牙龈卟啉单胞菌牙龈素在牙周炎症过程中的作用及其机制

牙周炎是口腔临床实践中最为常见的疾病之一。牙龈卟啉单胞菌与牙周炎密切相关,牙龈卟啉单胞菌表面的牙龈素(gingipains)、菌毛和脂多糖被认为是其最重要的毒力因子,是近年来牙周炎机制研究的热点,引起研究者的广泛关注。本文结合近年来的研究进展,就牙龈卟啉单胞菌gingipains的结构、引起牙周炎症的机制和所涉及的信号通路作一综述。     

大鼠实验性牙周炎中牙龈卟啉单胞菌rgpB和kgp变化的研究

目的:通过建立大鼠实验性牙周炎模型,检测不同时段大鼠上颌第一磨牙龈下人工定植的牙龈卟啉单胞菌、牙龈素rgpB和kgp相对含量的改变,动态观察牙周炎发展不同阶段牙龈卟啉单胞菌致病基因的变化。方法:选择6周的成年雄性大鼠13只,应用钢丝结扎法和细菌种植法建立大鼠实验性牙周炎模型。分别在4周和8周取上颌第一磨牙龈下菌斑,提取细菌DNA,应用PCR方法进行牙龈卟啉单胞菌、牙龈素基因rgpB和kgp特异引物扩增,应用SPSS13.0统计软件,分析大鼠牙周炎不同时段rgpB和kgp的相对变化。结果:大鼠实验性牙周炎模型,龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌的相对含量实验组明显高于对照组,8周组高于4周组;实验组牙龈卟啉单胞菌牙龈素rgpB和kgp明显高于对照组,4周组和8周组rgpB和kgp相对含量无显著性差异。结论:rgpB基因和kgp基因与牙周炎的致病性有关而与牙周炎的严重程度可能无直接相关。     

纤维结合蛋白及细菌内毒素对人牙龈成纤维细…

采用体外组织培养的方法，通过相差显微镜、光学显微镜的观察，Ｈ－胸腺嘧啶核苷细胞掺入试验，以及细胞电泳技术，观察分析：１、纤维结合蛋白（Ｆｎ）以及细菌内毒素（Ｂａｃｔｅｒｉａｌ ＬＰＳ）对人牙龈成纤维细胞（ＨＧＦ）形态结构、功能状态和影响；２、纤维结合蛋白（Ｆｎ）在对抗细菌内毒素脂多糖（ＬＰＳ）对ＨＧＦ毒性的作用；３、ＨＧＦ的电泳行为，以及Ｆｎ，ＬＰＳ对ＨＧＦ电泳行为的影响。实验结论：１、Ｆｎ促进Ｈ     

牙龈卟啉单胞菌Gingipains及抑制剂研究进展

牙龈卟啉单胞菌与成人牙周炎的起始和进展密切相关,其分泌的Gingipains(牙龈素,亦称半胱氨酸蛋白酶)是主要的毒性因子之一。本文就近年来对Gingipains及其抑制剂的研究进展进行综述。     

牙龈卟啉菌蛋白酶基因rgpA与rgpB蛋白酶区的克隆和表达

目的克隆牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)rgpA、rgpB蛋白酶区,构建rgpA、rgpB蛋白酶区原核表达系统。方法采用聚合酶链式反应(PCR)从PgATCC33277菌株中扩增rgpA、rgpB蛋白酶区,T-A克隆后测定核苷酸序列,构建pET42a的rgpA/rgpB蛋白酶区表达载体,在E.coli BL21DE3宿主菌中用不同浓度的IPTG诱导其表达。结果所克隆的PgATCC33277菌株rgpA、rgpB基因蛋白酶区的核苷酸序列与报道的相应核苷酸序列同源性分别为98.9%、99.0%,氨基酸序列同源性分别高达99.2%、99.1%。pET42a-rgpA/rgpB-E.coli BL21DE3系统的蛋白表达量为细菌总蛋白的60%左右。结论本研究成功地构建PgrgpA、rgpB蛋白酶区高效表达系统,为测定RgpA、RgpB免疫原性及作用提供前提。     

牙龈素在牙龈卟啉单胞菌生长及牙周致病过程中的作用

牙龈素是慢性牙周炎的重要致病菌---牙龈卟啉单胞菌的最重要毒力因子。作为一组半胱氨酸蛋白酶,牙龈素能结合并降解多种宿主蛋白质。本文总结了目前对牙龈素的结构和功能的研究,主要从牙龈素对牙龈卟啉单胞菌生长代谢、对牙周组织的致病作用及宿主免疫的影响三个方面阐述。     

牙龈组织中硫酸皮肤素蛋白多糖的免疫组织化学研究

应用单克隆抗体２－Ｂ－６，对正常和炎症牙龈组织中硫酸皮肤素蛋白多糖进行免疫组化研究。结果表明硫酸皮肤素广泛存在于正常牙龈结缔组织，尤其是靠近上皮外处结缔组织内呈强阳性反应；牙龈炎时染色性降低。牙龈上皮内未见阳性反应。     

牙龈素促进牙龈卟啉单胞菌免疫逃逸的机制

有关牙周炎病因的关键致病菌假说近年来引起学者们的关注,该假说认为牙龈卟啉单胞菌在牙周炎的发病过程中发挥着重要作用,是牙周炎的关键致病菌.牙龈素是牙龈卟啉单胞菌产生的重要致病因子之一,它可以协助牙龈卟啉单胞菌逃逸巨噬细胞、中性粒细胞及补体系统的杀伤作用.本文就牙龈素促进牙龈卟啉单胞菌免疫逃逸的机制相关研究进展作一综述,对这一机制的深入了解有助于进一步理解牙龈素的致病机制,同时也可以为牙周炎的防治探索新的途径.     

牙龈卟啉单胞菌菌毛素基因表达调控

牙龈卟啉单胞菌是成人牙用炎的主要致病茵，其表面的丝状菌毛是重要的致病因子，在牙龈卟啉单胞菌定植和侵入牙用组织过程中起重要作用。本文就有关牙龈卟啉单胞菌菌毛素基因表达调控的研究进展状况作简要回顾。     

有效维护牙龈健康——高露洁全效牙膏

高露洁全效不仅仅是一支牙膏，它还可以有效维护牙龈健康，并可提供长达12小时应对多种口腔问题的全效保护。 有研究显示，引起牙龈组织炎症的主要刺激因素，是牙齿及牙龈界面上生物膜（牙菌斑）上的细菌。高露洁全效特有的三氯生成分，是共聚体专利配方。三氯生能够阻止牙菌斑的形成，同时是一种广谱抗菌剂。     

牙龈卟啉单胞菌红血球凝集素B蛋白纯化和鉴定

目的:牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)是牙周炎的重要病原菌。该菌膜表面蛋白-红血球凝集素参与细菌黏附和入侵宿主细胞的过程。本研究目的是纯化和鉴定Pg381膜表面红血球凝集素-B(hemagglutinin B,HagB),为能进一步研究该蛋白的特性做准备。方法:HagB基因构建在载体pQE31上,用E.coliM15蛋白表达株通过Ni-NTA亲和柱来表达,表达带有Histag的目的蛋白,做蛋白测序鉴定,制备并筛选相应的抗体。结果:本实验通过分子生物学技术,纯化出目的蛋白HagB,经过抗原免疫,得到相应的单克隆抗体。结论:本实验中的E.coliM15[pREP4]pQE-31-TX1大肠杆菌表达系统能有效地表达HagB蛋白。     

牙龈收缩线的实验研究

目的 旨在研制一种有效的牙龈收缩线，探索其浸泡液（即牙龈收缩剂）的最佳配方。方法选用杂种上狗４只，不分雌雄，从中选用牙龈组织健康的牙５６颗作为实验对象。通过使用牙龈收缩线进行牙龈收缩处理、经肉眼观察、测量读数显微镜的测量，对配方的配选、定量研究进行探索。结果 牙龈收缩剂的最佳配方为：０．１％盐酸羟间唑啉，２６％Ａｌ２（ＳＯ４）３，８％ＡｌＣｌ３，１４％Ａｌｕｍ。结论 本实验配方具有良好的牙龈收缩效     

牙龈卟啉单胞菌侵入对血管内皮细胞E选择素表达的影响

目的：观察牙龈卟啉单胞菌（P.g）ATCC33277和W83侵入对血管内皮细胞E选择素转录和翻译的影响。方法：建立体外P.g侵入血管内皮细胞模型,反转录-聚合酶链式反应检测E选择素基因表达;蛋白质印迹技术检测E选择素膜蛋白表达的变化;采用SAS8.12软件包,多组均数之间的比较采用重复测量资料的方差分析,P〈0.05为差异有统计学意义。结果：P.gATCC33277和W83侵入后4h即上调E选择素基因表达（P〈0.05）,8h显著回落（P〈0.05）,24h恢复至基线水平;E选择素基因在P.gATCC33277/W83侵入后4h、8h、24h和TNFα处理0.5h后的相对表达水平分别为对照组的294.0%/326.4%、179.3%/224.6%、126.7%/128.3%和365.5%。P.g侵入后4h即诱导E选择素蛋白表达（P〈0.05）,8h达高峰（P〈0.05）,24h有持续高表达（P〈0.05）;E选择素蛋白相对表达水平分别为对照组的295.4%/343.6%、386.3%/394.3%、238.7%/296.4%和413.8%。P.gW83诱导血管内皮细胞E选择素表达的能力强于ATCC33277（P〈0.05）。结论：P.g侵入可造成血管内皮细胞E选择素高表达的动脉粥样硬化样改变,在动脉粥样硬化炎症病理反应中有重要意义。     

牙龈卟啉菌牙龈蛋白酶K基因真核表达载体的构建和体外表达

目的：构建牙龈卟啉菌牙龈蛋白酶K基因的真核表达载体，并检测其在体外真核细胞中的表达情况。方法：利用基因重组技术构建牙龈卟啉菌牙龈蛋白酶K基因重组质粒pcDNA3.1( )-KGPcd，然后通过脂质体将pcDNA3.1( )-KGPcd瞬时转染COS7细胞，以RT-PcR和间接免疫荧光法检测重组质粒的转录水平和蛋白表达情况。结果：成功构建了牙龈蛋白酶K真核表达载体；转染的COS7细胞中可检测到目的蛋白的转录和表达。结论：成功构建了pcDNA3.1( )－KGPcd真核表达载体并在哺乳动物细胞中能够正确转录和表达，为下一步作为基因疫苗免疫动物提供了依据。     

牙龈病损的临床和组织病理学研究（2485例龈活检资料分析）

作者对２４８５例牙龈活检资料进行了回顾性分析，探讨了现有病检资料中牙龈病的种类，并重新观察了牙龈病损的病理实质。研究表明，２４８５例龈检中有牙龈病损６９种，包括：龈固有疾病１４种，肿瘤和瘤样病变２９种，皮肤病和粘膜病在牙龈的表现５种，牙周病的龈表现２种，系统病在牙龈的表现和其它１９种。其中５ｌ种牙龈病文献中已有报告，１８种是文献中未见报告的。本研究根据临床表现将龈病损分为７大类。     

牙龈卟啉单胞菌第Ⅸ型分泌系统的研究进展

牙龈卟啉单胞菌第Ⅸ型分泌系统(T9SS)是新近发现的一种新型蛋白分泌系统,又被称为Por分泌系统(PorSS).与以往发现的8个蛋白分泌系统不同,T9SS系统是一个仅存在于拟杆菌中的多蛋白复合体,其分泌的蛋白质N端均具有Sec依赖的Ⅰ型信号肽,C端均含有保守结构域(CTD).牙龈卟啉单胞菌T9SS包括了内膜、外膜、细胞质以及细胞周质等重要组成部分的蛋白质,至少包括34种包含CTD的蛋白,这些蛋白参与调控的相关毒力因子包括牙龈素、菌毛、脂多糖、HBP35、CPG70蛋白和蛋白质-肽基精氨酸脱亚氨酶等.这些包含CTD的毒力蛋白通过T9SS转定位在细胞外膜上,然后释放至胞外,从而对牙周组织起破坏作用.本文对牙龈卟啉单胞菌T9SS的研究进展作一综述,以便于深入理解该菌的毒力机制.     

血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌生长曲线及细胞内钙离子浓度的影响

目的：研究血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis P．g）生长曲线的影响。探讨血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌细胞内钙离子浓度的影响。方法：通过低温高速离心，超声破碎等方法提取血链素，使血链素作用P．g，于37℃厌氧培养：采用微量液体对倍稀释法测定血链素对P．g的最小抑菌浓度（MIC）。选用不同浓度的血链素作用P．g，分别于0、4、8、12、16、20、24、48h时测定各组细菌悬液在590nm波长处的A值，并绘制生长曲线。用Fluo-3／AM负载P．g细胞内钙离子，在激光共聚焦显微镜下观察Ca抖荧光强度变化。结果：血链素对P．g有显著抑制作用，其MIC为0．0625g／L。血链素作用后，P．g的生长曲线在8～16h发生显著改变，对数生长期被延迟了8h。血链素作用后，P．g细胞内钙离子浓度显著降低，与对照组相比差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论：血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌有明显的抑制作用，在本实验范围内，随着血链素浓度的升高其抑制作用逐渐增强。血链球菌细菌素可导致牙龈卟啉单胞菌细胞膜钙离子通透性增强。     

牙龈卟啉单胞菌第Ⅸ型分泌系统的研究进展

牙龈卟啉单胞菌第Ⅸ型分泌系统（T9SS）是新近发现的一种新型蛋白分泌系统,又被称为Por分泌系统（PorSS）。与以往发现的8个蛋白分泌系统不同,T9SS系统是一个仅存在于拟杆菌中的多蛋白复合体,其分泌的蛋白质N端均具有Sec依赖的Ⅰ型信号肽,C端均含有保守结构域（CTD）。牙龈卟啉单胞菌T9SS包括了内膜、外膜、细胞质以及细胞周质等重要组成部分的蛋白质,至少包括34种包含CTD的蛋白,这些蛋白参与调控的相关毒力因子包括牙龈素、菌毛、脂多糖、HBP35、CPG70蛋白和蛋白质-肽基精氨酸脱亚氨酶等。这些包含CTD的毒力蛋白通过T9SS转定位在细胞外膜上,然后释放至胞外,从而对牙周组织起破坏作用。本文对牙龈卟啉单胞菌T9SS的研究进展作一综述,以便于深入理解该菌的毒力机制。     

牙龈卟啉菌蛋白酶的结构和作用

牙龈蛋白酶是牙龈卟啉菌的主要致病因子，因其对宿主蛋白的广泛活性受到了普遍关注本文就牙龈蛋白酶的生化特征、基因结构、蛋白分子结构与作用的研究现状作一综述。     

牙龈卟啉菌膜泡中牙龈毒素的纯化和毒理学研究

牙龈毒素是牙龈卟啉菌（ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ，Ｐｇ）所独有的多功能蛋白毒性酶。本实验采用高效液相色谱法提取了ＰｇＷ５０膜泡中的牙龈毒素并用ＭＴＴ法观察了其对Ｌ９２９细胞的毒理学。结果显示，牙龈毒素属半胱氨酸类蛋白酶，天然状态下分子量为２７８００，有一个１０９００的亚基；二硫基苏糖醇（ＤＴＴ）、Ｃａ２＋对其有增强活性作用，含硫基团蛋白酶抑制剂（ＴＬＣＫ）、乙二胺四乙酸（ＥＤ－ＴＡ）对其有抑制作用，最适ｐＨ值在７．５。纯化的牙龈毒素在１０μｇ／ｍｌ时，对Ｌ９２９细胞即有明显的抑制作用。本研究提示，膜泡所携带的毒力成分对于增强和扩展细菌对宿主组织的破坏有非常重要的作用。