衍生化LC-MS/MS测定大鼠血浆中新型抗流感药物帕拉米韦及其在药代动力学研究中的应用

目的：建立灵敏、可靠的衍生化LC-MS/MS新方法测定大鼠血浆中帕拉米韦的浓度。方法：血浆样品前处理包括蛋白沉淀和用盐酸（10mol/L）-甲醇（10：90,体积比）为衍生化试剂的衍生化反应,测定采用LC-MS/MS。通过电喷雾电离源以选择反应监测（SRM）方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z343→284（帕拉米韦衍生物）和m/z299→152（内标Ro64-0802衍生物）。色谱分离采用ZorbaxRX-C8柱（2.1mm×150mm,5μm）,以乙腈-水-甲酸（30：70：0.1,体积比,0.2ml/min）为流动相。结果：测定帕拉米韦的线性范围为10～10000ng/ml,相关系数r2为0.9940,定量下限为10ng/ml,批内和批间RSD%分别在5.0%和7.1%以内,准确度控制在89.9%～106.1%。结论：本方法通过衍生化反应,使帕拉米韦保留时间增加,基质抑制降低并使检测灵敏度提高。该方法成功应用于帕拉米韦非临床和临床研究中。     

LC-MS/MS法检测小鼠静注水溶性紫杉醇偶合物后血浆中的药物浓度

目的建立灵敏、特异的LC-MS/MS方法测定小鼠血浆中紫杉醇浓度,并应用于小鼠静注水溶性多聚（L-谷氨酸）-丙氨酸-紫杉醇偶合物的药物动力学研究。方法用甲基叔丁基醚提取小鼠血浆样品,以多西紫杉醇为内标,在BetaBasicC18色谱柱上以流动相乙腈-水-甲酸（65∶35∶0.1,体积比）分离,流速为0.2ml/min;采用液相色谱-质谱-质谱联用仪,通过电喷雾离子化电离源,以选择反应监测方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z854.2→286.1（紫杉醇）和m/z808.3→527.2（多西紫杉醇）。结果测定紫杉醇的线性范围为0.5～1000ng/ml,相关系数r为0.9995,定量下限为0.5ng/ml,日内日间精密度分别小于11.52%和13.11%,准确度控制在87.05%～100.87%,提取回收率为85.04%～93.63%。结论该法快速、灵敏度高、专一性好,成功应用于小鼠静注10mg/kg水溶性多聚（L-谷氨酸）-丙氨酸-紫杉醇偶合物的药物动力学研究。     

高效液相色谱串联质谱法测定人血浆中西酞普兰含量

目的探讨应用高效液相色谱串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定血浆中西酞普兰药物浓度的方法。方法设立色谱柱为Agilent-ZORBAX-C8柱;流动相：乙腈-0.1%甲酸水溶液（60：40）;流速：0.5 ml/min;柱温：20℃;质谱条件为电喷雾电离源（ESI）,以多反应监测（MRM）方式进行检测,用于定量分析的反应离子为m/z 325.1 262.1（西酞普兰）和m/z256.2 67.1（苯海拉明,内标）。结果西酞普兰在0.5～100 ng/ml范围内线性关系良好（r=0.9979）;西酞普兰的日内、日间精密度RSD均〈10%。结论该方法分析速度快,专属性强,灵敏度高,可作为西酞普兰的血浆药物浓度检测方法。     

HPLC-MS/MS法定量研究比格犬口服氨氯地平后的血浆药代动力学

目的建立比格犬血浆中氨氯地平的HPLC-MS/MS定量测定方法。方法 HPLC分离采用Zorbax SB-C18柱,流动相为乙腈-水（42∶58,0.1%甲酸,4 mmol·L-1醋酸铵）,流速为0.2 ml·min-1;质谱检测采用电喷雾（ESI）离子源,正离子多反应监测（MRM）方式检测。血浆样品经甲醇-乙腈混合液沉淀蛋白、高速离心后进样分析,检测反应为m/z409.4-238.1（氨氯地平）,m/z256.2-167.0（苯海拉明,内标）。结果氨氯地平在比格犬血浆中定量范围为0.5～500 ng·ml-1,日内和日间精密度≤9.04%、回收率高且血浆样品稳定性好。结论本方法特异、快速、准确、可靠,可满足氨氯地平比格犬血浆动力学研究需要。     

LC-MS法检测大鼠血浆中酒石酸美托洛尔的方法学研究

目的：建立准确、灵敏、可靠的LC-MS法检测大鼠血浆中酒石酸美托洛尔的浓度。方法：血浆样品用乙酸乙酯液-液萃取,内标选用盐酸普萘洛尔,液相色谱柱为ThermoODS-C18（5.0μm,100mm×2.1mm）,流动相为含0.1%甲酸的乙腈：甲醇：水（20：20：60,体积比）,流速为0.2ml/min;仪器选用Agilent公司1100LC/MSDSL型液相色谱-质谱联用仪,采用电喷雾离子化电离源（ESI）,选择性离子监测（SIM）方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z267→268（美托洛尔）和m/z259→260（普萘洛尔）。结果：在本实验条件下,美托洛尔与内标盐酸普萘洛尔分离良好,保留时间分别为1.79和4.01min,0.1～50ng/ml范围内线性关系良好（r2=0.99411）,提取回收率均大于80%,日内日间精密度均小于15%（n=5）。结论：该方法快速、准确、灵敏度高,专属性好,可用于酒石酸美托洛尔在大鼠体内药物代谢动力学的研究。     

HPLC-MS/MS法快速测定人血浆中氟哌噻吨浓度及生物等效性研究

目的建立测定人血浆中氟哌噻吨浓度的高效液相串联质谱法（HPLC-MS/MS）,用于氟哌噻吨美利曲辛片的生物等效性研究。方法以Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18（4.6mm×150mm,5μm）为色谱柱,流动相为乙腈（含1%甲酸）：0.02mol/L甲酸铵水溶液（80：20,V：V）,流速：0.8ml/min;柱温：40℃,以醋酸乙酯：二氯甲烷（4：1,V：V）为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择性反应监测（SRM）对氟哌噻吨（m/z435.2→305.1）和氯普噻吨（m/z316.2→231.1）进行测定。结果氟哌噻吨的高（1μg/L）、中（0.5μg/L）、低（0.05μg/L）3个浓度的平均回收率分别为101.01%、96.19%和106.63%,日内（n=5）、日间（n=3）RSD均小于15%;分析方法的最低定量限为0.025μg/L。线性范围为：0.025～2.5μg/L,回归方程为：F=0.6625ρ＋0.0049,r=0.997（n=7）,权重为1/ρ2。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血浓监测和药动学研究。     

LC-MS/MS法测定血浆中呋塞米浓度的研究

目的建立UFLC-MS/MS测定血浆中呋塞米浓度的方法。方法通过电喷雾离子化,采用多反应检测方式进行负离子检测,用于定量分析的检测离子为m/z 328.8→284.6。采用Shim-pack XR-ODS(3.0 mm×75 mm,2.0μm)柱分离,以乙腈-水-甲酸(60∶40∶0.1)为流动相,流速为0.40 ml.min-1。结果在3 min内完成呋塞米定量分析。线性范围为2.5～1000 ng.ml-1,最低定量限为2.5 ng.ml-1;日内、日间测定的相对标准偏差分别小于2.13%、2.68%。结论本方法重复性好,灵敏度高、分析速度快、操作简单,可作为血浆样品中呋塞米浓度的测定方法,适用于人体呋塞米血药浓度监测。     

HPLC-MS/MS法定量研究比格犬口服替米沙坦后的血浆药代动力学

目的建立比格犬血浆中替米沙坦的HPLC-MS/MS定量测定方法。方法液相色谱分离采用Zorbax SB-C18色谱柱,流动相为乙腈-4 mmol·L-1醋酸铵水（40∶60,0.1%甲酸）,流速为0.2 ml·min-1;质谱检测采用电喷雾（ESI）离子源,正离子多反应监测（MRM）方式检测。血浆样品经乙腈沉淀蛋白、高速离心后进样分析,检测反应为m/z 515.2-276.3（替米沙坦）,m/z 256.2-167.0（苯海拉明,内标）。结果替米沙坦在比格犬血浆中定量范围为0.5~2000 ng·ml-1,日内和日间精密度≤9.13%、回收率满足血浆测定要求,且血浆样品稳定性好。结论本方法特异、快速、准确、可靠,可满足替米沙坦比格犬血浆动力学研究需要。     

HPLC-MS／MS联用技术测定人血浆中9-硝基喜树碱的含量

目的建立HPLC-MS—MS法测定人血浆中9-硝基喜树碱浓度。方法以喜树碱为内标，流动相为乙腈-2％甲酸水溶液（55：45，V／V），色谱柱为Agilent C18（3．5μm，2．1mm×150mm），电喷雾离子源（ESI），正离子多反应监测（MRM）方式进行检测。用于定量分析的离子对分别为[M＋H]^＋m／z 394．2→m/z 350．0（9-硝基喜树碱），[M＋H]^＋m／z 349.1→m/z 305．3（喜树碱）。结果9-硝基喜树碱线性范围1～300μg·L^-1内呈良好线性关系（r=0．9990），定量下限为1μg·L^-1。日内、日间精密度的RSD均〈15％，平均回收率为76.02％，RSD为5．7％。结论本方法专属性强，生物样品处理方便，灵敏度高，适用于9-硝基喜树碱临床药动学研究。     

亲水色谱-质谱联用（HILIC-MS）定量测定大鼠血浆中美金刚浓度及药代动力学研究

目的建立灵敏、可靠的亲水色谱-质谱联用（HILIC-MS）方法测定大鼠血浆中美金刚的浓度。方法血浆样品前处理采用蛋白沉淀,用HILIC-MS法测定。通过电喷雾电离源以选择离子监测（SIM）方式进行正离子检测,用于定量分析的离子分别为m/z 180（美金刚）和m/z 285（内标Ro 64-0802）。色谱分离采用Amide-80柱（100 mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈-水-甲酸（70∶30∶0.1,v/v/v,0.35 ml/min）为流动相。结果美金刚的线性范围为2～500 ng/ml,相关系数r2为0.99882,定量下限为2 ng/ml,批内、批间精密度在3.9%和5.6%以内,准确度控制在84.9%～111.2%。结论本方法通过HILIC技术,使美金刚保留时间增加,基质抑制降低并使检测灵敏度提高。该方法成功应用于大鼠血浆测定研究中。     

HPLC法测定银花清咽含片中绿原酸木犀草苷连翘苷含量

目的建立HPLC法测定银花清咽含片中绿原酸、木犀草苷和连翘苷含量的方法。方法 Venusil MP C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.4%磷酸(10∶90)为流动相,流速:1 ml.min-1,检测波长327 nm,柱温:25℃,检测绿原酸;采用Agilent ZORBAX SB-phenyl柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈为流动相A,0.5%冰醋酸为流动相B梯度洗脱,梯度程序为0min(A:10%,B:90%)→15 min(A:18%,B:82%)→30 min(A:18%,B:82%)→40 min(A:30%,B:70%)→45 min(A:40%,B:60%),流速:1 ml.min-1,检测波长:350 nm,柱温:30℃,检测木犀草苷;采用乙腈-水(24∶76)为流动相,流速:1 ml.min-1,检测波长:277 nm,柱温:30℃,检测连翘苷。结果绿原酸、木犀草苷、连翘苷分别在0.3～2.4、0.012～0.096、0.26～2.08μg范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.78%、99.90%、100.09%,RSD分别为0.54%、0.46%、0.21%(n=6)。结论该方法重复性好、准确、专属性强,可用于银花清咽片中绿原酸、木犀草苷、连翘苷的含量测定,为较全面地控制银花清咽片的质量提供简便可靠的方法。     

HPLC-MS / MS 法测定 Beagle 犬血浆中硝苯地平的含量简

目的建立HPLC—MS／MS法测定Beagle犬血浆中硝苯地平的方法。方法以尼莫地平为内标,血浆样品经乙酸乙酯提取,采用ZorbaxExrend,C-18柱（2．1mm×100mm,3．5μlm）进行分离,乙腈-10mmolNH。CH3COOH缓冲液（印：40）为流动相,流速为0．3m1·min-1,柱温为40℃。质谱采用电喷雾离子化源,正离子检测,扫描方式采用多反应监测（MRM）,定量离子分别为硝苯地平m／z347．2→日15．2．内标尼莫地平m／z419．2→日43．3。结果硝苯地平在0．2～200ng-ml。浓度范围内线性关系良好,最低定量限为0．2ng·ml-1。结论本方法简便、准确、专属『生好,适用于硝苯地平在Beagle犬体内血药浓度检测及药代动力学研究。     

液质联用法测定龙胆水煎剂中三种环烯醚萜的含量

目的利用液质联用（LC／MS／MS）方法测定龙胆水煎剂中环烯醚萜类化合物龙胆苦苷、獐牙菜苦苷和马钱苷的含量。方法色谱柱为J’Sphere ODS-H80（150mm×2．0mm，4μm）；流动相为甲醇-10mmol·L^-1醋酸铵溶液（30：70）；流速为200μl／min。样品经电喷雾离子源（ESI）正离子化后，通过三级四极杆串联质谱仪，采用多反应离子监测方式测定样品中龙胆苦苷（m／z 357．2-195．3）、獐牙菜苦苷（m／z 392．1→195．2）和马钱苷（m／z 408．4→229．1）浓度。结果在该分析条件下，3种化合物能够同时进行检测。龙胆苦苷浓度在200～5000ng·ml^-1范围内线性关系良好，回归方程为Y=1．26×10^3X＋2．27×10^3，r=0．9983；獐牙菜苦苷浓度在20-500ng·ml^-1范围内线性关系良好，回归方程为Y=360X＋144，r=0．9991；马钱苷浓度在20-500ng·ml^-1范围内线性关系良好，回归方程为Y=782X＋42．6，r=0．9994。对照品峰面积精密度RSD分别为龙胆苦苷2．52％，獐牙菜苦苷2．77％和马钱苷2．89％；平均加样回收率分别为龙胆苦苷98．2％，獐牙菜苦苷99．1％和马钱苷99．7％。结论该方法灵敏、准确、特异性强。     

丹酚酸B药动学动物实验研究

 目的 采用液相色谱-串联质谱法进行丹酚酸B药动学动物实验研究。方法 比格犬静脉滴注丹酚酸B后不同时间经前腿静脉采血。血浆样品经液-液萃取后,以乙腈-水（含0.5%甲酸）：70-30（V/V）作为流动相,采用Symmetry C18（2.0 mm×50 mm,3 μm）柱分离,通过ESI源电离在负离子方式下进行检测,以选择反应监测（SRM）方式。用于定量分析的离子分别为 m/z 717.2→m/z 519.2（丹酚酸B）和 m/z 364.0→m/z 189.0(吲达帕胺,内标)。结果 在该测定条件下丹酚酸B和内标物的保留时间分别为1.03、1.24 min。丹酚酸B的线性范围为10.24～1.200×10⁴ ng/ml;定量下限为10.24 ng/ml,批内、批间精密度（RSD）均小于15%,准确度（RE）在-2.8%～1.9%之间。结论 所建立的LC-MS/MS法专属性强、灵敏度高,已成功用于丹酚酸B血药浓度测定和药动学研究。血中丹酚酸B半衰期较短,体内代谢呈一级线性动力学,符合三室模型。     

高效液相色谱法测定人血浆中万古霉素和去甲万古霉素的浓度

目的 建立人血浆中万古霉素和去甲万古霉素浓度高效液相色谱测定方法.方法 两者互为内标,采用Di-Amonsil C18(2)(150 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相:0.05 moL/L NaH2PO4(pH=3.2)-甲醇(87:13),流速:1.5 ml/min,柱温:35℃,检测波长:236 nm....     

多聚（L-谷氨酸）-丙氨酸-紫杉醇偶合物的稳定性研究

目的建立测定紫杉醇含量的液相色谱-串联质谱联用方法,以此考察多聚（L-谷氨酸）-丙氨酸-紫杉醇偶合物在各种缓冲液和血浆中的稳定性。方法色谱条件：色谱柱：BetaBasicC18column（150mm×2.1mm,5μm）,流动相：乙腈-水-甲酸（65：35：0.1）,流速：0.2ml/min;质谱条件：电喷雾离子源,选择离子反应监测,正离子检测模式,前体药物-产物离子转换选择离子反应监测得出紫杉醇的质荷比m/z为854.2→286.1,内标多西紫杉醇的质荷比m/z为808.3→527.2。结果该检测方法的最低定量下限为0.5ng/ml,线性范围0.5～5000ng/ml,r=0.9980;多聚（L-谷氨酸）-丙氨酸-紫杉醇偶合物在醋酸盐缓冲液中的稳定性高于在磷酸盐中的稳定性,多聚（L-谷氨酸）-丙氨酸-紫杉醇偶合物在血浆中释放出紫杉醇的量明显高于其在醋酸盐和磷酸盐缓冲液中释放出紫杉醇的量。结论该方法特异性强、灵敏度高,成功应用于紫杉醇含量测定及多聚（L-谷氨酸）-丙氨酸-紫杉醇偶合物稳定性评价。