和HBO治疗组各时间点脑组织HIF-1α蛋白表达明显增高（P<0.05），各时间点脑组织HIF-1α mRNA相对表达量亦明显增高（P<0.05）；③造模成功后1、3和7h，HBO治疗组各时间点的脑组织HIF-1α的表达分别为（226.57±57.49）、（205.91±30.36）、（187.67±29.25），明显低于较中毒组脑组织HIF-1α的表达［（1305.67±167.17）、（2667.83±367.79）、（1709.24±199.07）］，且血清MDA含量［（7.74±0.14）、（7.40±0.13）和（6.10±0.08）nmol/ml］亦较中毒组的血清MDA含量［（9.48±0.05）、（11.56±0.13）和（12.26±0.14）nmol/ml］明显下降，组间差异均有统计学意义（P<0.05）；而HBO治疗组治疗后1h和3h时间点的上述指标低于同时间点常规治疗组，组间差异亦有统计学意义（P<0.05）；④线性相关分析表明，HIF-1α mRNA相对表达量与血清MDA含量具有显著的正相关性（r=0.909，P=0.000）。 结论HIF-1α参与了急性有机磷中毒性脑损伤的病理生理过程，HBO对急性有机磷中毒性脑损伤早期的保护作用优于常规治疗组，其作用机制与抗氧化损伤和抑制HIF-1α的表达有关。     

激光治疗对噁恶唑酮诱导的溃疡性结肠炎大鼠细胞因子的影响

目的探讨低能量激光治疗溃疡性结肠炎(UC)的分子机制,观察治疗前、后细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)变化,为临床治疗提供依据。 方法将健康成年雄性SD大鼠30只分为正常组（6只）、UC对照组（8只）、200 mW激光治疗组（8只）和400 mW激光治疗组（8只）。采用改良的噁恶唑酮致敏法制备大鼠UC模型。造模后对2个激光治疗组大鼠分别以功率为200 mW与400 mW的砷铝化镓半导体激光进行治疗,每次照射10 min,每日1次,连续10 d。治疗后将大鼠处死,酶联免疫吸附分析（ELISA）测定各组大鼠血清和组织匀浆液中TNF-α、IL-6、IL-10的含量。 结果UC对照组大鼠与正常组比较,体重显著降低（P<0.01),黏液脓血便,血清和结肠组织匀浆中TNF-α和IL-6含量显著升高（P<0.05),IL-10显著下降（P<0.01),造模成功。激光治疗后,大鼠体重和大便性状显著好转;400 mW激光治疗组血清和结肠组织匀浆中TNF-α、IL-6显著降低（P<0.01),IL-10显著提高（P<0.05),接近正常水平;200 mW激光治疗组血清中TNF-α和IL-6显著降低（P<0.05),结肠组织匀浆中IL-6显著降低（P<0.01),TNF-α降低不显著(P&rt;0.05),血清和结肠组织匀浆中IL-10提高没有达到显著性水平(P&rt;0.05)。 结论400 mW砷铝化镓半导体激光能够有效地双向调节噁恶唑酮诱导的UC大鼠细胞因子,减低致炎细胞因子,增加抗炎因子作用,可能是低能量激光治疗UC产生较优疗效的机制之一。