熊果酸的抗肿瘤作用

目的 研究熊果酸的抗肿瘤活性.方法 体外用MTT比色法测定熊果酸对肿瘤细胞HepG2和S180的增殖抑制作用,再用DNA凝胶电泳法测定熊果酸对HepG2细胞凋亡的诱导作用;体内采用小鼠实体瘤模型,观察熊果酸对HepG2和S180实体瘤的抑制作用.结果 熊果酸对HepG2和S180的增殖有良好的抑制作用,48h内对细胞半数生长的抑制剂量(IC50)分别为12.5μg/ml和13.9μg/ml.同时熊果酸能够诱导HepG2发生凋亡.20.0μg/ml熊果酸对HepG2和S180实体瘤抑制率分别达到52.98%和44.41%.结论 熊果酸通过抑制增殖和诱导凋亡对肿瘤细胞株HepG2和S180表现出良好的抗肿瘤活性.     

植物内生阿维链霉菌I06A-01716次生代谢产物的研究

目的 分离鉴定阿维链霉菌106A-01716发酵液中抗植物病原真菌活性成分,并进行抗真菌、抗肿瘤和免疫抑制活性研究.方法 在抗真菌活性指导下,采用硅胶柱层析、凝胶柱层析、HPLC等分离手段对活性组分进行分离:通过高分辨质谱,ID-NMR和2D-NMR对其结构进行鉴定;采用琼脂平板纸片法,进行抗植物病原真菌的最低抑制浓度测定;采用MTT法检测其对肿瘤细胞生长的抑制作用;采用流式细胞仪测定其对细胞周期的影响.结果 分离得到2个活性组分:1716-1和1716-2.1716-1和1716-2对人肝癌细胞HepG2的IC_(50)值分别为2.42μg/mL和3.42μg/mL～对人口腔上皮癌细胞KB的IC_(50)值分别为1.64μg/mL和6.73μg/mL. 细胞周期研究表明,随着1716-2的浓度增加,在KB细胞中,G_2/M期比例由对照组的15.23%逐步升高到36.53%;在HepG2细胞中,G_2/M期比例由对照组的4.39%升高到35.78%.结论 1716-1和1716-2结构分别与寡霉素B和寡霉素A一致.1716-1和1716-2有抗多种植物病原真菌活性.1716-1和1716-2在较低浓度下能够抑制人肝癌细胞HepG2和人口腔上皮癌细胞KB生长.1716-2使HepG2细胞和KB细胞阻滞在G2/M期.     

噻替派(Thiotepa)滴眼液对人癌细胞和正常细胞的细胞毒作用

目的 了解0.05%Thiotepa滴眼液对各种不同的人癌细胞和正常细胞生长的影响.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法进行体外细胞毒试验,测定Thiotepa滴眼液对人癌细胞和正常细胞的生长抑制作用,以半数抑制浓度(IC50值)进行评价.结果 Thiotepa滴眼液在50μg/ml～0.78μg/ml浓度下对人癌细胞Glc-82、K-562、Bel-7402、Hela和CNE2的IC50值依次为:22.7μg/ml、10.6μg/ml、15.3μg/ml、11.2μg/ml和9.6μg/ml.对人正常细胞Hk-293、ECV-304、HRPE、Fibro和小鼠3T3细胞的IC50值分别为:1.4μg/ml、12.5μg/ml、17.8μg/ml、36.6μg/ml和14.4μg/ml.结论 Thiotepa滴眼液对各种细胞有明显的生长抑制作用;0.05%Thiotepa滴眼液对各种人癌细胞和正常细胞均有强的细胞毒作用,且对人癌细胞无明显的选择性抑制作用.     

苦参碱对人HepG2细胞与人ECV304细胞的增殖抑制活性比较研究

目的:研究苦参碱对人肝癌HepG2细胞和人脐静脉内皮细胞(ECV304)活性的影响.方法:购买纯度高达99％的苦参碱纯品,通过MTT法、生长曲线法、HE染色等实验初步观察苦参碱时人肝癌HepG2细胞和人脐静脉内皮细胞(ECV304)增殖抑制作用和形态影响.结果:MTT实验和生长曲线实验显示在不同浓度苦参碱作用不同时间后,人肝癌HepG2细胞和人脐静脉内皮细胞ECV304半数抑制率IC50分别为487.86μg/ml和1815.34μg/ml,且呈剂量、时间依赖性.HE染色后人肝癌HepG2细胞实验组与对照组相比形态学发生了明显的变化,而人脐静脉内皮细胞ECV304变化不明显.结论:苦参碱可抑制人肝癌HepG2细胞生长,促进其凋亡,而对内皮细胞的作用较弱.     

噻唑蓝法测定香菇多糖体外对癌细胞毒作用

目的评价香菇多糖对癌细胞的体外细胞毒作用。方法采用噻唑蓝(MTT)法测定香菇多糖对人前列腺癌细胞PC-3、人肺癌细胞A-549、人肝癌细胞HepG2和人白血病细胞K-562的细胞毒作用。结果香菇多糖对人前列腺癌细胞PC-3、人肺癌细胞A-549、人肝癌细胞HepG2和人白血病细胞K-562的半数抑制浓度(IC50)值分别为(25.8±3.4),(90.0±7.8),(63.3±4.2),(33.1±3.3)μg.mL-1,生长曲线显示香菇多糖100μg.mL-1对PC-3细胞及HepG2细胞的抑制率随着时间增加而增强,表现出一定的时-效关系。结论香菇多糖对癌细胞具有一定的体外细胞毒作用。     

土贝母皂苷-Ⅱ对人肝癌细胞HepG2增殖及细胞周期的影响

目的探讨土贝母皂苷-Ⅱ对人肝癌细胞HepG2增殖、细胞周期的影响及其抗肿瘤效应。方法用不同浓度土贝母皂苷-Ⅱ0、2、4、6、8、10、12μg/ml处理HepG2细胞后,MTT法检测细胞生长的抑制率,荧光染色和流式细胞术分别观察凋亡细胞形态和细胞周期的变化。同时,以H22肝癌小鼠模型初步探讨土贝母皂苷-Ⅱ的抗肿瘤作用。结果土贝母皂苷-Ⅱ能剂量依赖性地抑制HepG2细胞生长,24-h半数抑制剂量(IC50)为4.05μg/ml。HepG2细胞经土贝母皂苷-Ⅱ处理后,呈现典型的凋亡细胞形态,G2/M期细胞数量增加,而G0/G1期细胞数明显减少。体内抗肿瘤实验结果证明,土贝母皂苷-Ⅱ对肿瘤的生长有显著的抑制作用。结论土贝母皂苷-Ⅱ可能是通过使肿瘤细胞滞留于G2/M期,从而抑制肿瘤细胞的增殖。     

洛铂对肝癌细胞HepG2的放疗增敏效应

目的 探讨洛铂对肝癌细胞的放疗增敏效应.方法 用MTT法确定洛铂对肝癌细胞株HepG2半数抑制浓度(IC50),流式细胞仪检测1/4 IC50、1/8 IC50洛铂对HepG2细胞周期、凋亡的影响,蛋白免疫印迹检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达,细胞克隆形成实验研究洛铂对HepG2的放射增敏比.结果 洛铂对肝癌细胞株HepG2细胞毒作用呈剂量依赖性,半数抑制浓度为1.85μg/ml,不同浓度洛铂组(1/4 IC50组、1/8 IC50组)均观察到HepG2细胞凋亡和G2/M期阻滞明显增加(P＜0.05);两组洛铂干预组肝癌细胞Bcl-2表达下降,Bax、Caspase-3表达水平升高;洛铂对肝癌细胞HepG2的放疗增敏比分别是1.12、1.28.结论 洛铂具有放射增敏作用;其机制可能与促进肝癌细胞凋亡以及细胞G2/M期阻滞相关.     

杨黄总黄酮对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响

目的:研究杨黄总黄酮对人肝癌Hep G2细胞凋亡的影响。方法:制备杨黄总黄酮并进行定性、定量分析。以5-氟尿嘧啶(50μg/ml)与不同质量浓度杨黄总黄酮(10、20、40、80、100μg/ml)作用于Hep G2细胞24 h后,采用MTT法测定细胞活力以计算抑制率与半数抑制浓度(IC50)。以不同质量浓度杨黄总黄酮(40、80、100μg/ml)作用于Hep G2细胞72 h后,采用流式细胞仪测定细胞凋亡情况与细胞周期分布情况。结果:杨黄总黄酮含量为464.5 mg/g。10、20、40、80、100μg/ml杨黄总黄酮对细胞的抑制率分别为(6.46±1.74)%、(8.19±1.08)%、(23.19±2.77)%、(42.09±1.46)%和(58.18±1.89)%,抑制率与其质量浓度呈正相关,IC50为93.9μg/ml。40、80、100μg/ml杨黄总黄酮作用于细胞72 h后细胞凋亡率增加,并与质量浓度呈正相关。随着杨黄总黄酮质量浓度增加,S+G2期细胞比例增加。结论:杨黄总黄酮可诱导Hep G2细胞凋亡,其机制可能与将细胞阻滞于S+G2期有关。     

Aurora-B激酶抑制药的筛选和抗肿瘤活性研究

目的:以酵母细胞为模式菌高通量筛选具有抗肿瘤活性的Aurora-B激酶抑制药.方法:以野生型酵母菌Y300和ipl1-321温度敏感型突变株为模式菌,筛选Aurora-B激酶抑制药;体外酶学实验验证候选化合物对Aurora-B激酶的抑制作用;MTT方法检测阳性化合物对肿瘤细胞的杀伤活性;流式细胞术检测阳性化合物对肿瘤细胞的周期阻滞.结果:经筛选得到12个化合物和5个微生物发酵液;其中浓度在10μg·ml-1时对重组纯化的人Aurora-B激酶活性抑制率高于50%的有7个,其中3个活性较好的化合物IC50分别为10.253,1.826和2.054μmol·L-1;其中3个化合物对Hela细胞的IC50分别为4.255,15.326和1.032μmol·L-1,对HepG2细胞的IC50分别为5.387,17.465和1.725 μmol·L-1,对HCT116细胞的IC50分别为5.380,8.528和2.029 μmol·L-1.11号化合物能够诱导HCT116细胞G2/M期阻滞.结论:以Y300和ipl1-321酵母细胞为高通量筛选模型筛选到多个新的具有抗肿瘤活性的Aurora-B激酶抑制药.     

4-叔丁基-5-(12,4,-三唑-1-基)-2-苄亚氨基噻唑的体外抗癌活性研究

目的研究4-叔丁基-5-(1,2,4-三唑-1-基)-2-苄亚氨基噻唑类衍生物对宫颈癌细胞系Hela、肝癌细胞系Bel 7402、鼻咽癌细胞系CNE 2的体外抗癌活性。方法细胞抑制率采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定。每种试样设置5个浓度梯度(0.025、0.05、0.10、.25、0.5μmol/ml),每个浓度取4个平行样,并设置无药对照实验,用半数抑制浓度(IC50)评价目标化合物的抗癌活性。结果被测化合物对3种癌细胞均表现出一定的抑制作用,其中化合物5对Hela癌细胞和Bel 7402癌细胞的IC50值分别为0.076 1、0.062 8μmol/ml;化合物6对CNE 2癌细胞的IC50值为0.050 8μmol/ml。结论生物活性测试表明该类型氨基噻唑衍生物具有较好的抗癌活性,值得进一步研究和关注。