慢性缺氧大鼠肺组织钙调素活性研究

为探讨钙调素（ＣａＭ）在慢性缺氧性肺动脉高压发病中的作用，将４０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为四组，Ⅰ组为正常对照组，不接受任何处理。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组为实验组，分别间断缺氧１、２、３周，而后采用火焰原子吸收分光光度法及磷酸二酯酶法测定四组大鼠肺组织Ｃａ２＋含量及ＣａＭ活性。结果显示：缺氧１、２、３周均能引起大鼠平均肺动脉压（ｍＰＡＰ）及肺血管阻力（ＰＶＲ）增高，心输出量（ＣＯ）降低；缺氧大鼠肺组织Ｃａ２＋含量及ＣａＭ活性较正常对照组增高，其中缺氧２周及３周组大鼠肺组织ＣａＭ活性与正常对照组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５），但缺氧１周组大鼠ＣａＭ活性与正常对照组比较差异无统计学意义；肺组织Ｃａ２＋含量与ＣａＭ活性呈明显正相关（Ｐ＜０．０５），提示Ｃａ２＋－ＣａＭ系统在大鼠缺氧性肺动脉高压的发生中起一定作用。细胞内Ｃａ２＋浓度增高，可促使ＣａＭ由细胞骨架移行到细胞浆内，可能是慢性缺氧大鼠肺组织ＣａＭ活性增高的原因之一。     

雌二醇诱发大鼠高血压后相关组织中Ca,Cu及Zn含量的变化

探讨雌二醇诱发大鼠血压升高与某些离子的关系。用原子吸收分光光度法，检测了雌二醇诱发血压升高组及对照组大鼠血清，延髓，肾上腺，心肌和肾脏组织中Ｃａ＾２＋，Ｃｕ＾２＋和Ｚｎ＾２＋的含量，经ｔ检验统计处理。与对照组相比，实验大鼠血清和延髓中Ｃａ＾２＋的含量增加，而肾上腺和心肌中Ｃａ＾２＋含量减少。     

充血性心衰大鼠红细胞内离子含量与心功能关系探讨

目的：通过观察双眼载主力衰竭大鼠心功能及红细胞内Ｍｇ＾２＋、Ｃａ＾２＋、Ｎａ＾＋、Ｋ＾＋含量的变化，探讨心力衰竭与心肌细胞内Ｍｇ＾２＋、Ｃａ＾２＋、Ｎａ＾＋、Ｋ＾＋平衡的关系。方法：采用腹主动脉与后腔静脉同造瘘和左侧肾动脉缩窄联合术，致大鼠充血性心力衰竭模型似功能以及外周血红细胞内Ｍｇ＾２＋、Ｎａ＾＋、Ｃａ＾２＋、Ｋ＾＋含量的变化。结果：心力衰竭组大鼠心脏收缩功能下降，红细胞内Ｎａ＾＋、Ｃａ＾２＋     

成年大鼠脑细胞内钙的测定

目的：探讨成年大鼠脑细胞分离及其细胞内钙（［Ｃａ２＋］ｉ）的测定。方法：低浓度胰蛋白酶消化及机械吹打等方法分离脑细胞，以Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为Ｃａ２＋－敏感的荧光指示剂，应用荧光分光光度计测定［Ｃａ２＋］ｉ。结果：分离的脑细胞存活率在９５％以上，在细胞外Ｃａ２＋１ｍｍｏｌ／Ｌ的情况下［Ｃａ２＋］ｉ为（２７０±３５）ｎｍｏｌ／Ｌ，高钾使［Ｃａ２＋］ｉ急剧增加。结论：本方法分离成年大鼠脑细胞简单、可靠，且能准确反映［Ｃａ２＋］ｉ的变化。     

神经元缺血坏死与细胞外液中不同Ca^＋浓度的关系

目的 探讨缺血时细胞外不同Ｃａ＾２＋浓度对神经细胞坏死程度的影响。方法 使用体外培养１２－１４天大鼠大脑皮神经细胞,随机分为正常对照组（８例）;单纯缺血组（８例）;较高Ｃａ＾２＋浓度组（８例）高Ｃａ＾２＋浓度组（８例）。检测各组神经细胞内总钙（ＴＣＡ＾２＋）,游离钙（Ｃａ＾２＋ｉ）及细胞外液中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）浓度变化。结果 单纯缺血组,较高Ｃａ＾２＋浓度组,高Ｃａ＾２＋浓度组细胞内ＴＣａ＾２＋、Ｃａ＾２＋ｉ及外液中ＬＤＨ均高于正常对照组（Ｐ〈０．０５）,同时高Ｃａ＾２＋浓度组,较高Ｃａ＾２＋浓度组细胞内ＴＣａ＾２＋、Ｃａ＾２＋ｉ及外液ＬＤＨ浓度均高于缺血组。结论 脑缺血时,随着细胞外液中Ｃａ＾２＋浓度增设,神经细胞内钙沉积增加,从而加速神经细胞死亡。     

链脲菌素实验性糖尿病大鼠组织钙调素活性的研究

目的探讨链脲菌素（ＳＴＺ）实验性糖尿病大鼠组织钙调素（ＣａＭ）活性的变化及其对胰岛素治疗的反应。方法Ｗｉｓｔａｒ大鼠３２只，分为正常对照组、糖尿病非治疗７２ｈ病程组、２ｗｋ病程组及胰岛素治疗组。用ＳＴＺ制成糖尿病模型。采用依赖于Ｃａ２＋的磷酸二酯酶分析法测定肝脏、脂肪、骨骼肌和肾脏组织中可溶性钙调素活性。结果①与正常对照组相比，各糖尿病非治疗组组织中ＣａＭ活性均显著降低，平均下降４０％～６０％不等，不同病程组间无显著差异。胰岛素治疗可使肝脏、脂肪和骨骼肌组织中的ＣａＭ活性恢复正常。②各组织中活性与血清胰岛素水平均呈正相关。结论Ｃａ２＋－ＣａＭ系统在胰岛素作用机制和糖尿病的发生机理中，可能起重要作用。     

环孢素A肾中毒时大鼠尿中前列腺素的变化

该实验探讨了环孢素Ａ（ＣｓＡ）肾中毒与肾脏血栓素Ａ２（ＴＸＡ＿２）、前列环素（ＰＧＩ＿２）的关系。实验中将ＳＤ雄性大鼠２０只随机分为二组，Ｉ组为正常对照组；Ⅱ组为ＣｓＡ中毒组。于实验前后分别检测大鼠的肾功能、尿酶以及尿中血栓素Ｂ＿２（ＴＸＢ＿２）、６－酮－前列腺素Ｆ１ａ（６－ｋｅｔｏ－ｐＧＦ１ａ）等指标，最后进行肾脏光镜检查。结果发现，ＣｓＡ中毒组大鼠尿中的ＴＸＢ＿２显著升高，而尿中６－ｋｅｔｏ－ｐＧＦ１ａ稍低于正常对照组，ＴＸＢ＿２／６－ｋｅｔｏ－ｐＧＦ１ａ比值明显升高。实验证实，中毒剂量的ＣｓＡ引起肾脏ＴＸＡ＿２／ＰＧＩ＿２平衡常数明显升高。     

不同年龄自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞Ca^2＋转运功…

应用不同年龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血管平滑肌原代与传代细胞（ＶＳＭＣ），观察Ｃａ＾２＋转运功能障碍及某些相关因素的变化，结果表明：（１）在血压未升高的ＶＳＭＣＣａ＾２＋内流已较同龄对照组ＷＫＹ大鼠明显增加，而Ｃａ＾２＋外流量较ＷＫＹ大鼠显著降低。表明ＳＨＲＶＳＭＣ膜Ｃａ＾２＋转运功能障碍在血压升高前就已发生，并随年龄及血压增高有加重趋势；（２）ＶＳＭＣｃＡＭＰ及钙调素含量变化与细胞膜Ｃａ＾２＋     

大鼠脑损伤后脑皮质和血清中钙及CaM水平变化的关系

采用大鼠脑损伤模型，研究脑损伤后脑皮质和血清中Ｃａ２＋及钙调素（ＣａＭ）水平的变化。并观察山莨菪碱对Ｃａ２＋及ＣａＭ水平变化的作用。结果表明，脑损伤后脑皮质及血清中ｃａ２＋含量均有升高，但以脑皮质中ｃａ２＋含量升高较为明显，伤后４８ｈ，Ｃａ２＋含量升至２４．１２±１０．２２ｍｍｏｌ／ｋｇ干脑，为对照值的２倍。脑皮质和血浆中ＣａＭ含量升高很明显，伤后４８ｈ达高峰，分别为对照值的２．６和２．８倍，ＣａＭ含量变化与Ｃａ２＋改变密切相关。山莨菪碱能显著降低Ｃａ２＋和ＣａＭ含量。     

不同程度减压低氧对心肌肌浆网钙摄取和Ca^2＋—ATP酶活性…

将实验大鼠分别置于模拟５０００和８０００ｍ海拔高度的低压仓内７ｄ，观察两种减压低氧对大鼠左心功能及左心室肌肌浆网钙摄取及Ｃ＾２＋－ＡＴＰ酶活性的影响。结果表明，５０００ｍ低氧大鼠左心功能抑制程度明显轻于８０００ｍ低氧，ＳＲＣａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性及＾４５Ｃａ＾２＋摄取降低程度也明显低于８０００ｍ低氧，ＡＴＰ酶和钙摄取的变化基本一致。从而推论，心肌ＳＲＣａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性及＾４５Ｃａ＾２＋摄取的     

低氧影响大鼠肺内碱性成纤维细胞生长因子及其受体的表达

目的:观察慢性低氧对肺内成纤维细胞生长因子及其受体表达的影响。方法:置SD大鼠于含10％O2低氧箱内1周、2周或3周,用RT—PCR法测定不同低氧时间大鼠肺动脉和肺组织bFGF mRNA,SP免疫组织化学染色法检测肺组织bFGF及其受体蛋白表达水平。结果:低氧1周时,肺动脉、肺组织内bFGF表达水平(分别为5303±756;4876±674),较对照组(分别为2578±384;1462±231)明显升高(P<0.05),持续至低氧第2周,低氧3周时,bFGF回复到低氧前水平。低氧1周、2周大鼠肺组织内bFGF受体表达增加,3周时与正常对照无差异。结论:慢性低氧能刺激大鼠肺内bFGF的表达,bFGF可能参与低氧性肺动脉高压发病的病理和病理生理学过程。     

血管内皮生长因子在低氧性肺动脉高压大鼠肺内的分布和水 …

This study was designed to elucidate whether the level and distribution of vascular endothelial growth factor (VEGF) are changed in the lungs of rats with hypoxic pulmonary hypertension. 13 male Wistar rats were exposed to isobaric hypoxia for 3 weeks. The pulmonary artery pressure was measured by right cardiac catheterization. The level of VEGF in pulmonary homogenate was measured by Elisa method. The distribution of VEGF in the rat lung was examined by immunohistochemistry. The results showed that the pulmonary artery pressure was significantly increased after hypoxic exposure. The level of VEGF in pulmonary homogenate of rats treated with hypoxia (466.9 +/- 75.5 pg/g) were significantly increased as compared with taht of normal rats (376.2 +/- 47.1 pg/g). The contents of VEGF in the wall of pulmonary arteriole were significantly increased in rats with pulmonary hypertension. So we suggest that chronic hypoxia can strongly stimulate VEGF secretion, and VEGF may mediate the process of hypoxic pulmonary vascular remodeling and pulmonary hypertension.     

缺氧对幼猪肺组织和肺小动脉壁钙调蛋白活性量的影响

作者观察了慢性缺氧对幼猪肺组织和肺小动脉壁钙调蛋白活性量的影响。缺氧动物的上述组织均在缺氧条件下取出。结果表明,①慢性间断性低压缺氧的幼猪在4000m模拟高原肺动脉增压反应明显。②缺氧动物肺组织钙调蛋白活性量较平原组显著增高。③在肺小动脉持续收缩时,取材测得肺小动脉壁钙调蛋白活性量与平原组相比无显著改变。说明缺氧性肺小动脉收缩不是通过影响平滑肌细胞内钙调蛋白活性量而实现的。     

Effects of Hypoxia on Calmodulin Levels of Lung Tissues and Small Pulmonary Arterial Walls in Young Pigs

The effects of chronic hypoxia on calmodulin levels of lung tissues and small pulmonary ar-terial walls were studied in young pigs, The tissue specimens of hypoxic animals were obtained underhypoxic conditions. The following results were collected:(1) The swine exposed to chronic intermittent hypoxia showed a significant pulmonary pressor re-sponse at a simulated high altitude of 4000 m.(2) A higher level of calmodulin was found in the lung tissues of chronic hypoxic animals. It maybe related to the increased release of some vaosactive substances from pulmonary non-muscularcalls.(3) No significant difference of calmodulin level of small arterial walls was demonstrated between theexperimental animals and the control.The findings suggest that pulmonary vasoconstriction due to hypoxia is not likely to be associatedwith obvious change in calmodulin level in the smooth muscle of blood vessels.     

慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺内血管内皮生长因子表达的变化

为了解低氧对肺内血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）基因表达的影响及ＶＥＧＦ在肺动脉闹压发生中的作用，以常压低氧建立大鼠肺动脉高压模型，采用Ｅｌｉｓａ检测大鼠肺动脉血血清ＶＥＧＦ的含量改变，以体外转录并用ＤＩＧ－ＵＴＰ标记的ＶＥＧＦ ｃＲＮＡ探针进行肺组织原位杂交，检测大鼠肺内ＶＥＧＦ ｍＲＮＡ表达的变化。结果发现：低氧３周后，大鼠形成明显的肺动脉高压；大鼠肺动脉血血清中ＶＥＧＦ含量在低氧３周组为４２０．     

低氧大鼠肺组织核因子κB表达的变化

目的探讨核因子κB(NF-κB)在慢性低氧大鼠肺组织表达的变化及其在低氧性肺动脉高压发病中的作用。方法将20只雄性SD大鼠随机分为正常对照组和低氧组,以常压低氧3周复制肺动脉高压模型。采用微导管法测定大鼠平均肺动脉压(m PAP);对大鼠肺组织切片采用HE染色,经图像分析技术测定大鼠肺小动脉管壁厚度占血管外径的百分比(W T%)和管壁面积占血管总面积的百分比(W A%);采用免疫组化法检测两组大鼠肺组织NF-κB的表达情况。结果①低氧组大鼠m PAP为(29.1±4.5)mmHg,正常组大鼠m PAP为(16.8±2.6)mmHg,两组比较差异具有统计学意义(P<0.001);②低氧组大鼠W T%为(22.36±2.99)%、W A%为(69.14±5.38)%,正常对照组W T%为(13.30±2.77)%、W A%为(46.75±6.54)%,两组之间的差异有统计学意义(P均<0.01);③正常组和低氧组大鼠肺组织内均存在NF-κB阳性染色,以细支气管上皮细胞为明显,正常组大鼠NF-κB核染色阳性细胞百分比为(12.23±1.08)%,低氧组大鼠NF-κB核染色阳性细胞百分比为(29.11±1.12)%,两组比较差异有统计学意义(P<0.001)。结论NF-κB在慢性低氧大鼠肺内表达增加,可能参与了低氧性肺动脉高压的发病过程。     

bFGFmRNA在慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺组织中的表达及分布

为探讨碱性成纤维细胞生长因子在慢性低氧性肺动脉高压肺血管重建中的作用及机理,通过建立慢性低氧性动脉高压大鼠模型,测定其肺血流动力学 。     

硫化氢对低氧性肺动脉高压中氧化应激的调节作用

目的:探讨硫化氢(H2S)对低氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary hypertension, HPH)形成中氧化应激的调节作用.方法:选取体重180～200 g的健康雄性Wistar大鼠20只,随机分为对照组、低氧组、低氧+硫氢化钠(NaHS)组.建立低氧模型21 d后,监测其血液动力学变化;应用比色法检测肺组织匀浆中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase ,SOD)、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)、还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)、丙二醛(malondiadehyde, MDA)、羟自由基(hydroxy radical,[·OH)]的含量;应用实时荧光定量PCR的方法检测SOD基因转录水平的变化.结果:经3周低氧处理,大鼠形成HPH和肺血管结构重构,表现为平均肺动脉压(mean pulmonary arterial pressure, mPAP)明显增加[(23.7 ±2.2) mm Hg vs. (16.3±3.7) mm Hg, P《 0.01],右室重量与左室及室间隔重量的比值[RV/(LV+SP)]升高(P《[ 0.01);]给予外源性H2S供体NaHS后,可以降低肺动脉压力[(16.3 ±2.8) mm Hg vs. (23.7 ±2.2) mm Hg, P《0.01],减少RV/(LV+SP) (P《0.01);H2S供体可以提高T-AOC 18.8%(P《0.01),减少GSSG的含量23.2%(P《[0.01)],但对SOD的活性及基因转录水平无明显影响.结论:H2S在HPH形成中的氧化应激过程中发挥抗氧化作用,其作用机制部分是通过减少GSSG的含量,从而提高机体的抗氧化能力.     

Effects of endothelin receptor antagonist on the hypoxic pulmonary hypertension]

This investigation was made to elucidate the role of endothelin (ET) in hypoxic pulmonary hypertension and the preventing effects of BQ-123, an ETA receptor antagonist. Thirty male Wistar rats were divided into three groups and exposed to air, isobaric hypoxia or isobaric hypoxia plus BQ-123 for 3 weeks. The pulmonary artery pressure was measured by right cardiac catheterization. The plasma level of ET-1 was measured by RIA method. Histologic sections of the lungs were examined by a computerized image analyser. In hypoxic rats, the pulmonary artery pressure and the thickness of wall of arteriole were significantly increased, and right ventricular hypertrophy was developed. The plasma level of VEGF in rats treated with hypoxia (192.3 +/- 43.1 pg/ml) was significantly increased as compared with that of normal rats (128.2 +/- 28.1 pg/ml), P < 0.01. Chronic BQ-123 treatment prevented the developments of pulmonary hypertension, thickening of pulmonary arteriole and right ventricular hypertrophy induced by hypoxia. These result indicate that chronic hypoxia can result in hypoxic pulmonary hypertension and increased plasma level of ET-1, and the ETA receptor antagonist can prevent hypoxic pulmonary hypertension.