应用供精冷冻精液出生子代的安全性分析

目的:调查使用供精者精液行辅助生殖技术(ART)后的妊娠结局,探讨应用供精冷冻精液出生子代的安全性。方法:2006年1月至2012年12月我院人类精子库向全国31家生殖中心提供冷冻精液,共治疗50 247个周期。统计使用供精精液行宫颈内人工授精(ICI)、宫腔内人工授精(IUI)、体外受精(IVF)及卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)的子代出生缺陷发生率及自然流产率,对比不同授精方式的出生缺陷率与自然流产率的差异。结果:使用供精者冷冻精液行人工授精39 047个周期,其中ICI周期数36 674个,临床妊娠8 612例,自然流产917例,自然流产率(28孕周)10.6%(917/8 612);活胎数6 133例,发生出生缺陷者43例,出生缺陷发生率0.70%(43/6 133)。IUI周期数2 373个,共获得临床妊娠547例,自然流产41例,自然流产率为7.5%(41/547);活胎数426例,发生出生缺陷2例,出生缺陷率0.47%(2/426)。使用供精者冷冻精液行IVF、ICSI治疗共计11 200个周期,其中IVF临床妊娠5 860例,自然流产456例,自然流产率7.8%(456/5 860),活胎数5 089例,出生缺陷发生率1.08%(55/5 089);ICSI临床妊娠350例,自然流产30例,自然流产率8.6%(30/350),活胎数229例,出生缺陷发生率1.31%(3/229)。使用供精冷冻精液出生的后代缺陷发生率显著低于我国卫生部发布的监测数据(0.86%vs 1.53%,P0.01)。结论:供精冷冻精液出生子代的安全性仍在可控的范围。     

精子库13723管外供精液标本的妊娠结局分析

目的:探讨使用精子库的精液标本进行辅助生育的安全性及各种助孕方式之间妊娠结局的差异性。方法:对精子库外供给各临床生殖中心的精液标本,采用供精人工授精(AID)、供精体外受精(IVF)及胞质内单精子注射(ICSI)的方式助孕所反馈的资料进行分析比较。结果:精子库共外供13 723管精液标本用于辅助生育,各临床生殖中心使用精液标本的情况不同,有的使用1管/周期,有的使用2管/周期,13 723管精液标本共进行7 743个周期,包括AID 7 123个周期,临床妊娠1 415例(19.87%),其中正常生育1 221例(86.29%),流产数169例(11.94%),出生缺陷6例(0.43%),异位妊娠19例(1.34%),感染性传播疾病0例;IVF 571个周期,临床妊娠367例(64.27%),其中正常生育330例(89.92%),流产数35例(9.54%),出生缺陷0例,异位妊娠2例(0.54%),感染性传播疾病0例;ICSI 49个周期,临床妊娠28例(57.14%),其中正常生育25例(89.29%),流产数3例(10.71%),出生缺陷0例,异位妊娠0例,感染性传播疾病0例。AID与IVF、ICSI的临床妊娠率相比较有显著性差异(P<0.05),而IVF与ICSI的临床妊娠率相比较则无显著性差异(P>0.05)。AID、IVF和ICSI在流产率、出生缺陷率及异位妊娠率方面,三者相比无显著性差异(P>0.05)。结论:无1例因使用精子库的精液标本而感染性传播疾病。采用3种助孕方式的流产率、出生缺陷率和异位妊娠率与通过自然方式受孕之间并无明显差异,因此使用精子库的精液标本进行辅助生育是安全的。IVF和ICSI的妊娠率高于AID,但AID的费用较低,而IVF和ICSI的费用较高,对于究竟采用何种方式助孕,则需根据临床实际情况而定。     

活动精子总数与宫腔内人工授精妊娠率的关系

目的探讨处理前后的精液特征对IUI妊娠率的影响。方法收集分析342例不育不孕患者共372个IUI治疗周期,检测记录每个周期精液处理前后的各精液参数,并按照妊娠结果分成两组:妊娠组与非妊娠组,按照处理后精子活动总数(PTMS)分成3组:PTMS<10×106/ml,10×106/ml≤PTMS<20×106/ml,PTMS≥20×106/ml。比较各组间的精液参数和IUI妊娠率。结果372个IUI周期共获得62例妊娠,总周期妊娠率是16.67%,总病例妊娠率是18.13%。妊娠组与非妊娠组各精液参数无明显差别;PTMS<10×106/ml组获得的妊娠率明显低于后两组(P<0.05)。结论当PTMS>10×106/ml时,IUI治疗周期才有可能获得较为理想的妊娠率。     

冷冻精液行供精人工授精685例临床观察

目的比较ICI和IUI的成功率,评价人类精子库的冻精质量。方法对用我库的冷冻精液行供精人工授精(AID)治疗有适应证妇女685例的临床资料进行回顾性分析。精液冻后平均活率为(62.23±26.78)%,平均密度为(38.17±13.62)×106/ml。结果供精人工授精685例,共有1385个周期中214例获临床妊娠,周期妊娠率15.5%,受孕率31.2%,二种AID方法的成功率无显著性差异(P>0.05)。结论我院人类精子库的冷冻精液各项指标均达到并超过部颁标准,可用作供精人工授精。     

精液不液化对精子回收率及人工授精妊娠率的影响

目的分析不同液化状态的精液行夫精人工授精(AIH)精浆优化后的精液质量、精子回收率、不达标率及妊娠率,探讨精液不液化对人工授精的影响以及人工授精前纠正精液不液化的必要性。方法回顾性分析2014年1月至2016年12月1553例共2525周期AIH资料,根据精液检查结果,分为液化组及不液化组,其中液化组2350周期,不液化组175周期,比较两组处理后精子回收率、不达标率及妊娠结局有无差别。结果液化组不达标率(7.1%)显著低于不液化组(12.0%),差异具统计学意义(P0.05),两组精液处理后精液量、存活率无显著性差异;但不液化组处理后的前向运动精子总数(24.92±15.38×10~6/一次射精)低于液化组(29.59±17.66×10~6/一次射精,差异具统计学意义(P 0.05),液化组的处理后活动精子回收率(38.54±12.64%)高于不液化组(31.87±15.21%),差异具统计学意义(P0.05);不液化组AIH周期妊娠率(9.14%)、累积妊娠率(14.55%)均低于正常组(12.60%、20.51%),差异具统计学意义(P0.05)。结论精液不液化与AIH精浆优化的精子低回收率、精液不达标率相关。相对于液化组,不液化精液行密度梯度离心法优化精浆后前向运动精子总数较低,AIH妊娠率较低。行AIH前纠正精液不液化可能有助于提高精浆优化后精液质量,提高AIH妊娠率。     

16例射精障碍的不育男性IVF取卵前实行精液冷冻的结局分析

目的探讨射精障碍的不育男性在取卵前实行精液冷冻的可行性.方法对取精液行常规检查时即有射精障碍的不育男性16例在取卵前实施精液冷冻,并对其结局进行分析.结果冷冻精液16人份,取卵日解冻使用的仅1例,其余15例均完成取精而使用新鲜精液,至目前为止,累计移植18周期,临床妊娠9例,妊娠率为50%.结论对于有射精障碍不育男性,在IVF取卵前实行精液冷冻备用,能有效预防取卵日延迟射精和不射精等射精障碍的发生.     

精液过滤结合IUI治疗精液不液化不育

探讨体外精液过滤法治疗精液不液化不育症的临床疗效。本文采用双层镜头纸过滤精液结合宫腔内授精或宫颈管内授精（IUI／ICI）,对35例精液不液化不育者进行了48个周期治疗。结果表明过滤后精液全部液化,妻子妊娠率51．4％,周期妊娠率37．5％。结论认为双层镜头纸过滤精液结合IUI治疗精液不液化不育,方法简便、安全、有效、值得临床推广应用。     

精液冻存时间对精液质量及受孕能力的影响

目的旨在探讨供精精液冻存时间对精液质量及受孕能力的影响。方法回顾性分析广东省人类精子库280对夫妇使用供精冷冻精液成功怀孕在再次生育时使用同一供精者精液用于人工授精技术的临床使用、随访反馈等相关资料。结果已确认妊娠的人工授精周期复苏后供精精液质量如下:精子浓度,首次生育时(67.5±19.8)×10^6/m L,再次生育时(69.3±21.7)×10^6/m L,两组差异无统计学意义(P>0.05);前向运动精子百分比,首次生育时(54.7±8.8)%,再次生育时(51.0±7.0)%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。再次生育精液与首次生育精液的冻存时间差与前向运动精子百分比差的相关性无统计学意义(P>0.05)。再次生育时精液周期妊娠率为20.9%,与同期首次生育的周期妊娠率21.49%相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论再次生育时精液质量与首次生育时比较略下降,提示精液冷冻保存时间的延长对精子活力有影响,但冷冻保存时间的长短与对精液质量影响大小的相关性无统计学意义。     

人精子超低温冻贮技术的研究(一)——不同的冻贮方法、冷平衡时间对精子存活率的影响

关于精液冻贮技术虽国外已做了大量的研究,但一些研究结果不无矛盾。为了寻找适合我国使用的简便、有效的精液冻贮方法,我库从1984年12月开始,以液氮为致冷源,用自行研制的精液冷冻设备,对人精子超低温冻贮技术进行了一系列比较性研究。从1985年2月至1986年2月,共做冻精人工授精118例,181周期。确知怀孕和已生育者33例,周期成功率为18.23%(另文报道)。现将精子冻贮技术的实验研究结果报道如下。     

取卵日连续2次取精在辅助生殖技术中的应用效果

目的:评价取卵日连续2次取精而减少ICSI特别是经皮附睾穿刺抽吸术(PESA)/睾丸细针抽吸术(TESE)周期数在辅助生殖技术中的应用效果。方法:收集取卵日连续2次射精的精液样本(34例68份)。比较前后2次取出的精液分析参数,总结2次精液处理后混合用于授精的实验室结果和临床妊娠结局。结果:34例男性均在4 h内连续手淫取出2次精液。第1和第2次射精时间间隔[94.9±39.8(26~183)]m in。第1次射出精液的量[(2.0±1.4)m l]显著高于第2次射出的量[(1.5±0.9)m l](P=0.007),而第1次射出精液的精子活动率和a+b级精子百分率[(40.8±25.3)%、(30.9±22.4)%]显著低于第2次的[(52.2±21.1)%、(39.9±17.5)%](P<0.05);但是2次取出精液的精子浓度和精子总计数比较差异无统计学意义(P>0.05)。34例男性的精液处理后行IVF、ICSI和IVF+ICSI周期分别为28、3、3。其中IVF、ICSI、IVF+ICSI周期的平均获卵数、正常受精率、优质胚胎率、冷冻周期数/新鲜移植周期数分别为15.5±8.7、57.0%(247/433)、58.7%(145/247)、20/24;21.7±8.3、61.5%(40/65)、67.5%(27/40)、3/2;10.0±2.6、72.4%(21/29)、66.7%(14/21)、3/3。新鲜胚胎移植临床妊娠率和冷冻胚胎冻融移植(FET)临床妊娠率分别为34.5%、30.7%。在妊娠例数中14例活产6男9女的健康小孩。结论:取卵日连续2次取精以收集更多数量和/或活动力更好的精子用于辅助生殖技术中可以获得30%以上的临床妊娠率,也可以避免微创取精术和其他不必要的显微受精方式。     

精子蛋白ERp57与宫腔内人工授精周期妊娠率相关性的初步分析

目的:比较不同周期妊娠率的宫腔内人工授精(IUI)所用的精子中,精子蛋白ERp57表达量的差异,探讨其能否作为筛选合格供精者精液的一项指标。方法:将42例用于IUI的精液标本,按IUI周期妊娠率分为A组(16例,IUI周期妊娠率为0)、B组(13例,IUI周期妊娠率为10%～20%)和C组(13例,IUI周期妊娠率大于20%),应用Western印迹检测精子蛋白ERp57的表达情况,其表达量用ERp57蛋白与内参β-微管蛋白的平均吸光度的比值表示。结果:A、B、C组精子蛋白ERp57的表达量分别为:0.95±0.24、1.33±0.43和1.33±0.39,ERp57蛋白在A组中的表达量明显低于B组与C组(P<0.05),而B组与C组之间则无明显差异(P>0.05)。结论:ERp57蛋白在A组(IUI周期妊娠率为0)精子中的低表达,可以作为筛选不合格供精者及精子库中低IUI周期妊娠率的精液标本原因分析的一项参考指标。     

2008～2018年捐精志愿者精液细菌培养结果分析

目的:分析捐精志愿者精液中病原菌分布情况及细菌感染对精液质量的影响。方法:对2008～2018年4 897例捐精志愿者精液样本进行细菌培养,按菌落数不同分为<10~4cfu/ml组(n=4 229)和≥10~4cfu/ml组(n=150),并选择同期未检出细菌的捐精志愿者518例(即菌落数=0 cfu/ml)作为对照组,采用生物梅里埃公司的微量生化反应系统对菌落数≥10~4cfu/ml的样本进行菌种鉴定,使用SCA计算机辅助精液分析仪对所有精液样本进行分析,并与对照组的精液质量进行比较。结果:4 897例捐精志愿者精液样本细菌培养中,杂菌生长的精液样本6例(0.12%),细菌纯生长的精液样本4379例(89.42%),其中菌落数≥10~4cfu/ml的精液样本150例(3.43%)。菌落数≥10~4cfu/ml的精液样本中培养出革兰阴性菌(G~-菌)104例(69.33%),以大肠埃希菌为主,普通变形杆菌和肠杆菌次之;革兰阳性球菌39例(26.00%),革兰阳性性杆菌4例(2.67%),淋病奈瑟氏菌3例(2.00%)。菌落数≥10~4cfu/ml和菌落数<10~4cfu/ml的精子总数和前向运动精子百分率明显低于对照组精子总数(P<0.05),精液液化时间、精液pH值、精子总活力和正常形态精子百分率与对照组比较无明显差异(P>0.05)。结论:捐精志愿者精液细菌培养阳性率占89.42%,细菌种类较多,以G~-菌为主。同时,精液质量随着菌落数的增多呈降低趋势。     

少弱精子冷冻保存在宫腔内人工授精中的应用

目的:探讨精液冷冻保存在少弱精子症患者行宫腔内人工授精(IUI)周期中的应用效果。方法:2008年3月至2009年6月103对原发性不孕夫妇,共计152个IUI治疗周期,其中精液正常者53个周期(组1),少弱精子者52个周期(组2),少弱精子经精液冷冻保存后结合新鲜精液者47个周期(组3)。检测治疗前后精液常规、精液处理后前向活动精子总数,随访3组患者治疗期间配偶妊娠结局。结果:精液处理前组3精液体积、精子活率、a级精子均低于组2,差异极显著(P<0.01);组3处理后前向活动精子总数高于组2,但差异无显著性(P>0.05)。3组间生化妊娠率和临床妊娠率均无显著性差异。结论:精液冷冻保存可以增加少弱精子症患者前向活动精子总数,精液冷冻保存技术可以在一定程度上提高其IUI妊娠率。精液冷冻保存与IUI相结合,可能是治疗少弱精子症一种较为理想的方法。     

浙江省人类精子库供精者精液参数及精子耐冻性变化分析

目的 了解供精者捐精过程中精液参数、精子耐冻性变化以及为人类精子库实验室质量控制提供部分依据;方法 13261份精液样本均来自2006年9月至2010年12月浙江省人类精子库的1513例合格的供精者,年龄20～42周岁,职业以学生为主,对所有精液标本进行精液常规分析;达到冷冻标准的精液标本进行冷冻及冷冻复苏后精液常规分析.结果 1513例供精者中,每次捐精均合格的为343例,占22.7%;每次捐精(至少连续3次)均不合格的为68例,占4.5%;捐赠精液至少一次不合格的为1102例,占72.8%.捐赠的13261份精液中,有10158份冷冻复苏后达到外供标准,占76.6%;不合格的捐赠精液为3103份,占23.4%,其中,未达到冷冻标准的为1565份,占所有捐赠精液的11.8%;冷冻复苏后未达到外供标准(不耐冻精液)为1538份,占所有捐赠精液的11.6%.结论 人类精子库供精者每次捐赠的精液不仅精液参数变化较大,其耐冻性变化也很大;所捐赠的精液不合格比例较高.     

精液白细胞与不育症之间关系探讨

目的以瑞-姬染色方法,油镜精细观察,区分精液中生精细胞与白细胞,探讨精液白细胞的检出率与不育症之间关系,以提供临床参考。方法293例精液采用瑞-姬染色,油镜进行白细胞及其他细胞形态分类,并进行统计处理。结果293例不育症精液中检出白细胞阳性136例占46.4%;阴性157例占53.6%。年度精液白细胞阳性率1990年为13.8%;1993年为21.5%;1997年为34.1%;2006年为46.4%,说明有逐渐增加趋势。对2006年136例精液白细胞数量分布统计,以≤5个者最多占70.6%;6~20个占8.9%;21~40个占3.4%;>40个占1.3%。1~4个组与5~9个组、>20个组比较,有显著差异(P<0.001)。56例精液与前列腺液进行白细胞对照观察,两者均有白细胞者为48.2%(27/56)。精液中非生精细胞检出率,以前列腺上皮细胞最高为27.3%;其次是吞噬细胞为23.5%;再次是淋巴细胞为10.8%;支持细胞和间质细胞均为8.1%。结论精液白细胞有逐年增加趋势,影响精液质量造成不育症,实验室应认真检测,以油镜观察≤5个者,可考虑来源于精液;>5个者应检查前列腺,临床应注意其来源,对症治疗。     

人工刺破卵泡治疗排卵障碍42例分析

黄素化不破裂卵泡综合征 (LUFS)是常见排卵障碍疾病 ,正常妇女有 5 %～ 7%的周期可出现LUFS ,在不育妇女中则高达 30 % [1] 。本文回顾分析对 4 2例排卵障碍行阴道超声引导下人工刺破卵泡的治疗效果。一、材料与方法1 资料 :1999年 1月至 2 0 0 1年 1月 ,在我院门诊就诊的因排卵障碍导致不育 12 0例 ,其中 4 2例经诊断为LUFS患者自愿接受人工刺破卵泡。 4 2例中原发不育 12例、继发不育 30例 ,不育年限 2～ 8年 ,多数有月经不规律 ,双侧输卵管至少一侧通畅 ,男方精液常规正常。2 方法 :患者在自然周期或促排卵周期 ,采用阴道B超 (Alo…     

精液液化异常者精浆中酸性磷酸酶和锌的检测及其临床意义

精液液化异常是指射精后1h未液化的现象,它包括精液不液化和液化迟缓。精液不液化或液化迟缓均可导致不育。Nilson报告在精子数大于20×106/ml病人中,以精液不液化为唯一异常指标者占11.8%;国内胡毓安等在对1000例不育男性精液常规的调查中发现14.8%的病人精液液化不良[1]。多年来的研究发现,精液中的液化因子主要来源于前列腺,精液液化主要受前列腺分泌功能状态影响。为此,我们测定了273例精浆中锌和酸性磷酸酶含量并作白细胞染色计数,以观察它们对精液液化异常的影响。材料和方法1.检测对象:本组273例,其中生育组22例,年龄23￣38岁,被检…     

WHO第5版精液参考值标准的临床应用对IUI适应证谱的影响

目的:探讨WHO第5版精液参考值标准的调整对夫精宫腔内人工授精(IUI)适应证谱的影响。方法:回顾性分析我院生殖中心2012年1~7月采用WHO第4版标准111个周期IUI的临床资料(A组),和2013年1~7月采用WHO第5五版标准84个周期IUI的临床资料(B组),统计各种适应证所占百分率。结果:两组适应证比较,弱精子症差异有统计学意义[97个周期(87.4%)vs 47个周期(55.9%),P0.05]。少精子症(0vs 0)、畸形精子症[57个周期(51.4%)vs 30个周期(35.7%)]、液化异常[1个周期(0.9%)vs 0]、性功能障碍及生殖器畸形[0vs 3个周期(3.6%)]、免疫性不育[1个周期(0.9%)vs 0]和不明原因不育[4个周期(3.6%)vs 2个周期(2.4%)]差异无统计学意义(P均0.05)。结论:WHO第5版精液参考值标准的临床应用对IUI适应证谱有较大影响,造成因为男方因素行IUI的病例大幅度减少,可能会使部分患者治疗周期加长,女方诊治过度,进一步加重其经济负担和身心压力。     

1126例捐精者精液细菌学分析

目的:通过对捐精者精液细菌培养、感染不同菌落数的精液质量检测,了解捐精者精液细菌感染率和菌种分布情况、不同菌落数细菌感染对精液质量的影响。方法:对1 126例捐精者精液样本进行细菌培养,用Synbiosis全自动菌落计数仪对样本进行菌落计数,并用梅里埃VITEK2 Compact全自动微生物生化鉴定仪对菌落数≥104cfu/ml的样本进行菌种鉴定;按不同菌落数从1 126例精液样本中分别选取22例菌落数104cfu/ml和22例菌落数≥104cfu/ml的精液样本,使用Makler精子计数板进行人工精液质量检测,并与对照组(未检出细菌,菌落数=0 cfu/ml)的精液质量进行比较。结果:1 126例精液样本细菌培养中,杂菌污染5例,占0.44%(5/1 126),未被杂菌污染的样本中有细菌生长993例,占88.58%(993/1 121),菌落数≥104cfu/ml的精液样本有22例,占2.22%(22/993),以牛链球菌(Streptococcus bovis)为主,极小棒状杆菌(Tiny bacilli)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)次之,其中革兰阳性菌(G+菌)95.45%(21/22),革兰阴性菌(G-菌)4.54%(1/22)。菌落数≥104cfu/ml和菌落数104cfu/ml的精子总数(×10~6/1次射精)(389.9±110.6、421.9±155.9)和精子前向运动(PR,%)(61.6±4.3、61.0±3.5)与对照组(分别为567.5±327.6、65.0±6.5)比较有显著性差异(P0.05),精液液化时间(min)、精液p H值、精子总活力(PR+NP,%)和正常形态精子(%)与对照组比较无显著性差异(P0.05)。随机对284例精液样本进行解脲脲原体(UU)检测,UU阳性34例,占11.97%。同时将UU阳性与UU阴性的精液质量作比较发现,无显著性差异(P﹥0.05)。结论:精液细菌培养阳性率占88.58%,细菌种类较多,以G+菌为主。同时,随着菌落数的增多,精液质量逐渐降低。     

爱活尿通对精液中部分凝血因子及液化时间影响的初步研究

目的 探讨爱活尿通对人类精液液化时间延长者的治疗效果,同步检测治疗前后精液中凝血因子的变化.方法 46例精液液化时间延长者口服爱活尿通为治疗组,2周后复查精液液化时间,同时检测治疗前后精液中组织因子(TF)、凝血因子Ⅶ a(F Ⅶ a)及凝血因子ⅧAg(FⅧAg)含量.45例精液常规正常者作为对照组.结果 经治疗,32例液化时间＜30 min,占70%,12例液化时间在30至60 min之间,占26%,2例液化时问仍大于60 min,占4%,较治疗前液化时间缩短,且精子活力提高,差异有显著性(P＜0.05);治疗后精液中TF、FⅦa及FWAg含量降低(P＜0.05),与对照组相比无统计学意义(P＞0.05).结论 爱活尿通对精液液化时间延长者有一定疗效;对影响精液液化的凝血因子水平可能具有改善作用.