山茱萸不同溶剂萃取部位对D-半乳糖致衰人胚肺细胞影响的实验研究

目的：研究山茱萸不同溶剂萃取部位对D-半乳糖致衰人胚肺细胞的影响。方法：采用MTT法对比不同浓度不同作用时间D-半乳糖对人胚肺细胞的致衰作用。选取合适的D-半乳糖浓度进行造模,用MTT法观察山茱萸不同活性部位对D-半乳糖致衰人胚肺细胞的影响。选取对D-半乳糖致衰人胚肺细胞有保护作用的山茱萸活性部位,进行细胞衰老β-半乳糖苷酶染色实验。结果：4g／L的D-半乳糖在作用72h时,Sg／L的D-半乳糖在作用48h、72h时造模具有统计学意义。维生素E和山茱萸制品总提液、生品总提液乙酸乙酯萃取部位、总提液（生品、制品）正丁醇萃取部位、生品总提液水部位、水煎液去多糖（生、制）、水煎液去多糖（生、制）二氯甲烷萃取部位、水煎去多糖（生、制）正丁醇萃取部位、水煎液去多糖（生、制）水部位对D-半乳糖损伤的人胚肺细胞具有保护作用。细胞衰老β-半乳糖苷酶染色实验结果表明,所选山茱萸活性部位可减少D-半乳糖致衰细胞的数量。结论：山茱萸几种溶剂萃取部位可保护D-半乳糖造模损伤的人胚肺细胞。     

山茱萸生品及制品二氯甲烷萃取部位对D-半乳糖致衰小鼠骨髓细胞的影响

目的研究山茱萸生、制品二氯甲烷萃取部位对D-半乳糖致衰小鼠骨髓细胞的影响。方法单细胞电泳观察D-半乳糖致衰小鼠骨髓细胞DNA损伤情况,RT-PCR法检测小鼠骨髓细胞p53基因的表达情况。结果D-半乳糖致衰模型组小鼠骨髓细胞DNA拖尾率高于正常对照组(P0.05),且Ⅲ、Ⅳ级(中重度)损伤细胞数较多;山茱萸生品及制品二氯甲烷萃取部位组小鼠骨髓细胞DNA的拖尾率均低于D-半乳糖致衰模型组(P0.05)。D-半乳糖致衰模型组小鼠骨髓细胞p53基因的表达高于正常对照组、阳性药组及制品组。结论D-半乳糖致衰小鼠骨髓细胞DNA有损伤,山茱萸生、制品二氯甲烷萃取部位对D-半乳糖致衰小鼠骨髓细胞有保护作用;D-半乳糖致衰小鼠骨髓p53基因表达上调,山茱萸制品二氯甲烷萃取部位能显著下调D-半乳糖致衰小鼠骨髓p53基因的表达。     

山茱萸制品石油醚萃取部位对几种模型小鼠影响的研究

目的:探讨山茱萸制品石油醚萃取部位对几种模型小鼠的影响。方法:取ICR小鼠,复制D-半乳糖致衰模型、四氯化碳急性肝损伤模型、肾阴虚模型,给小鼠灌服药液,观察山茱萸制品石油醚萃取部位对几种模型小鼠的影响,结果:山茱萸制品石油醚萃取部位能影响D-半乳糖致衰模型小鼠血清SOD、NO水平;能降低四氯化碳急性肝损伤模型小鼠ALT、AST值;增加肾阴虚模型小鼠负重游泳及耐缺氧时间。结论:山茱萸制品石油醚萃取部位对几种模型小鼠均有影响,表现出多方面的保护作用。山茱萸石油醚萃取部位可能是山茱萸的主要活性部位。     

山茱萸提取部位对D-半乳糖致衰模型小鼠骨髓细胞脱氧核糖核酸的影响

目的 探讨山茱萸几种提取部位对D-半乳糖致衰模型小鼠骨髓细胞DNA的影响.方法 取ICR小鼠,复制D-半乳糖致衰模型,给小鼠灌服药液,通过单细胞电泳和流式细胞仪检测,观察D-半乳糖致衰模型小鼠骨髓细胞DNA的变化及山茱萸几种提取部位的保护作用.结果 D-半乳糖对小鼠骨髓细胞脱氧核糖核酸(DNA)结构表现出一定的的影响,山茱萸几种提取部位尤其是石油醚萃取部位表现出保护作用.结论 山茱萸提取部位对D-半乳糖致衰模型小鼠DNA结构有不同程度的影响.     

山茱萸水提液对人胚肺成纤维细胞(MRC-5)的影响机制初探

目的探讨山茱萸水提液体外对D-半乳糖致衰人胚肺成纤维细胞(MRC-5)的影响作用及机制。方法 MTT法观察山茱萸水提液对D-半乳糖致衰MRC-5细胞生长状况的影响;Western blot法观察山茱萸水提液对D-半乳糖致衰MRC-5细胞抗衰老通路P16,P21的影响;Telomere PNA Kit/FITC for Flow Cytometry法观察山茱萸水提液对MRC-5细胞端粒长度的影响。结果 MTT检测山茱萸水提液对D-半乳糖致衰MRC-5细胞有促进增殖作用;Western blot法检测,与对照组比较山茱萸水提液能够使D-半乳糖致衰MRC-5细胞P16、P21表达降低;与对照组比较山茱萸水提液能够延缓端粒缩短。结论山茱萸水提液有抗衰老作用。     

山茱萸二氯甲烷部位对D-半乳糖致衰老小鼠脑组织中NO、NOS及p53、pRB蛋白表达的影响

目的:探讨制山茱萸二氯甲烷部位对D-半乳糖致衰老小鼠脑组织中NO、NOS及p53、pRB蛋白表达的影响。方法:采用D-半乳糖建立小鼠衰老模型,实验结束后观察小鼠一般状态;采用化学比色法检测脑组织中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)含量;并用Western blot检测脑组织中p53、pRB蛋白表达水平。结果:制山茱萸二氯甲烷部位高、低剂量组可改善衰老小鼠一般状态,降低NO和NOS含量。结论:制山茱萸二氯甲烷部位对D-半乳糖致衰老小鼠脑损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与降低脑组织中NO和NOS含量,保护神经元有关。     

山茱萸不同提取部位对几种化学致损肝、肾细胞影响的研究

目的：研究山茱萸生品、酒蒸品水煎液、总提液不同提取部位对几种化学致损肝、肾细胞的保护作用。方法：选择几种化学致损肝、肾细胞损伤模型,通过MTT法,观察山茱萸生品、酒蒸品水煎液和总提液不同提取部位对细胞的保护作用。结果：山茱萸不同提取部位对几种化学致损肝、肾细胞具有一定的保护作用,且生、制品作用有差异。结论：山茱萸生品、制品几种提取部位对肝、肾细胞具有直接保护作用。     

山茱萸二氯甲烷溶剂萃取部位对两种细胞影响的研究

目的研究山茱萸二氯甲烷部位对巨噬细胞及人胚肺细胞的影响。方法采用MTT法对比二氯甲烷部位给药组和空白对照组之间OD值的差异,观察药物对细胞的影响。结果巨噬细胞给药组与对照组OD值有显著性差异,人胚肺细胞给药组与模型组之间有显著性差异。结论山茱萸二氯甲烷部位可增强巨噬细胞和人胚肺细胞免疫作用,保护H2O2造模损伤的人胚肺细胞。     

制山茱萸活性部位对D-半乳糖致小鼠肝损伤的保护作用

目的:研究制山茱萸活性部位对D-半乳糖致小鼠肝损伤的保护作用。方法:采用D-半乳糖造成小鼠急性肝损伤模型,以血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及肝脏丙二醛(MDA)含量作为考察指标,观察制山茱萸活性部位(醇沉多糖部位、正丁醇萃取部位、石油醚萃取部位)对小鼠急性肝损伤的保护作用。另取肝组织进行常规HE染色病理组织学切片,结合透射电镜观察肝细胞的凋亡情况。结果:生化分析结果表明,与正常对照组比较,模型组小鼠肝匀浆SOD活性显著降低,MDA含量及ALT、AST活性活性均显著升高(P<0.05);与模型组比较,三种制山茱萸活性部位干预组小鼠肝脏ALT、AST活性及MDA含量均显著降低,肝脏SOD活性显著升高(P<0.05)。肝脏病理形态学显示,模型组肝脏出现明显坏死和炎症,而制山茱萸活性部位干预组变性坏死明显减少,炎症细胞数减少,肝组织的损伤修复程度较好。电镜结果显示,模型组肝细胞损伤较为明显,小鼠肝脏细胞出现明显凋亡特征,而制山茱萸活性部位用药组未见凋亡。结论:制山茱萸多糖、正丁醇萃取部位、石油醚萃取部位均表现出保肝作用,提示三者均存在保肝活性成分,是制山茱萸保肝的物质基础所在,其保肝机制可能与抑制氧化应激及抗炎症反应有关。     

山茱萸炮制增效活性部位对老年小鼠骨髓细胞MN影响的研究

目的:探讨山茱萸炮制增效活性部位对老年小鼠骨髓细胞微核(MN)的影响。方法:取青年组、老年组、用药组(山茱萸制品几种溶剂萃取部位)小鼠的骨髓细胞,检测MN,统计微核率。结果:老年组与青年组相比,微核率差异显著,而两个用药组分别用石油醚萃取部位、水煎液灌胃,小鼠骨髓细胞微核率与老年组相比差异显著,表现出一定的药效。结论:山茱萸制品水煎液及山茱萸制品石油醚萃取部位对老年小鼠骨髓细胞DNA有一定的保护作用。     

山茱萸多糖的提取及含量测定

目的从山茱萸中提取多糖,并建立山茱萸多糖含量的测定方法。方法采用均匀设计优化山茱萸多糖的提取条件,用热水浸提、乙醇沉淀、DE-52柱层析的方法提取纯化山茱萸多糖,用苯酚-硫酸比色法测定多糖含量。结果山茱萸中多糖的含量为16.04%,平均回收率为99.01%,RSD=1.13%(n=3)。结论首次运用均匀设计优化山茱萸多糖的提取条件,提取得率高,苯酚-硫酸比色法测定山茱萸多糖含量稳定性、回收率较好。     

多指标成分分析确定山茱萸最佳采收期

目的：分析河南、浙江、陕西3个产区山茱萸中主要化学物质的积累规律,确定最佳采收期。方法：分别对山茱萸样品中的熊果酸、马钱苷、鞣质、多糖、总有机酸的含量以及醇浸物、水浸物等指标进行测定,对测定结果进行主成分分析。结果：3个产区不同生长期的山茱萸中主要化学物质积累都具有一定的规律;山茱萸果树生长年限对药材质量影响不大;果树的大小年现象对药材质量影响也不明显。结合当地的传统采收习惯,确定河南、浙江两产区最佳采收期为10月下旬,陕西产区为10月中旬。结论：研究结果为山茱萸传统采收期提供了科学依据。     

炮制前后山茱萸煎液、溶出层面的比较研究

从煎液、溶出层面对炮制前后山茱萸中活性成分进行比较研究。采用HPLC,中药煎出法,溶出度法对炮制前后山茱萸的活性成分马钱苷、莫诺苷的煎出率与溶出度特征进行比较研究。结果表明,炮制前后活性成分马钱苷、莫诺苷含量变化不明显;与生品相比,制品(煎液)中马钱苷的含量增高明显,而莫诺苷变化不明显;与生品相比,溶出度层面,在肠液中,制品(提取物)马钱苷的溶出度差别不明显,而莫诺苷溶出度增大、差别明显;在胃液中,制品马钱苷、莫诺苷的溶出度均减少、差别明显,但综合考虑临床上服用的煎药剂量,添加煎出率指标后,煎出溶出积=煎出率×溶出度,则在肠液与胃液中,制品的煎出溶出积指标均增大,差别非常明显,提示制品在临床应用方面优于生品。该文提出从煎液、溶出层面比较炮制前后活性成分变化和煎出溶出积指标,用于山茱萸炮制后的质量评价。     

山茱萸不同炮制品成分分析

对山茱萸不同炮制品的不同溶剂提取物进行薄层分析,并对其所含熊果酸含量进行测定;根据结果对山茱萸不同炮制品质量进行对比分析。     

山茱萸不同工艺炮制品中马钱素含量比较

目的比较山茱萸不同炮制品中马钱素含量。方法高效液相色谱法。结果各炮制品中的马钱素含量相对于生品含量有所降低。结论不同的炮制方法对山茱萸中的马钱素含量有明显影响。     

山茱萸多糖的研究进展

山茱萸多糖是山茱萸中的一种主要活性成分之一,具有多种药理作用和生物活性功能,是目前的一个研究热点。笔者对山茱萸多糖的提取、分离纯化、化学结构及生物活性等多方面进行了综述,为山茱萸资源的深入开发起一定借鉴作用。     

酒制山茱萸水煎液对四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用研究

目标：观察研究酒制山茱萸水煎液对四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法：通过四氯化碳诱导昆明小鼠急性肝损伤,并连续给小鼠灌胃酒制山茱萸水煎液14 d后,测定小鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）活性、肝组织SOD、MDA含量;并用HPLC法测定酒制山茱萸水煎液中主要指标成分的含量。结果：结果酒制山茱萸水煎液能保护四氯化碳所致小鼠肝损伤,表现为血清ALT,AST活力和肝脏MDA含量下降,SOD含量升高。结论：酒制山茱萸水煎液对四氯化碳所致小鼠肝损伤具有保护作用。     

山茱萸多糖对肺癌细胞的凋亡作用及Bcl-2、Bax表达的影响

目的 探讨山茱萸多糖对人肺癌A549细胞凋亡的作用及凋亡相关基因表达的影响.方法 采用MTT法、DNA琼脂糖凝胶电泳法、免疫组化SP法检测山茱萸多糖对A549细胞凋亡作用及Bcl-2、Bax蛋白表达的变化.结果 山茱萸多糖对A549细胞抑制作用明显,抑制程度与质量浓度呈正相关;DNA琼脂糖凝胶电泳出现相差约200 bp的DNA梯形条带,免疫组化SP法染色显示Bcl-2的表达下降,Bax的表达上升.结论 山茱萸多糖对人肺癌A549细胞的增殖有较强抑制作用,能诱导细胞凋亡,其机制与下调Bcl-2的表达,上调Bax的表达有关.